WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

загрузка...
   Добро пожаловать!

Pages:     | 1 |   ...   | 2 | 3 ||

Результаты определения площади рубца после окрашивания срезов сердца кролика ТТХ показали, что в 1-ой группе (контроль) площадь рубца составляла 20,2±1,9%. В опытных группах максимальные изменения были выявлены в группе животных, которым выполнялась интрамиокардиальная трансплантация ЯСК: общая площадь рубца составляла 35,8±1,6%. Положительные изменения были отмечены после интрамиокардиальной трансплантации культуры МСК – площадь рубцовой ткани в этих сердцах соответствовала 6,0±2,6% (рис. 1).

Рис.1. Площадь рубца в контрольной группе, после интрамиокардиальной трансплантации культуры МСК (группа 2) и ЯСК (группа 3). Примечание: * р<0.05 в сравнении с контрольной группой.

18

Результаты определения индекса дилатации левого желудочка показали, что в группе животных, которым интрамиокардиально трансплантировали ЯСК, этот показатель в 2 раза превышал значения контрольной группы (0,34±0,03 и 0,19±0,02). Индекс дилатации левого желудочка сердец кроликов, перенесших интрамиокардиальную трансплантацию культуры МСК, был в 2 раза меньше по сравнению с контрольной группой и составлял 0,11±0,02 (рис. 2).

Результаты определения площади рубца после внутривенного введения показали, что в контрольной группе площадь рубца составляла 22,4 ± 2,5 %. В опытных группах средние значения площади рубца достоверно не отличались от значений в контрольной группе и составляли 24,3±2,0% и 19,9±3,1%, соответственно (рис. 3).

Рис. 2. Индекс дилатации левого желудочка (ЛЖ) в контрольной группе, после интрамиокардиальной трансплантации культуры МСК (группа 2) и ЯСК (группа 3). Примечание: * р<0.05 в сравнении с контрольной группой.

Рис.3. Площадь рубца в контрольной группе, после внутривенного введения культуры МСК (группа 5) и ЯСК (группа 6).

19

Индекс дилатации левого желудочка в контрольной группе составлял 0,18±0,03. В 5-ой и 6-ой группах животных после внутривенного введения клеток средние значения индекса дилатации составляли 0,22±0,02 и 0,21±0,04, что не имело достоверных отличий от значений индекса в контрольной группе (рис. 4).

Рис. 4. Индекс дилатации левого желудочка в контрольной группе, после внутривенного введения культуры МСК (группа 5) и ЯСК (группа 6).

Количественная оценка васкуляризации. Результаты количественной оценки сосудов в пограничной с рубцом зоне после интрамиокардиальной аутотрансплантации показали, что общее количество сосудов в контрольной группе составляло 9±2 в одном поле зрения. Во 2-ой группе количество сосудов почти в 2 раза было больше, чем в контроле и составляло 16±3 в одном поле зрения. В 3-й группе также отмечалось значительно большее число сосудов по сравнению с контрольной группой, что соответствовало 14±3 в одном поле зрения. Анализ количества сосудов в пограничной зоне после внутривенного введения ростовой среды и клеток костного мозга показал, что общее количество сосудов в 4-ой (контрольной) группе составляло10±3 в одном

поле зрения. В 5-ой и 6-ой группах количество сосудов достоверно не отличалось от контроля и составляло 8±4 и 11±3, соответственно.

Гистологическая характеристика миокарда. Анализ гистологической структуры миокарда кроликов показал, что интрамиокардиальная трансплантация культуры МСК и ЯСК приводила к формированию принципиально иной морфологической структуры миокарда, чем в контрольной группе. После трансплантации культуры МСК наблюдалась картина мелкоочагового склероза с последующим восстановлением структуры миокарда. Кроме того, в исследуемых препаратах отмечалась повышенная васкуляризация миокарда. Интрамиокардиальная трансплантация ЯСК сопровождалась

20

формированием фиброзной аневризмы с поражением правого желудочка. Однако в исследуемых препаратах была отмечена хорошая васкуляризация миокарда, значительно превышающая уровень васкуляризации в контроле (таблица 6).

Таблица 6.

Гистологическая характеристика миокарда кроликов контрольной и опытных групп после интрамиокардиальной трансплантации.

Признак

Группы

1-ая (контроль)

2-ая

(трансплантация культуры МСК)

3-я (транспланта

ция ЯСК)

апикальный сегмент

средний сегмент

базальный сегмент

апикальный сегмент

средний сегмент

базальный сегмент

апикальный сегмент

средний сегмент

базальный сегмент

Аневризма

+

+

+

--

+

--

+

+

+

Поражение правого желудочка

--

--

--

--

--

--

--

--

+

Поражение межжелудочковой

перегородки

--

+

--

--

--

--

--

--

+

Прогрессирующий кардиосклероз

--

+

+

--

--

--

--

--

+

Группы кардиомиоцитов, сохранившихся в рубце

+

+

+

+

+

+

--

--

--

«+» - наличие признака, «-» - отсутствие признака

Внутривенное введение культуры МСК и ЯСК не приводило к достоверному изменению морфологического состояния миокарда по сравнению с контрольной группой.

Таким образом, результаты наших исследований позволили показать, что аутотрансплантация клеток костного мозга влияет на течение экспериментального инфаркта миокарда.

21

ВЫВОДЫ

  1. Пункционный способ получения костного мозга у кролика имеет преимущество перед резекционным в связи с лучшим качеством и большим количеством получаемого материала, меньшей инвазивностью процедуры получения костного мозга и ее технической простотой.
  2. Через 20 суток после интрамиокардиальной аутотрансплантации меченые мезенхимальные стромальные клетки костного мозга и нефракционированные ядросодержащие клетки костного мозга сохранялись в миокарде; после внутривенного введения меченые клетки костного мозга в миокарде не определялись.
  3. Интрамиокардиальная аутотрансплантация культуры мезенхимальных стромальных клеток костного мозга при экспериментальном инфаркте миокарда приводила к уменьшению площади зоны ишемического повреждения, нормализации показателей систолической функции сердца, а также полному восстановлению перфузии миокарда за счет стимуляции ангиогенеза.
  4. Положительное влияние интрамиокардиальной трансплантации культуры мезенхимальных стромальных клеток костного мозга наблюдалось на сроках от 3 дней до 1 года после лигирования коронарной артерии у кроликов, т.е. имело стабильный и долгосрочный терапевтический эффект.
  5. Интрамиокардиальная аутотрансплантация нефракционированных ядросодержащих клеток костного мозга сопровождалась увеличением размеров зоны ишемического повреждения и ухудшением показателей сократительной функции сердца, что сочеталось с активацией ангиогенеза и восстановлением показателей перфузии в условиях экспериментального инфаркта миокарда.
  6. Внутривенная аутотрансплантация культуры мезенхимальных стромальных клеток костного мозга и нефракционированных ядросодержащих клеток костного мозга не влияла на морфофункциональное состояние миокарда и показатели его перфузии.

22

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

  1. Интрамиокардиальная аутотрансплантация культуры мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток костного мозга может быть использована в лечении больных с острым инфарктом миокарда, а также для стимуляции ангиогенеза при ишемической болезни сердца.
  2. Аутологичные нефракционированные ядросодержащие клетки костного мозга при интрамиокардиальном введении не могут применяться в острейшую фазу инфаркта миокарда.
  3. Внутривенное введение различных клеток костного мозга в острейшую фазу инфаркта миокарда является нецелесообразным.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

  1. Матюков А.А. Влияние интрамиокардиальной аутотрансплантации клеток костного мозга на перфузию ишемизированного миокарда в эксперименте // Клеточная трансплантология и тканевая инженерия. – 2006. - №3(5). – С.42-47.
  2. Матюков А.А., Цупкина Н.В., Гриценко В.В., Власов Т.Д., Давыденко В.В., Ялфимов А.Н., Пинаев Г.П. Сравнительное влияние интрамиокардиальной аутотрансплантации клеток костного мозга на репарацию миокарда кроликов после инфаркта // Клеточная трансплантология и тканевая инженерия. - 2007. – Т. II, №1. - С.48-52.
  3. Давыденко В.В., Матюков А.А., Цупкина Н.В., Власов Т.Д., Гриценко В.В., Кузнецов А.А., Аминева Х.К., Деев Р.В., Ялфимов А.Н., Пинаев Г.П. Влияние аутотрансплантации различных клеток костного мозга на морфофункциональное состояние миокарда кролика после инфаркта // Клеточная трансплантология и тканевая инженерия. - 2007. – Т. II, №2. - С. 53-61.
  4. Давыденко В.В., Гриценко В.В., Орловский П.И., Азовцев Р.А., Дегтерева О.А., Астафьева О.В., Лапекин С.В., Матюков А.А., Урусова М.А. Особенности ишемии миокарда у больных пороками клапанов сердца // Регионарное кровообращение и микроциркуляция. – 2006. - №4. – С.64-68.
  5. Давыденко В. В., Гриценко В. В., Афанасьев Б.В., Пизин В.М., Мочалов О.Ю., Дегтерева О.А., Матюков А.А. Интракардиальная трансплантация мононуклеарных клеток аутологичного костного мозга в комплексном лечении больных пороками клапанов сердца //

23

Вестник хирургии им. И.И. Грекова. – 2007. - №3. – С.16-21.

  1. Матюков А.А., Гриценко В.В., Власов Т.Д., Давыденко В.В., Тютин Л.А., Ялфимов А.Н., Иванова А.А., Цупкина Н.В., Пинаев Г.П. Оценка степени перфузии ишемизированного миокарда с использованием ОФЭКТ в эксперименте // Бюл. НЦССХ им. А.Н.Бакулева. - 2006. - Т.7, №5 (Приложение). - С.267.
  2. Цупкина Н.В., Матюков А.А., Ялфимов А.Н., Савченко О.Н., Тютин Л.А., Власов Т.Д., Гриценко В.В., Давыденко В.В., Пинаев Г.П. Влияние интрамиокардиальной аутотрансплантации клеток костного мозга на кровоснабжение ишемизированного миокарда в эксперименте // Тезисы Всероссийского симпозиума «Биология клетки в культуре». Цитология. – 2006. -Т.48, №9 - С.809.
  3. Гриценко В.В., Власов Т.Д., Давыденко В.В., Матюков А.А., Цупкина Н.В., Пинаев Г.П. Влияние интрамиокардиальной трансплантации аутологичных клеток костного мозга на течение экспериментального инфаркта миокарда // Бюл. НЦССХ им. А.Н.Бакулева. - 2005. - Т.6. - №5 (Приложение). - С.298.
  4. Ялфимов А.Н., Тютин Л.А., Савченко О.Н., Матюков А.А., Давыденко В.В., Гриценко В.В., Власов Т.Д., Цупкина Н.В., Пинаев Г.П. Использование ОФЭКТ с 99mTc-тетрофосмином в оценке влияния трансплантации различных типов клеток на перфузию ишемизированного миокарда в эксперименте // Новые технологии в ядерной медицине: материалы науч. конф. с международным участием. – СПб., 2006. - С.59-60.
  5. Ялфимов А.Н., Тютин Л.А., Савченко О.Н., Матюков А.А., Давыденко В.В., Гриценко В.В., Власов Т.Д., Цупкина Н.В., Пинаев Г.П. Перфузионная томосцинтиграфия в динамической оценке влияния трансплантации различных типов клеток на перфузию ишемизированного миокарда в эксперименте // Невский радиологический форум "Новые горизонты": сборник научных трудов. – СПб., 2007. – С.591.
  6. Матюков А.А., Власов Т.Д., Давыденко В.В., Цупкина Н.В., Пинаев Г.П., Ялфимов А.Н. Влияние аутотрансплантации различных клеток костного мозга на состояние поврежденного миокарда в разные сроки после инфаркта // Стволовые клетки: законодательство, исследования и инновации. Международные перспективы сотрудничества.
    Pages:     | 1 |   ...   | 2 | 3 ||






© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»