WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

загрузка...
   Добро пожаловать!

Pages:     | 1 | 2 ||

Полученные нами результаты в прогнозировании преждевременных родов на основании уровня экспрессии гена HBD1, особенно в комплексе с длиной шейки матки по данным УЗИ, позволят улучшить отбор женщин для проведения специфической терапии. Более тщательный выбор пациенток группы высокого риска по развитию преждевременных родов позволит значительно снизить затраты на лечение «угрозы преждевременных родов», которое на данный момент в популяции ожидаемых результатов не дает. Эффективность лечения при правильном подборе целевой популяции также должна возрасти.

Несмотря на разработку новых препаратов для лечения и предупреждения преждевременных родов частоту их снизить не удается.

Используемые в настоящее время препараты для предупреждения и лечения преждевременных родов, такие как: -адреномиметики, антагонисты окситоцина, ингибиторы циклооксигеназы и сульфат магния - блокируют сокращения миометрия. Несмотря на достаточно большой опыт применения этих препаратов и большое количество клинических исследований, не получено достоверных данных о значительном пролонгировании беременности с помощью одного из них. При этом, их применение может быть связано с серьезными побочными эффектами (со стороны сердечно-сосудистой системы, преждевременное закрытие артериального протока и т.д.).

Эффективность токолитиков ограничивается несколькими сутками, что позволяет лишь провести профилактический курс кортикостероидов, снижая риск респираторного дистресс-синдрома, внутрижелудочковых кровоизлияний, некротического энтероколита и гибели ребенка. Кроме того, острый токолиз может позволить осуществить транспортировку матери в центр, оснащенный детской реанимацией (Denney J.M., 2008).

Возможно, такие результаты применения современных токолитических препаратов связано с тем, что они действуют на конечный этап патогенеза преждевременных родов – маточные сокращения.

Вполне вероятно выработанные нами критерии позволят точнее отбирать беременных группы высокого риска для профилактической терапии антибактериальными препаратами.

Учитывая полученные нами результаты, указывающие на первичность иммунных сдвигов в патогенезе преждевременных родов, сочетанная терапия антибиотиками и иммуномодуляторами у пациенток, отобранных по предлагаемым нами критериям, может дать положительные результаты.

Описано исследование применения антагониста TLR-4 в предотвращении преждевременных родов, проведенного на макаках резус (Adams Waldorf K.M., 2008). В нашей работе мы подтвердили, что развитию преждевременных родов предшествует гиперэкспрессия гена TLR. Разработка антагонистов других TLR и их применение у пациенток группы высокого риска (при повышенной экспрессии генов TLR) может предотвратить разворачивание цитокинового каскада и запуск родовой деятельности. Также эффективным может оказаться их сочетанное применение с антибактериальными препаратами.

При исследовании показателей врожденного иммунитета слизистой цервикального канала при бактериальном вагинозе, мы получили следующие результаты: Значительное увеличение экспрессии гена TLR2 (78,2 ± 16,2 x 106 копий кДНК по сравнению с 0,8 ± 0,01 x 106 у здоровых беременных) и снижение экспрессии гена HBD1 (38.6 ± 4.1 х 103 копий кДНК по сравнению с 87,8 ± 8,8 х 103 у здоровых беременных).

Основываясь на полученных нами и другими исследователями данных (Кира Е.Ф., 2001, Brocklehurst P. et al, 2000, Hillier S. et al, 2001), можно предположить, что причиной развития осложнений, связанных с бактериальным вагинозом, являются иммунные сдвиги, сопровождающие данную патологию.

Изменения локальной иммунной системы при БВ, выявленные в ходе нашей работы (увеличение экспрессии гена TLR2 и снижение экспрессии гена HBD1) аналогичны тем, которые по нашим данным предшествуют развитию преждевременных родов. Вполне возможно, эти изменения являются не следствием БВ, а одним из звеньев его патогенеза (Xu J. et al, 2008).

Снижение местной защиты при низком уровне экспрессии гена HBD1 создает условия для размножения условно-патогенных микроорганизмов. Эти выводы можно подтвердить исследованием экспрессии генов TLR и HBD в слизистой влагалища. В ранних исследованиях было показано, что при бактериальном вагинозе возрастает экспрессия генов TLR2 и TLR-4 в слизистой влагалища (Grenache D.G. et al., 2004).

Таким образом, иммунные изменения в слизистой цервикального канала при БВ могут быть не результатом, а фоном для его развития, как и для развития преждевременных родов. То есть бактериальный вагиноз, наличие которого, по данным литературы увеличивает вероятность преждевременных родов более чем в 2 раза, является своеобразным маркером локальных иммунных изменений, которые в свою очередь приводят к недонашиванию беременности.

Для определения возможности применения показателей врожденного иммунитета слизистой цервикального канала в качестве независимых маркеров локальный иммунных изменений, мы провели корреляционный анализ этих показателей с уровнем лейкоцитов крови, с количеством палочкоядерных лейкоцитов в лейкоцитарной формуле и количеством лейкоцитов в общем анализе мочи. Для всех 3 перечисленных показателей коэффициент корреляции находился в пределах от -0,3 до +0,3, что не является достаточным для установления наличия связи между исследуемыми показателями.

Учитывая результаты корреляционного анализа, мы можем с уверенностью говорить, что изменения локальной системы врожденного иммунитета шейки матки не зависят от системных воспалительных реакций (уровень лейкоцитов крови, количество палочкоядерных лейкоцитов) и воспалительных изменений в органах, располагающихся в непосредственной близости от шейки матки (количество лейкоцитов в моче). Такие результаты говорят о высокой специфичности данного метода в определении локальной способности организма препятствовать проникновению инфекции.

Таким образом, наши результаты подтверждают мнение о компенсаторной активации системы врожденного иммунитета во время беременности. Показано, что Toll подобные рецепторы, как основные рецепторы врожденного иммунитета, могут служить маркерами осложнений беременности, а также потенциальной мишенью новых терапевтических вмешательств.

Сочетание повышенной экспрессии гена TLR2 и недостаточной экспрессии гена HBD1 является характерным состоянием, для различных патологических состояний – воспалительных заболеваний органов малого таза, бактериального вагиноза и преждевременных родов.

С высокой точностью прогнозировать преждевременные роды позволит сочетанная оценка экспрессии гена HBD1 слизистой цервикального канала и длины шейки матки про помощи УЗИ.

Выводы

  1. К факторам риска преждевременных родов относятся: наличие в анамнезе самопроизвольных прерываний беременности в первом триместре; работа, связанная со стрессом; ожирение; хроническая артериальная гипертензия; перенесенная в I триместре ОРВИ.
  2. В клетках слизистой цервикального канала здоровых небеременных женщин экспрессируются гены TLR2 и HBD1, причем на фоне воспалительных заболеваний органов малого таза экспрессия гена TLR2 возрастает, а экспрессия противомикробного пептида HBD1 снижается
  3. Физиологическое течение беременности сопровождается повышением активности компонентов врожденного иммунитета, что на локальном уровне проявляется повышением экспрессии TLR2 и противомикробного пептида HBD1 слизистой цервикального канала.
  4. При преждевременных родах экспрессия гена TLR2 клетками слизистой цервикального канала значительно возрастает, экспрессия гена прготивомикробного пептида -дефензина 1 напротив снижается.
  5. С высокой чувствительностью прогнозировать преждевременные роды позволяет оценка экспрессии HBD1. Определение уровня экспрессии HBD1 слизистой цервикального канала ниже 25 х 103 копий кДНК прогнозирует преждевременные роды с отрицательной прогностической ценностью 85,7% и чувствительностью 86,7%.
  6. Изменения экспрессии компонентов врожденного иммунитета слизистой цервикального канала при бактериальном вагинозе аналогичны предшествующим преждевременным родам.


Практические рекомендации

  1. Наличие у беременной в анамнезе самопроизвольных прерываний беременности в первом триместре; работы, связанной со стрессом; ожирения; хронической артериальной гипертензии; перенесенной в I триместре ОРВИ дают основание относить данный контингент к группе риска по недонашиванию беременности и соответственно проводить целенаправленное обследование и соответствующее лечение.
  2. Для своевременного прогнозирования преждевременных родов в комплексе обследования беременных высокого инфекционного риска целесообразно включать оценку показателей врожденного иммунитета с обязательным определением уровня экспрессии противомикробного пептида HBD1.
  3. Снижение экспрессии противомикробного пептида HBD1 слизистой цервикального канала ниже 25 х 103 копий кДНК относительно 106 копий -актина в сочетании с укорочением шейки матки по данным УЗИ менее 25 мм позволяет с высокой точностью отнести данных пациенток к группе высокого риска по развитию преждевременных родов.

Список условных обозначений

БВ — бактериальный вагиноз

ВЗОМТ — воспалительные заболевания органов малого таза

ВПГ — вирус простого герпеса

ДНК — дезоксирибонуклеиновая кислота

ИЛ — интерлейкин

ИФ — интерферон

ИФА — иммуноферментный анализ

кДНК — комплементарная ДНК — это ДНК, синтезированная из зрелой мРНК в ходе реакции обратной транскрипции.

мРНК — матричная РНК

ОРВИ — острая респираторная вирусная инфекция

ПГ — простагландин

ПЦР — полимеразная цепная реакция

РНК — рибонуклеиновая кислота

УГИ — урогенитальные инфекции

УЗИ — ультразвуковое исследование

ФНО — фактор некроза опухоли

ЦМВ — цитомегаловирус

HBD (human beta defensine) — -дефензин человека

TLR (Toll like receptor) — Toll подобный рецептор

Список работ, опубликованных по теме диссертации:

  1. Макаров О.В., Бахарева И.В., Кузнецов П.А., Романовская В.В. Современные подходы к прогнозированию преждевременных родов. // Российский вестник акушера-гинеколога, 2007, том 7, №6, с.10-15.
  2. Gankovskaya O.A., Romanovskaya V.V., Kuznecov P.A., Fenzeleva V.A., Kartashov D.D. TLR and antimicrobial peptide genes expression during prenatal infection // Abstract from Conference for young scientists, PhD students and students on molecular biology and genetics dedicated to 120th anniversary of M.I. Vavilov, Kyiv, Ukraine, 20-22 september, 2007, p.165
  3. Макаров О.В., Ганковская Л.В., Козлов П.В., Бахарева И.В., Романовская В.В., Кузнецов П.А. Профилактика и ведение невынашивания беременности и преждевременных родов // Акушерство и гинекология, №5, 2008, с. 19-24
  4. Ганковская Л.В., Ковальчук Л.В., Ганковская О.А., Макаров О.В., Лавров В.Ф., Карташов Д.Д., Кузнецов П.А. Экспрессия противомикробных пептидов клетками слизистой оболочки цервикального канала и нейтрофилами периферической крови у беременных с урогенитальной инфекцией // Вестник РГМУ, №5, 2008, с. 26-29
  5. Макаров О.В., Ганковская Л.В., Бахарева И.В., Кузнецов П.А., Ганковская О.А., Карташов Д.Д. Показатели врожденного иммунитета слизистой цервикального канала при беременности // Проблемы репродукции, 2009, специальный выпуск «Материалы III международного конгресса по репродуктивной медицине», с. 97
  6. Макаров О.В., Ганковская Л.В., Бахарева И.В., Кузнецов П.А., Карташов Д.Д. Современные методы лечения при преждевременных родах // Российский вестник акушера-гинеколога №2, 2009, с. 29-34
  7. Ганковская Л.В., Макаров О.В., Бахарева И.В., Романовская В.В., Кузнецов П.А., Идрисова Л.С. Прогностическое значение компонентов врожденного иммунитета у беременных с высоким риском реализации внутриутробной инфекции // Сборник материалов XVI Российского национального конгресса «Человек и лекарство», Москва, 6-10 апреля 2009г, с. 380.
  8. Макаров О.В., Бахарева И.В., Ганковская Л.В., Кузнецов П.А., Романовская В.В., Щукина А.В., Ганковская О.А., Карташов Д.Д. Изменение показателей врожденного иммунитета слизистой цервикального канала при беременности и воспалительных заболеваниях органов малого таза // Сборник материалов XVI Российского национального конгресса «Человек и лекарство», Москва, 6-10 апреля 2009г, с. 395.
  9. Ганковская Л.В., Ковальчук Л.В., Бахарева И.В., Кузнецов П.А., Ганковская О.А., Романовская В.В., Карташов Д.Д., Макаров О.В., Экспрессия генов Toll-подобных рецепторов слизистой цервикального канала при нормальной и патологически протекающей беременности // Вестник РГМУ, № 4,2009, с.
    Pages:     | 1 | 2 ||






© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»