WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

загрузка...
   Добро пожаловать!

Pages:     || 2 | 3 |

На правах рукописи

КУЗНЕЦОВ ПАВЕЛ АНДРЕЕВИЧ

ОЦЕНКА ФАКТОРОВ ВРОЖДЕННОГО ИММУНИТЕТА СЛИЗИСТОЙ ЦЕРВИКАЛЬНОГО КАНАЛА В ПРОГНОЗИРОВАНИИ ПРЕЖДЕВРЕМЕННЫХ РОДОВ

14.00.01. Акушерство и гинекология

14.00.36. Аллергология и иммунология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени

кандидата медицинских наук

Москва 2009

Работа выполнена в Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Российский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»

Научные руководители:

доктор медицинских наук, профессор Макаров Олег Васильевич

доктор медицинских наук, профессор Ганковская Людмила Викторовна

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор Кузьмин Владимир Николаевич

доктор медицинских наук, профессор Стенина Марина Александровна

Ведущая организация:

ГУ Московский областной НИИ акушерства и гинекологии Министерства здравоохранения Московской области (МОНИИАГ).

Защита состоится «30» ноября 2009 года в 13.00 часов на заседании диссертационного совета Д 208.072.12 при ГОУ ВПО РГМУ Росздрава по адресу: 117997, г. Москва, ул. Островитянова, д.1.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГОУ ВПО РГМУ Росздрава по адресу: 117997, г. Москва, ул. Островитянова, д.1.

Автореферат разослан «17» октября 2009 года.

Ученый секретарь диссертационного совета

доктор медицинских наук, профессор Хашукоева Асият Зульчифовна


ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность исследования:

Среди основных проблем практического акушерства преждевременные роды занимают одно из первых мест, так как именно они определяют перинатальную заболеваемость и смертность. На долю недоношенных детей приходится 60 — 70% ранней неонатальной смертности (Кулаков В.И. и соавт., 2002; Макаров О.В. и соавт., 2007; Сидельникова В.М., 2001). Многие ученые всего мира работают над проблемами патогенеза, прогнозирования и терапии преждевременных родов (Сидельникова В.М. и соавт., 2006; Goldenberg R.L. et al, 2003, Iams J.D., 2003).

Поиск дополнительных сведений о механизмах развития преждевременных родов позволит разработать препараты патогенетического действия, что должно помочь врачам всего мира справиться с проблемой снижения частоты недонашивания беременности.

По современным представлениям более трети преждевременных родов происходят вследствие инфицирования плодных оболочек (Shim S.S. et al, 2004).

Проникновение инфекционных агентов в матку приводит к разрушению плодных оболочек, активизации цитокинового каскада, который инициирует сокращения миометрия, приводит к инфицированию плода. Однако, восходящее продвижение микроорганизмов невозможно при нормальной локальной защите, при адекватно функционирующей местной иммунной системе. Обнаружение сбоев на этом уровне и своевременная коррекция нарушений позволит предотвратить одну из основных причин наступления преждевременных родов.

Оценить вероятность наступления преждевременных родов очень сложно. Жалоб на тянущие боли в нижних отделах живота недостаточно для выставления диагноза: «угроза преждевременных родов». Выделено множество социальных, демографических и медицинских факторов риска преждевременных родов, но если даже опираться на них, группа высокого риска будет слишком велика, чтобы использовать ее для проведения профилактического лечения (McPheeters M.L., 2005). Традиционно в качестве маркеров предстоящих преждевременных родов рассматривают укорочение шейки матки и появление в цервикальной слизи фетального фибронектина. Однако, специфичность этих методов недостаточно высока (Leitich H. et al, 2003; Iams J.D., 2001).

В последние годы активно изучается роль факторов врожденного иммунитета в развитии преждевременных родов. Доказано, что началу родовой деятельности предшествует запуск цитокинового каскада, результатом которого является продукция простагландинов и ферментов, способствующих сокращениям матки и раскрытию шейки матки (Goldenberg R.L., 2003; Макаров О.В. и соавт., 2007).

Решение проблемы прогнозирования преждевременных родов позволит осуществлять отбор пациенток для целенаправленного лечения. Раскрытие секретов патогенеза даст возможность разрабатывать новые препараты для лечения и предупреждения преждевременных родов.

Цель настоящей работы: оценка значимости компонентов врожденного иммунитета [TLR2, TLR6, HBD1] слизистой цервикального канала в прогнозировании преждевременных родов инфекционного генеза.

Задачи исследования:

  1. Провести комплексное клинико-лабораторное обследование пациенток с угрозой прерывания беременности во II и III триместрах с учетом известных факторов риска развития преждевременных родов.
  2. Сравнить показатели компонентов локального врожденного иммунитета слизистой цервикального канала (TLR2, HBD1) у здоровых небеременных женщин и пациенток с воспалительными заболеваниями органов малого таза.
  3. Сопоставить уровни экспрессии генов TLR2 и HBD1 клетками слизистой цервикального канала у здоровых небеременных и женщин с физиологически протекающей беременностью в конце II, начале III триместра беременности.
  4. Оценить изменения компонентов врожденного иммунитета у беременных на фоне урогенитальных инфекций.
  5. Сопоставить уровни экспрессии генов TLR2 и HBD1 слизистой цервикального канала у беременных с УГИ, родивших преждевременно и в срок.
  6. Исследовать компоненты врожденного иммунитета слизистой цервикального канала (TLR2, HBD1) при бактериальном вагинозе.
  7. Определить роль параметров врождённого иммунитета как возможных маркёров недонашивания беременности.

Научная новизна

Впервые в России проведена оценка экспрессии генов TLR2 и HBD1 слизистой цервикального канала у здоровых беременных в сравнении с небеременными.

Определены критерии, позволяющие с высокой точностью прогнозировать преждевременные роды. По поводу использования экспрессии гена HBD1 в качестве маркера предстоящих преждевременных родов подана заявка на изобретение в федеральную службу по интеллектуальной собственности, патентам и товарным знакам под номером 2009108294 от 10.03.2009.

Подтверждена активация системы врожденного иммунитета у здоровых беременных. Проведён анализ исходов беременности у пациенток с угрозой прерывания во II-III триместрах и показателей корреляции между повышением экспрессии гена TLR2 и снижением экспрессии гена противомикробного пептида HBD1 эпителиальными клетками цервикального канала при преждевременных родах, что свидетельствует о дисбалансе системы врождённого иммунитета. Полученные данные об изменении экспрессии генов TLR2 и HBD1 у беременных высокого инфекционного риска помогли расширить представление о роли механизмов врождённого иммунитета в патогенезе невынашивания беременности.

Определены изменения врожденного иммунитета при бактериальном вагинозе и сформулирована гипотеза о причинах корреляции между наличием данной патологии и частотой преждевременных родов.

Положения, выносимые на защиту

  1. По сравнению со здоровыми небеременными у женщин с воспалительными заболеваниями органов малого таза возрастает уровень экспрессии гена TLR2 клетками слизистой цервикального канала, а экспрессия гена HBD1 снижается.
  2. Физиологическое течение беременности сопровождается повышением активности врождённого иммунитета на локальном уровне, что определяет защиту от восходящего инфицирования.
  3. Исследование компонентов врождённого иммунитета (TLR2, HBD1) на локальном уровне (эпителиальные клетки цервикального канала) имеет большое значение в прогнозировании восходящего инфицирования у небеременных и во время беременности.
  4. В патогенезе бактериального вагиноза важную роль играет дисбаланс показателей врожденного иммунитета.
  5. Снижение уровня экспрессии гена противомикробного пептида HBD1 как прогностический фактор для преждевременных родов обладает высокой чувствительностью.

Практическая значимость

Определение факторов риска преждевременных родов позволяет выделить когорту беременных для проведения динамического клинико-лабораторного контроля состояния будущей матери с применением современных технологий. Диагностика нарушений врождённого иммунитета даёт возможность своевременно прогнозировать развитие осложнений беременности и определить показания к назначению терапии, направленной на пролонгирование беременности, антибактериальной и иммунокорригирующей терапии у беременных.

Определены диагностические критерии с учётом механизмов врождённого иммунитета, позволяющие с высокой точностью прогнозировать преждевременные роды. Снижение экспрессии гена HBD1 эпителиальными клетками цервикального канала рекомендуется в качестве маркёра предстоящих преждевременных родов.

Определены механизмы реализации восходящего инфицирования у пациенток ВЗОМТ, беременных с бактериальным вагинозом, невынашиванием беременности, что требует проведения соответствующей терапии.

Внедрение результатов работы в практику

Материалы диссертационного исследования используются в практике учебно-педагогического процесса на кафедре акушерства и гинекологии лечебного факультета РГМУ, кафедре иммунологии РГМУ и в практической работе родильного отделения городской больницы №8 г. Москвы.

По поводу использования экспрессии гена HBD1 в качестве маркера предстоящих преждевременных родов подана заявка на изобретение в федеральную службу по интеллектуальной собственности, патентам и товарным знакам под номером 2009108294 от 10.03.2009.

Апробация

Апробация диссертации состоялась на объединенной научно-практической конференции сотрудников кафедр акушерства и гинекологии и иммунологии Российского государственного медицинского университета, сотрудников городской клинической больницы №55, городской больницы №8, родильного дома №10 08 сентября 2009 года.

Материалы диссертации представлены на III Международном конгрессе по репродуктивной медицине, Конференции молодых ученых по молекулярной биологии и генетике, посвященной 120-летию М.И. Вавилова, Киев, Украина, 20—22 сентября, 2007; II Международной (XI Всероссийской) Пироговской студенческой научной медицинской конференции, 2009г.; IV Ежегодном конгрессе специалистов перинатальной медицины «Современная перинатология: организация, технологии и качество», 2009 г.,, III Международном конгрессе по репродуктивной медицине, 2009; XVI Российском национальном конгрессе «Человек и лекарство», Москва, 6-10 апреля 2009г

Публикации результатов исследования

По теме диссертации опубликовано 9 печатных работ, в том числе 5 статей в центральной печати.

Структура и объем диссертации

Диссертация состоит из введения, обзора литературы, результатов собственных наблюдений, обсуждения полученных результатов, выводов, практических рекомендаций, указателя литературы, содержащего 92 отечественных и 139 зарубежных источников. Работа выполнена на 139 страницах машинописного текста, иллюстрирована 18 таблицами и 29 рисунками.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Материалы и методы исследования

Исследование проводили в 2006-2009 гг. на клинических базах кафедры акушерства и гинекологии лечебного факультета РГМУ (заведующий кафедрой д.м.н., профессор, заслуженный врач РФ О.В. Макаров): в родильном отделении городской больницы №8 ДЗ г.Москвы (главный врач А.Б. Дуленков), женской консультации при родильном доме №10 УЗ ЮЗАО г. Москвы (главный врач Е.П. Озимковская) и городской клинической больнице №55 ДЗ г. Москвы (главный врач д.м.н., проф. О.Н. Румянцев) совместно с кафедрой иммунологии медико-биологического факультета РГМУ (заведующий кафедрой, д.м.н., профессор Л.В. Ковальчук).

Проведено клиническое и лабораторное обследование 120 женщин. Из них 60 составили основную группу, в которую вошли беременные в сроках 26-32 недели, поступившие в родильный дом при городской больнице №8 с диагнозом угроза преждевременных родов, у которых ранее было выявлено носительство урогенитальных инфекций.

Все пациентки основной группы получали стандартное комплексное лечение, направленное на пролонгирование беременности, несмотря на это, у 20 женщин из 60 беременность закончилась преждевременными родами в сроках 29—37 недель, остальные 40 родили в срок. Группа пациенток с преждевременными родами была выделена как группа Iа. Кроме того, при первичном анализе показателей врожденного иммунитета слизистой цервикального канала были выявлены запредельно высокие показатели экспрессии генов TLR у женщин с бактериальным вагинозом. Высокие значения искажали общую картину, что потребовало выделения этих беременных в отдельную группу (Iв). Таким образом, в группу Iб были отнесены пациентки, носители урогенитальных инфекций без признаков бактериального вагиноза, родившие в срок. В три группы контроля вошло по 20 человек.

Первая контрольная группа была составлена из 20 женщин с физиологически протекающей одноплодной беременностью в сроке 26—32 недели. Во вторую контрольную группу были включены 20 здоровых небеременных женщин. Третья контрольная группа состояла из 20 женщин с воспалительными заболеваниями органами малого таза (ВЗОМТ).

Методы клинического обследования: В исследуемых группах изучали: данные анамнеза, течение настоящей беременности, особенности родового акта, оценивали состояние новорожденных. Всем пациенткам проводили комплексное клинико–лабораторное обследование (клинический анализ крови и мочи, определение группы крови и резус-фактора, биохимический анализ крови, гемостазиограмму, анализ микрофлоры влагалища и цервикального канала бактериологическим методом и методом ПЦР). Ультразвуковой скрининг проводили у всех беременных на аппарате «Aloka 4000» (Япония) с использованием трансабдоминальных и эндовагинальных датчиков. Для наблюдения за состоянием плода с 30 недель беременности использовали антенатальную кардиотокографию при помощи мониторов фирмы «Hewlett Packard» (США).

Pages:     || 2 | 3 |






© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»