WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

загрузка...
   Добро пожаловать!

Pages:     | 1 | 2 || 4 | 5 |   ...   | 9 |

ФЭК

10 мин.

-

Предложенная альтернативнаяметодика обнаружениялекарственных веществ, производныхфенотиазина, с применениемщелочного раствора гидроксиламина(после предварительногорастворения исследуемыхсоединений в спиртовой среде),с последующим добавлениемраствора кислоты азотной,способствовала значительномуповышению по своейчувствительности определения (таблица4). Аналогом, взятым для сравненияс предлагаемыми намиисследованиями на производныефенотиазина, является способ,включающий реакцию пробыс 1 % раствором калиябромата и 16 % растворомкислоты серной, с последующейрегистрацией изменения окраски,где перед прибавлением враствор кислоты добавляютпроизводное первичныхароматических аминов сконцентрацией до 0,25 %.Способом-аналогом исследованотакже ограниченное количествопроизводных фенотиазина. Способ-аналог,как и способ-прототип, помимоограничений, имеет рядсущественных недостатков. Аименно, в способе-аналоге для10-алкилпроизводных фенотиазинанеобходимо проводить реакциюидентификации в течение 15-25минут; а для 10-ацилпроизводных - 25-35минут. Предлагаемый нами способпозволяет в 3-12 раз быстрее, и- без нагревания обнаружить12 лекарственных веществ, а поспособу-аналогу - исследовано 8лекарственных веществ. Реакция сприменением реагента -гидроксиламина, по сравнениюсо способом-аналогом, отличаетсяболее высокой чувствительностью.Например, для 10-алкилпроизводныхфенотиазина применениеокислителя гидроксиламина, вопределенных условиях, увеличиваетчувствительность определения в30-100 раз, в сравнении с аналогом,а для 10-ацилпроизводныхфенотиазина чувствительностьопределения увеличивается в 100-250раз. Перечисленные данные, всравнительном аспекте,представлены в таблице 4.

ТАБЛИЦА 4.

Цветная реакцияпроизводных фенотиазина путемобработки спиртовыхрастворов свежеприготовленным 10 %щелочным растворомгидроксиламина с дальнейшимдобавлением 16 % раствора кислотыазотной. Сравнение среактивом-аналогом - калияброматом в присутствии 0,25 %свежеприготовленного растворановокаина в 16 % растворекислоты серной (Д.В. Куприч идр.; см. описание изобретения кпатенту Российской Федерации«Способ идентификациипроизводных фенотиазина» от 25.12.1997 г.).

№ п/п иназвание лекарственноговещества (МНН).

Цветпродуктов реакции. Времяобнаружения

Чувствительность

определения, г/мл.

попредла- гаемому способу

поспособу- аналогу

попредла- гаемому способу

поспособу- аналогу

10-алкилпроизводные фенотиазина

1) Хлорпромазин.

Розовый

(3 – 5 мин.)

Малиновый,через 10 мин. бордовый, затемгрязно-розовый

(15- 25минут)

4. 10-5

2. 10-4

2) Промазин.

Красный

(3 – 5мин.)

Розово-оранжевый

(15-25мин.)

4. 10-5

2. 10-4

3) Трифлуопера-

зин

Желтый

(3 – 5мин.)

Желто-оранжевый

(15 –25мин.)

1. 10-4

2. 10-4

4) Прометазин.

Розовый

(3 –5мин.)

Розовый,через 10мин. ярко-зеленый(15 – 25мин.)

5. 10-5

2. 10-4

5) Диэтазин

Розовый

(3 –5мин.)

Розовый,через 10мин. серовато-зеленый

(15 – 25мин.)

2. 10-5

2. 10-4

6)Перфеназин

Розовый

(3 –5мин.)

Нетсведений

2,5. 10-5

-

7)Флуфеназин

Коричневый

(3 – 5 мин.)

Нетсведений

5. 10-5

-

8)Тиоридазин

Голубой

(3 - 5 мин.)

(3 - 5мин.)

4. 10-6

-

10 -ацилпроизводные фенотиазина

9) Флуацизин

Оранжевый (3 – 5 мин.)

Послегидролиза амидной связи – синий (25– 35 мин.)

2. 10-5

1,25. 10-4

10) Азаклорзин.

Розовый

(3-5 мин.)

Послегидролиза - голубовато-зеленый

(25 – 35 мин.)

5. 10-6

1,25. 10-4

11)Морацизин.

Фиолетовый

(3 – 5 мин.)

Нетсведений

4,5. 10-5

-

12) Этацизин

Фиолетовый

(3 – 5 мин.)

Послегидролиза фиолетовый, затем серый идалее

зеленоватый

(25 – 35мин.)

5,5. 10-5

1,25. 10-4

Нами для получениястабильной окраски продуктовреакции на производныефенотиазина с применениемокислителя - гидроксиламина,предлагается обязательноеиспользование спиртовыхрастворов лекарственных веществ,к которым добавляютсвежеприготовленный 10 % щелочнойраствор гидроксиламина, сдальнейшим добавлением 16 %раствора кислоты азотной. Длявыполнения работыприменяли спектрофотометры -СФ-26 и СФ-103, также -фотоэлектроколориметр КФК- 2. Ваналитических исследованияхиспользовали статистическиерасчеты, принятые ГФ XI издания.Исследование полученных цветныхпродуктов реакций производныхфенотиазина проведено сприменением спектрофотометрии вУФ- и видимой областях спектра(см. рисунки 1 и 2). Поглощениепродуктов реакций снято наоднолучевом приборе СФ-103(Аквилон, Россия). Управлениеприбором осуществляли сиспользованием программы«Спектр» (Аквилон,Россия).

Также исследование продуктовреакции проведено с применением ВЭЖХ-метода (метода высокоэффективнойжидкостной хроматографии) наприборе «Милихром-А-02» сУФ-детектором 190 – 360 нм и стандартнойколонкой, заполненной сорбентомProntoSIL-120-5-C18 AQ и размером 75 мм х 2,зернением 5 мкм, где применентвердый носитель с привитымигидрофобными группами, предколонка2,0 х 0 мм. В качестве подвижнойфазы использована смесь кислоговодного раствора литияперхлората с ацетонитрилом.Применено градиентное элюирование.Управление прибором и расчетхроматографических параметровосуществлены с использованиемпрограммы Мультихром-СПЕКТР дляWindows. На примере фторацизинаокисленного нагляднонаблюдается обнаружениепродуктов окисления (см. рисунок3). Найдено, что время удерживания(tR)фторацизина окисленногосоставляет 32 мин., также найденыпараметры пиков продуктовокисления. Объем вводной пробы- 4 мкл. Длина волныдетектирования - 210 нм. Скорость подачи:100 мкл/мин.. Линейная скорость - 0,76мм/с.

РИСУНОК 1.Спектр поглощения продуктоввзаимодействия аминазинас гидроксиламином.

РИСУНОК 2.Спектр поглощения продуктоввзаимодействия тиоридазина сгидроксиламином.

РИСУНОК 3.Хроматограмма окисленногофторацизина.

Нарисунках 1 и 2 представленыспектры поглощения продуктовреакции на примерахвзаимодействия аминазина итиоридазина в 50 % этиловомспирте с 10 % щелочнымраствором гидроксиламина, ис добавлением 16 %раствора кислоты азотной наспектрофотометре СФ-103, винтервале длин волн от 300 до 750нм, в кварцевых кюветах столщиной слоя 10 мм, относительноконтрольных опытов. Спектрыпоглощения характеризуютсяналичием двух максимумовпоглощения, а именно:слабовыраженного коротковолнового(максимум при длине волны330–360 нм), иинтенсивного длинноволнового(максимум при длине волны 415-630нм). Результаты исследованийпоказывают, что продукты окисления,полученные в ходе реакции,имеют специфические максимумыпоглощения на спектральныхкривых в видимой областиспектра, в зависимости отхарактера заместителей вовтором положениифенотиазинового ядра. В таблицах5 и 6 представленырезультаты исследованиявзаимодействия 10-алкилпроизводныхи 10-ацилпроизводных фенотиазинас гидроксиламином.

ТАБЛИЦА 5.

Сравнительнаяхарактеристика спектральныхданных при взаимодействиинекоторых 10 - алкилпроизводныхфенотиазина сгидроксиламином.

Наименованиелекарственного средства

МННТорговое

Цвет продуктовреакции

Значениемаксимумов поглощения (нм).

ПервогоВторого

ХлорпромазинАминазин

Розовый

345420

ПромазинПропазин

Красный

350515

ТиоридазинАпо-тиоридазин

Голубой

355525

Для 10-ацилпроизводныхфенотиазина характерно наличиетрех максимумов поглощения.

ТАБЛИЦА 6.

Сравнительнаяхарактеристика спектральныхданных при взаимодействиинекоторых 10 - ацилпроизводныхфенотиазина сгидроксиламином.

Наименованиелекарственного средства

МННТорговое

Цвет продуктовреакции

Значениемаксимумов поглощения (нм).

ПервогоВторого Третьего

ФлуацизинФторацизин

Желтый

321445505

АзаклорзинНонахлазин

Розовый

325445525

МорацизинЭтмозин

Фиолетовый

322450560

Очевидно, у10-алкилпроизводных фенотиазина ввидимой области спектра, посравнению с 10-ацилпроизводными,при взаимодействии сгидроксиламином, наблюдаетсябатохромный сдвиг первогомаксимума поглощения иотсутствие третьего максимумапоглощения.

Исследована возможностьприменения данной реакции дляколичественногофотоэлектроколориметрическогоопределения лекарственных формхлорпромазина, прометазина, промазина,перфеназина, диэтазина, тиоридазина,флуацизина, азаклорзина, морацизина.Для определения оптимальныхусловий проведения предлагаемойреакции применен методматематического планированияэксперимента - метод латинскихквадратов. На характер спектровпоглощения и максимальныйвыход продуктов окислениясущественно влияют следующиефакторы: концентрация исследуемоголекарственного вещества; порядокприбавления основного ивспомогательного реагентов, аименно –«лекарственное вещество + 50 %этиловый спирт + 10 %щелочной растворгидроксиламина» (где рН средысоставляет 11,0 – 11,5 –в 1 стадии реакции); идальнейшее добавление объема 16% раствора кислоты азотной(где рН среды составляет 1,4– 1,5 – во 2 стадииреакции). Влияние различныхфакторов мы изучали напримерах реакций с морацизином(или этмозином), с применениемфотометрических методов анализав видимой области спектра.

ПРИМЕНЕНИЕМАТЕМАТИЧЕСКОГО ПЛАНИРОВАНИЯЭКСПЕРИМЕНТА - МЕТОДАЛАТИНСКИХ КВАДРАТОВ ВИССЛЕДОВАНИИ ПРОИЗВОДНЫХФЕНОТИАЗИНА

I) Влияние 10 %щелочного растворагидроксиламина наинтенсивность окраски продуктовреакции.

Постановка опытов сводилась кследующему: в мерные колбывместимостью 50 мл добавлялипо 2 мл раствора морацизинав 50 % этиловом спирте(концентрации 5,0 мг/мл), затем тудажедобавляли

разные объемы 10% щелочного растворагидроксиламина и равныеобъемы 16 % раствора кислотыазотной, тщательно перемешивалии доводили объем исследуемогораствора водой очищенной дометки. Оптическую плотностьполученных растворов измерялина ФЭК-е - КФК-2 присветофильтре № 6, в кювететолщиной слоя 10 мм, относительноконтрольных опытов. Полученныерезультаты представлены втаблице 7.

ТАБЛИЦА 7.

Данные длярасчета коэффициента корреляциис учетом добавляемого объема10 % щелочного растворагидроксиламина.

D x 1000или х

Pages:     | 1 | 2 || 4 | 5 |   ...   | 9 |






© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»