WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

загрузка...
   Добро пожаловать!

Pages:     | 1 |   ...   | 5 | 6 || 8 | 9 |

На 21 сутки наблюдения наместе ожоговой поверхности кожи старыхживотных 2 подопытной группы определяетсямягкий эластичный рубец, на которомнаблюдается рост шерсти.

В гистологическомпрепарате (21 сутки) на участке, занимающемнесколько полей зрения, в дермеопределяется пласт зрелой рубцовой ткани сумеренным количеством клеточных элементов(преимущественно – зрелых фибробластов) и большимколичеством компактно упакованных грубыхмалоизвитых хаотично ориентированныхколлагеновых волокон. На поверхностирубцовой ткани – ожоговый струп с густойинфильтрацией распадающимися лейкоцитами,представленный пластом эпидермиса всостоянии коагуляционного некроза, свключениями полигональных частицжелтовато –коричневого окрашивания.

Сравнительный анализпроцесса заживления термического ожогакожи у старых животных свидетельствует остимулирующем влиянии экстрактаэмбриональных хрящевой и костной тканей ипептидного биорегулятора хондролюкса нарепарацию тканей кожи. Так, основные этапырепарационного процесса у старых животныхподопытных групп наступали в среднем на 7дней раньше, чем у кроликов контрольнойгруппы (табл. 7). Следует отметить, чтоприменение пептидного биорегуляторахондролюкса способствовало более раннемунаступлению этапа пролиферациифибробластов и появлениянейтрофильно-лимфоцитарной инфильтрации,что приводило к более быстрому образованиюэластичного мягкого рубца, чем у животных 1подопытной группы, которым применялиаппликации с экстрактом эмбриональныххрящевой и костной тканей.

Влияние экстрактовэмбриональных тканей и пептидногобиорегулятора на репарацию костнойткани

Морфологическая характеристикарепаративного процесса в плоских костях устарых животных

В исследование быливключены 15 кроликов в возрасте 4,5 лет смассой тела 4,5-4,8 кг, которые были разделенына 2 группы. Кроликам в теменной областипроизводили трепанацию черепа (площадьдефекта равна 22 см).

У животных контрольнойгруппы (6 особей) заживление дефектакостной ткани происходило естественнымпутем. У 9 животных подопытной группыосуществляли пластику костного дефектасингенным хрящом из рёберно-грудинногосочленения, вложенным между двумя слоямитонко нарезанной гемостатической губки (потипу «сэндвича»). Одновременно с этим наместо костного дефекта делали аппликации спептидным биорегуляторомхондролюксом.

Контрольныегистологические исследования ирентгенографию черепа проводилипоследовательно с интервалом в 7 дней смомента операции вплоть до полногозамещения дефекта костной ткани.

В гистологическомпрепарате через 28 суток после трепанациичерепа представлен фрагмент плоскойгубчатой кости животного контрольнойгруппы. На участке, занимающем несколькополей зрения, определяется дефект кости.Костная ткань стенок дефектагомогенизирована, с усилением восприятиякислого фуксина. Со стороны надкостницывидны реактивные изменения, заключающиесяв увеличении количества фибробластов иувеличении толщины коллагеновыхволокон.

В гистологическихпрепаратах кости старого животногоподопытной группы после пластикисингенным хрящем и аппликации с пептиднымбиорегулятором хондролюксом на срокенаблюдения 7 суток определяются фрагментыплоской губчатой кости. На участке,занимающем несколько полей зрения,выявляется дефект кости, выполненныйразобщенными фрагментами хряща.

Фрагменты хрящасоединены с костными балкамиклеточно-волокнистыми тяжами, в составекоторых преобладают молодые формыфибробластови немногочисленные нежныеколлагеновые волокна. Кроме того, вклеточном составе встречаютсянейтрофильные лейкоциты с примесью клетоклимфоидного ряда и небольшое количествомакрофагов.

В гистологическихпрепаратах старых кроликов подопытнойгруппы на сроке наблюдения 14 суток послепластики сингенным хрящем и аппликаций спептидным биорегулятором хондролюксом научастке, занимающем несколько полейзрения, определяется дефект кости,выполненный разобщенными фрагментамихряща. Фрагменты хряща соединены скостными балками клеточно-волокнистымитяжами, в составе которых выявляетсябольшое количество молодых формфибробластов. Содержание коллагеновыхволокон увеличено по сравнению спредыдущим сроком исследования. В составеформирующейся грануляционной ткани видныновообразованные сосуды.

На сроке наблюдения 21сутки морфологическая картина вновообразованной грануляционной тканисущественно не изменилась по сравнению спредыдущим сроком исследования. Однакофрагменты хряща более плотно прилегают кстенкам дефекта костной ткани за счетболее компактной упаковкиновообразованных коллагеновых волокон.Отмечаются также явления резорбции хрящаостеокластами.

На сроке наблюдения 28суток в гистологических препаратах костичерепа старых кроликов подопытной группыопределялись фрагменты плоской губчатойкости. На участке, занимающем несколькополей зрения, определяется дефект кости,выполненный небольшими фрагментами хряща.Фрагменты хряща с полной утратой ядер,соединены с костными балками плотнымисоединительнотканными сращениями снебольшим количеством клеточных элементови плотно упакованными грубымималоизвитыми коллагеновыми волокнами. Вклеточном составе новообразованнойплотной соединительной ткани преобладаютзрелые веретеновидные формы фибробластов.Содержание коллагеновых волоконсущественно увеличено по сравнению спредыдущим сроком исследования.

Таким образом,применение метода пластики сингеннымхрящом и аппликаций с пептиднымбиорегулятором хондролюксом позволяетзначительно ускорить процесс репарациикостной ткани у старых животных, приводя кобразованию полноценной плоской губчатойкости к 28 суткам наблюдения, в то время каку животных контрольной группы на этомсроке наблюдения обнаруживаетсязначительный дефект кости.

Закономерностирегенерации ткани костного мозга притрансплантации его в брыжейку тонкогокишечника кролика

Суть модели культивированиясингенного костного мозга в брыжейкетонкого кишечника экспериментальногоживотного заключается в том, что взятая избедренной кости кролика взвесь клетоккостного мозга вводится между листкамибрыжейки, создавая некую полость. Стечением времени в трансплантированнойвзвеси клеток начинаются процессыорганизации, приводящие, в конце концов, кобразованию полноценной гемопоэтическойткани. При проведении повторнойлапаротомии в установленные срокинаблюдения обращают на себя вниманиекрасноватые очаги (диаметром до 0,5 см) нафоне белесоватой брыжейки, а прозрачностьи некоторая растяжимость самой брыжейкиделают возможной световую микроскопию. Кконцу 3-ей –началу 4-ой недели эксперимента весь объёмэтой искусственной камеры заполняетсязрелой костно-мозговой тканью.

Таким образом, данная модельпредставляет собой удобный и доступныйспособ исследования регенераторнойспособности костного мозга притрансплантационном повреждении.

В микропрепаратах насроке 8 недель представлен полосчатойформы фрагмент жировой ткани, окруженныйтонкими соединительно-тканными пластами смезотелиальной выстилкой. Во всех поляхзрения в толще жировой ткани определяютсяучастки разрастания плотнойсоединительной ткани с умереннымколичеством клеточных элементов икомпактно упакованными малоизвитымиколлагеновыми волокнами. В клеточномсоставе преобладают зрелые веретеновидныеформы фибробластов. Вокругновообразованных соединительнотканныхтяжей –отложения зерен гемосидерина как всвободном виде, так и в составегемосидерофагов.

Закономерностирегенерации ткани костного мозга в областиобразованной полости в костном остовебедренной кости кролика

Исследование проведенос использованием модели фистулы в костномостове бедренной кости у 9 кроликов ввозрасте 4 лет с массой тела 4,5-4,7 кг. Фистулапредставляет собой круглый тоннель отповерхности кости до костного мозга вобласти эпифиза, диаметр 2 мм, глубина 5 мм. Образующийсятаким образом тоннель, стенки которогоограничены костной тканью, создаёт условиядля изучения характера миграциикостномозговых элементов в получившеесяпустотное пространство.

Данное положение намиконтролировалось визуально в различныесроки после образования тоннеля в костнойткани (1, 2, 3, 4 недели). Это позволилоотметить, что в течение 1-й недели из тканиинтактного костного мозга старых животныхконтрольной группы (4 кролика) в областиобразовавшейся пустоты начинаетпоявляться нарастающий объём тканикостного мозга. К концу 3-й недели этотобъём ткани костного мозга практическизаполняет всё пустотное пространство ипредставляет собой округлый цилиндр,состоящий из костномозговой ткани.

5 кроликам подопытнойгруппы в просвет фистулы, начиная с 1-го дняэксперимента, в течение 1 недели 1 раз в деньвводили 1,25 мл (0,5 мг) пептидногобиорегулятора хондролюкса для изучениястимулирующего действия препарата напроцесс образования костной ткани.

Таким образом, даннаямодель фистулы в костном остове бедреннойкости кролика представляет собой удобныйдоступный способ морфо-функциональногоисследования регенераторных возможностейкостного мозга.

Морфологическаяхарактеристика процесса регенерациикостного мозга при заполнении полости вбедренной кости кролика

Препаратырегенерирующего костного мозга на сроке 1недели представляют собой зону, в которойот внутреннего входа в просвет фистулыобразовывается тканевой столбик,исходящий своим основанием из структурынеповреждённого костного мозга.Характерная гистологическая картина всрезах на указанных сроках демонстрируетналичие фибробластов и формирование из нихмощных «пучков». Это стадия экспансиироста фибробластов.

Срок 2 недели у животных контрольнойгруппы характеризовался появлениемучастков разрежения фибробластных«пучков», когда между плотно прилежащимидруг к другу фибробластами образуютсяпромежутки.

В гистологических препаратах костного мозга животныхподопытной группы после примененияпептидного биорегулятора хондролюксапоявление промежутков в «пучках»фибробластов и разрежения в области«пучков» отмечалось уже к 10 дню.

В гистологическихпрепаратах костного мозга животныхконтрольной группы на сроке эксперимента 4недели по-прежнему остаётся выраженный повсей длине тяж из фибробластов, ноинтенсивно испещрённый очагамикроветворения. Такие островковыеобразования окружены сосудистымэндотелием, а полости внутри заполненыбольшим количеством эритроцитов имиелоидными элементами крови.Расположение этих очагов кроветворенияпреимущественно периферическое поотношению к основной оси фибробластноготяжа, в центре которого имеется большоеколичество таких кроветворныхструктур.

На сроке 3 неделиобращает на себя внимание, что в основаниинаросшего в просвет фистулы фрагментакостномозговой ткани, а именно, попериферической окружности, наблюдаетсяформирование костной ткани. Это явлениеобъясняется особенностями нашей модели, аименно, тем, что тоннель образован вкостном остове. При этом стенки еговыстланы тонкой стальной пластинкой. Всвязи с этим регенерирующий костный мозг вобласти фистулы не имеет естественногоконтакта со структурами трубчатой кости.Поскольку эволюционное развитиекостномозговой ткани всегдаограничивается костной муфтой,необходимость её представляется намочевидной и при заполнении полого объёмафистулы в эксперименте. Именно поэтому подостижении костномозговой тканью вобласти фистулы определённой зрелостивозникает необходимость в образованииестественного костного барьера. Именно этомы и наблюдаем на последних срокахэксперимента, когда от основания фистулывверх по краям тоннеля начинает появлятьсякостная ткань – у животных контрольной группы кконцу 4 недели, а у животных подопытнойгруппы после применения пептидногобиорегулятора хондролюкса – на 3 неделе.

Следует особо отметить,что контрольные гистологическиеисследования, проведенные через 6месяцев после окончания экспериментов намоделях эксцизионных ран, термическихожогов и костных дефектов, показали, чтоприменение экстракта эмбриональныххрящевой и костной тканей и пептидногобиорегулятора хондролюкса не вызываетнегативных пролиферативных процессов вкоже и костной ткани: гистологическаякартина соответтсвующей ткани кроликовподопытных групп через 6 месяцевсвидетельствует о том, что атипичныеэлементы тканей в препаратах отсутствуют.Таким образом, отдаленные результатыисследования подтверждают безопасностьприменения экстрактов эмбриональныхтканей и пептидного биорегуляторахондролюкса для ускорения заживлениядефектов кожи и костной ткани.

Заключение

Одной из актуальныхпроблем современной геронтологии являетсявосстановление утраченных функциональныхспособностей стареющего организма. Врассматриваемом аспекте особого вниманиязаслуживает способность стареющегоорганизма к реализации репаративногопроцесса при повреждениях различныхтканей организма. В нашем исследованиипредставлены возможности репарацииповреждений кожи и дефектов костногоскелета.

При различных видахпатологии, требующих включениярепаративного процесса, стареющемуорганизму требуется «посторонняя» помощьв виде стимулирующих средств. Этонеобходимо для ускорения репаративногопроцесса или перевода вяло текущеговосстановления на уровень эффективного повремени восстановления.

В наших исследованияхпредставлены морфологические образцызаживления эксцизионных кожных ран, атакже течение пролиферативного процесса устарых животных под влияниемаппликаций с экстрактом эмбриональныххрящевой и костной тканей и пептидногобиорегулятора хондролюкса,представляющего собой экстракт изхрящевой ткани телят. Обращает на себявнимание замедленное начало репарации устарых животных. Если начальноеформирование воспалительной реакции увзрослых особей обычно занимает 5 дней, то устарых животных выраженность этой стадииотсрочена на 3-4 дня. Проявлением этойособенности является слабая скоростьинфильтрации лейкоцитами повреждённойобласти, пассивная мобилизацияфибробластов и неповреждённых клеток покраям раны. Это приводит к задержкепролиферации во всех слоях повреждённогоучастка кожи. Впоследствии это задерживаетзакрытие раневого дефекта.

Безусловно, медленнаямиграция клеток миелоидного и лимфоидногорядов, отвечающих за выработку и секрециюразличного типа цитокинов, сдерживаетважные для репаративного процессаклеточно-клеточные взаимодействия.Поэтому в области раны у старыхживотных преобладают некротическиепроявления, сдерживающие полноценноезаживление раны. Как упоминалось ранее, вобычных условиях миграция клетокмиелоидного и лимфоидного рядовпроисходит в более быстром темпе.

Pages:     | 1 |   ...   | 5 | 6 || 8 | 9 |






© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»