WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

загрузка...
   Добро пожаловать!

Pages:     || 2 | 3 | 4 | 5 |   ...   | 9 |

На правах рукописи

КУРИЛОВ

ИгорьНиколаевич

ВОЗРАСТНЫЕ ОСОБЕННОСТИРЕПАРАТИВНОГО ПРОЦЕССА

В КОЖЕ И КОСТНОЙ ТКАНИ

(экспериментальноеисследование)

14.00.53 - геронтология игериатрия

Автореферат

диссертации на соисканиеучёной степени

докторамедицинских наук

Санкт-Петербург-2010

Работа выполнена в отделефундаментальных исследованийЧелябинского государственного институталазерной хирургии МЗСР РФ и лабораториивозрастной клинической патологииСанкт-Петербургского институтабиорегуляции и геронтологии СЗОРАМН

Научные консультанты:

доктор медицинских наук,профессор

Рыжак Галина Анатольевна

заслуженный деятельнауки РФ,

доктор медицинских наук,профессор

Попов ГеннадийКонстантинович

Официальныеоппоненты:

заслуженный деятель науки РФ,

доктор медицинских наук,профессор

Кветной Игорь Моисеевич

доктор медицинских наук,профессор

Королькова ТатьянаНиколаевна

доктор медицинских наук,профессор

КочишАлександрЮрьевич

Ведущая организация:

ГОУ ВПО«Санкт-Петербургская государственнаямедицинская академия им. И.И.Мечникова»

Защита диссертациисостоится «___» __________ 2010 г. в _____ часов назаседании Диссертационного Совета Д 601.001.01в Санкт-Петербургском институтебиорегуляции и геронтологии СЗО РАМН поадресу: 197119, Санкт-Петербург, пр. Динамо,3.

С диссертацией можноознакомиться в библиотекеСанкт-Петербургского институтабиорегуляции и геронтологии СЗОРАМН.

Автореферат разослан«___»___________2010 г.

Ученый секретарь

диссертационногоСовета,

доктор биологическихнаук,доцентКозина Л.С.

ВВЕДЕНИЕ

Актуальностьпроблемы

Первые годы настоящегостолетия характеризуются огромныминтересом теоретиков и клиницистов кизучению потенциальных возможностействоловых костномозговых клеток. Этосвязано с тем, что костномозговыепредшественники способныдифференцироваться не только вгемопоэтические клетки и клетки костногоскелета, но и в клетки других тканейорганизма. Всё это определяет возможностьвосстановления регенераторного характерапрактически всех видов тканей приповреждении.

Решение этого вопросавозможно при непосредственном примененииэкспериментального моделирования и знаниязакономерностей развития костного мозга вразличные периоды морфогенеза. Именно этообусловливает обострившийся интересисследователей к закономерностямморфологического и физиологическогостановления костного мозга. В последнеевремя всё больше и больше звучатвысказывания о том, что возникла острейшаянеобходимость в интерпретации уже давноописанных процессов морфо- и гистогенеза сфизиологических позиций. Эта проблемасуществует давно [Lash J., Whittaker J.R., 1974], но впоследние годы характеризуетсяпотребностью в глубоком проникновении вэти процессы, а именно, крайне необходимымявляется развитие биохимической ифизиологической интерпретаций этихявлений. Основные схемы дифференцировки ипролиферации клеток при первичномразвитии тканей остаются в потенциалезрелого функционирующего организма. Вотэто и обусловило выбор темыдиссертационной работы на примеререгенераторной и восстановительнойвозможностей костного мозга, которые могутбыть использованы в различных отрасляхмедицины.

Костный мозгмлекопитающих локализуется внутрикостного скелета. Наибольшаяфункциональная активность отмечается вэпифизах трубчатых костей, где костнаяткань представлена в виде сетчатойструктуры. Такое анатомическое соседствоне случайно, поскольку костномозговая икостная ткани проявляют функциональнуювзаимозависимость. Прежде всего,костномозговые стволовые клетки способныдифференцироваться как в кроветворныециркулирующие элементы, так и образовыватьостеобласты. Во-вторых, кровоснабжениекостного мозга и кости имеет прямоесоединение. Венозные синусы костного мозгаобеспечиваются кровью из питающих артерийкости и периостальной капиллярной сети[Brooks P., 1961]. Следует также подчеркнуть, чтоостеокласты являются производнымигемопоэтических клеток,моноцитов/макрофагов. В то же время,сетчатая структура эпифизов трубчатыхкостей обеспечивает формированиемикроокружения для эффективногокроветворения. Всё перечисленное выше даётнекоторым авторам право определятьфункциональную взаимозависимость костный мозг - костная ткань как функциональную единицу [CompstonJ.E., 2002]. В самом деле, это положениеподтверждается многими исследованиями вобласти экспериментальной гематологии.Так, экстрамедуллярная трансплантациякостного мозга всегда сопровождаетсяразвитием очагов кроветворения ссопутствующим образованием в этой областикостной ткани [Фриденштейн А.Я., Лурия Е.А.,1980]. Данный феномен является объективнымкритерием того, что для полноценногофункционирования ткань костного мозгануждается во взаимодействии споверхностью эндоста.

В аспекте излагаемоговопроса актуальным представляетсяизучение репаративного потенциалакостного мозга при различных формахповреждения. Подобные ситуации могутвозникнуть как при травматическихвоздействиях, так и после оперативныхвмешательствах по поводу остеомиелита иудаления эпифизарных кист трубчатыхкостей. Особый интерес должен представлятьвозможный способ устранения дефекта вплоских костях черепа с помощьютрансплантированных сингенных клетоккостного мозга. Не менее важноморфологическое исследованиемикроокружения после проведенияцитостатической терапии при различныхгематологических заболеваниях.

Осмыслению базисныхпроцессов, лежащих в основе репарациикостного мозга и костной ткани, и посвященонастоящее исследование. Нами на основеразличных экспериментальных моделейпредставлен материал, освещающий важностьклеточно-клеточных взаимодействий ивозможности ускорения репаративногопроцесса при повреждении кожи и костнойткани под действием ряда ростковыхфакторов, содержащихся в экстрактахэмбриональных тканей.

Наибольшее значениепроблема стимуляции репаративныхпроцессов в различных тканях имеет пристарении организма, поскольку снижениерезервных возможностей стареющегоорганизма влечет за собой замедлениепроцессов репарации во всех органах итканях. Это диктует необходимость поискаэффективных и безопасных средств длястимуляции пролиферативных процессов вповрежденных тканях с целью ускорениязаживления повреждений кожи и костнойткани, которые наиболее часто встречаютсяу людей пожилого и старческого возраста исущественно снижают качество их жизни.

Цель и задачиисследования

Цельюнастоящего исследования явилось изучениевлияния экстрактов эмбриональных тканей,содержащих биологически активные пептиды,и пептидного биорегулятора хондролюкса нарегенераторные процессы при повреждениикожных покровов и костного скелета устарых животных.

Для достижения поставленной целибыло необходимо решить следующие задачи:

1. Изучить особенностирегенеративного процесса на моделиэксцизионных ран и ожогов кожи имеханических повреждений костного скелетау старых животных.

2. Выявить основныезвенья в развитии репаративного процесса устарых животных, тормозящие полноценноевосстановление поврежденных тканей.

3. На основеморфологических и биохимических методовоценить возможности регуляциимежклеточных взаимодействий экстрактамиэмбриональных тканей.

4. Изучить эффектыаппликации экстрактов эмбриональныхтканей и пептидного биорегуляторахондролюкса на длительность и качестворегенерации кожи в области эксцизионныхран.

5. Изучить эффектыаппликации экстрактов эмбриональныхтканей и пептидного биорегуляторахондролюкса на длительность и качестворегенерации костной ткани при повреждениитрубчатых и плоских костей у старыхживотных.

6. Установить отсутствиеотдаленных побочных эффектов у старыхживотных при применении экстрактаэмбриональных тканей и пептидногобиорегулятора.

7. Обосноватьвозможность использования экстрактовэмбриональных тканей для проведенияэкспериментальных работ по созданиюпрепаратов, стимулирующих репаративныепроцессы при старении.

8. Обосноватьэффективность применения пептидногобиорегулятора хондролюкса для ускорениярегенерации тканей при повреждениях кожи икостной ткани при старении.

Положения, выносимые назащиту

1. При старенииснижается скорость и ухудшается качестворепаративных процессов, протекающих в кожеи костной ткани.

2. Заживлениеэксцизионных кожных ран у старых животныхзамедляется за счёт удлинения раннегопериода репаративного процесса,обусловленного задержкой началаобразования грануляционной ткани.

3. Аппликация на областьэксцизионной раны или термического ожогаэкстракта эмбриональных хрящевой икостной тканей существенно улучшаетколичественные и качественныепоказатели процесса заживления кожныхран у старых животных.

4. Применение пептидногобиорегулятора хондролюкса в видеаппликаций на поврежденную кожнуюповерхность у старых животныхспособствует ускорению процессоврепарации в коже и образованию мягкогоэластичного рубца.

5. У старых животныхотмечается медленное восстановлениекостного дефекта и слабая активациястромальной ткани по периферии костногодефекта.

6. Пептидныйбиорегулятор хондролюкс и хрящеваяпластинка, помещённые на область костногодефекта, существенно сокращают сроквосстановления повреждённой кости по типуэндохондрального остеогенеза за счётускоренной мобилизации и активациистромальных элементов в зонеповреждения.

7. Применение пептидногобиорегулятора хондролюкса в видеаппликаций на область костного дефектаусиливает пролиферацию клеток костнойткани и ускоряет репаративный процесс втрубчатых и плоских костях.

8. Применениеаппликаций экстракта эмбриональныххрящевой и костной тканей и пептидногобиорегулятора хондролюкса в качествестимуляторов репаративного процесса приповреждении кожного покрова и дефектовкостного скелета не вызывает в организместарых животных признаков атипичногороста, что подтверждается морфологическиммониторингом через 6 месяцев послеокончания лечения.

9. Ускорениерепаративных процессов при повреждениикожи и костной ткани при старении можетслужить дополнительным показанием кприменению лекарственного средствахондролюкса.

Научная новизнаисследования

Результаты исследованиявосстановительного процесса призаживления эксцизионных ран кожи идефектов костного скелета у старыхживотных показали значительное снижениеколичественных и качественныххарактеристик пролиферативного процессапри старении. Установлено, что заживлениеэксцизионных и термических поврежденийкожи у старых животных значительнозамедляется за счёт пролонгированияраннего периода репаративного процесса,замедления миграции клеток крови иснижения активации резидентных макрофагови фибробластов в месте повреждения. В связис этим время начала образованиягрануляционной ткани в зоне эксцизионныхран у старых животных отстает от этогопоказателя у молодых животных.

Впервые установлено, чтосреди различных эмбриональных экстрактовнаиболее выраженными хемоаттрактивнымисвойствами обладает экстрактэмбриональных хрящевой и костной тканей,который содержит биологически активныепептиды, обладающие пролиферативнойактивностью.

Впервые показано, чтоаппликации с экстрактами эмбриональныххрящевой и костной тканей или пептидногобиорегулятора хондролюкса на областьэксцизионного или термическогоповреждения кожи существенно ускоряютмедленно развивающийся репаративныйпроцесс у старых животных за счетуменьшения времени до начала образованиягрануляционной ткани и ускорениянеоангиогенеза.

Установлено, чтовосстановление костного дефекта у старыхживотных характеризуется медленнымтечением и сниженной активацией элементовстромальной ткани по периферии дефекта.Сокращение срока восстановленияповрежденной кости у старых животных путемэндохондрального остеогенеза достигаетсяприменением пептидного биорегуляторахондролюкса и хрящевой пластинки,помещённых на область костного дефектаплоских костей черепа, за счёт ускорениямобилизации и активации стромальныхэлементов в зоне повреждения.

В экспериментальноймодели трансплантации костного мозга вбрыжейку тонкого кишечника показано, чтоклетки костного мозга являются источникомобразования остеобластов, которыеформируют костный футляр для очагакостного мозга, что выражается в ростемиелоидного и эритроидного ростковкроветворения.

Доказано, что применениеаппликаций с экстрактом эмбриональныххрящевой и костной тканей или пептидногобиорегулятора хондролюкса в качествестимуляторов репаративного процесса приповреждении кожного покрова и дефектовкостного скелета не вызывает в организместарых животных побочного действия.

Практическая значимостьрезультатов исследования

Установлено, чторепаративные процессы в коже и костнойткани при старении существеннозамедляются. Показано, что экстрактыэмбриональных тканей обладаютхемоаттрактивными свойствами и содержатбиологически активные пептиды, обладающиепролиферативным действием, которыенаиболее выражены у экстрактаэмбриональных хрящевой и костной тканей.Доказано, что при аппликации экстрактаэмбриональных хрящевой и костной тканейдостигается ускорение репаративныхпроцессов при повреждении кожи и костныхдефектах у старых животных. Отсутствиепобочного действия позволяетрекомендовать использовать экстрактыэмбриональных тканей в качестве основы дляразработки лекарственных средств,ускоряющих репаративные процессы приповреждении кожи и костной ткани пристарении.

Установленаэффективность применения пептидногобиорегулятора на основе экстракта изхрящевой ткани телят - хондролюкса дляускорения репаративных процессов приповреждении кожи и костной ткани пристарении.

Долгосрочноеморфологическое мониторирование показалоотсутствие патологических процессов ворганизме старых животных послеприменения экстракта эмбриональныххрящевой и костной тканей или пептидногобиорегулятора хондролюкса в видеаппликаций на поврежденную поверхность дополного заживления дефекта кожи иликостной ткани.

Доказанныеэффективность и безопасность примененияэкстракта эмбриональных тканей позволяетрассматривать его в качестве основы дляразработки средств стимуляциирепаравтиных процессов пристарении.

Установленное ускорениерепаративных процессов при эксцизионном итермическом повреждениях кожи и костныхдефектах при аппликациях на поврежденнуюповерхность пептидного биорегуляторахондролюкса позволяет рекомендоватьрасширение показаний к егоприменению.

Связь с планом НИР

Работа выполнена всоответствии с планом НИР Челябинскогогосударственного института лазернойхирургии Минздравсоцразвития РФ иСанкт-Петербургского институтабиорегуляции и геронтологии СЗОРАМН.

Публикации

Pages:     || 2 | 3 | 4 | 5 |   ...   | 9 |






© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»