WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

загрузка...
   Добро пожаловать!

Pages:     | 1 |   ...   | 3 | 4 || 6 | 7 |   ...   | 11 |

1121

2421

2516

600

980

1890

3192

Таким образом,исследование в лабораторных масштабахпроцессов получения ФГМБ в результатегидролиза концентратов молочного белка сразным соотношением казеин/сывороточныебелки промышленными ферментнымипрепаратами позволило определитьоптимальные условия проведения процесса. Вслучае использования «Панкреатина»оптимальным является концентрацияфермента 2% по массе, температура 50±1оС, продолжительностьреакции 3 часа, рН оптимум 7,5 (срН-статированием щелочью или без него).Применение «Флавоэнзима» наиболееэффективно при содержании фермента 5% помассе сухих веществ, температуре 50±1оС, продолжительностиреакции до 20 часов, рН оптимуме 6,0 (безрН-статирования). Подобранные условиядействия ферментных препаратовиспользованы далее при получении ФГМБ впромышленных масштабах.

Итогом исследований вданном разделе явилась оптимизациятехнологических режимов ФГ для полученияФГМБ на основе КМБ и КСБ со средней ивысокой степенью гидролиза. Основныепараметры этих процессов и критическиважные характеристики получающихся ФГМБприведены в табл. 8.

Анализ критическиважных характеристик ФГМБ, получающихсяпри действии «Панкреатина» и«Флавоэнзима» на молочные белки, показал,что они близки для КСБ и КМБ. Однако, сучётом существенно большей биологи-

Таблица 8

Технологическиехарактеристики процесса ФГ

Параметры процесса и характеристикиФГМБ

КСБ+«Панкреатин»

КМБ+«Панкреатин»

КСБ+«Флавоэнзим»

КМБ+«Флавоэнзим»

Массоваядоля сухих веществ в растворе, %

5

5

3

3

Количествофермента от массы субстрата, %

2

2

5

5

Температурапроцесса оС

50±1

рНпроцесса

7,4-7,6*

7,4-7,6*

5,8-6,0

5,8-6,0

Продолжительность процесса, ч

3

3

20

20

Температураинактивации фермента, оС

93±2

Продолжительность инактивации,мин

5+0,2

Мср,** кД

4,5

3,1

1,8

1,4

АГ

510-3

110-3

1,510-3

510-4

Примечание. *Возможноиспользование рН-статирования растворомщелочи. **Мср-средняя молекулярная масса пептидов

ческой ценности КСБ всравнении с КМБ, а также тогообстоятельства, что ФГМБ на основеконцентратов сывороточных белков имеют вцелом гораздо менее выраженную горечь всравнении с гидролизатами КМБ и казеина. Вэтой связи выбор КСБ в качестве основногообъекта дальнейших исследованийпредставляется предпочтительным.

Глава 5. Изучениехарактеристик ФГМБ в процессе мембраннойобработки. Как было показанов предыдущем разделе, в результате ФГбелков коровьего молока (как КМБ, так и КСБ)не удаётся получить ФГМБ, полностьюсвободные от остаточных количествнерасщепленного или частичнорасщепленного белка (в диапазонемолекулярных масс 10 кД и более), количествокоторого в отдельных случаях можетдостигать нескольких процентов прирасчете по величине оптической плотностипри длине волны 280 нм (см. табл. 1-6). С учётомжёстких требований, предъявляемых ксодержанию остаточных количествнерасщепленных антигенов молока в составегипоаллергенных СП для питания детей(особенно, страдающих аллергическимизаболеваниями), использование полученныхФГМБ непосредственно в составе указанныхпродуктов не представляется возможным.Высокой степени элиминации из продуктамакромолекулярных белковых структур можнодостичь с использованием методовмембранной обработки гидролизатов.

Основнымидостоинствами мембранных методовобработки является их высокаяселективность по высокомолекулярнымфракции (ВМФ) с молекулярной массой более 10кД и возможность длительногомногократного использования мембран привысокой производительности процесса. Приэтом наряду с остаточными количестваминерасщепленного белкового субстрата изпродукта удаляются следовые количестважира, бактерии, а также макромолекулярныекомпоненты используемого ферментногопрепарата.

В табл. 9-10 приведенырезультаты оценки ММР пептидов вферментативных гидролизатах, полученныхиз образца КСБ после мембранных обработок.Использовали УФ-мембрану с размером пор 10кД и последующую нанофильтрацию. Исходныйгидролизат получен при обработке 2%«Панкреатином» в течение 3 часов и 5%«Флавоэнзимом» в течение 22 часов,соответственно.

Таблица 9

ММР пептидов ФГМБ,полученных из образца КСБ,

при гидролизе«Панкреатином» после мембраннойобработки

Диапазон молекулярных масс,кД

Относительное распределениепептидов

по молекулярным массам,%

исходный

гидролизат

УФ

УФ+НФ,

ВМФ

УФ+НФ,

НМФ*

Более166,0

6,5

0

0

0

166,0-28,2

3,6

0

0

0

28,2-11,0

3,6

2,2

3,7

0

11,0-4,0

19,2

16,3

28,0

0

4,0-1,4

14,2

19,5

27,3

9,9

Менее1,4

52,9

65,0

41,0

90,1

Примечание. * НМФ -низкомолекулярная фракция

Анализ полученныхрезультатов показал, чтоультрафильтрационная обработка (втангенциальном потоке при использованиеммембран с пропускной способностью помолекулярной массе 10 кД) удаляет изреакционной смеси высокомолекулярныеструктуры размерами более 11 кД.

ПоследующееНФ-фракционирование приводит кпрактически полному удалению из образцапептидов с молекулярными массами более 1,4кД.

Таблица 10

ММР пептидов ФГМБ,полученных из образца КСБ, пригидролизе

«Флавоэнзимом» послемембранной обработки

Диапазон молекулярных масс,кД

Относительное распределениепептидов

по молекулярным массам,%

исходный

гидролизат

УФ

УФ+НФ,

ВМФ

УФ+НФ,

НМФ

Более166,0

3,2

0

0

0

166,0-28,2

1,0

0

0

0

28,2-11,0

0,5

0,3

0,5

0

11,0-4,0

10,0

8,5

17,8

0

4,0-1,4

17,4

15,9

25,5

8,6

Менее1,4

67,9

75,3

56,2

91,4

Как следует из полученных данных, всоставе пептидного фильтрата при НФ более92% материала представлено свободнымиаминокислотами и олигопептидами;отсутствуют пептиды, превосходящие помассе 4 кД. При этом нанофильтрационныйретентат (остаток) обогащается «средними»пептидами в диапазоне молекулярных масс1,4-4,5 кД. Особенностью этой фракции являетсято, что она обладает удовлетворительнымиорганолептическими свойствами(практически отсутствует горечь) идостаточно низкой осмолярностью. Темсамым, она имеет хорошие перспективыиспользования в составе продуктов дляэнтерального питания и гипоаллергенныхпродуктов профилактическойнаправленности, где важным показателемкачества является вкус, позволяющийбольным применять продукты не только череззонд, но и в виде напитка.

НМФ, получаемая врезультате НФ, обладает, как будет показанониже, чрезвычайно низкой остаточной АГ иможет поэтому использоваться в качествебелкового компонента СП для больных,страдающих тяжелыми и средней тяжестиформами аллергических заболеваний. Какбудет показано в главе 6, она такжеперспективна для получения ферментативныхгидролизатов, модифицированных поаминокислотному составу.

В табл. 11 приведенырезультаты определения остаточной АГ ФГМБ,полученных из образца КСБ путем гидролиза«Флавоэнзимом» и последовательныхмембранных обработок.

Таблица 11

Остаточная АГгидролизата КСБ «Флавоэнзимом»

и его фильтрационныхфракций

Образец

АГ

Гидролиз

«Панкреатином»

Гидролиз

«Флавоэнзимом»

1

КСБ

0,382

2

ФГМБ

510-3

210-4

3

Фильтрат ФГМБ через УФ мембрану 10кД

610-5

610-6

4

ВМФ ФГМБпосле НФ УФ-фильтрата

710-5

710-6

5

НМФ ФГМБпосле НФ УФ-фильтрата

210-5

210-6

Из приведенныхрезультатов можно заключить, чтоиспользование мембранных обработокпозволяет снизить АГ более чем в 100 000 раз.Такое значение остаточной АГ позволяетиспользовать подобные гидролизаты вкачестве белкового компонента в лечебныхпродуктах питания для детей, страдающихнепереносимостью пищевых белков.

Отдельно был рассмотренвопрос о влиянии повторных УФ-обработок наАГ ФГМБ. В табл. 12 приведены результатытаких исследований, выполненных на УФ- иСУФ-мембранах с пропускной способностьюмембран 10 и 5 кД, соответственно.

Pages:     | 1 |   ...   | 3 | 4 || 6 | 7 |   ...   | 11 |






© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»