WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

загрузка...
   Добро пожаловать!

Pages:     | 1 || 3 | 4 |   ...   | 11 |

Второй этап посвящен экспериментальномуизучению закономерностей получения ФГМБ.Исследовали процесс накопления пептидовразличной молекулярной массы в составеФГМБ в ходе ФГ систем с различнымсоотношением казеинов и сывороточныхбелков под действием ферментныхпрепаратов в зависимости от рядатехнологических факторов, включаяфермент-субстратное соотношение,продолжительность гидролиза, режимытемпературной обработки, наличиерН-статирования. В получаемых ФГМБоценивали изменение ММР, содержаниесвободных аминокислот, остаточной АГ.

На основании данных обостаточной протеолитической активности вгидролизатах определяли параметрыинактивации фермента.

В дальнейшихисследованиях изучали особенности очисткии фракционирования ФГМБ, анализировалиизменение свойств гидролизатов в процессемембранной обработки (в т.ч. кратной) сиспользованием ультрафильтрации (УФ),селективной ультрафильтрации (СУФ), НФ иобратного осмоса (ОО), разрабатывалипринципы расчета процессов мембранногофракционирования ФГМБ. В качестве основныхконтролируемых при получении ФГМБ величинвыбраны характеристики мембранныхпроцессов, ММР, остаточная АГ, расчётнаябиологическая ценность.

ТЕОРЕТИЧЕСКОЕ ОБОСНОВАНИЕ ИПРАКТИЧЕСКАЯ РЕАЛИЗАЦИЯ ТЕХНОЛОГИЙГИДРОЛИЗАТОВ

МОЛОЧНЫХ БЕЛКОВ ИСПЕЦИАЛИЗИРОВАННЫХ ПРОДУКТОВ С ИХИСПОЛЬЗОВАНИЕМ



I. Теоретические исследования







Обобщение и анализ результатовотечественных и зарубежныхисследований


-аналитический обзор

- обоснование направлений

собственныхисследований

- цель и задачи работы






II. Экспериментальныеисследования




Оптимизация процессов ФГ молочныхбелков (КМБ и КСБ)


-параметры процесса

- кинетика ФГ

- ММР

- АГ

- аминокислотный состав

- режимы инактивациифермента










Изучение характеристик ФГМБ впроцессе мембранной обработки


-селективность мембран

- параметры процесса

- кратность обработки

- состав и свойствагидролизатов

- принципы расчета










Исследование закономерностейудаления фенилаланина из ФГМБ сиспользованием АХр


-ММР

- содержание фенилаланина

- закономерностифракционирования

- параметры АХр











Разработка параметров технологийФГМБ


-ФГ, УФ, СУФ, ОО, АХр

- параметры сгущения исушки

- частные технологии ФГМБ

- состав и свойстваобразцов









Разработка блочно-модульной схемыполучения ФГМБ и СП на их основе


-технологические блоки

- принципиальнаяблочно-модульная
технологическая схема

- классификация ФГМБ и СП








III. Практическая реализациярезультатов исследований









Организация

производства


Техническая

документация


Социальная

значимость

Рис. 1. Схема проведенияисследований

Исследовализакономерности селективной сорбциифенилаланина из ФГМБ, прошедших мембраннуюочистку и фракционирование. Оптимизировали процесс АХр.

Обобщенный материалэкспериментальных исследований послужилоснованием для разработки технологическихпроцессов различных видов ФГМБ и СП на ихоснове.

Следующая частьисследований связана с разработкойклассификаций ФГМБ и продуктов на ихоснове, обоснованием принципиальнойтехнологической схемы с указаниемтехнологических процессов иконтролируемых величин, а такжеблочно-модульной схемы получения ФГМБ и СП.

Третий,заключительный этап работы, связан спрактической реализацией результатовисследований. В соответствии смедико-биологическими требованиямиосуществляли адаптацию разработанныхтехнологий к промышленным условиям,разрабатывали техническую документацию,внедряли результаты исследований впромышленности с проведением клиническихапробаций новых СП, оформляли патентнуюдокументацию.

На разных этапах работыобъектами исследований являлись: молококоровье, предназначенное для производствапродуктов детского питания; концентратмолочного белка (КМБ) и КСБ с массовой долейбелка не менее 80%, в т.ч. получаемые поимпорту и разрешенные органамиГоссанэпиднадзора Минздрава России дляиспользования в производстве продуктовдетского питания; коммерческие ферментныепрепараты «Флавоэнзим» из Asp. оrhyzae(«Novozyme», Дания) и «Панкреатин» изподжелудочной железы крупного рогатогоскота (отечественного или импортногопроизводства); сорбент ХАД-16 («Laboratoire Channy»,Франция) для АХр, лабораторные, пилотные ипромышленные образцы продукции.

При выполнении работыиспользовали общепринятые, стандартные иоригинальные методы исследования.

Физико-химические имикробиологические показатели сырья,вспомогательных материалов и готовыхпродуктов, контроль параметровтехнологического процесса осуществляли всоответствии с действующей нормативнойбазой: МУК 4.2.577 «Методымикробиологического контроля продуктовдетского, лечебного питания и ихкомпонентов»; СанПиН 2.3.4.551 «Производствомолока и молочных продуктов»; СанПиН 2.3.2.1078«Гигиенические требования безопасности ипищевой ценности пищевых продуктов»;«Инструкция по технохимическому контролюпроизводства сухих молочных продуктовдетского питания», утверждённая 30.12.92;«Санитарно-технологические требования кпроизводству продуктов детского илечебного питания на молочной основе»,утверждённые 16.09.80; «Инструкция потехнохимическому контролю дляпредприятий, вырабатывающих молочныепродукты для детей различных возрастныхгрупп», утверждённая 25.12.1980.

При оптимизациипроцессов получения ФГМБ в лабораторныхмасштабах гидролиз проводили безпредварительной термической обработкисубстратов в водяном или суховоздушномтермостате с перемешиванием, притемпературе 37-50С. Контроль рНосуществляли с использованиемлабораторных рН-метров. рН-статированиеосуществляли добавлением 1,0 М растворагидроокиси натрия или 1,0 М соляной кислоты.По окончании процесса ферментный препаратв составе гидролизата инактивировалинагреванием при 90-95 оС в течение 5-10 мин. Ультрафильтрациюполученных гидролизатов проводили налабораторной установке «МИНИТАН»(«Millipore»,США) с использованием мембран сдиаметром пор 10 и 5 кД. НФ проводили наустановке производства «ВЛАДИСАРТ»(Россия), через мембрану с размером пороколо 0,5 кД при рН 6,0-6,5. Полученныегидролизаты лиофильно высушивали налабораторной сублимационной сушке.

В основу получениягидролизатов молочных белков со сниженнымсодержанием фенилаланина положен методАХр с использованием в качественеподвижной твердой фазы смолы ХАД-16,представляющей собой пористые гранулыхимически модифицированного полистирола.В лабораторных масштабах нахроматографическую колонку (2,540 см) с ХАД-16,уравновешенную дистиллированной водой,через перистальтический насос наносиливодный раствор ФГМБ с массовой долей сухихвеществ от 20 до 45% в объёме от 10 до 25 мл.После этого проводили элюированиедистиллированной водой со скоростью 2,0мл/мин в течение 100 минут, отбираяхроматографические фракции на коллектор.Колонку далее регенерировалипоследовательным пропусканием 600 мл 0,2 Мгидроокиси натрия, 500 мл 0,1 М солянойкислоты и 1000 мл дистиллированной воды. Вотобранных фракциях измеряли оптическуюплотность при 280 нм на спектрофотометре иопределяли содержание сухих веществрефрактометрическим методом, а такжепроводили анализ ММР методомэксклюзионной хроматографии. После этогофракции лиофильно высушивали. В высушенныхфракциях определяли содержаниефенилаланина методом ВЭЖХ на обращеннойфазе.

В процессе перехода кпилотным условиям производства былаприменена полупромышленнаяхроматографическая колонка с неподвижнойфазой ХАД-16 размером 44100 см). В качествеосновного критерия подобия при переходе кпилотной установке нами было принято времяэлюирования полного объема колонки,которое составило 100 минут.

При исследованиихарактеристик ФГМБ и их фракций,полученных методами мембранной фильтрациии препаративной АХр в лабораторных иполупромышленных масштабах, использовалиследующие методы.

ММР пептидов оценивалиметодом эксклюзионной хроматографии. Былииспользованы две хроматографическиеколонки с характеристиками пористости,наиболее подходящими для получаемых ФГМБ.В качестве аналитической колонкиприменяли колонку высокого давления TSK GELG2000 SWLX (HP, США), 0,830см. В качестве элюента использовали0,05 М калий фосфорнокислый однозамещенный с0,15 М хлористым натрием и 0,01% азидом натрияили 0,2 М хлористый натрий с добавлением 0,01%азида натрия. Скорость элюированиясоставляла 0,2 мл/мин, в качестве проточногодетектора использовалиспектрофотометрический детектор на длинуволны 280 нм.

Pages:     | 1 || 3 | 4 |   ...   | 11 |






© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»