WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

загрузка...
   Добро пожаловать!

Pages:     | 1 || 3 | 4 |   ...   | 5 |

Типирование локусов HLA-A и В проводили с использованием микролимфоцитотоксического теста [Terasaki P.I. et al., 1978]. Серологическое типирование осуществляли при помощи панели №38, включающей 72 аллоантисыворотки, против 38 антигенов HLA локусов А и В (АО "Гисанс", СПб).

Генотипирование HLA DRB1 проводилось методом сиквенс-специфичных праймеров (SSP- sequence specific ргоbе). Для определения 13 специфичностей гена DRB1 главного комплекса гистосовместимости методом PCR-SSP использовалась ДНК, полученная из ядерных клеток периферической крови пациентов и доноров. Для типирования использовались коммерческие наборы фирмы "DNA-технология", Москва [Alexeev et al., 1996], и термоциклер "Терцик МС2" этой же фирмы.

Cтатистическая обработка полученных результатов проводилась методами описательной, непараметрической статистики, а также методами структурного статистического анализа с использованием программы “STATISTICA - 5.0” и пакета программ для медико-биологических исследований - “СНЕДЕКОР” [Боровиков В.П. с соавт., 1998]. Достоверность различий оценивалась с помощью t-критерия Стьюдента для данных с нормальным распределением. При распределении, отличном от нормального, использовали критерий Манн-Уитни. Выделение различных диапазонов количественных признаков осуществляли в соответствии с методическими и аналитическими подходами квантильного анализа, предложенными в работах Б.С. Шорникова, Ф. Мостеллера и Дж. Тьюки [Шорников Б.С., 1979; Мостеллер Ф., Тьюки Дж., 1982; Гланц С., 1999]. О достоверности различий частот встречаемости квантильных диапазонов и других клинико-лабораторных признаков, с бинарным распределением (“есть”/”нет”) судили с использованием точного метода Фишера. Для оценки диагностической значимости клинико-иммунологических признаков вычисляли комплекс стандартных мер информативности (меры Шеннона- Jsh, Кульбака - JKu, диагностический коэффициент – (ДК), а также показателей их чувствительности (Sn) и специфичности (Sp), расчеты которых осуществляли с использованием общепринятых методов статистического анализа [Гублер Е.В., 1978, Лакин Г.Ф., 1990, Боровиков В.П., 1998].

Для анализа особенностей распределения антигенов гистосовместимости I и II классов в группах больных и здоровых доноров производили расчет частот HLA-антигенов, генов, фенотипов и гаплотипов различных HLA-локусов, определялась величина и уровень достоверности неравновесного сцепления генов, соответствие распределения генотипов равновесию Харди-Вайнберга.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Результаты иммунологического обследования больных локальными урогенитальными инфекциями и урогенными реактивными артритами.

Нами было проанализировано 189 пациентов, которые были распределены на 3 группы. В первую, - контрольную группу пациентов (n=78), были включены практически здоровые жители г. Новосибирска обоего пола, не имевшие на момент иммунологического обследования лабораторных и клинических признаков УГИ. Во вторую группу вошли 27 больных из 36 группы с локальными формами УГИ. В третью группу были включены 84 пациента, у которых УГИ сочеталось с развитием урогенного реактивного артрита.

Сравнительный анализ средних величин показателей иммунного статуса у пациентов контрольной группы, локальных форм УГИ и урогенного реактивного артрита позволил выделить группу признаков отражающих общие отклонения в состоянии иммунной системы, регистрируемые как при локальной урогенитальной инфекции, так и при системных экстрагенитальных формах.

К таковым, прежде всего, относятся признаки недостаточности фагоцитарной активности гранулоцитов и моноцитов периферической крови (p<0.001), уменьшение объема циркулирующего пула лимфоцитов (p<0.01), повышение суммарного уровня IgG, ЦИК (p<0.05) и увеличение концентрации в сыворотке крови аутоантител различной специфичности (p<0.001).

На основании полученных данных можно говорить о том, что у больных локальными формами УГИ и урогенными реактивными артритами имеются сходные изменения в иммунном статусе, которые обусловлены наличием персистирующей внутриклеточной инфекции.

На втором этапе статистического анализа были изучены межгрупповые особенности иммунного статуса пациентов локальными формами УГИ и УРеА. Статистическая обработки данных проводилась с помощью метода квантильного анализа, поскольку данная методология позволяет не только выявить межгрупповые различия иммунологических признаков, но и охарактеризовать их с точки зрения информативной (диагностической) составляющей.

Кроме уже рассмотренных в рамках общих для двух групп изменений характерных для персистенции урогенитальной инфекции, методом квантильного анализа был выявлен ряд достоверно отличающихся от контрольной группы диапазонов признаков (табл.1).

Таблица 1.

Частоты встречаемости и диагностическая значимость диапазонов иммунологических признаков при различных формах хронической УГИ

Признаки

Частота встречаемости признака (в %)

Достовер-

ность разли- чий форм

УГИ (PTMФ)

Информативность

Контроль

ЛУГИ

УРЕА

Jsh

DK

1

2

3

4

5

6

7

Признаки риска развития хронической локальной УГИ:

ИИМ > 1.0

25.8

51.8*

16.7

0.0004

-1.1

-3.0

ПАН > 2.78

25.8

4.5*

24.1

0.03

-2.5

-7.5

Ig M > 1.49 г/л

11.1

33.3*

15.3

0.03

-1.6

-4.8

ЦИК > 31.3 у.е.

12.9

33.3*

19.5

0.03

-2.2

-6.5

Признаки риска развития системных форм УГИ:

CD3+ > 74.0 (%)

12.3

11.1

25.0*

0.04

1.0

3.1

CD8+ > 33.0 (%)

12.3

11.1

22.6*

0.04

0.9

2.6

Ig A > 2.77 г/л

11.1

7.4

31.8*

0.01

1.5

4.6

А-ТГ >25.8 у.е. 100

9.6

33.3

75.0*

0.02

3.0

9.2

Примечание: DK – диагностический коэффициент; Jsh – информативность по Шеннону; * - достоверность различий показателей (р<0,05) по сравнению с группой здоровых доноров.

При анализе клеточного звена в группе УРеА выявлено достоверное увеличение содержания в периферической крови субпопуляций CD8+ и CD3+ лимфоцитов, что вполне соответствует концепции патогенеза урогенных реактивных артритов [Доронина Е.В., 1999; Locht H., et al., 2000; Sieper J. et al., 2006], поскольку именно бактериоспецифичные HLA-В27 рестриктированные и нерестриктированные CD8+ цитотоксические лимфоциты играют ключевую роль в антихламидийном иммунном ответе, при адекватности которого возможна полная элиминация патогена.

При анализе показателей гуморального звена, помимо общих с ЛУГИ изменений, а именно повышение титров IgG, ЦИК и аутоантител, в группе больных УРеА отмечается повышение уровня IgA. В масштабных клинических исследованиях пациентов с УРеА показано, что повышение титров IgA и IgG периферической крови характерно для данного страдания и является маркером персистенции триггерных инфекционных факторов [Агабабова Э.Р., 2001; Melles H.H. et al., 2000]. Необходимо отметить, что именно IgА выступают в роли аутоантител к различным компонентам тканей макроорганизма [Locht H., 2003]. Повышение титра ЦИК коррелирует с клинической активностью заболевания.

При анализе особенностей показателей клеточного звена иммунитета пациентов с ЛУГИ, не было выявлено нарушений соотношения и количества основных субпопуляций Т-клеток и NK-клеток. При оценки активности ГЗТ-эффекторов, у пациентов ЛУГИ было зарегистрировано достоверное повышение индекса миграции и индекса ингибиции миграции лимфоцитов относительно оппозитных групп. Повышение ИМ можно трактовать как повышение миграционной способности клеток фагоцитарного ряда в ответ на митоген. Патогенетическое значение данного показателя может заключаться в отражении предсуществующей хемотактической активности фагоцитов в ответ на персистирующую внутриклеточную инфекцию, сопровождающуюся продукцией хемотаксинов и гиперэкспрессии молекул адгезии [Rdel J. et al., 2002].

Характерной особенностью данной группы при оценки гуморального звена неоходимо считать повышение титра IgМ в периферической крови. Полученные результаты могут быть объяснены с позиции того, что при локальных УГИ частота первичного иммунного ответа значительно выше, чем при системных персистирующих формах.

Нами также была проведена оценка показателей иммунного статуса у больных с синдромом Рейтера, особой клинической формой УРеА, характеризующейся наиболее тяжелым течением и неблагоприятным прогнозом (табл.2).

Таблица 2.

Частоты встречаемости и диагностическая значимость диапазонов иммунологических признаков при различных вариантах УРеА

Иммунологические признаки

Частоты признаков

Jsh

DK

УРеА(+)СР(-)

(n=33)

СР

(n=41)

CD20+ (%) >14,0

11

31

32,9

5,5*

ЕА-мон (%) >62,0

24

13

30,6

-5,5*

ЕА-гран (%) >70,0

25

12

32,8

-5,8*

Ig A (г/л) >3,0

12

33

52,2

3,7*

Примечание: DK – диагностический коэффициент; Jsh – информативность по Шеннону; * - достоверность различий показателей (р<0,05).

В группе СР было зафиксировано повышение количества CD20 - позитивных лимфоцитов и титра IgA, что по нашему мнению отражает процессы неспецифической В-клеточной поликлональной активации, являющейся следствием доминирования Th2-иммунного ответа в ответ на персистенцию специфических для СР триггерных УГИ [Мартынова В.Р., 1996; Locht H. et. al., 2000]. Достоверное уменьшение показателя ЕА-фагоцитоза моноцитов и гранулоцитов в группе больных УРеА с более легким клиническим течением отражает, описанные нами ранее, процессы недостаточности фагоцитарной активности данных клеток [Koehler L., 1997; Sieper J. et al., 2006].

Pages:     | 1 || 3 | 4 |   ...   | 5 |






© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»