WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

загрузка...
   Добро пожаловать!

Pages:     | 1 |   ...   | 2 | 3 ||

В НГМ из высушенного сырья, в отличие от НГМ из свежего сырья присутствуют пирогаллол, галловая и эллаговая кислота, что связано с процессами окисления и восстановления при сушке сырья.

Анализ компонентов липофильной фракции (извлекается из НГМ путем трехкратной экстракции гексаном) гомеопатических настоек коровяка проводили методом хромато-масс-спектрометрии на приборе Saturn 2000 (Varian) с масс-анализатором с ионной ловушкой на капиллярной кварцевой колонке CP-SIL 24 CB Low Bleed/MS 30м (длина колонки)0,25 мм (толщина колонки)0,25 мкм (внутренний диаметр колонки).

Газохроматографические условия анализа: газ-носитель гелий, постоянная скорость потока 1,0 мл/мин, инжектор 1079 с деление потока газа носителя в инжекторе 1:10, температура 280°С, температурная программа колонки: 40°С – 1 мин, нагрев до 150 °С со скоростью 10°С/мин, до 290 °С – 4°С/мин, изотерма при 210°С 13 мин. Исследование липофильной фракции, выделенной из НГМ коровяка густоцветкового и обыкновенного, показало, что в таковой из настойки коровяка густоцветкового обнаружено 43 соединения, из них идентифицировано – 38; из НГМ коровяка обыкновенного – 77 соединений, идентифицированных – 39. Обнаружены свободные жирные кислоты и их этиловые эфиры, эфиры насыщенных карбоновых кислот и другие вещества. В настойках из высушенного сырья проанализированных видов коровяка выявлено уменьшение содержания этиловых эфиров насыщенных кислот и всех ненасыщенных кислот при одновременном увеличении концентрации этиловых эфиров пента - и гептадекановой кислоты. Эти особенности увеличения концентрации этиловых эфиров связаны с естественной сушкой и изменением состава липофильной фракции при хранении.

В НГМ коровяка обнаружены алкалоиды – на основании результатов ТСХ, УФ-спектрофотометрии и литературных данных можно предположить, что в изучаемых НГМ содержатся алкалоиды группы макроциклических 17-членных лактамов (вербаллоцин и вербасин). Эти соединения обладают достаточно высоким поглощением в УФ-свете, благодаря чему их можно обнаружить с помощью ТСХ и в перспективе разработать методику их количественного определения.

По методикам, предложенным для оценки качественного и количественного состава аминокислот в ЛРС, проанализированы НГМ коровяка. Суммарное содержание свободных и связанных аминокислот составляет для НГМ коровяка густоцветкового и коровяка обыкновенного 0,277% и 0,266%, что свидетельствует о том, что более половины аминокислот находится в сырье в связанном виде – в виде пептидов. НГМ коровяка черного содержит гораздо меньшее суммарное количество аминокислот – 0,147%.

5. Разработка показателей качества и установление сроков годности ЛРС, НГМ Verbascum densiflorum. Анализ гомеопатических разведений.

Для контроля качества ЛРС коровяка густоцветкового предложены следующие показатели: описание ЛРС, диагностически значимые признаки, качественные реакции, числовые показатели, количественное определение БАВ – флавоноидов в пересчете на нарингенин и суммы полисахаридов. Предложены следующие нормативы: влажность для свежего сырья – не менее 60%, для высушенного сырья – не более 12%; содержание золы общей не более 4%; золы, нерастворимой в 10% хлористоводородной кислоте - не более 0,25%; содержание минеральной и органической примеси не более 1%; сумма экстрактивных веществ, извлекаемых водой и спиртом – 25 и 19% соответственно; содержание суммы флавоноидов в пересчете на нарингенин - не менее 1,0%; содержание суммы полисахаридов – не менее 22%. Срок годности ЛРС предлагаем установить 3 года.

Контроль качества НГМ коровяка регламентируется по следующим показателям: состав настойки; описание; критерии подлинности; сухой остаток, содержание спирта; плотность; тяжелые металлы; микробиологическая чистота, количественное определение суммы флавоноидов, срок годности

Разработка показателей качества настойки проводилась на пяти сериях препарата. Критерии подлинности настоек включают реакции на вещества фенольной природы с раствором железа окисного хлоридом, на сапонины (пенообразование при встряхивании с водой), а также испытанием методом ТСХ. В качестве стандарта используют раствор лютеолин-7-гликозида в 70 % этиловом спирте. Неподвижная фаза: пластинки со слоем силикагеля ”Сорбфил ПТСХ-П-А-УФ”. Подвижная фаза: этилацетат-кислота уксусная ледяная - вода (5:1:1). Содержание сухого остатка должно быть не менее 1,5%, плотность - в пределах от 0,880 до 0,910. Содержание тяжелых металлов сос-тавляет не более 0,001%.

Количественное определение суммы флавоноидов было проведено по разработанной нами методике. В НГМ коровяка густоцветкового содержание суммы флавоноидов в пересчете на нарингенин должно быть не менее 0,50%.

Нами проведено изучение состояния НГМ коровяка в процессе естественного хранения по всем показателям качества, регламентируемых проектом ФСП. Срок годности НГМ коровяка установлен 2 года. Наблюдение за настойками в процессе хранения продолжаются.

Для оценки подлинности гомеопатических разведений Verbascum, которые используются в гомеопатической практике в качестве монопрепаратов, и для изготовления комплексных лекарственных средств, использованы качественные реакции и испытание методом ТСХ, при этом важным является установление наличия веществ, обуславливающих терапевтический эффект, в том числе флавоноидов. Разведения настоек Verbascum готовили по правилам гомеопатической технологии (ОФС 42-0027-05 «Настойки гомеопатические матричные»).

Первое десятичное (1D) разведение Verbascum представляет собой прозрачную жидкость красно-коричневого цвета, со своеобразным запахом. Второе десятичное разведение (2D) - прозрачная жидкость светло-коричневого цвета практически без запаха; третье десятичное разведение (3D) - жидкость бледно-желтого цвета, спиртового запаха и четвертое десятичное разведение (4D) - бесцветная жидкость спиртового запаха.

Первое и второе десятичные разведения при упаривании на кипящей водяной бане дают реакцию с раствором железа окисного хлорида на дубильные вещества, третье десятичное - изменение окраски при добавлении реактива практически не заметно, четвертое разведение - реакция отрицательна. На хроматограммах исследуемых растворов 1D и 2D разведений НГМ коровяка обнаруживаются зоны, идентичные зонам настойки, но более слабой интенсивности; в разведениях 3D и 4D идентичных зон не обнаружено.

Результаты анализа гомеопатических разведений НГМ коровяка свидетельствуют о том, что методом ТСХ можно определять БАВ, устанавливать подлинность и характеризовать качество разведений, в том числе и в процессе хранения, до второго десятичного разведения, для последующих разведений полученные данные не могут быть объективными.

ОБЩИЕ ВЫВОДЫ

  1. Проведен товароведческий анализ ЛРС коровяка, установлены диагностически значимые микроскопические признаки сырья ”Коровяка трава высушенная” и ”Коровяка цветки высушенные” (определенные виды волосков), определены числовые показатели для ЛРС коровяка.
  2. С помощью физико-химических методов изучен в сравнительном аспекте флавоноидный, углеводный и аминокислотный состав ЛРС видов коровяка, как свежего, так и высушенного, и НГМ, изготовленных из него. Показано, что коровяк густоцветковый и коровяк обыкновенный близки по качественному и количественному составу основных групп БАВ, тогда как коровяк черный существенно отличается от них меньшим содержанием флавоноидов и полисахаридов. Следовательно, коровяк обыкновенный также может применяться при изготовлении НГМ.
  3. Методом ТСХ и ВЭЖХ впервые изучен аминокислотный состав ЛРС и НГМ коровяка густоцветкового, обыкновенного и черного. Идентифицированы 18 аминокислот, из них 7 незаменимых. Содержание аминокислот в сырье в среднем составляет от 0,23 до 0,91%; в НГМ от 0,15 до 0,28%. В основном, среди общего количества аминокислот превалируют серин, метионин, валин, аспарагиновая и глутаминовая кислота.
  4. Проведено исследование состава фенольных соединений НГМ коровяка густоцветкового и коровяка обыкновенного с помощью метода ВЭЖХ. В НГМ коровяка качественно идентифицированы флавоноиды - кемпферол, гесперидин, нарингенин, дубильные вещества, фенолкарбоновые кислоты.
  5. Разработаны методики количественного определения суммы флавоноидов в пересчете на нарингенин и углеводов в пересчете на глюкозу в НГМ коровяка с помощью метода дифференциальной спектрофотометрии.
  6. Проведено исследование состава липофильной фракции, полученной из НГМ коровяка густоцветкового и коровяка обыкновенного, идентифицированы жирные кислоты, терпеноиды, углеводороды, витамин Е, фитол. Установлены отличия между настойками в зависимости от вида коровяка и от состояния сырья (свежее или высушенное).
  7. Показано, что сырье коровяка густоцветкового и коровяка обыкновенного сходно по составу БАВ, следовательно, оно также может быть использовано для изготовления НГМ и других официнальных лекарственных форм.
  8. Установлен срок годности ЛРС коровяка – 3 года, НГМ - 2 года. По результатам исследования подготовлены проекты ФС на ”Коровяка густоцветкового D1 настойку гомеопатическую матричную” и сырье – ”Коровяка густоцветкового траву высушенную”.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

  1. Даргаева Т.Д., Сокольская Т.А., Копытько Я.Ф., Копнин А.А. Биологически активные вещества настойки коровяка густоцветкового гомеопатической матричной //Тезисы докладов X Российского национального конгресса "Человек и лекарство", Москва, 7-11 апреля 2003 г., С. 601.
  2. Копытько Я.Ф., Копнин А.А. Изучение биологически активных веществ настойки коровяка густоцветкового гомеопатической матричной //Сборник научных трудов "Нетрадиционные природные ресурсы, инновационные технологии и продукты" Выпуск 7, Москва, РАЕН, 2003 г., С. 237-238.
  3. Сапронова Н.Н., Копнин А.А. Коровяк //Российские аптеки, приложение к журналу "Ремедиум", № 10, 2003г.
  4. Копнин А.А. Применение коровяка густоцветкового в медицинской практике//Тезисы докладов III Конференции молодых ученых России с международным участием "Фундаментальные науки и прогресс клинической медицины", Москва,20-24 января 2004 г., С. 352.
  5. Копнин А.А. Изучение биологически активных веществ настойки коровяка густоцветкового гомеопатической матричной с помощью физических и физико-химических методов //Тезисы докладов III Конференции молодых ученых России с международным участием "Фундаментальные науки и прогресс клинической медицины", Москва, 20-24 января 2004 г., С.352.
  6. Копнин А.А., Копытько Я.Ф., Сапронова Н.Н., Сокольская Т.А. Изучение анатомического строения сырья коровяка густоцветкового //Сборник научных трудов 59-й региональной конференции по фармации и фармакологии, Пятигорск, 26-29 января, 2004 г., С.
  7. Копнин А.А. Изучение анатомического строения сырья коровяка густоцветкового //Тезисы докладов XI Российского национального конгресса "Человек и лекарство", Москва, 19-23 апреля 2004 г., С. 878.
  8. Копнин А.А., Копытько Я.Ф., Даргаева Т.Д., Сокольская Т.А. Стандартизация настойки коровяка густоцветкового гомеопатической матричной //Тезисы докладов XIV Московской международной гомеопатической конференции, Москва, 23-25 января, 2004 г., С. 82.
  9. Даргаева Т.Д., Сокольская Т.А, Копытько Я.Ф., Копнин А.А. Совершенствование стандартизации настоек гомеопатических матричных //Тезисы докладов XIV Московской международной гомеопатической конференции, Москва, 23-25 января, 2004 г., С. 84.
  10. Сокольская Т.А., Даргаева Т.Д., Копытько Я.Ф., Исаева Н.В., Копнин А.А. Лекарственное растительное сырье и настойки матричные в гомеопатии // Сборник научных трудов международной научной конференции "Генетические ресурсы лекарственных и ароматических растений", посвященной памяти профессора Шретера А.И., Москва, 12-14 июля 2004 г., С. 277-279.
  11. Копнин А.А. Изучение анатомического строения сырья коровяка густоцветкового и стандартизация настоек гомеопатических матричных коровяка //Материалы VIII международного съезда Фитофарм-2004, "Актуальные проблемы создания новых лекарственных препаратов природного происхождения", Финляндия, Миккели, 21-23 июня 2004 г., С. 451-455.
  12. Сокольская Т.А., Даргаева Т.Д., Копытько Я.Ф., Кирьянов А.А., Копнин А.А. Стандартизация настоек гомеопатических, содержащих фенольные соединения //Тезисы докладов VI Симпозиума по фенольным соединениям. Москва, 28-30 апреля 2004 г., с.122.
  13. Копнин А.А., Копытько Я.Ф. Состав липофильной фракции настоек коровяка обыкновенного гомеопатических матричных// Тезисы докладов VI Симпозиума по фенольным соединениям. Москва, 28-30 апреля 2004 г., с.94.
  14. Копнин А.А., Копытько Я.Ф. Фенольные соединения в настойках гомеопатических матричных коровяка (Verbascum)// Тезисы докладов XIII Российского национального конгресса "Человек и лекарство", Москва, 3-7 апреля 2006 г., C. 670.
  15. Копнин А.А. Изучение фенольных соединений коровяка густоцветкового настойки гомеопатической матричной//Тезисы докладов XVI Московской международной гомеопатической конференции, Москва, 27-29 января 2006 г., С. 109.
  16. Копнин А.А., Копытько Я.Ф., Сокольская Т.А. Стандартизация настоек гомеопатических матричных Verbascum densiflorum //Фармация. – 2007.
    Pages:     | 1 |   ...   | 2 | 3 ||






© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»