WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

загрузка...
   Добро пожаловать!

Pages:     | 1 | 2 || 4 |

Качественный состав веществ фенольной природы в НГМ коровяка оценивали методом ТСХ. В НГМ коровяка густоцветкового и обыкновенного обнаружены зоны адсорбции, соответствующие рутину, кверцетину, лютеолину, нарингенину. В НГМ коровяка черного содержание лютеолин-7-гликозида сомнительно, т.к. зона адсорбции этого вещества не обнаруживается в системе растворителей этилацетат - уксусная кислота - вода (5:1:1); а в системе бензол – метанол - уксусная кислота (90:16:8) для НГМ того же вида коровяка – не обнаруживаются зоны адсорбции лютеолина и рутина.

Сравнительный анализ состава флавоноидов в НГМ из свежесобранного и высушенного сырья методом ТСХ подтвердил, что существенных изменений в компонентном составе не наблюдается.

Таблица 5

Состав аминокислот в ЛРС коровяка после кислотного гидролиза, %, в пересчете на абсолютно высушенное сырье

Аминокислота

Коровяк густоцвет.

Коровяк обыкнов.

Коровяк черный

Аспарагиновая кислота

0,0152

0,0459

Треонин

0,0364

0,00770

0,00278

Серин

0,0545

0,0273

0,00338

Глутаминовая кислота

0,436

0,593

Пролин

0,0152

0,0227

0,0108

Глицин

0,0364

0,00685

0,0248

Аланин

0,0667

0,0228

0,0382

Полуцистин

0,00182

0,00327

0,00232

Валин

0,0788

0,0241

0,00691

Метионин

0,0788

0,0139

0,0775

Изолейцин

0,00364

0,00561

0,00294

Лейцин

0,00485

0,00891

0,00198

Тирозин

0,00303

0,00752

0,00250

Фенилаланин

0,00424

0,00824

0,00104

Лизин

0,00424

0,00921

0,00101

Гистидин

0,00242

0,00457

0,00207

Аргинин

0,00303

0,00541

0,0301

Суммарное содержание

0,877%

0,907%

0,227%

Суммарное содержание флавоноидов в НГМ предлагается оценивать методом спектрофотометрии в пересчете на нарингенин после реакции комплексообразования с алюминия хлоридом.

Содержание суммы флавоноидов в пересчете на нарингенин в настойке в процентах (X) вычисляют по формуле:

где:

а – навеска настойки, в граммах;

– показатель удельного поглощения комплекса нарингенина с алюминия хлоридом в максимуме поглощения при 377 нм, равный 70.

Наиболее высокое содержание суммы флавоноидов в пересчете на нарингенин в НГМ коровяка характерно для коровяка густоцветкового (около 0,8% – из свежего сырья и 0,6% – из высушенного сырья). Значения, полученные для НГМ коровяка обыкновенного из свежего и высушенного сырья, сопоставимы с таковыми для НГМ коровяка густоцветкового и составляют около 0,7 %. В НГМ коровяка черного содержание флавоноидов в НГМ немного ниже – около 0,5 – 0,6 %.

Ошибка единичного определения разработанной методики количественного определения суммы флавоноидов в пересчете на нарингенин в НГМ коровяка не превышает 6,01% (табл.6).

Для подтверждения отсутствия систематической ошибки проведены опыты с добавками нарингенина. Ошибка опытов с добавками не превышает ± 1,85 %.

Исследование состава фенольных соединений НГМ коровяка изучаемых видов проводили также методом ВЭЖХ на хроматографе фирмы «GILSON», Франция с последующей компьютерной обработкой результатов исследования с помощью программы «МультиХром» для «Windows».

Таблица 6

Метрологические характеристики метода количественного определения суммы флавоноидов в пересчете на нарингенин в НГМ из высушенного сырья Verbascum

Xср

S2

S

Sx

Px

T(P,f)

X

, %

НГМ коровяка густоцветкового (Verbascum densiflorum Bertol.)

0,661

0,03840

0,1960

0,05908

0,95

2,23

0,03973

6,01

НГМ коровяка обыкновенного (Verbascum thapsus L.)

0,650

0,03411

0,1847

0,05568

0,95

2,23

0,03744

5,76

НГМ коровяка черного (Verbascum nigrum L.)

0,478

0,01916

0,1384

0,04173

0,95

2,23

0,02806

5,87

Исследование состава фенольных соединений НГМ коровяка изучаемых видов проводили также методом ВЭЖХ на хроматографе фирмы «GILSON», Франция с последующей компьютерной обработкой результатов исследования с помощью программы «МультиХром» для «Windows». В качестве неподвижной фазы применяли колонку ALLTIMA C 8 размером 4,6х250 мм, подвижная фаза - метанол – вода - кислота фосфорная концентрированная (40:60:0,5). Детектирование проводилось при длине волны 254 нм.

Подготовка пробы: по 5 мл НГМ коровяка густоцветкового и коровяка обыкновенного помещали в мерные колбы вместимостью 100 мл, прибавляли 50 мл 90 % этилового спирта, перемешивали и доводили 90% спиртом этиловым до метки и фильтровали (исследуемый раствор).

Параллельно готовили серию 0,05 % растворов РСО в 90% спирте этиловом: рутина, кверцетина, лютеолина-7-гликозида, галловой кислоты, коричной кислоты, салициловой кислоты, эллаговой кислоты, танина медицинского, пирогаллола, кемпферола, гесперидина и нарингенина.

По 20 мкл исследуемого раствора и растворов сравнения вводят в хроматограф и хроматографируют. Оценка хроматограммы проводится по временам удерживания и площади пика в автоматическом режиме (табл. 6).

Таким образом, в НГМ коровяка густоцветкового и коровяка обыкновенного идентифицированы флавоноиды – кемпферол, гесперидин и нарингенин.

Таблица 6

Результаты исследования фенольных соединений НГМ

коровяка методом ВЭЖХ

Соединение

Время удержи-вания, сек

НГМ коровяка густоцветкового

НГМ коровяка обыкновенного

Свежее ЛРС

Сухое ЛРС

Свежее ЛРС

Сухое ЛРС

Кемпферол

303

49,70

34,71

21,10

15,79

Галловая кислота

351

6,57

7,89

5,63

9,46

Танин

501

17,55

18,39

5,63

6,87

Нарингенин

712

2,45

1,69

1,47

0,93

Гесперидин

748

11,64

12,75

5,36

4,76

Пирогаллол

820

3,12

2,78

Рутин

887

6,17

3,23

1,64

0,97

Лютеолин-7-гликозид

877

3,82

2,75

1,89

1,12

Эллаговая кислота

1378

6,20

21,72

2,15

6,00

Салициловая кислота

1262

10,20

2,45

5,66

1,12

Кверцетин

2082

0,45

0,28

0,26

0,11

Коричная кислота

1769

0,26

0,08

0,21

0,05

Pages:     | 1 | 2 || 4 |






© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»