WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

загрузка...
   Добро пожаловать!

Pages:     || 2 | 3 | 4 |

На правах рукописи

Копнин Алексей Александрович

СТАНДАРТИЗАЦИЯ КОРОВЯКА (VERBASCUM) И НАСТОЕК ГОМЕОПАТИЧЕСКИХ МАТРИЧНЫХ, ПОЛУЧАЕМЫХ НА ЕГО ОСНОВЕ

15.00.02 – Фармацевтическая химия, фармакогнозия

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени

кандидата фармацевтических наук

Москва-2007 г.

Диссертационная работа выполнена во Всероссийском научно-исследовательском институте лекарственных и ароматических растений (ВИЛАР) РАСХН.

Научный руководитель:

Кандидат фармацевтических наук

Копытько Янина Федоровна

Официальные оппоненты:

Доктор фармацевтических наук

Костенникова Зинаида Петровна

Доктор фармацевтических наук, профессор

Патудин Александр Васильевич

Ведущая организация: Институт стандартизации и контроля лекарственных средств ФГУ «НЦ ЭСМП» Росздравнадзора

Защита диссертации состоится «___» ____________ 2007 г. в 14:00 на заседании Диссертационного Совета Д 006.070.01 во Всероссийском научно-исследовательском институте лекарственных и ароматических растений (ВИЛАР) РАСХН по адресу: 117216, г. Москва, ул. Грина,7.

С диссертацией можно ознакомиться в научной библиотеке ВИЛАР по адресу:117216, г. Москва, ул. Грина, д.7

Автореферат разослан: «___»_________ 2007 г.

Ученый секретарь Диссертационного совета

Д 006.070.01,

доктор фармацевтических наук А.И. Громакова

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Возросший во всем мире интерес к традиционным методам лечения, к которым в России относят и гомеопатию, привел к значительному увеличению доли гомеопатических лекарственных средств (ГомЛС) на фармацевтическом рынке. Количество зарегистрированных ГомЛС в Российской Федерации насчитывает более 600 наименований комплексных и более 1200 однокомпонентных ГомЛС.

В Российской Федерации отсутствует отечественная гомеопатическая фармакопея, наличие которой унифицировало бы требования к качеству ГомЛС, способствовало бы производству безопасных и действенных лекарственных препаратов.

Настойки гомеопатические матричные (НГМ) являются исходными субстанциями для изготовления ГомЛС, но в нашей стране их выпуск не удовлетворяет существующим потребностям, многие производители ГомЛС пользуются импортными субстанциями. Для организации выпуска качественных и безопасных ГомЛС своевременным является углубленное изучение исходного лекарственного растительного сырья (ЛРС). В последние годы большое внимание уделяется фитохимическим и фармакологическим исследованиям тех лекарственных растений, которые применяются как в официнальной, так и в народной медицине.

В связи с этим является актуальным фитохимическое изучение лекарственных растений с целью разработки нормативной документации на них (НД) и создание отечественной Гомеопатической фармакопеи.

Одними из таких растений являются растения рода коровяк (Verbascum), семейства Норичниковые – Scrophulariaceae. В настоящее время в официнальной медицине виды коровяка практически не используются, хотя являются перспективными лекарственными растениями. Кроме того, химический состав травы коровяка как лекарственного растительного сырья изучен недостаточно, методики стандартизации отсутствуют. Поэтому, актуальным является комплексное фитохимическое изучение коровяка с использованием современных физико-химических методов, разработка методик стандартизации и их совершенствование, создание нормативной документации.

Цель и задачи исследования. Целью настоящих исследований является изучение химического состава коровяка густоцветкового, коровяка обыкновенного и коровяка черного и разработка методик их стандартизации.

Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:

  1. Изучить фитохимический состав свежесобранного и высушенного сырья коровяка с использованием физико-химических методов и разработать методики качественного и количественного анализа по БАВ.
  2. Провести исследования химического состава НГМ из свежесобранного и высушенного сырья коровяка. Разработать методики контроля качества НГМ.
  3. Разработать методики установления подлинности гомеопатических разведений коровяка.
  4. Изучить в сравнительном аспекте химический состав НГМ коровяка густоцветкового и коровяка обыкновенного для подтверждения возможности использования в гомеопатической практике.
  5. Оформить проекты Фармакопейных статей на ”Коровяка густоцветкового траву высушенную” и ”Коровяка густоцветкового D1 настойку гомеопатическую матричную”.

Научная новизна. На основании микроскопического анализа сырья видов коровяка, установлены диагностически значимые признаки, характерные для каждого из видов сырья (наличие и особенности строения волосков). Анализируя данные по химическому составу и применению сырья коровяка, теоретически обоснована необходимость разработки методик получения и стандартизации НГМ. Подобраны условия анализа БАВ в сырье и НГМ видов коровяка с помощью физико-химических методов: хроматография в тонком слое сорбента (ТСХ), высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ), хромато-масс-спектрометрия (ГХ-МС), спектрофотометрия в УФ и видимой области спектра и др.

Разработаны методики качественного и количественного определения аминокислот, веществ фенольной природы (флавоноидов и фенолкарбоновых кислот), витаминов, алкалоидов, углеводов в сырье и НГМ видов коровяка.

С помощью разработанных методик в ЛРС качественно и количественно определены флавоноиды, аминокислоты, полисахариды и моносахара, компоненты липофильной фракции. Выявлены различия по составу БАВ в ЛРС в зависимости от вида сырья, а также его состояния (свежесобранное или высушенное). Обнаружено, что в коровяке черном содержится меньшее количество БАВ, чем в 2 других изучаемых видах коровяка. Разработаны методики стандартизации травы коровяка густоцветкового, при этом установлены критерии подлинности и нормы содержания действующих веществ.

Впервые изучен аминокислотный состав сырья и НГМ изучаемых видов коровяка. Найдены и детально описаны анатомо-диагностические признаки, важные при описании и определении подлинности сырья.

С учетом современных требований к НГМ разработаны критерии подлинности и нормы содержания БАВ в НГМ коровяка густоцветкового и коровяка обыкновенного.

Практическая значимость работы. На основании проведенных исследований разработаны:

  • методики установления подлинности ЛРС микроскопическим методом (микропрепараты цветков и листьев видов коровяка);
  • методики качественного и количественного определения флавоноидов, полисахаридов, аминокислот в ЛРС И НГМ коровяка;
  • методика определения содержания суммы флавоноидов в пересчете на нарингенин, включенная в проект ФС «Коровяка густоцветкового траву высушенную»;
  • проект ФС на ”Коровяка густоцветкового траву высушенную”;
  • проект ФС на «Коровяка густоцветкового D1 настойку гомеопатическую матричную» для гомеопатической фармакопеи.

Связь задач и исследования с проблемным планом фармацевтической науки. Диссертационная работа выполнена в соответствии с тематикой и планом научно-исследовательских работ Всероссийского научно-исследовательского института лекарствен-ных и ароматических растений (номер государственной регистрации 01860074455).

Основные положения, выносимые на защиту:

  • Результаты исследований химического состава свежесобранного и высушенного сырья и НГМ, приготовленных из него, в сравнительном аспекте;
  • Результаты разработки методик качественного и количественного анализа действующих веществ в ЛРС и НГМ изучаемых видов коровяка;
  • Разработка проектов фармакопейных статей на ЛРС и НГМ в соответствии с учетом современных требований качества на лекарственные средства.

Публикации. По теме диссертации опубликовано 15 работ.

Во в в е д е н и и раскрыта актуальность темы, определены цель и задачи исследования, сформулирована научная новизна и практическая значимость работы.

В п е р в о й г л а в е на основании литературных данных рассмотрены сведения о ботанико-морфологической характеристике видов коровяка; химическом составе, фармакологической активности и медицинском применении сырья и настоек гомеопатических матричных (НГМ) растений рода коровяк; методах анализа основных действующих веществ и вопросах стандартизации сырья и НГМ коровяка.

В разделе П о я с н е н и е к э к с п е р и м е н т у приводятся объекты исследования – свежесобранное и высушенное ЛРС коровяка густоцветкового (Verbascum densiflorum Bertol.), коровяка обыкновенного (Verbascum thapsus L.) и коровяка черного (Verbascum nigrum L.), заготовленное в 2002 – 2005 гг. в Московской и Рязанской областях, а также НГМ, полученные из этого сырья. Описываются использованные в исследовании методы и приборы, хроматографические системы, сорбенты и реактивы.

В т о р а я г л а в а посвящена товароведческому анализу сырья коровяка, установлению морфолого-диагностических признаков и числовых показателей лекарственного растительного сырья (ЛРС) коровяка. Впервые подробно описаны внешний вид и диагностически значимые микроскопические признаки сырья коровяка.

В т р е т ь е й г л а в е излагаются результаты фитохимического исследования сырья коровяка, приводится разработка и обоснование разработанных методик качественного и количественного определения суммы флавоноидов и углеводов в траве и цветках видов коровяка, а также динамика накопления флавоноидов за один вегетационный период.

В ч е т в е р т о й г л а в е приводятся результаты фитохимического изучения НГМ видов коровяка, краткая технология их получения, разработка и обоснование методик качественного и количественного определения флавоноидов, аминокислот и липофильной фракции.

П я т а я г л а в а посвящена разработке показателей качества и установлению сроков годности ЛРС и НГМ Verbascum densiflorum, методикам идентификации БАВ в гомеопатических разведениях изучаемых настоек.

Объем и структура диссертации. Диссертационная работа изложена на страницах, содержит таблиц, рисунков и состоит из введения, обзора литературы, пяти глав экспериментальной части, библиографии из 177 источников литературы, из которых 123 – на иностранных языках и приложений.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

1. Товароведческий анализ ЛРС коровяка

Микроскопический анализ. Для микроскопического анализа готовили препараты с поверхности листьев, венчиков, чашелистиков коровяка (ГФ XI изд.).

Для венчика коровяка характерны следующие диагностические признаки: звездчатые многоклеточные волоски на многоклеточной ножке (впервые данный тип волосков упомянут в Государственной Фармакопее VIII издания, а нами описан более подробно); волоски на коротких тычинках булавовидно вздутые, головчатые волоски по краю венчика, а также по жилке венчика встречаются сосочковидные выросты.

При изучении поверхности травы коровяка найден аномоцитный устьичный комплекс, многоклеточные звездчатые волоски на одно- и многоклеточной ножке, маловетвистые и головчатые волоски.

Микроскопический анализ и диагностические признаки идентичны для ЛРС коровяка густоцветкового и коровяка обыкновенного. Микроскопические признаки для сырья коровяка черного совпадают с таковыми для сырья других изучаемых видов коровяка. Все вышеописанные микроскопические признаки цветков и травы коровяка подтверждены фотографическими снимками и включены в разработанную фармакопейную статью ”Коровяка густоцветкового трава высушенная”.

Проведено сравнительное изучение числовых показателей (влажность, зола, содержание экстрактивных веществ и допустимых примесей) для ЛРС коровяка изучаемых видов.

2. Фитохимическое изучение ЛРС коровяка

Для ЛРС коровяка разработаны критерии подлинности, включающие качественные реакции на фенольные вещества, сапонины, гликозиды, углеводы и тонкослойную хроматографию.

В спиртовых извлечениях из ЛРС коровяка густоцветкового и обыкновенного обнаружены зоны адсорбции, соответствующие рутину, кверцетину, лютеолину, нарингенину. Сравнительный анализ состава флавоноидов в свежесобранном и высушенном сырье методом ТСХ показал, что существенных изменений в компонентном составе не отмечено.

Углеводы (поли - и моносахара) извлекали из сырья водой. Обнаружение зон адсорбции углеводов осуществляли дифениламино-анилин-фосфорно-кислотным реактивом. Выявлено, что ЛРС коровяка густоцветкового отличается более разнообразным составом углеводов, что выражается в большем количестве их зон адсорбции на хроматограммах по сравнению с двумя другими изучаемыми видами (табл. 1). После гидролиза на хроматограммах обнаружено большее количество глюкозы, галактозы и фруктозы, чем до гидролиза, что, возможно, связано с гидролитическим расщеплением сахарозы и других дисахаридов. По сравнению с литературными данными, нами найдено, что коровяк густоцветковый и коровяк черный накапливают арабинозу и мальтозу, тогда как в коровяке обыкновенном этих углеводов в свободном виде не обнаружено.

Для количественной оценки БАВ в ЛРС коровяка разработаны методики количественного определения. Сырье предложено характеризовать по содержанию суммы флавоноидов и углеводов. При разработке методики количественного определения флавоноидов методом спектрофотометрии при выборе рабочего стандартного образца апробировались рутин, лютеолин-7-гликозид, кверцетин, нарингенин после проведения реакции комплексообразования с алюминия хлоридом (рис. 1). В качестве стандарта выбран раствор РСО нарингенина, максимум поглощения спектра комплекса которого с алюминия хлоридом совпадает с таковым извлечения из травы коровяка.

Таблица 1

Качественный состав углеводов в траве изучаемых видов коровяка

сахар

Содержание свободных сахаров

Pages:     || 2 | 3 | 4 |






© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»