WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

загрузка...
   Добро пожаловать!

Pages:     | 1 |   ...   | 3 | 4 || 6 | 7 |   ...   | 9 |

На ультрамикроскопическом уровне в фолликулярных эпителиоцитах на всех сроках эксперимента ядра были представлены преимущественно эухроматином с большим количеством ядрышек, матрикс митохондрий имел высокую электронную плотность. Внутриклеточные органеллы имели признаки пониженной секреторной функции. При морфометрии выявлялось незначительное уменьшения фактора формы, увеличение яркости эухроматина по отношению к гетерохроматину (в 1,37 раза по сравнению с интактной группой) и цитоплазме (в 1,1 раза), P<0,05. Увеличение объемной плотности митохондрий и их яркости по отношению к цитоплазме было максимальным на 60-е сут ЭТ и превышало таковой показатель в группе контрольных животных в 1,17 и в 1,63 раза, соответственно. Уменьшение ОД везикул по сравнению с контрольной группой (в 1,87 раза к 90-м сут) свидетельствовало о снижение секреторной активности.

Изменения гормонов гонадной оси у самок с хроническим ЭТ с преимущественным поражением печени были более выраженными, чем у животных с ЭТ с преимущественным поражением почек. Так, уровень ЛГ на 30-е сут эксперимента увеличился в 2,3 и в 1,6 раза, к окончанию эксперимента (90-е сут) – в 2,5 и в 1,9 раза соответственно. Уровень пролактина на 90-е сут ЭТ превышал интактный в 2,1 раза у самок с преимущественным поражением печени, и в 1,7 раза – у животных с преимущественным поражением почек. Содержание эстрадиола и прогестерона достоверно снижалось в обеих экспериментальных группах (рис. 5).

Рис. 5. Гормоны гонадной оси в сыворотке крови крыс-самок при хроническом ЭТ. За единицу принято значение показателя в интактной группе животных.

При хроническом ЭТ происходила реверсия взаимозависимости гипофизарных гормонов. К 90-м сут ЭТ изначально сильная положительная связь ФСГ – ЛГ трансформировалась в сильную связь, противоположную по знаку (r = -0,93), в то время как исходно отрицательная средняя по силе корреляция между ЛГ и пролактином к окончанию эксперимента становилась сильной положительной (r = 0,75). Часть связей, существовавших в гонадной оси крыс контрольной группы, при развитии хронического ЭТ утрачивалась (ФСГ – эстрадиол и ЛГ – эстрадиол). В других случаях произошло усиление ранее малозначимых связей (ФСГ – прогестерон, ЛГ – прогестерон). К 90-м сут были нарушены как вертикальные, так и горизонтальные связи, что свидетельствовало о существенных нарушениях, происходящих в гонадной оси крыс-самок при хроническом ЭТ.

Замещение стромой фолликулярных эндокриноцитов в яичнике при ЭТ, на наш взгляд, представляет собой результат патологического ремоделирования фолликула, происходящего на фоне дисбаланса половых гормонов, а морфологические изменения в яичниках, в свою очередь, являются субстратом усугубления гормонального дисбаланса. Зарегистрированная нами пролактинемия, обнаруживаемая и доминирующая на всех сроках эндогенной интоксикации согласуется с литературными данными, согласно которым введение бактериального ЛПС увеличивает продукцию и выброс пролактина [Besnard N. et al., 2001; De Laurentiis A. с соавт., 2002].

Морфолические изменения инсулярного аппарата и дисбаланс инсулина у крыс при хроническом эндотоксикозе.

В островках поджелудочной железы на 30-е сут ЭТ выявлялся отёк междольковых перегородок с умеренной лимфоцитарной инфильтрацией и очаговыми кровоизлияниями в жировой клетчатке по периферии органа. К 60-м сут в паренхиме железы отмечались участки с выраженным явлением перидуктального и периацинарного склероза. В этих зонах выявлялась пролиферация эпителия выводных протоков и формирование мелких протоков. Отдельные островки были полностью склерозированы. Для других островков было характерно выраженное полнокровие капилляров, в большинстве эндокриноцитов определялась гиперхромия ядер. Эти изменения становились более интенсивными к 90-м сут хронического ЭТ. При морфометрии установлено достоверное уменьшение ОД островков Лангерганса, (на 90-е сут ЭТ - в 1,65 раза по сравнению с показателями в контрольной группе, P<0,05). Соответственно, ОД инсулоцитов в островках снижалась на протяжении всего эксперимента, и к 90-м сут ЭТ была в 1,52 раза меньше, чем у крыс контрольной группы (P<0,05).

Экспрессия NOS-3 в сосудах панкреатических островков увеличивалась с 3% до 23% к 90-м сут хронического ЭТ, иммунопозитивные эндотелиоциты локализовались преимущественно в капиллярах по периферии островков. При изучении экспрессии TRAIL на ранних сроках эксперимента определялось окрашивание единичных эндокриноцитов и ацинарных клеток (4%), к 90-м сут ЭТ иммунопозитивных инсулоцитов было значительно больше (29%), они располагались диффузно на территории островка. На 30-е сут хронического ЭТ единичные каспазо-позитивные клетки выявлялись на границе с ацинарной тканью, по мере увеличения сроков эксперимента появлялись все более многочисленные клетки с экспрессией каспазы-3 на периферии островков.

При ультрамикроскопии островков Лангенгарса на 30-е сут ЭТ отмечено увеличение количества секреторных везикул в -клетках при незначительном уменьшении количества везикул в -клетках. В дальнейшем в большинстве -клеток выявлялось большое количество секреторных везикул, а количество -клеток продолжало снижаться, в них все чаще обнаруживались признаки пониженной секреторной активности: полиморфизм гранул и появление более крупных везикул. При морфометрии к 30-м сут выявлялись увеличение фактора формы кариолеммы и количества эухроматина в ядре, расцененные как признаки активации ядерного аппарата. Уменьшение ОД митохондрий (в 1,26 раза по сравнению с показателями в контрольной группе) на фоне увеличения их яркости (в 1,1 раза). К 60-м сут ОД митохондрий несколько увеличивалась, а относительная яркость их матрикса оставалась практически на том же уровне, что свидетельствовало о напряженности энергетических процессов в клетке. Секреторная активность -клеток увеличилась, о чем можно судить по достоверному приросту ОД везикул (в 1,53 раза, P<0,05). К окончанию эксперимента (90-е сут) зарегистрировано уменьшение фактора формы, яркости активного хроматина, ОД митохондрий, их относительной яркости и ОД секретируемых везикул. Все это в совокупности расценено как признаки снижения секреторной активности -клеток.

Уровень инсулина при хроническом ЭТ на 30-е и 60-е сут в обеих моделях определялся в пределах 15-20% выше показателей контрольной группы, а к 90-м сут процесса значительно снижался, достигая лишь 2/3 от значений в контроле (P<0,05). У животных контрольной группы имелась сильная обратная корреляционная связь между содержанием АКТГ и инсулина в крови (r = -0,87). На 30-е сут эксперимента происходило ослабление зависимости (r = - 0,51), а к окончанию эксперимента обнаружена уже умеренная положительная связь (r = 0,63).

Таким образом, исследование структурно-функциональных изменений эндокриноцитов поджелудочной железы при действии ЭТС, показало, что процессы повреждения и деструкции носили мозаичный характер и сочетались с процессами регенерации. Отчетливо выраженные изменения в эндокриноцитах сопровождались перестройкой ультрамикроскопического строения -эндокриноцитов и снижением секреции инсулина. Гипоинсулинемия при SIRS и хронических токсических состояних ранее описывалась [Гельфанд Б.Р. с соавт., 2006; Federici M.et al., 2001; Nedungadi T.P. et al., 2006], но нами детализированы отдельные механизмы ее формирования при хроническом ЭТ в составе общей гормональной дизрегуляции.

Математический анализ и моделирование эндокринной дизрегуляции при хроническом эндотоксикозе.

Доказательство участия эндокринной дизрегуляции в пато- и морфогенезе хронического ЭТ было проведено с системных позиций при использовании математического моделирования с использованием корреляционного анализа и построения регрессионных уравнений. В результате корреляционного анализа между гормонами периферической крови, входящих в состав основных гормональных осей, и биохимическими маркерами эндогенной интоксикации выявлено значительное количество сильных и умеренных математических связей (рис. 6).

Рис. 6. Корреляционные связи между маркерами эндогенной интоксикации и профилем гормонов в крови у крыс контрольной группы и при хроническом ЭТ.

У животных контрольной группы гормоны тиреоидной оси не имели значимых корреляционных связей с маркерами эндогенной интоксикации. Для адреналовой оси установлено наличие сильных обратных связей кортизола с ВСММ (-0,85) и МДА (-0,79). Среди гормонов гонадной оси наиболее сильные корреляционные связи обнаружены между ЛГ и олигопептидами (0,77) – у самцов, эстрадиолом и ВСММ (0,84) – у самок.

На 30-е сут ЭТ произошло формирование сильных корреляционных связей между гормонами адреналовой оси и маркерами эндогенной интоксикации. На этом же сроке обнаружены значимые корреляции между гормонами тиреоидной оси: ТТГ, Т3, Т4. Гормоны гонадной оси имели сильные корреляционные связи с ВСММ, олигопептидами и МДА (r в пределах 0,78-0,98 по модулю). В динамике хронического ЭТ часть связей ослабло, однако основные гормоны осей сохраняли сильные связи с одним и более маркером эндогенной интоксикации. На 90-е сут сохранялась общая тенденция в образовании умеренных и сильных корреляционных зависимостей между гормонами эндокринных осей и маркерами эндогенной интоксикации.

Отдельные закономерности выявлены в корреляциях между уровнями гормонов и показателями повреждения печени и почек.

Установлено увеличение числа и усиление ранее существовавших корреляционных связей между гормонами тиреоидной оси и морфометрическими показателями печени и почек по мере увеличения срока эксперимента. Наиболее значимые корреляции: Т4 – ОД соединительной ткани печени (0,86), Т4 – ОД гепатоцитов (-0,84); Т4 – ОД интерстициальной ткани почек (0,88), Т4 – количество склерозированных клубочков (0,95).

Корреляционный анализ между содержанием половых гормонов у самцов и тяжестью ЭТ выявил рост количества и силы связей в ряду: ЛГ – ФСГ – тестостерон – пролактин по мере увеличения сроков ЭТ.

У самок при изучении корреляций между гормонами гонадной оси и морфометрическими показателями печени и почек наиболее сильные связи обнаружены у эстрадиола с ОД гепатоцитов (0,85), ОД соединительной ткани печени (-0,82) и количеством склерозированных почечных клубочков (-0,87).

Аналогичные многочисленные корреляционные связи, имеющие логическое обоснование, были обнаружены при попарном сопоставлении между группами количественных показателей, описывающих изменения в эндокринных органах, гормональном профиле и маркеров ЭТ.

В итоге, корреляционный анализ морфометрических показателей позволил нам на математическом уровне доказать участие различных элементов эндокринной системы в пато- и морфогенезе повреждения печени и почек при хроническом ЭТ (рис. 7).

1,2

- повреждающие влияния - компенсаторные влияния

Рис. 7. Обобщенные представления о влиянии различных структур эндокринной системы на развитие морфофункциональных изменений в печени и почках при хроническом ЭТ.

Одной из задач выполняемого статистического анализа является вычисление величин параметров, прижизненное измерение которых чрезвычайно инвазивно или практически невозможно, но сведения о которых диагностически значимы и весьма информативны. В то же время существуют показатели, с помощью которых оценивается тяжесть хронического ЭТ (биохимические маркеры эндогенной интоксикации) и/или наличие эндокринного дисбаланса (гормональный профиль). Они характеризуются малой инвазивностью при получении, точностью определения, технической простотой и экономической доступностью. Именно эти параметры были использованы для нахождения искомых морфометрических показателей.

Из всей генеральной совокупности в качестве искомых параметров нами отобраны морфометрические показатели эндокринных органов, которые формируют основные гормональные оси, вовлекаемые в патологический процесс при хроническом ЭТ.

После математических преобразований с пересчетом параметров в относительных единицах (Х) и учетом данных корреляционного анализа, в частности, для расчета ОД ацидофилов гипофиза было получено:

Для расчетного определения морфометрических показателей пучковой зоны коркового вещества надпочечников оказалось возможным построить следующую систему уравнений:

1)

2)

3)

4)

Для расчета функциональной активности щитовидной железы достаточно измерить параметры Т3своб., Т3общ., ВСММ, Ацилаза почек, МДА, Олигопептиды, Ацилаза почек и решить систему уравнений:

1)

2)

3)

Итак, разработана математическая модель, позволяющая с высокой долей вероятности прогнозитровать структурные изменения, возникающие в органах эндокринной системы при хроническом ЭТ.

Формировние концепции гормональной дизрегуляции как компонента хронического эндотоксикоза.

Итак, нами установлено, что длительная эндогенная интоксикация приводит к развитию гормональной дизрегуляции, которая характеризуется изменениями уровня гормонов в периферической крови и разобщением внутриосевых горизонтальных и вертикальных связей. С морфологических позиций, необходимо подчеркнуть стереотипность событий, происходящих в органах эндокринной системы. Они могут быть описаны на 30-е сут как преобладание явлений раздражения и стимуляции при крайнем истощении отдельных эндокриноцитов и дистрофии клеток с сохранением общей структуры желез. Дальнейшее повреждение реализуется в зональную атрофию эндокриноцитов. К 90-м сут атрофические процессы в эндокриноцитах и их нарастающий численный дефицит в результате апоптической гибели играют ключевую роль в формировании эндокринопатий при хроническом ЭТ. В то же время на самых поздних стадиях ЭТ присутствуют эндокриноциты в состоянии гиперстимуляции и гиперфункции.

Сопоставление гистологического, морфометрического и ультраструктурного исследований фолликулярных эндокриноцитов при хроническом ЭТ свидетельствовали о наличии нарушения секреции, и мозаичности повреждения, что проявлялось чередованием участков с повышенной функциональной активностью и фрагментов с явлениями истощения.

Pages:     | 1 |   ...   | 3 | 4 || 6 | 7 |   ...   | 9 |






© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»