WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

загрузка...
   Добро пожаловать!

Pages:     | 1 |   ...   | 2 | 3 || 5 | 6 |   ...   | 9 |

В ходе корреляционного анализа установлено, что у интактных животных уровень кортизола находился в сильной корреляционной зависимости от уровня АКТГ (R=0,89), на 30-е сут хронического ЭТ связь между гормонами ослабевала (R=0,69), а к 90-м сут можно было говорить о полном разобщении связи между гормонами (R=0,15).

Среди всех эндокринных осей, адреналовая изучена при хронических воздействиях в связи с классической концепцией стресса и выделением стессорной составляющей этих процессов [Бажанова Е.Д., Теплый Д.Л., 2004; Данилов Г.Е. с соавт., 2004; Бобынцев И. И., с соавт., 2007; Кузнецов С.Л. с соавт., 2008; Dallman M.F. et al., 2004; McCormick C.M. et al. 2007; Ulrich-Lai Y.M. et al., 2007]. Полученные собственные данные детализируют механизмы формирования и субстрат гормональной дизрегуляции адреналовой оси при развитии хронического ЭТ.

Морфологические изменения щитовидной железы и дисбаланс гормонов тиреоидной оси у крыс при хроническом эндотоксикозе.

В щитовидной железе выявлялось мозаичное нарушение гистоархитектоники органа. По мере увеличения длительности ЭТ структурные преобразования в ЩЖ характеризовались фазовыми изменениями и не имели принципиальных особенностей в различных моделях. На ранних сроках хронического ЭТ железа сохраняла нормопластический тип строения и характеризовалась снижением количества фолликулярных тироцитов, развитием вакуольной дистрофии и десквамацией отдельных клеток в просвет фолликула. По мере увеличения сроков ЭТ происходило ремоделирование ткани щитовидной железы по макрофолликулярному типу с образованием малочисленных гнездных очагов с микрофолликулярной трансформацией и стромальным замещением объема утраченной паренхимы.

Количественные показатели подтверждали и детализировали описанные качественные изменения (табл. 4).

Для определения функциональной активности эндокриноцитов ЩЖ был использован оригинальный метод радиальной морфометрии [Калашникова С.А. с соавт., 2007]. У крыс контрольной группы в железе преобладали клетки, находящиеся в состоянии физиологической секреции (II тип).

Таблица 4

Морфометрические показатели ЩЖ у крыс при хроническом ЭТ

(модель с преимущественным поражением печени, M±m)

Показатели

Интактные животные

Сроки эксперимента

30 сут

60 сут

90 сут

Средний наружный диаметр фолликула, мкм

Высота фолликулярного эпителия, мкм

ОД коллоида, %

ОД фолликулярного

эпителия, %

ОД интерфолликулярного эпителия, %

ОД стромы, %

ОД сосудистого русла, %

125,4±11,7

31,0±9,1

18,7±0,4

74,9±3,1

3,9±0,1

1,1±0,1

1,3±0,1

118,9±27,6

25,1±5,7*

17,9±0,9

72,4±9,1

4,5±0,1

2,4±0,1

2,9±0,1

115,1±27,8*

29,8±18,3*

19,9±1,2

50,2±7,4*#

4,3±0,1

16,0±1,1*#

9,5±0,9*#

91,3±5,2*#

16,5±2,5*#

10,5±0,9*#

60,9±2,3*

5,2±0,9*

18,5±1,9*#

14,9±1,2*#

Клетки с гипосекрецией (I типа) составляли всего 1,0%. При хроническом ЭТ в обеих моделях достоверно нарастало число эндокриноцитов с повышенной секрецией (III тип, P<0,05). К 90-м сут хронической эндогенной интоксикации количество клеток с гиперсекреторной активностью уменьшалось, одновременно нарастало до 12,5% число клеток в состоянии повреждения и функционального истощения (IV тип, P<0,01).

Иммуногистохимичексое исследование выявило увеличение процентаэндотелиальных клеток, гиперэкспрессирующих нитроксидсинтазу в ЩЖ крыс при хроническом ЭТ с преимущественным поражением печени в 5,1 раза к 90-м сут эксперимента, в модели с преимущественным поражением почек - в 3,7 раза. На 30-е сут эксперимента наблюдалось 5-кратное увеличение частоты экспрессии TRAIL, а к окончанию эксперимента (90-е сут) иммунопозитивные клетки располагались сплошным тонким слоем по периметру фолликула с преимущественной локализацией лиганда на апикальной поверхности тироцитов. Параллельно выявлено увеличение экспрессии каспазы-3: на 30-е сут хронического ЭТ иммунопозитивными оказывались до 80% тироцитов. На 60-е сут апикальная часть фолликулярных клеток давала иммунопозитивное окрашивание в виде маргинальной полоски по всему периметру фолликула. К 90-м сут до 15% эндокриноцитов были резко иммунопозитивными, уменьшены в размерах, с пикнотичным ядром.

При ультрамикроскопическом исследовании фолликулярных эндокриноцитов максимальные изменения были зарегистрированы в ЭПР, тотальное расширение цистерн, деформация и уменьшение электронной плотности которого свидетельствовало о повреждении синтетического аппарата эндокриноцитов под действием эндогенных токсических соединений. По-видимому, выявленные нарушения возникают не на уровне начального синтеза тиреоглобулина, а в процессе его транспортировки в аппарат Гольджи и непосредственно в нем, при формировании конечного тиреоглобулина [Юкина Г.Ю. с соавт., 2004].

Достоверно увеличение фактора формы кариолеммы регистрировалось, начиная с 60-х сут ЭТ, уменьшение эффективного объема ядра реализовалось за счет многочисленных инвагинаций кариолеммы. Отношение яркостей эу- и гетерохроматина по мере увеличения срока эксперимента снижалось практически линейно в 1,7 раза к 90-м сут (P<0,01). Аналогичная тенденция выявлена при изучении отношения яркостей эухроматина и матрикса цитоплазмы в системе RGB. ОД митохондрий после небольшого увеличения к 60-м сут эксперимента (в 1,17 раз больше, чем в контрольной группе, P<0,05), снижалась, и к 90-м сут была несколько ниже, чем в контрольной группе. Аналогичной была динамика отношения яркостей митохондрий и цитоплазмы, что косвенно отражало истощение их функции к 90-м сут ЭТ. Данное утверждение подтверждалось увеличением, а затем уменьшением ОД везикул в динамике эксперимента.

Таким образом, сопоставление структурных изменений на различных уровнях при хроническом ЭТ свидетельствовало о значительной тканевой перестройке в ЩЖ и наличии морфологического субстрата гормональной дисфункции фолликулярных эндокриноцитов.

При хроническом ЭТ выявлены существенные изменения профиля гормонов тиреоидной оси в сравнении с животными контрольной группы (рис. 3).

Рис. 3. Гормоны тиреоидной оси в сыворотке крови крыс при хроническом ЭТ. За единицу принято значение показателя в интактной группе животных.

По мере нарастания сроков эксперимента у крыс зарегистрировано незначительное снижение ТТГ, уровень которого к 90-м сут эксперимента снизился в 1,6 раза (P<0,05). Уровень трийодтиронина менялся незначительно: повышался к 60-м сут в 1,2 раза, и снижался в 1,3 раза на 90-е сут экспериментального ЭТ. Максимальный подъем Т4. был зарегистрирован на 30-е сут ЭТ, когда его общее содержание повышалось в 2,5 раза. В дальнейшем уровень тироксина снижался, но и на 90-е сут его количество по-прежнему превышало аналогичные значения в контроле в 1,4 раза (P<0,05). Содержание тиреоглобулина к 30-м сут хронического ЭТ было в 4,0 раза ниже, чем в контрольной группе, на 90-е сут - в 2,7 раза (оба P<0,001).

При корреляционном анализе установлено усиление связи между ТТГ и периферическими тиреоидными гормонами на 30-е сут опыта. Наиболее сильными были взаимосвязи ТТГ с общим трийиодтиронином и общим тироксином (R=0,81 и R=0,99, соответственно). К 90-м сут эксперимента связь ТТГ – Т3 отсутствовала, а с Т4 и его свободной фракцией была сильной и отрицательной. Таким образом, происходящие в ходе хронического ЭТ изменения, затрагивали как вертикальные, так и горизонтальные связи.

Полученные нами данные не противоречат имеющимся в литературе сведениям о характере структурно-функциональных преобразований фолликулярного эпителия ЩЖ при хроническом воздействие токсических агентов [Хмельницкий О.К. с соавт., 2000; Раскоша О.В., Ермакова О.В., 2006; Лунькова Л.К. с соавт., 2007]. В то же время, сопоставление отдельных механизмов (ФНО-зависимого апоптоза, эндотелиальной дисфункции и связанного с ней стромального замещения утраченных паренхиматозных элементов, появление автономно секретирующих эндокриноцитов) раскрывает ряд новых моментов в развитии тиреоидного дисбаланса при хроническом ЭТ.

Морфологические изменения семенников и дисбаланс гормонов гонадной оси у крыс-самцов при хроническом эндотоксикозе.

На 30-е сут хронического ЭТ выявлены незначительные морфологические изменения инкреторного аппарата мужских половых желез. Отмечено увеличение клеток объема интерстициальной ткани в межканальцевых пространствах за счет гиперплазии гландулоцитов и относительное количество клеток Лейдига, приходящихся на один семенной канатик. ОД интерстициального эпителия увеличивалась в течение всего эксперимента, к 90-м сут хронического ЭТ превышая значения в контрольной группе в 1,2 раза.

Наибольшие изменения при хроническом ЭТ, независимо от модели, касались нарушения сперматогенеза. В динамике эксперимента выявлялось все большее число канальцев, не содержавших зрелых сперматозоидов, к 90-м сут ЭТ появлялись канальцы со слущенным эпителием, уменьшалось количество светлых (делящихся) сперматогоний, часть сперматоцитов имели пикнотические ядра. Индекс сперматогенеза снижался в 1,72 раза по сравнению с контрольными показателями (P<0,01).

Таким образом, основными изменениями в семенниках крыс при хроническом ЭТ, являлись уменьшение делящихся сперматогоний и зрелых сперматозоидов при сохранении сперматогенного эпителия и гландулоцитов. По-видимому, местные факторы регуляции обеспечивают защиту и обусловливают относительно меньшее повреждение семенников эндогенными токсическими соединениями, по сравнению с другими органами эндокринной системы.

Данные, полученные при изучении половых гормонов в сыворотке крови самцов, свидетельствовали о вовлеченности гонадной оси в общий пейзаж нарушений гормонального профиля при хроническом ЭТ (рис. 4).

Рис. 4. Гормоны гонадной оси в сыворотке крови крыс-самцов при хроническом ЭТ. За единицу принято значение показателя в контрольной группе животных.

На 30-е сут ЭТ уровень ФСГ увеличился в 2,7 раза, ЛГ – в 2,3 раза, а пролактина – в 2,2 раза (P<0,05), эти изменения сохранялось или несколько нарастали (ФСГ) в дальнейшем. Содержание тестостерона в сыворотке крови самцов уменьшалось, более интенсивно – в модели с преимущественным поражением печени: в 5,9 раз, по сравнению с контрольной группой (P<0,001). Уровень тестостерона в крови интактных крыс имел умеренную отрицательную связь с ФСГ (r=-0,95), в то время как между ЛГ и пролактином связь была слабой. На 30-е сут хронического ЭТ произошло резкое усиление связей со всеми гипофизарными гормонами, которые несколько ослабевали на 60-е сут патологического процесса. К 90-м сут ЭТ были сформированы сильная отрицательная связь ФСГ-тестостерон (r=-0,98) и сильная положительная связь ЛГ-тестостерон (R=0,97).

Исследования морфологии семенников, мужской гонадной оси и сперматогенеза при хроническом стрессе и интоксикациях являются единичными [Галимов Ш.Н. с соавт., 1999; Hadid R. et al., 1995; Papadopoulos A.D., Wardlaw S.L., 2000]. В рамках рассматриваемой концепции мы пришли к выводу о максимально высокой чувствительности рассматриваемых эндокринных органов к действию эндогенных токсичексих соединений.

Морфологические изменения яичников и дисбаланс гормонов гонадной оси у крыс-самцов при хроническом эндотоксикозе.

На ранних сроках ЭТ (30-е сут) структурные преобразования в ткани яичника у крыс характеризовались незначительной гиперемией и отдельными периваскулярными кровоизлияниями в корковое вещество яичника. В дальнейшем по мере нарастания сроков ЭТ уменьшалось число примордиальных, первичных, вторичных фолликулов. Третичные фолликулы не обнаруживались. Выявлялось значительное количество кистозно-атрезирую-щихся фолликулов и активное разрастание паренхиматозных элементов, представленных эпителиальными и соединительнотканными (текальными) элементами. Обращали на себя внимание уплощенные клетки внутреннего слоя гранулезы со скудным содержанием эозинофильной цитоплазмы.

При иммуногистохимическом исследовании в эндотелии сосудов яичника в динамике ЭТ выявлялся прирост экспрессии нитроксидсинтазы. Участки микроциркуляторного русла, содержащие большое количество эндотелиоцитов, гиперэкспрессирующих NOS-3, располагались очагами, преимущественно на удалении от примордиальных и первичных фолликулов. Количество иммунопозитивных клеток к TRAIL неуклонно возрастало к 90-м сут эксперимента, охватывающего не только клетки гранулезы, а в отдельных случаях - теку коркового вещества и паренхиму яичника. При этом распределение иммунопозитивных клеток к каспазе-3 было неравномерным. Как известно, на протяжении эстрального цикла гибель клеток путем апоптоза и их регенерация происходят в строго регулируемой последовательности и зависят от стадии цикла. Подавляющее большинство фолликулов в яичнике подвергаются атрезии посредством ФНО-зависимого апоптоза, который происходит в основном в клетках гранулезы [Кузнецова И.В., Коновалова В.Н., 2004; Van Delft M.F., Huang D.C., 2006].

Pages:     | 1 |   ...   | 2 | 3 || 5 | 6 |   ...   | 9 |






© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»