WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

загрузка...
   Добро пожаловать!

Pages:     | 1 || 3 |

4. Образцы пятен крови 5 пациентов с адреногенитальным синдромом и членов их семей направлялись для проведения молекулярно-генетического обследования в генетическую лабораторию ФГУ «Эндокринологический научный центр Росмедтехнологий» г. Москва.

5. Статистическая обработка материала. Полученные данные исследований были подвергнуты статистической обработке на IBM Pentium с использованием пакета прикладных программ STATISTICA 6.0 и программ статистического анализа Microsoft Exel, версия 2003 года. Оценка соответствия изучаемого распределения 17ОНР закону нормального распределения проводилась по критерию нормальности Колмогорова-Смирнова.

Для анализа структуры выборки гормонов с неправильным ассиметричным распределением был применен центильный метод. Использовался критерий Манна – Уитни (показатель Т) для сравнения двух независимых выборок; тест Крускела – Уолиса (критерий Н) использовался для сравнения более двух независимых выборок.

В целях изучения взаимосвязи исследуемых признаков проведен анализ корреляции. Поскольку распределение изучаемых признаков не было нормальным, для исследования связи двух количественных признаков применялся метод непараметрического корреляционного анализа по Спирмену (); для исследования связи порядкового и количественного признаков применялся метод непараметрического корреляционного анализа по Кендаллу ().

Для сравнения относительных частот признака в двух группах использовался двусторонний критерий статистической значимости различий между двумя пропорциями.

Критический уровень значимости при проверке статистических гипотез принимался равным 0,05.

Результаты собственных исследования и их обсуждение

В Архангельской области в периоде новорожденности диагноз классической формы адреногенитального синдрома был установлен у 5 детей за 26 месяцев скрининга. Частота встречаемости АГС в нашем регионе за данный период составила 1: 5 934. Распространенность данной формы составила 7,2 случая на 100 000 детского населения.

До начала скрининга на АГС с 1986 года в ГУЗ АОДКБ данный диагноз был установлен клинически по обращаемости у 16 детей, из них мальчики составили 7 человек (43,7 %), девочки 9 человек (56,3 %). Структура по форме заболевания была представлена следующим образом: вирильная форма - 8 детей (50%), сольтеряющая форма – 8 детей (50%). До начала проведения скрининга медиана возраста постановки диагноза в группе девочек с сольтеряющей формой заболевания составила 14 дней (от 1 до 82 дней), в группе мальчиков с сольтеряющей формой – 30 дней (от 13 до 99 дней). Медиана возраста постановки диагноза в группе девочек с вирильной формой заболевания составила 10,2 месяца (от 18 дней до 9 лет), в группе мальчиков с вирильной формой – 4 года (от 1 месяца до 6 лет). Всего за 20 лет до начала скрининга было рождено 331 712 детей, частота АГС составила в среднем 1: 20 732.

С началом проведения скрининга структура АГС изменилась следующим образом: простая вирильная форма выявлена у 2 детей (40%), сольтеряющая форма – у 3 новорожденных (60%). При распределении детей по полу в период до скрининга соотношение мальчики: девочки составляло 1: 1,3; по результатам скрининга соответственно – 4: 1.

Всем детям в Архангельской области с установленным при проведении скрининга диагнозом АГС было проведено молекулярно-генетическое исследование для выявления мутаций в гене CYP 21. Выявлены следующие изменения: у детей с сольтеряющей формой в гомозиготном состоянии del 8 пар нуклеотидов в 3 экзоне (2 ребенка) и I2Spl (1 ребенок); у одного ребенка с вирильной формой компаунд P30L/30kbdel. Тяжесть клинических проявлений соответствовала установленным мутациям, характер которых определял различную степень снижения активности 21-гидроксилазы. У второго ребенка с вирильной формой не выявлена ни одна из 16 определяемых мутаций.

При проведении центильного анализа данных 17ОНР установлено, что у новорожденных детей в Архангельской области 50% значений располагаются в интервале от 4,5 до 9,5 нмоль/л, медиана составила 6,58 нмоль/л, а значение 99 перцентиля во всей популяции не превышает установленной лабораторной нормы. Исследования данных 17ОНР в популяции новорожденных Тюменской области показали, что 50 % значений располагаются в интервале от 6,21 до 13,9 нмоль/л, в популяции доношенных новорожденных Краснодарском крае – от 5,7 до 19,7 нмоль/л. В нашем исследовании значения 17ОНР имеют более низкие уровни по сравнению с данными выше указанных исследований.

Нами были определены центильные значения 17ОНР во всей популяции (n=14163) в зависимости от срока гестации у новорожденных детей Архангельской области, результаты представлены в таблице 1.

Таблица 1

Центильные значения 17ОНР (нмоль/л) в зависимости от срока гестации у новорожденных детей Архангельской области

Срок гестации (неделя)

Число детей

17ОНР нмоль\л

Р 10

Р 25

Р 50

Р 75

Р 99

25-28

49

8,24

17,13

26,76

45,81

312,39

29-30

32

7,62

9,01

18,65

31,44

189,47

31-32

97

6,43

9,25

13,52

25,33

73,72

33

77

5,13

7,58

12,47

22,32

86,81

34

114

4,86

7,56

10,76

14,95

50,17

35

210

4,52

6,74

10,77

16,46

50,30

36

264

4,17

5,87

9,095

12,67

35,48

37 и более

13 320

2,98

4,42

6,44

9,15

25,0

Медиана и 99 перцентиль 17ОНР в европейской популяции для доношенных новорожденных имеют значения соответственно 12,0 нмоль/л и 30,3 нмоль/л. В Архангельской области они составили соответственно 6,44 нмоль/л и 25,0 нмоль/л.

Медиана 17ОНР в различные гестационные сроки у недоношенных детей Архангельской области в 1,5 – 2 раза ниже соответствующих величин у детей европейской популяции. Выше перечисленные данные могут указывать на особенности функционирования коры надпочечников в раннем неонатальном периоде у детей высокоширотного региона. Данное положение не противоречит результатам морфологических исследований С.Г.Суханова (1993), в ходе которых установлено, что в надпочечниках плодов и новорожденных «северян» замедлены темпы замещения провизорной (фетальной) коры окончательной (дефинитивной). Полученные нами при популяционном исследовании данные уровня 17ОНР, по сути, совпадают с результатами А.В. Ткачева (1987-2004), С.Г. Суханова (1986-1993), З.Д. Губкиной (1989 - 2007) и др., полученными у взрослых, о том, что у человека в условиях Севера функциональные резервы эндокринной системы снижены.

Вместе с тем более низкие уровни 17ОНР у новорожденных детей Архангельской области на различных сроках гестации могут свидетельствовать о более раннем, опережающем формировании зрелых функций адреналовой системы у жителей Севера. Это также подтверждается данными морфогистологических исследований С.Г. Суханова (1993), показавшими, что для новорожденных Архангельской области характерно раннее формирование, но тонкого слоя дефинитивной коры надпочечников.

Низкие показатели верхнего предела нормативных значений (99 перцентиль) 17ОНР в группах доношенных детей (25 нмоль/л) и недоношенных детей 33 – 34 недель гестации (50 нмоль/л) требуют снижения Cut –off при проведении неонатального скрининга в Архангельской области с целью предупреждения ложно – негативных результатов.

При применении стандартных наборов «Дельфия неонатальный 17 альфа-ОН-прогестерон» (Wallac, Финляндия) производитель рекомендует принимать во внимание модификации тест-систем, которые приводят к изменению получаемых результатов и определению новых пороговых уровней. Учитывая более низкие региональные показатели пороговых значений 17ОНР, для расчета порогового уровня 17ОНР мы ввели поправку на основе вычисления абсолютной и относительной погрешности для различных модификаций стандартного набора, которая составила (- 16%) от рекомендуемого в наборе порогового уровня для исключения ложно-негативных результатов.

Для изучения влияния веса новорожденного на уровень 17ОНР нами было проведено сравнение показателей неонатального уровня 17ОНР в группах доношенных (более 36 недель) детей с различной массой тела при рождении. В 1-ю группу были включены 43 доношенных новорожденных ребенка с массой тела менее 2000 г, во вторую - 1299 доношенных новорожденных детей с массой тела более 2000 г. Средняя масса тела при рождении в группах значимо отличалась и составила 1825,3 + 32,7г и 3391,1 + 12,7г в двух группах соответственно (р=0,00001). Медиана, интерквартильный размах и верхний предел нормативных значений (99 перцентиль) 17ОНР у доношенных детей с различной массой тела при рождении представлены в таблице 2 и на рисунке 1.

Таблица 2

Центильные значения 17ОНР (нмоль/л) у доношенных детей с различной массой тела при рождении

17ОНР (нмоль/л)

n

Среднее значение

Медиана

SD

Центиль

25

75

99

Масса <2000г

43

10,30

9,11

6,18

5,7

13,83

34,71

Масса >2000г

1299

5,93

5,19

3,7

3,5

7,47

19,46

Рис. 1 Медиана и интерквартильный размах 17ОНР у доношенных детей с различной массой тела при рождении

Таким образом, в Архангельской области доношенные новорожденные с низкой массой тела при рождении (менее 2 000 грамм) имеют достоверно (р=0,000057) более высокие значения уровня неонатального 17ОНР.

Архангельская область географически расположена в высоких широтах, где наиболее контрастными сезонами по длительности светового дня являются лето (июнь – август) и зима (ноябрь – февраль).

С целью изучения влияния фотопериодизма на гипофизарно– тиреоидно – адреналовую систему новорожденных детей нами был проведен анализ изменений уровня 17ОНР и ТТГ более 5 мМЕ/мл в зависимости от продолжительности светового дня и сезона года. Зависимость уровня 17ОНР при ТТГ > 5 мМЕ/мл от сезона года представлена на рисунке 2.

В группе детей, родившихся зимой и имевших уровень ТТГ более 5 мМЕ/мл, медиана 17ОНР составила 7,15 нмоль/л; интерквартильный размах 17ОНР 5,42 – 10,41 нмоль/л. В группе новорожденных, родившихся летом и имевших уровень ТТГ более 5 мМЕ/мл, медиана 17ОНР составила 4,06 нмоль/л; интерквартильный размах 17ОНР 2,66 – 6,05 нмоль/л. Различия двух данных независимых групп были достоверны (р <0,0001); в зимние месяцы уровни 17ОНР при имевшейся гипертиреотропинемии были увеличены в 1,5-2 раза в сравнении с летними месяцами. Можно предполагать с определенной долей вероятности, что в летний период усиливается процесс превращения 17ОНР в кортизол. Для окончательного ответа на данный вопрос необходимы дальнейшие исследования с одновременным определением кортизола.

Рис. 2 Зависимость уровня 17ОНР при ТТГ > 5 мМЕ/мл от сезона года

Такая же закономерность установлена при изучении зависимости уровня ТТГ более 5 мМЕ/мл от сезона года. Медиана в группе «лето» составила 6,44 мМЕ/мл, 50% значений находились в интервале 5,61 – 8,96 мМЕ/мл. Медиана в группе «зима» составила 7,19 мМЕ/мл, 50% значений находились в интервале 5,92 – 9,92 мМЕ/мл. При сравнении двух данных независимых групп установлено, что показатели первой группы значимо ниже (р = 0,003).

Pages:     | 1 || 3 |






© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»