WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

загрузка...
   Добро пожаловать!

Pages:     | 1 |   ...   | 6 | 7 || 9 | 10 |

Корреляцияуровней цитокинов между собойв зависимости от уровняИЛ-4

Подгруппы

Тренд

Число цитокинов

0-1

2

3

4

Числобольных

n=95

n=18

n=15

n=4

n=33

Уровни

ИЛ-4 (пг/мл)

0-4,9

5

>29,9

>29,9

>29,9

Характеристика групп по ЦК

НетЦК

или ИЛ-4 (мин.ур.)

ИЛ-4 иИЛ-1 (сред.ур.)

ИЛ-4 иФНО- (сред.ур.)

ИЛ-4 +

ИЛ-1+

ФНО-

Все ЦК,включая и ИЛ-10

Средние

уровни ИЛ-4

(колебания)

4,43

43,83

(7-137)

28,2

(27-90)

(мало

наблюдений)

(71-93)

554

(30-1810)

Присутствиедругих ЦК

нет

ИЛ-1

ФНО-

ИЛ-1 ФНО-

ИЛ-1, ФНО-

ИЛ-10

КорреляцияИЛ-4 с ИЛ-1

нет

r= 0,48

р=0,02

нет

(мало

наблюдений)

r= 0,43

р=0,012

КорреляцияИЛ-4 с ФНО-

нет

нет

r= 0,22

р=0,38

(мало

наблюдений)

r= 0,8

р=0

КорреляцияИЛ-1 сИЛ-10

нет

нет

нет

нет

r= 0,22

р=0,2

КорреляцияИЛ-4 с ИЛ-10

нет

нет

нет

нет

r= 0,49

р=0,004

Рисунок 7. Совокупностьразличных показателей погруппам

Примечание:достоверные различия всравнении: * - с ИЛ-4 в группес 5 токсинами,

+ - с ИЛ-10в группе с 5 токсинами

Рисунок 8.Соотношение уровней ИЛ-4 иИЛ-10 в зависимости от числавыявленных токсинов убольного

При наличиив КФ 4 или 5 токсиновв титре 1:8 и более,уровни ИЛ-4 падают, снижаются иконцентрации ИЛ-10, наиболеерезкое снижение, достоверноес показателями соответствующих ИЛ вгруппах, кроме группы с 4токсинами (р<0,05). При этомисчезает достоверность связимежду уровнями ИЛ-4 и ИЛ-10(р>0,05), присутствовавшая вдругих группах, чтосвидетельствует о том, чтовоздействие большого количестватоксинов, отличающихся,различными механизмами действияна сигнальные системы клетки,приводит к дискоординации еефункциональной активности, чтов применении к Тхелперам, резко снижаетпродукцию ИЛ-4 и,возможно, ИЛ-10 Трегуляторными клетками.

Таким образом,можно полагать, чтовыявленная разница уровней ЦКи токсинов, среднемолекулярныхИК, показателей интоксикациии диареи, ЛИИ и числалейкоцитов в группах больных,с различным спектром ЦК,отражает особенностивоздействия различных сочетанийтоксинов и О-Аг наразличные клетки (включаяиммунокомпетентные), органы исистемы организма, чтоприводит к различному уровнюиммунного ответа организма напатогенные возбудители, вцелом, и на отдельныефакторы патогенностивозбудителей, в частности. Врезультате слабого илинеадекватного реагирования,может продолжатьсяжизнедеятельность возбудителейв кишечнике, продолжаютсинтезироваться токсины нафоне недостаточно эффективногоих связывания антителами сформированием ИК, что, всвою очередь, поддерживаетинтоксикацию и воспаление иусугубляет угнетение имиответа.

Как известно,ИЛ-4 является плейотропным ЦКс регуляторными эффектами нарост В-клеток, рост ифункции Т-клеток, переключениеIg, на гемопоэтические иопухолевые клетки (Mearns H. et.all., 2008; Paul W.E., 1991; Patton E.A. et.all. 2002).

В то жевремя существует небольшоечисло работ, свидетельствующихо том, что ИЛ-4 поддерживаетпоражение в кишечнике вкачестве провоспалительногомедиатора. В сравнении сколитом, вызванным ИЛ-12,поражение, вызываемое ИЛ-4,менее тяжелое, с меньшейдлительностью и не зависитот Т-клеток. Избыточнаяэкспрессия ИЛ-4, как и ИЛ-12,вызывает у экспериментальныхмышей в течение 24 часовдозо- и штаммозависимыефатальные колиты.ИЛ-4 обусловленныйколит сопровождается локальнойэкспрессией в кишечнике ИЛ-4 иФНО- иинфильтрацией кишечной стенкимононуклеарами и гранулоцитами, при этом,ФНО- являетсяважным медиатором колита,вызванного ИЛ-4 (van Kampen С. et.al., 2005).

ОбусловленнаяИЛ-4 генерация периферическихТ рег.клеток зависима от антиген-специфической реакции.Наиболее важнымаспектом Т рег. клетокявляется регуляция изотиповантител и супрессияпровоспалительных клеток. Т рег. клеткимогут также напрямую угнетатьтакиеэффекторные клетки какбазофилы и эозинофилы. ИЛ-10,секретируемый Т рег. клетками,сдвигает продукцию IgЕ(обусловленное действием ИЛ-4на базофилы, тучные клетки слизистойоболочки, моноциты/макрофаги,нейтрофилы, В-клетки) всторону невоспалительныхизотиповIgG.Таким образом, индукция антиген-специфи­ческих Т рег. клеток можетпереправлять ненадлежащийиммунный ответ (в частности,к аллергену или аутоантигену)с помощью широкого спектрасупрессорных механизмов (Taylor.A., 2004). Так, экспериментальнопоказано, что отсутствие ИЛ-10оказывает огромное влияниена колит, обусловлен­ный C.jejuni:увеличивается степеньколонизации и тяжестьэнтерита, создаются возможностидля экстраинтестинальногораспространения возбудителя (Мansfild LS., 2008).

В целом,стимуляция ИЛ-4 формирования Трег. клеток изпериферических T хелперовявляется закономернымфизиологическим процессом,направленным на завершениеинфекционного процесса,ограничение функций Т и Вклеток, избыточной продукцииими межклеточных регуляторов,и формирование долговременныхТ клеток памяти. Изучениеэтих заключительных этаповинфекционного процесса иразличных отклонений, в томчисле развитие толерантности,в настоящее время ведетсяочень активно (Patton E.A at. all,2002; Mearns H.et. al. 2008 ).

Повторные микстинфекции не только способныувеличить Т - клеточныйиммунитет через генерацию Тклеток памяти, но могуттакже усиливать супрессивуюактивность эндогенных Т рег. CD4+CD25+ клеток. Эти клеткиселективно экспрессируют TLR -2,-4, -5, -7, -8. В нормальныхусловиях Т рег. анергичны,но способны к распознаваниюи к прямой пролиферации вответ на TLR - лиганды,экспрессированные на микробахи паразитах. Удаление Трег. клеток в определеннойстепени усиливает протективныйиммунный ответ к бактериям,вирусам и грибам, чтоведет к элиминации патогеннаиз организма, может помочьзавершить элиминациюинфекционного патогенна иуменьшить воспаление закороткое время.

Активность Трег. клеток не всегдаблагоприятна, они могут такжеподавлять иммунные ответы кантигенам опухолей ипатогенам, однако, высокиеуровни ИЛ-10 и TGF- опосредуютспособность Т рег. клетокугнетать патологическийиммунный ответ притрансплантации, аллергии иаутоиммунных заболеваниях.Макрофаги, но не дендритныеклетки, повышают транскрипциюИЛ-10 mRNA, это подтверждает,что они имеют способностьснижать или уменьшатьначальный провоспалительныйответ (Normatsu L., 2003).

Однако,представленные в литературеисследования свидетельствуют,что многие вопросы биологии Трег. клеток остаются невыясненными (Toiti L.G. et. al. 2008),в том числе, касающиесявозбудителей и токсиновкишечных бактерий.

Прямойединично-нуклеотидный полиморфизмпромоутера ИЛ-10 ассоциируют свысокой, промежуточной илинизкой продукцией ИЛ-10.Показано, что LT изменяет иммунныйответ слизистой в сторонуувеличения ИЛ-10 (Flores J. Et al., 2008) и при высокойпродукции ИЛ-10 наблюдалосьразвитие диареи в присутствиив организме СТ и ST ETEC (FloresJ. etal., 2008).

Для определениявзаимосвязей между всемиизученными показателями мыпровели корреляционный анализи множественный регрессионный(линейный) анализ. Корреляционныйанализ выявилзначительное количестводостоверных связей, большуючасть которых составили связимежду клиническими показателями:показателивыраженности диареи коррелируютмежду собой и сдлительностью лихорадки, авысота температуры – только сдлительностью диареи.В разгаре болезнимы не наблюдали достоверныхсвязей между уровнями ЦК иклиническими показателями.Однако, мы выявилидостоверную обратнуюзависимость показателя высотытемпературы с уровнямитоксина А C.dif. и ШТ(r=-0,17, р<0,02) и близкую кдостоверности, слабую обратнуюсвязь между токсином ВC.dif. ичастотой стула (r=-0,13, р=0,086).Результаты корреляционногоанализа выявили достоверныеположительные связи (отумеренных до сильных) междувыявленными уровнями токсиновв КФ (r=0,23 – 0,75, р=0,05).Также установлена положительнаядостоверная связь (сильной иумеренной силы) между про-(r=0,71, р=0,000) ипротивовоспалительными ЦК (r=0,75, р=0,000),а также между ними (r=0,63-0,89,р=0,000). Однако мыне выявили достоверных связеймежду уровнями изученных ЦКи токсинов.

Благодаряиспользованию нового доступногометода выявления токсинов вКФ, у больных ОКИ удалосьустановить связи междууровнями Шигатоксина, токсина А C.perf. и числом О-Аг разныхвозбудителей, выявленных впробе КФ, что, вероятно, свидетельствует ободновременной активациипродукции всех токсинов (изчисла изученных) возбудителямикишечных инфекций. Учитываято, что большинство больныхиз числаобследованных на ЦК (59,4%) в КФ имели от2 до 7 О-Аг разных возбудителей в2-х пробах КФ и почтиполовина из них (30,6%) имелиеще и маркеры несколькихистинных токсинов, и, такимобразом, подвергалисьзначительному токсическомувоздействию, полученные намиданные о слабой достовернойобратной связи ШТ и C.dif. А с высотойлихорадки свидетельствуют обугнетающем воздействии токсинов(на макрофаги, ИКК, ЦНС идругие системы).

Регрессионный(линейный) анализ выявилзависимость некоторыхпоказателей от двух иболее независимых переменных.

Впервые длявсех клинических данных вкачестве независимыхисследовались показателиуровней ЦК (ФНО-, ИЛ-1, ИЛ-4,ИЛ-10), титры токсинов(ШТ, энтеротоксин А C.difficile, цитотоксин В C.difficile,энтеротоксин А C.perfringens иХЭТ) и число О-АГв пробе КФ.

В результатерегрессионного анализа дляпоказателей высоты идлительности лихорадки, частотыстула, а также числалейкоцитов удалосьустановить модельпрогнозируемого показателя с двумя илиболее независимыми переменными.Для показателейвысоты и длительностилихорадки получены вполнеинформационно способные истатистически зна­чи­мые модели (p<0,01) уравнения регрессии,а для прогнозируемыхпоказателей частоты стула ичисла лейкоцитов – модели,значимые в пределах 70%уровня надежности (р>0,3).

Также впервыедля прогнозируемыхпоказателей ЦК (ФНО-, ИЛ-1, ИЛ-4, ИЛ-10)в качестве независимыхисследовались клиническиепоказателиинтоксикации (высотаи длительность лихорадки) идиареи (частота идлительность диареи),лабораторные данные (ЛИИ ичисло лейкоцитов),все детектированные токсины иколичество О-АГ вКФ. Вмодели удалосьвключить толькоклинические показатели, таккак взаимосвязь с остальнымипараметрами (даже в пределах70% надежности) не былаустановлена. Дляпрогнозируемого уровня ИЛ-1 всыворотке крови у больныхОКИ намиполучена статистически зна­чи­мая модель(p<0,02) зависимости егоуровня от длительностилихорадки и показателя числалейкоцитов. Для остальных ЦК(ФНО-,ИЛ-4, ИЛ-10) были получены модели,значимые в пределах 70%уровня надежности (р>0,3).

Впервыерегрессионный анализ проведендля уровнейотдельных токсинов (ШТ,энтеротоксин А C.difficile, цитотоксин В C.difficile, энтеротоксин C. Perfringens А и ХЭТ)в КФ у больных ОКИ. Вкачестве независимыхисследовались высотаи длительность лихорадки,частота и длительность диареи,лабораторные данные (ЛИИ ичисло лейкоцитов),ЦК (ФНО-, ИЛ-1, ИЛ-4,ИЛ-10)и количество О-АГ в КФ. Однако, удалосьполучить модели ввиде уравнения регрессии только дляэнтеротоксина А C.difficile и ХЭТ. Для прогнозируемогозначения уровня энтеротоксина А C.difficile у больных ОКИ намиполучена статистически зна­чи­мая модель(p<0,02), адля показателя уровня ХЭТ – значимостьмодели колеблется в пределах70% уровня надежности(р>0,3).

Главное, о чемсвидетельствуют результаты анализа- это адекватностьвыбранных токсинов (Шигатоксин, токсины А и ВC.dif­ficile,энтеротоксин А C.perfringens, ХЭТ),цитокинов (ИЛ-1, ФНО, ИЛ-4 и ИЛ-10),клинических (высота идлительность лихорадки, частотаи длительность диареи) илабораторных показателей (числолейкоцитов и ЛИИ).

Таким образом,комплекс полученных намиданных свидетельствует, чтоприсутствие токсинов ворганизме больного, несомненно,влияет на клиническиепоказатели интоксикации, равнокак и на уровеньциркулирующих ЦК. Так, уровеньциркулирующего ИЛ-4 в кровиреагирует скорее на изменениеу данного больного уровнейтоксинов в копрофильтрате.

Pages:     | 1 |   ...   | 6 | 7 || 9 | 10 |






© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»