WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

загрузка...
   Добро пожаловать!

Pages:     | 1 |   ...   | 3 | 4 || 6 | 7 |

При полученииспецифических гипериммунных сывороток сцелью изготовления из них диагностикумовиспользовали масляные адъюванты. Отборменее токсичных, но обладающих высокойиммунизирующей активностью, проводили сиспользованием разработанного нами методас использованием пробирок с культуройклеток СП в монослое. В таблице 10приведены данные активности гипериммунныхсывороток, полученных с применениемотобранныхадъювантов, при иммунизации вирусами ИРТ,ПГ-3, бешенства, РС, ящура, а такжехламидиозными антигенами.

Таблица10

Результатыактивности гипериммунныхсывороток

Видживотных

Кол-воголов

Антигены

Гипериммунные сыворотки

Опр.активность

Методы

КРС

5

Вирусов ИРТ

25600+6000

ИФА

КРС

5

ПГ-3

1:12800+2000

ИФА

Овцы

63

Бешенство

1:480+7

РСК

КРС

5

РС

1:12800+2000

ИФА

КРС*

5

Ящура тип А22

3,2+0,1 lg

РН

Овцы

45

хламидиоза

1:256-1:1024

РСК

Примечание:*- свирусом ящура изучали иммуногеннуюактивность вакцин с масляным адъювантом приревакцинации животных.

Полученные данныепозволили получать высокоэффективныеспецифические гипериммунные сывороткидля изготовления диагностикумов с использованиемотобранных адъювантов на разных видахживотных без заметных клинических изменений.

2.2.12. Способы получениялечебной ассоциированной гипериммуной сывороткипротив пастереллеза, гемофилеза истрептококкоза свиней с использованием различныхвидов животных

В последние ноды зарубежом изготавливается целый рядвакцинных и сывороточных препаратовпротив гемофилеза, стрептококкоза ипастереллеза, в том числе иассоциированных.

В нашей странесывороточные препараты против гемофилеза,пастереллеза и стрептококкоза неразработаны.

Значительныйэкономический ущерб, наносимыйсвиноводству гемофилезом, пастереллезоми стрептококкозом, и отсутствиеэффективных специфических средствлечения и профилактики этих заболеванийпослужило основанием для выполнения работы поразработке нового препарата – гипериммуннойсывороткипротив гемофилеза, пастереллеза истрептококкоза свиней.

Исследования поотработке схемы гипериммунизации иполучению опытных партий сывороток противгемофилеза, пастереллеза и стрептококкозасвинейпроводили на Армавирскойбиофабрике.

Для этого былисформированы пять групп свиней по пятьголов в каждой.

Гипериммунизациюсвиней проводили путем внутримышечныхинъекций возрастающих дозинактивированных концентрированныхгемофилезного, пастереллезного истрептококкозного антигенов с интерваломв 2-3 дня. При этом антигены вводили раздельно в разныеучастки тела животного. Через 7-10 дней усвиней брали кровь, получали сыворотку иопределяли ее активность в реакцииагглютинации (РА). Были испытаны пять схем,отличающихся дозой антигенов иколичеством инъекций (таблица 13).

Как показываеттаблица 11 (схема 1) гипериммунизация свинейпутем 10-ти внутримышечных инъекций ввозрастающих дозах инактивированногоконцентрированного пастереллезного игемофиллезного антигенов в общемколичестве по 1000 млрд. микробных тел (м.т.)каждого антигена, стрептококкового – в общей дозе 1255млрд.м.т. позволяет получить сыворотку ститрамиантител в РА: к P. multocida A,D – 1:400, B – 1:800, к H. pleuropneumoniae 5870 – 1:320, ГУ – 19 – 1:640, к Str. suis Касли – 1:200.

Увеличение числаинъекций больше 10-ти и количестваантигенов пастереллезного и гемофилезногобольше 1000 млрд.м.т., стрептококковогобольше 1255 млрд.м.т. (схема 2, 3) не привело кдольнейшему повышению титра антителсыворотки в РА.

Увеличение количестваантигенов и числа инъекцийнецелесообразно, так как оказываетдополнительную нагрузку на иммуннуюсистему продуцентов и не выгодна сэкономической точки зрения.



Таблица11

Активность в РАсывороток против гемофилеза,стрептококкоза и пастереллеза свиней,полученных разными способами


Схема

1

2

3

4

5

1

2

3

4

5

6

Количество инъекций

10

11

12

8

7

Количество (млрд.микробныхтел)

Пастереллы

Гемофилы

Стрептококки

1000

1000

1255

1220

1220

1475

1470

1470

1725

645

800

1000

510

700

800

1

2

3

4

5

6

Активность сыворотки в РА

P.multocidaA

В

D

H.pleuropneumoniae 5870

ГУ-19

Str. suis Касли

1:400

1:800

1:400

1:320

1:640

1:200

1:400

1:800

1:400

1:320

1:640

1:200

1:400

1:800

1:400

1:320

1:640

1:200

1:400

1:800

1:400

1:320

1:640

1:200

1:200

1:400

1:200

1:160

1:160

1:100

Уменьшение числаинъекций до 8-ми (схема 4) при уменьшенииобщего количества вводимых антигенов:пастереллезного до 645 млрд.м.т.,гемофилезного – до 800 млрд.м.т., стрептококкового– до 1000млрд.м.т., не привело к снижению титраантител в сыворотке.

Уменьшение числаинъекций до 7-ми (схема 5) при уменьшенииобщего количества вводимых антигеновпастереллезного – до 510 млрд.м.т., гемофилезного – до 700 млрд.м.т.,стрептококкового – до 800 млрд.м.т. привело к снижениютитров антител в полученной сыворотке в 2раза.

Таким образом,сравнительная оценка 5-ти схемгипериммунизации свиней для получения сыворотки противгемофилеза, стрептококкоза ипастереллеза свиней позволило предложитьсхему гипериммунизации путем 8-10-тиинъекций антигенов в общей дозепастереллезного – 645-1000 млрд.м.т., гемофилезного– до 800-1000млрд.м.т. и стрептококкового – 1000-1255 млрд.м.т. синтервалом в 2-3 дня. В виду разнойреактивности продуцентов целесообразнопроводить гипериммунизацию по циклам: 1-йцикл - 8 инъекций, 2-й цикл – 2 инъекции.Животных, давших активную сыворотку после1-го цикла, переводят в эксплуатационнуюгруппу, остальных подвергают второму циклугипериммунизации, что экономическиоправдано.

Предложенный способапробирован с положительными результатамив производственных условиях наАрмавирской биофабрике.

Разработку способаполучения гипериммунной сыворотки противгемофилеза, стрептококкоза ипастереллеза свиней, включающегоприготовление антигена изинактивированных и концентрированныхкультур Pasterella multocidaсеровариантов А, В и Д и Haemophilus pleuropneumoniae сероваровI и II, Streptococcus suis серовара II (штамм Касли),грундиммунизацию и гипериммунизациювозрастающими дозами антигена споследующим крововзятием и выделениемцелевого продукта, отличающегося тем, что вкачестве продуцентов использовали волов, приэтом гипериммунизацию проводили7-10-кратными внутримышечными инъекциями вобщей дозе каждого антигена 1800-2400миллиардов микробных тел с интервалом 2-3дня, а грундиммунизацию осуществляют подкожно вразные участки тела двукратно сначала по10-15 млрд микр. тел, а через 14 дней по 20-25 млрдмикр. тел с добавлением 10 см3 гидроокисиалюминия. Промышленные серии лечебныхсывороток на волах имели следующуюактивность, гарантирующую высокуюлечебную эффективность.

Титры антителзависели от антигена и индивидуальныхособенностей продуцентов. Средние титрыантител в РА в отношении H. Pleuropneumoniae (шт. 5870 иГУ-19) и Str.suis (Касли)составили 1:474 (1:80-1:640); 1:640 (1:320-1:1280) и 1:200(1:100-1:400), соответственно.

Наибольший титр в РПГАнаблюдался в сыворотках в отношении П.мультоцида серовариантв В 1:700 (1:320-1:1600).Титры антител в отношении П. мультоцидасеровариантоа А и Д были 1:130 (1:40-1:256) и 1:139(1:64-1:240), соответственно.

В процессеэксплуатации 10 продуцентов было получено 3сыворотки-сырца, которые были объеденены водну опытную серию объемом 75 л.

В таблице 12представлены титры антител в РА и РПГАопытной серии сыворотки в сравнении споказателями ТУ.

Таблица12

Титры антител в РА иРПГА опытной серии

П.мультоцида

Pleuropneumoniae

(РА)

Str.Suis

(РА)

АВ Д

5870ГУ-19

Касли

серия

1:1201:512 1:120

1:3201:320

1:300

ТУ

1:32 1:128 1:32

1:1001:100

1:100

Опытная сериясыворотки была стерильна ибезвредна.

Таким образом,контроль сыворотки показал, что попоказателям стерильности, безвредности, активностиполученная опытная серия сывороткисоответствует ТУ на препарат.

2.2.13. Динамикаизготовления диагностических наборов впромышленных условиях

В течение последних 7лет по нашим разработкам во ВНИТИБП былиизготовлены и выпущены диагностикумы,представленные в таблице 13.

Таблица 13

Объем выпускадиагностикумов за 2001-2007 гг.

Наименова-ниедиагнос-тикумов

2001

2002

2003

2004

2005

2006

2007

1. Набордля диагностики бешенства в РДП

374

500

270

456

415

402

443

2. Глобулинфлюоресцирующий

330

500

485

616

520

71

598

3. Набордля диагностики хламидиоза с/х ж-х

2150

3100

2400

2693

2000

649

2306

4. Набордля диагностики ИРТ КРС ИФА «Диарин-С»

200

229

230

408

120

120

120

2.2.14. Экономический иэкологический эффект

Pages:     | 1 |   ...   | 3 | 4 || 6 | 7 |






© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»