WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

загрузка...
   Добро пожаловать!

Pages:     | 1 || 3 | 4 |   ...   | 10 |

Апробация диссертациипроведена на совместной научнойконферен-
ции с участиемсотрудников кафедры клинической биохимиии лабораторной диагностики Московскогогосударственногомедико-стоматологического
университета, лабораторииклинической биохимии, хирургическогоотделе-
ния проктологии,отдела патологической анатомии опухолейчеловека НИИ
клиническойонкологии ГУ Российского онкологическогонаучного центра
им.Н.Н.Блохина РАМН 12 июня 2008г.

Публикации. По материаламдиссертации опубликовано 19 научных
работ, в том числе визданиях, рекомендуемых ВАК – 7 печатныхработ.

Структура и объемдиссертации. Диссертация изложена на 177 стра-
ницах и состоит из введения, обзоралитературы, описания материала име-
тодов исследования, 4глав результатов собственныхисследований, обсуж-
денияполученных результатов, выводов ипрактических рекомендаций.
Текст иллюстрирован 58 таблицами и 23рисунками. Указатель литературы
содержит 74 работ отечественных и 186зарубежных авторов.
Положения, выносимые назащиту;

  1. Наиболее высокие уровни экспрессииММР-9 выявлены в опухоли у пре-
    обладающего большинства больныхраком толстой кишки при поздних
    стадиях заболевания, при низкойстепени дифференцировки опухоли, а также при наличииинвазии карциномы в кровеносных сосудах.При этом, общая 5-летняя выживаемость больныхраком толстой кишки при высоком уровне экспрессии ММР-9достоверно ниже, чем при низкойэкспрессии белка.
  2. Низкий уровень экспрессииколлагена IVтипа достоверно чащевыявляли
    в опухолях убольных колоректальным раком прираспространенном
    процессе, при низкой степенидифференцировки опухоли, привыражен-
    ной глубинеинвазии опухоли в стенку кишки, а также приналичии инва-
    зии опухоли вкровеносных сосудах. Показатели общей5-летней выжи-
    ваемостибольных с низкой экспрессией коллагена IVтипа в опухоли бы-
    лидостоверно ниже, чем при высокойэкспрессии маркера.
  3. Исходная концентрация ключевогоактиватора неоангиогенеза VEGF в
    сыворотке крови больных ракомтолстой кишки была достоверно вышепо сравнениюс практически здоровыми людьми. При этом,уровень маркера
    достоверно повышался в сывороткекрови больных с увеличением глуби-
    ны инвазии опухоли в стенку кишки,при прорастании опухоли в крове-
    носные сосуды, при низкой степенидифференцировки опухоли.
  1. Самые низкие показатели общей5-летней выживаемости отмеченысреди
    больных ракомтолстой кишки с высокими уровнями VEGF (от 800пг/мл
    и более). При этом,высокий уровень экспрессии ММР-9 впервичной опу-
    холи былсвязан с повышенными исходнымипоказателями VEGF в сыво-
    ротке крови, тогда как при низкихисходных значениях VEGF чаще выяв-
    ляли высокую экспрессию коллагенаIV типа в первичной опухоли.
  2. Почти в 2 раза чаще sFas выявляли в сыворотке крови больныхколорек-
    тальным раком, аего уровни были достоверно выше посравнению с прак-
    тическиздоровыми людьми, при этом общая5-летняя выживаемость
    больных раком толстой кишки приуровнях sFasв сыворотке крови от10
    нг/мл и более быладостоверно ниже.
  3. Содержание uРА и tPAв ткани опухоли больныхраком толстой кишки
    былодостоверно выше, чем в неизмененнойслизистой и зависело от ос-
    новных клинико-морфологическиххарактеристик заболевания, а именно,распространенностиопухолевого процесса, степенидифференцировки опухоли, глубины прорастания встенку кишки и кровеносные сосуды.
  4. Безрецидивная выживаемость больныхколоректальным раком достовер-
    но различалась по порогу уровню 3нг/мг белка для uРА, 2 нг/мг белка для
    tPA и 2нг/мг белка для PAI-1.
  5. Выявлены наиболее неблагоприятныесочетания маркеров при оценке об-
    щего прогноза у больных ракомтолстой кишки: ММР-9/коллаген IV типа,
    MMP-9/uPA, MMP-9/PAI-1, коллаген IV типа/PAI-l и при прогнозеотда-
    ленных метастазов -MMP-9/sFas.

Содержаниедиссертации

Материал и методыисследования

Общая характеристикабольных раком толстой кишки. В исследо-
ваниевключено 187 больных раком толстой кишки ввозрасте от 34 по 79
лет,проходивших обследование и лечение в ГУРОНЦ им. Н.Н.Блохина
РАМН впериод с 1986 по 2006 гг. и наблюдавшихся послеокончания лечения не менее двух лет.Количество больных мужского и женскогопола составило 86 (46%) и 101 (54%),соответственно, средний возраст пациентов- 60,5±0,8 лет, медиана - 62 года.Средний возраст больных мужчин иженщин неразличался и составил 60,8±1,0 и 60,2±1,1 лет,соответственно.

Распределение больныхраком толстой кишки с учетом стадиизаболевания представлено втаблице 1. Как видно из данных, приведенныхв таблице 1, в группе больныхв IVb стадии количество пациентовмужского и женского пола былопримерно равным (55 мужчин и 50 женщин), тогдакак в группах пациентов сболее ранними стадиями - преобладалиженщины. Минимальныйсредний возраст был характерен для больныхраком толстой кишки IV стадии.

Таблица 1.

Распределение больныхраком толстой кишки
сучетом стадии заболевания

Стадия

Кол-во

Частота (%)

Пол (абс.)

Возраст,годы


больных


м/ж

(М±т)

I

3

1,6

0/3

63,3±3,0

Па

9

4,8

3/6

64,4±1,6

IIb

29

15,5

13/16

65,8±1,5

IIIa

11

5,9

4/7

64,2±3,0

IIIb

21

11,2

8/13

59,3±2,4

IVa

9

4,8

3/6

58,8±3,2

IVb

20

10,7

6/14

59,9±2,0

IVb срезекцией

85

45,5

49/36

58,3±1,2

печени





Всего:

187

100

86/101

60,5±0,8

Все больные ракомтолстой кишки подвергнуты хирургическомулече-
нию различногообъема: право/левосторонняягемиколэктомии, резекции
сигмовидной, поперечно-ободочной,прямой кишки.

Отметим, что у 141 (75,4%)больного раком толстой кишкивыявлены
единичные имножественные регионарные метастазы влимфатических узлах.
У 98(52,4%) пациентов были обнаружены метастазы впечени. При этом, 85
пациентам выполнена резекцияпечени по поводу метастазов, этипациенты
выделены нами вотдельную группу с целью анализа прогнозазаболевания.

Клинико-морфологическуюхарактеристику больных ракомтолстой
кишки, вошедших висследование, проводили в соответствии сМеждународ-
нойгистологической классификацией опухолейкишечника ВОЗ (1989). Для
определения гистологического типаи варианта строения опухоли, степениее
дифференцировки,глубины инвазии в кишечную стенку, наличиясосудистой
инвазии изучалипарафиновые срезы, окрашенныегематоксилином и эози-
ном.Слизеобразование оценивали с помощьюокраски альциановым синим
по Крейбергу. Исследовали такженаличие участков некроза, лимфоиднойи
воспалительнойинфильтрации в опухоли.

При гистологическомисследовании материала у всех больныхбыли
диагностированыаденокарциномы, которые были представленыразличными вариантами строения:железистым, папиллярным, трабекулярным исолидноалвеолярным. Из 187 больных ракомтолстой кишки у 124 (66,3%) пациентов наблюдали железистый вариантстроения опухоли, у 43 (23,0%) - преобладали папиллярные структуры, у 7 (3,7%) -выявлен трабекулярный вариант строения аденокарциномы, у 13 (7%) -опухоль была представлена солидными илисолидно-альвеолярными структурами.

Высокодифференцированные аденокарциномывыявлены у 24 (12,8%)
пациентов,умереннодифференцированные - у 138 (73,8%)больных, низко-
дифференцированные - у 25 (13,4%)пациентов.

Опухоли больных ракомтолстой кишки имели различную глубинуин-
вазии в кишечнуюстенку: прорастание слизистого иподслизистого слоев наблюдали у 6 (3,2%) больных, врастаниеопухоли в мышечную оболоч-
ку - у 21 (11,2%) пациента, прорастаниевсех слоев стенки кишки - у
61 (32,6%) больного, опухоль прорасталавсе слои и врастала в жировую
клетчатку - 87 (46,5%) пациентов.Глубина инвазии была достоверносвя-
зана со стадиейзаболевания (р=0,0001). Прорастание опухоли всоседние ор-
ганы и тканиобнаружили у 12 (6,6%) больных раком толстойкишки.

Важнойклинико-морфологической характеристикойрака толстой
кишкиявляется наличие у больного инвазииопухоли в кровеносные и лим-
фатические сосуды. У 51 из 187 (27,3%)больных раком толстой кишки обна-
ружена сосудистая инвазия впервичной опухоли. Существенноеповышение
частотывыявления сосудистой инвазии (более чем уполовины больных) об-
наружено у больных раком толстойкишки при 1ПЬ и IV стадиях посравне-
нию с более раннимистадиями заболевания.

Слизеобразование в тойили иной степени выраженности выявленов
опухолях 61 из 107пациентов (57%), страдающих раком толстойкишки, при
этом частота егообнаружения не была связана со стадиейзаболевания.

Методы определенияиммуногистохимических маркеров. Опреде-
лениеиммуногистохимических показателейсодержания белковых маркеров в опухоли больныхраком толстой кишки проведено влаборатории гистохимии иэлектронной микроскопии НИИ клиническойонкологии ГУ Российскогоонкологического научного центра им.Н.Н.Блохина РАМН.

Таблица 2.

Характеристикаантител

Антиген

Антитело,

Фирма

Рабочее

Функциябелка


клон


разведение


ММР-9

Mouse mAb

Novocastra

1 :80

Ферментвнеклеточно-


15W2



го матрикса

Коллаген

Mouse mAb

Novocastra

1 :200

Компонентбазальных

IV типа

РИМ- 12



мембран

Иммуногистохимическоеисследование белковых маркеров вопухолях
больных ракомтолстой кишки выполняли на серийныхпарафиновых срезах
спомощью биотин-стрептавидиновогоиммунопероксидазного метода спри-
менением антител кММР-9 и коллагену IV типа (фирма «Novocastra»,Вели-
кобритания).Характеристика использованных висследовании антител дана в
таблице 2.

Pages:     | 1 || 3 | 4 |   ...   | 10 |






© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»