WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

загрузка...
   Добро пожаловать!

Pages:     | 1 |   ...   | 2 | 3 || 5 |

Частотный анализ распределения генотипов гена CCR5 у пациентов в группе НМРЛ не выявил значимых различий со среднестатистической популяцией Западно-Сибирского региона. В группу пациентов с МРЛ мы также включили пациентов, прогенотипированных по данному полиморфизму Н.В.Севостьяновой (2004), и она суммарно составила 53 человека. Мы выявили на уровне тенденции увеличение частоты встречаемости гетерозиготного w/del32 генотипа гена ССR5 в сравнении с группой здоровых доноров (табл. 7). Стратификация групп по возрастному признаку и фактору курения не изменила соотношений частот генотипов гена ССR5 у больных НМРЛ и МРЛ.

Есть основания считать, что функциональная активность гена репарации XRCC1 может напрямую зависеть от полиморфизма гена р53, так как он координирует активацию транскрипции генов, необходимых для запуска репарации того или иного повреждения ДНК, стимулируя тем самым эксзиционную репарацию ДНК (Zhou et al., 2001; Offer et al., 2002; Gueven et al., 2000). Литературные сведения о связи Arg399Gln полиморфизма XRCC1 с РЛ достаточно противоречивы, хотя есть указания на рисковую значимость минорных аллелей. В наших исследованиях не выявлен вклад минорного аллеля гена репарации XRCC1 (генотипы Arg/Gln или Gln/Gln, данные не представлены) в риск возникновения НМРЛ, что согласуется с данными других авторов (Ratnasinghe et al., 2001; Stern et al., 2001).

Таким образом, при изучении отдельного вклада полиморфизма генов CCR5 и XRCC1 мы не установили их ассоциации с НМРЛ независимо от факторов риска, а также не выявили связи с патогенетически значимыми клинико-морфологическими признаками (данные не представлены). Наши данные согласуются с мнением Имянитова Е.Н. (2006) о том, что каждый полиморфизм в отдельности обладает лишь весьма умеренным эффектом, поэтому роль нормальных вариаций генома в патологии с трудом поддается изучению. Эффективность исследований может быть повышена при оценке сочетаний функционально связанных между собой патогенетически значимых генов. Поэтому мы оценили ассоциацию вариантных генотипов генов CCR5 и XRCC1 в сочетании с комбинациями полиморфизмов гена р53 с НМРЛ, учитывая возрастную компоненту.

Мы показали, что рисковая значимость w/dup16- Arg/Pro-w/m комбинации гена р53 для НМРЛ у лиц зрелого возраста сохраняется как при сочетании с w/w генотипом гена CCR5 (р0,006), так и в сочетании с w/del32 генотипом (р0,05). Следовательно, носительство гетерозиготных генотипов гена р53 определяет риск НМРЛ для лиц зрелого возраста, независимо от статуса гена CCR5, регулирующего его транскрипционную активность(табл.8).

Установлена ассоциация w/dup16-Arg/Pro-w/m комбинации генотипов гена р53 при сочетании с Arg/Gln генотипом гена репарации с НМРЛ для лиц зрелого возраста. В то же время при сочетании с мажорным генотипом Arg/Arg гена XRCC1 комбинация гетерозиготных генотипов р53 не ассоциирована с РЛ (табл.9).

Таблица 8. Сочетание генотипов гена CCR5 с комбинацией генотипов

(3 интрон-4 экзон-6 интрон) гена р53 у больных НМРЛ в зависимости от возраста

Комбинации генотипов генов

здоровые

Больные НМРЛ

зрелого

возраста

пожилого

возраста

CCR5

р53

w/w

w/w-Arg/Arg-w/w

41

(62/150)

36

(14/39)

67*,#

(22/33)

р0,01

w/w-Arg/Pro-w/w

28

(42/150)

28

(11/39)

18

(6/33)

w/dup16- Arg/Pro-w/m

4

(6/150)

18*

(7/39)

р0,006

9

(3/33)

w/del32

w/w-Arg/Arg-w/w

31

(11/35)

33

(3/9)

60

(6/10)

w/w-Arg/Pro-w/w

31

(11/35)

11

(1/9)

10

(1/10)

w/dup16- Arg/Pro-w/m

6

(2/35)

33*

(3/9)

р0,05

20

(2/10)

Примечание: #- различия статистически значимы по сравнению с аналогичными показателями группы больных зрелого возраста.

Таблица 9. Сочетание комбинаций генотипов (3 интрон-4 экзон-6 интрон) гена р53 c генотипами гена XRCC1 у больных НМРЛ в зависимости от возраста

Комбинации генотипов генов XRCC1 и р53

здоровые

Больные НМРЛ

зрелого

возраста

пожилого

возраста

Arg/Arg

w/w-Arg/Arg-w/w

37

(25/68)

36

(7/19)

67*

(18/27)

p0,01

w/w-Arg/Pro-w/w

31

(21/68)

26

(5/19)

15

(4/27)

w/dup16- Arg/Pro-w/m

4

(3/68)

12

(3/25)

4

(1/27)

Arg/Gln

w/w-Arg/Arg-w/w

38

(35/91)

42

(12/28)

56*

(18/32)

w/w-Arg/Pro-w/w

27

(25/91)

14

(4/28)

28

(9/32)

w/dup16- Arg/Pro-w/m

3

(3/91)

21*

(6/28)

p0,005

9

(3/32)

Gln/Gln

w/w-Arg/Arg-w/w

37

(11/30)

25

(3/12)

69

(9/13)

w/w-Arg/Pro-w/w

33

(10/30)

42

(5/12)

7

(1/13)

w/dup16- Arg/Pro-w/m

6

(2/30)

17

(2/12)

15

(2/13)

По-видимому, нормально функционирующий белок XRCC1 может нивелировать рисковую значимость этой комбинации для индивидуумов зрелого возраста, показанную нами выше. Можно полагать, что сочетание генотипов (Arg/Gln)w/dup16-Arg/Pro-w/m является неблагоприятным с точки зрения риска формирования НМРЛ для лиц зрелого возраста ввиду совместного вклада минорных аллелей генов р53 и XRCC1 в снижение эффективности процессов репарации.

Мы показали, что ассоциация w/w-Arg/Arg-w/w комбинации генотипов гена р53 с НМРЛ в пожилом возрасте оставалась значимой при сочетании с w/w генотипом гена CCR5 и Arg/Arg генотипом гена репарации, характеризующимися неизмененной активностью своих белковых продуктов (табл.8 и 9). На наш взгляд, рисковая значимость этих сочетаний генотипов может быть определена наличием гомозиготного состояния р53 по аргинину, о возможных механизмах патологического вклада которого мы упоминали выше. Важно то, что с возрастом увеличивается вероятность мутации р53, обусловленная не только длительной экспозицией к факторам внешней среды, но и ошибками систем репарации.

Нам не удалось оценить ассоциацию генотипов гена CCR5 с комбинацией генотипов (3 интрон-4 экзон-6 интрон) гена р53 у больных МРЛ по причине малочисленности группы (n=34).

Таким образом, проведенные исследования показали, что в условиях патогенетически значимых экзогенных влияний (курение) сочетанное носительство функционально измененных генотипов, несущих минорные аллели генов р53 и XRCC1 способствует более раннему возникновению НМРЛ. В то же время носительство комбинации функционально полноценных генотипов (мажорные аллели) генов р53, CCR5, XRCC1 ассоциировано с НМРЛ в пожилом возрасте. Эти исследования подтверждают, что полиморфизм ДНК, даже вне коди­рующей области, может быть связан с ослаблением или усилением функции гена и свидетельствуют о том, что существуют определенные механизмы реализации онкогенного потенциала каждой из изучаемых комбинаций гена р53 при НМРЛ в зависимости от возраста. В целом полученные нами данные в определенной степени подтверждают высказанную недавно гипотезу об антагонистической плейотропии генов онкосупрессоров, в первую очередь, гена р53, согласно которой нормально функционирующий белок р53 защищает от рака в раннем периоде жизни, промотируя одновременно фенотип старения и связанный с ним поздний рак. Защита от неоплазий у молодых организмов связана с активным апоптозом либо индукцией фенотипа клеточного старения: оба эти процесса предотвращают пролиферацию и снижают риск злокачественной трансформации. Оборотной стороной такой активности является ускоренное накопление стареющих клеток в тканях, что наряду с дисфункцией теломеразы характеризуется резистентностью к апоптотическим сигналам, а также проканцерогенными изменениями стромальных клеток. В частности, возрастная зависимость рака ряда локализаций, с одной стороны, обусловлена накоплением мутаций в эпителиальных клетках, а с другой, - связанным со старением изменением стромального микроокружения, которое становится способным формировать и поддерживать опухолевый фенотип. Такое микроокружение характеризуется повышением экспрессии факторов роста эпителия, провоспалительных цитокинов, ремодулирующих экстраклеточный матрикс молекул (Faragner, 2000; Krtolica, Campisi, 2002; Campisi, 2005).

Показанное нами вовлечение комбинации гетерозиготных генотипов гена р53 по интронным и экзонному полиморфизму в формирование НМРЛ и МРЛ свидетельствуют о важной роли этого гена в патогенезе обеих форм рака легкого. Предварительные данные о связи делеционного аллеля хемокинового рецептора CCR5 с МРЛ, но не с НМРЛ, по-видимому, могут объясняться тем фактом, что МРЛ развивается из нейроэндокринных клеток APUD-системы, в регуляции которой участвует иммунная система, и нарушение функции рецептора ССR5 в результате делеции 32 пар нуклеотидов может выступать патогенетически значимым фактором в развитии МРЛ.

Исход заболевания, одним из объективных оценочных критериев которого является продолжительность жизни больного, зависит от целого ряда факторов: распространенности процесса, гистологической структуры опухоли, применяемого лечения, чувствительности опухоли к цитостатической терапии. Для того, чтобы оценить возможную связь изучаемых комбинаций полиморфизмов гена р53 с исходом, мы провели однофакторный анализ общей выживаемости больных НМРЛ в зависимости от носительства разных комбинаций его генотипов по методу Каплана-Майера (рис.1). Исследуемые группы были сопоставимы по полу, возрасту, распространенности, локализации и гистотипу опухоли, а также по эффективности проводимой терапии.

Рис 1. Общая выживаемость больных НМРЛ в зависимости от носительства комбинаций генотипов гена р53. Примечание: нецензурированные данные - завершенные наблюдения, в которых наступил случай смерти; цензурированные данные - незавершенные наблюдения, в которых исследуемый исход не наступил, или объект выбыл и больше не наблюдался. Группа 1- носительство w/w-Arg/Arg-w/w комбинации и группа 2 – носительство w/dup16- Arg/Pro-w/m комбинации. По оси абсцисс – время в месяцах с момента постановки диагноза НМРЛ, по оси ординат – кумулятивная выживаемость, рассчитанная по методу Каплан-Майера.

Pages:     | 1 |   ...   | 2 | 3 || 5 |






© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»