WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

загрузка...
   Добро пожаловать!

Pages:     | 1 | 2 || 4 | 5 |

Изучение спектра поглощения комплекса гидролизата полисахаридов кактуса крупноцветкового с пикриновой кислотой показало, что он имеет максимум поглощения при длине волны 460±2 нм, аналогичный максимум поглощения имеет комплекс глюкозы с пикриновой кислотой (рис.1). Таким образом, предложено использовать в качестве аналитической - длину волны 460 нм и проводить определение суммы моносахаров после гидролиза полисахаридов в пересчете на глюкозу.

Воспроизводимость методики количественного определения полисахаридов была установлена на примере одного образца сырья в 5 независимых повторностях. Метрологические характеристики методики определения содержания полисахаридов в пересчете на глюкозу приведены в таблице 6

Таблица 6

Метрологические характеристики методики количественного определения моносахаров в пересчете на глюкозу в побегах кактуса крупноцветкового,

Сырье

f

X

S2

S

P,%

t(P,f)

x

,%

Побеги свежесобранные

4

22,671

1,597

1,263

95

2,78

1,57

±6,92

Побеги высушенные

4

21,623

1,362

1,167

95

2,78

1,45

±6,71

Относительная ошибка единичного определения не превышает ±6,92 для свежего сырья и ±6,71 % для высушенного, что свидетельствует об удовлетворительной воспроизводимости методики. Относительная ошибка проведенных опытов с добавками глюкозы находится в пределах случайной ошибки предложенной методики, что свидетельствует об отсутствии систематической ошибки (табл.7).

Таблица 7

Результаты опыта с добавками глюкозы к навеске полисахаридов свежесобранного сырья кактуса крупноцветкового

Содержание полисахаридов в навеске, г

Добавлено глюкозы, г

Должно быть, г

Найдено полисахаридов, г

Ошибка

Абс., %

Отн, %

0,2371

0,0611

0,2982

0,2826

+0,0156

+5,24

0,2410

0,1303

0,3713

0,3936

-0,0223

-6,02

0,2202

0,1821

0,4023

0,3822

-0,0200

-4,98

0,2334

0,2351

0,4685

0,4800

+0,0115

+2,45

С помощью разработанного метода проанализированы 5 серий свежесобранного и 5 серий высушенного сырья кактуса крупноцветкового, в результате проведенного эксперимента установлена норма содержания данной группы БАВ – не менее 20 %.

Количественное определение суммы аминокислот в побегах кактуса крупноцветкового

Для определения суммы аминокислот была использована методика, основанная на реакции их взаимодействия с раствором нингидрина и последующем измерении оптической плотности окрашенного комплекса. В ходе эксперимента нами установлены оптимальные условия экстракции аминокислот из побегов кактуса: измельченность высушенного сырья 1 мм, экстрагент – вода, соотношение сырье-экстрагент 1:50, время экстракции 45 мин. Для установления аналитической длины волны были изучены спектры поглощения окрашенного комплекса с нингидрином глютаминовой кислоты и окрашенных комплексов аминокислот кактуса крупноцветкового с нингидрином (рис.2).

В результате установлено, что при длине волны 566±2нм, наблюдается интенсивный максимум поглощения как исследуемых комплексов, так и комплекса глютаминовой кислоты с нингидрином. В связи с этим предложено использовать аналитическую длину волны 566 нм и проводить количественное определение суммы аминокислот в пересчете на кислоту глютаминовую.

Рис. 2. УФ-спектр поглощения комплекса глютаминовой кислоты с раствором нингидрина (1), водно-спиртового извлечения кактуса крупноцветкового побегов высушенных с раствором нингидрина (2) и кактуса крупноцветкового побегов свежих с раствором нингидрина (3)

Метрологические характеристики разработанной методики представлены в таблице 8. Относительная ошибка методики не превышает ±6,06 % для свежего сырья и ±5,96 % для высушенного

Таблица 8

Метрологические характеристики методики количественного определения суммы аминокислот в пересчете на глютаминовую кислоту в сырье кактуса

Сырье

f

X

S2

S

P,%

t(P,f)

x

,%

Побеги свежесобранные

4

61,422

8,9327

2,99

95

2,78

3,72

±6,05

Побеги высушенные

4

60,923

8,527

2,92

95

2,78

3,63

±5,96

Отсутствие систематической ошибки подтверждено в опытах с добавками кислоты глютаминовой к навеске сырья перед экстракцией (табл. 9).

Таблица 9

Результаты опытов с добавками глютаминовой кислоты к навеске сырья кактуса крупноцветкового свежесобранных

Содержание аминокислот в навеске мг

Добавлено глютаминовой кислоты, мг

Должно быть, мг

Найдено аминокислот, мг

Ошибка

Абсолютная,

мг

Относительная,

%

0,6203

0,1553

0,7756

0,8132

-0,0376

-4,85

0,6169

0,3108

0,9277

0,9808

-0,0531

-5,72

0,6232

0,4723

1,0955

1,0417

+0,0538

+4,91

0,6280

0,6204

1,2484

1,2283

+0,0201

+1,61

Аналогичные результаты были получены в опытах с добавками глютаминовой кислоты к навеске высушенных побегов кактуса крупноцветкового.

На основании результатов анализа 5 серий свежесобранного и 5 серий высушенного сырья кактуса крупноцветкового, установлена норма содержания суммы аминокислот в пересчете на кислоту глютаминовую и абсолютно сухое сырье – не менее 58 мг%.


Изучение динамики накопления биологически активных веществ в зависимости от фазы вегетации растения

Поскольку накопление БАВ значительно варьирует в процессе онтогенеза растений, нами изучено содержание суммы связанных моносахаров и аминокислот в сырье в зависимости от фазы вегетации кактуса крупноцветкового (табл. 10).

Таблица 10

Результаты определения содержания аминокислот и моносахаров в побегах кактуса крупноцветкового в зависимости от фазы вегетации растения

№ п/п

Фаза вегетации

Содержание БАВ

Аминокислоты, мг%

Связ.моносахара, %

1

Появление побега

50,2

19,5

2

Начало бутонизации

54,5

21,8

3

Цветение

62,5

23,2

4

Конец цветения

58,6

22,1

5

Плодоношение

52,1

20,9

Полученные результаты свидетельствуют о том, что наибольшее количество аминокислот и полисахаридов накапливается в фазу цветения, в связи с чем заготовку побегов кактуса целесообразно вести в конце июня – начале июля.


Установление сроков годности сырья

Для установления сроков годности сырья нами изучена стабильность при хранении побегов кактуса крупноцветкового в упаковке, предусмотренной проектом НД.

На основании полученных данных установлены срок и условия хранения для свежесобранного сырья – 24 часа при температуре не выше 40С в холодильной камере, высушенного – 3 года в защищенном от света месте при температуре не выше 150С.


Разработка нормативной документации на сырье

На основании проведенных исследований разработаны и оформлены проекты фармакопейных статей «Кактуса крупноцветкового побеги свежие» и «Кактуса крупноцветкового побеги». Согласно проекту ФС контроль качества ЛРС осуществляется по следующим показателям: внешние признаки, подлинность (микроскопия, качественные реакции), числовые показатели: содержание связанных моносахаров в пересчете на глюкозу, содержание аминокислот в пересчете на кислоту глютаминовую; потеря в массе при высушивании; зола общая; зола, нерастворимой в 10 % растворе кислоты хлористоводородной, органическая примесь, минеральная примесь; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 0,5 мм не более 0,5 % (только для высушенного сырья).

Проекты ФС находятся на рассмотрении в Институте стандартизации и контроля лекарственных средств ФГУ НЦСМП Росздравнадзора.

4. Получение настоек гомеопатических матричных Кактус и разработка методов их стандартизации

Получение НГМ Кактус проводили согласно методикам, изложенным в ОФС 42-0027-05 «Настойки гомеопатические матричные» с учетом свойств исходного сырья. Поскольку влажность свежего лекарственного растительного сырья составляет не менее 60 %, и содержащиеся в сырье полисахариды представлены в основном слизями, то при изготовлении НГМ Кактус из свежего сырья применяли метод 3.

НГМ Кактус из высушенного сырья получали по методу 4а ОФС 42-0027-05 «Настойки гомеопатические матричные».


Разработка методов оценки качества настойки гомеопатической матричной Кактус

В соответствии с требованиями, изложенными в ОФС «Настойки гомеопатические матричные» контроль качества НГМ осуществляли по показателям: описание, подлинность, сухой остаток, плотность, содержание спирта, тяжелые металлы, микробиологическая чистота.

Pages:     | 1 | 2 || 4 | 5 |






© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»