WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

загрузка...
   Добро пожаловать!

Pages:     | 1 |   ...   | 2 | 3 ||

Был выявлен значительный подавляющий функциональную активность ПХ эффект смеси препаратов, как при повышении концентрации атропина, так и - добавлении пилокарпина к атропину. Такой цитогенетический эффект, по-видимому, объясняется известными ранее данными (Левин, Высотский, 1949) о том, что с увеличением концентрации атропина в смеси начальная пилокарпиновая стадия укорачивается, а последующая атропиновая – удлиняется. Критерием токсичности на субклеточном уровне послужило угнетение активности NO при увеличении доли холиноблокатора в смеси. Действительно, нарушение функций NO, ответственного за поддержание гомеостаза в клетке и являющегося сенсором многих стрессовых воздействий, приводит к апоптозу и гибели клеток (Зацепина, 2007), в связи с чем, ответная реакция NO специфична и может служить индикатором биологической активности.

Глава 6. ОБРАТИМОСТЬ ИЗМЕНЕНИЙ АКТИВНОСТИ ЯДРЫШКОВОГО ОРГАНИЗАТОРА И КОЛЕЦ БАЛЬБИАНИ ПОД ВЛИЯНИЕМ ПИЛОКАРПИНА

Действие пилокарпина в концентрации 2 мг/мл привело к угнетению NO и BR при 60 ч. Активность NO, сниженная к 12 ч по сравнению с контролем, вновь возрастала к 36 ч, и затем равномерно понизилась к 60 ч (рис. 13).

Рис. 13. Обратимость изменений индекса NОR при влиянии 2 мг/мл пилокарпина (П)

Неоднозначный характер изменений активности NO свидетельствовал о включении краткосрочных механизмов адаптации в ответ на токсическое действие пилокарпина и сбое циклической активности по сравнению с контролем. Угнетение работы BR при продолжительном действии пилокарпина - об избыточном количестве синтезируемого секрета и, вследствие этого, подавлении работы участков ПХ, ответственных за секреторную деятельность желез (рис. 14-16).

Рис. 14. Обратимость изменений индекса BR1GR при влиянии 2 мг/мл пилокарпина (П)

Рис. 15. Обратимость изменений индекса BR2GR при влиянии 2 мг/мл пилокарпина (П)

Рис. 16. Обратимость изменений индекса BRВR при влиянии 2 мг/мл пилокарпина (П)

Повышение активности всех BR после 12 ч воздействия пилокарпином у личинок, перемещенных в чистую воду, по-видимому, объяснялось необходимостью восстановления равновесия между выведением секрета и его синтезом.

В целом цитогенетические эффекты пилокарпина свидетельствовали о функциональной разбалансировке активных участков ПХ под действием заведомо токсичной концентрации - 2 мг/мл. Изменения активности участков ПХ, даже при токсичной концентрации пилокарпина – 2 мг/мл, приводящей к образованию максимального количества пуфов de novo, обратимы, что согласуется с мнением Ильинской (1989) о модификационной природе изменчивости активности ПХ.

В заключении подведены основные результаты диссертационного исследования.

ВЫВОДЫ

1. В качестве оптимизации методических подходов к оценке действия лекарственных препаратов рекомендовано: проводить эксперимент по воздействию без субстрата; цитогенетические эффекты оценивать на фоне морфофункциональных изменений у личинок; полученные при влиянии результаты нормировать на контроль; снизить количество изучаемых параметров до NOR, уменьшение значений которого может служить критерием токсического действия на субклеточном уровне.

2. Выявленo, что при акклимации личинок Ch. plumosus к лабораторным условиям происходит: повышение функциональной активности всех BR, увеличение количества работающих BRG и PB и изменение картины пуфинга. Определены границы изменчивости и процент работающих активных участков ПХ в контроле, наиболее вариабелен индекс компактности, наиболее стабильно работает NO.

3. Установлена зависимость активности ряда участков ПХ от генотипических характеристик личинок: увеличение активности BRB у личинок с гомо- и гетерозиготной инверсией plu В2 по сравнению с личинками, гомозиготными по последовательности plu В1; уменьшение активности BR2G при возрастании числа гетерозиготных инверсий в кариотипе; изменчивость NO у личинок с разными генотипическими комбинациями (plu A1.2 D1.4 и plu B1.2D1.4, plu A1.2B1.2D1.4 и plu B1.2D1.4, plu A1.2B1.2 и plu B1.2D1.4), что указывает на индивидуальные особенности реакции особей на основе естественного генетического полиморфизма и свидетельствуют о работе генома как единой сбалансированной системы.

4. Выявлено, что атропин в остром периоде в целом снижает функциональную активность ПХ, а пилокарпин – повышает. Адекватно воздействию холинотропных препаратов меняются значения NOR и BRBR в отличие от BRGR и PВR, характер изменений которых не согласован. Показано, что наиболее чувствительным к воздействию холинотропных препаратов является компактность ПХ, наиболее устойчивым – индекс NOR.

5. Проанализированы цитогенетические эффекты холинотропных препаратов с противоположным действием на секрецию при их комбинированном влиянии. Значительный подавляющий функциональную активность ПХ эффект наблюдался, как при повышении концентрации атропина в смеси, так и добавлении раствора пилокарпина к атропину по сравнению с перемещением из атропина в пилокарпин. Увеличение концентрации холиноблокатора в смеси препаратов приводит к токсическому цитогенетическому эффекту.

6. Показана обратимость всех изменений функциональной активности NO, всех BR и пуфов даже после воздействия токсической концентрации пилокарпина, что подтверждает модификационный характер изменчивости морфологии ПХ, известный ранее для компактности.

СПИСОК РАБОТ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Полуконова Н.В., Фёдорова И.А. Эколого-кариологическая оценка последствий действия экологических факторов на хирономид (Chironomidae, Diptera) // Поволжский экологический журн. 2006. № 2/3. С. 164-175.

2. Фёдорова И.А., Полуконова Н.В. Оптимизация методов хромосомного мониторинга водных экосистем разного типа // Экологические проблемы урбанизированных территорий: материалы научн.-практ. конференции. Елец: ЕГУ им. И.А. Бунина. 2007. С. 151-155.

3. Полуконова Н.В., Белянина С.И., Фёдорова И.А. Методологические подходы к анализу генотоксичности // XXI Любищевские чтения. Современные проблемы эволюции (сборник докладов). Ульяновск: Ульяновский гос. пед. ун-т. 2007. С. 180-186.

4. Фёдорова И.А., Полуконова Н.В. Особенности цитогенетического анализа ткани слюнных желез личинок хирономид под воздействием холинотропных препаратов // Тезисы всероссийской научной конференции. Астрахань 20-22 сентября, 2007 г. Астрахань. 2007. С. 191.

5. Фёдорова И.А., Полуконова Н.В. Цитогенетические эффекты политенных хромосом хирономид под влиянием холинотропных препаратов // Тезисы XIII Международной школы-конференции молодых учёных «Биология внутренних вод». Борок, 23–26 октября 2007 г. Борок, 2007. С. 54.

6. Полуконова Н.В., Дёмин А.Г., Катаева И.В., Фёдорова И.А. Анализ сообществ, популяций и генома хирономид (Diptera) в биомониторинге гидроэкосистем // Тезисы 9-ой конференции (сессии стендовых сообщений) «Водные экосистемы, организмы, инновации – 9» МГУ. М. 2007 г. С. 102.

7. Фёдорова И.А., Полуконова Н.В. Реакция различных участков генома хирономид (Diptera) под действием атропина // Энтомологические и паразитологические исследования в Поволжье. Вып. 6. Саратов. Изд-во Сарат. ун-та. 2007. С. 65-73.

8. Фёдорова И.А. Цитогенетический анализ действия атропина // Материалы межрегиональной научно-практической конференции «Молодежь и наука: итоги и перспективы» Саратов. Изд-во Сарат. ун-та. 2007. С. 81.

9. Полуконова Н.В., Ермохин М.В., Воронин М.Ю., Дёмин А.Г., Катаева И.В., Фёдорова И.А., Козлов М.С. Биологический мониторинг водных экосистем на основе анализа сообществ, популяций, кариотипа и мтДНК хирономид (Chironomidae, Diptera) // Известия Саратовского гос. ун-та. Серия биологическая. 2007. С. 71-78.

10. Фёдорова И.А., Полуконова Н.В. Изменение транскрипционной активности политенных хромосом Chironomus plumosus (Diptera) под действием полулетальной концентрации атропина // Тр. Ставропольского отделения Русского энтомол. об-ва. Вып. 4: материалы Междунар. Научно-практ. конфер. Ставропольский гос. аграрный ун-т. Ставрополь: АРГУС. 2008. С. 269-273.

11. Фёдорова И. А., Полуконова Н. В. Динамика транскрипционной активности политенных хромосом и морфофункционального состояния личинок Chironomus plumosus (Chironomidae, Diptera) при разных концентрациях атропина // Материалы III Всероссийской конфер. по водной токсикологии, посвященной памяти Б. А. Флерова «Антропогенное влияние на водные организмы и экосистемы» Ч. 2. Борок. 2008. С. 172-175.

12. Фёдорова И. А., Полуконова Н. В. Цитогенетические эффекты холинотропных препаратов антагонистического действия // Материалы межрегиональной научно-практической конференции «Молодежь и наука: итоги и перспективы» Саратов. Изд-во Сарат. ун-та. 2008. С. 169.

13. Фёдорова И.А., Полуконова Н.В., Дворецкий К.Н., Богословская С.И.

Функциональная активность политенных хромосом Chironomus (Diptera) под влиянием холинотропных препаратов атропина и пилокарпина // Экологическая генетика. 2009, Т. 7. № 3. С. 44-52.

14. Фёдорова И. А., Полуконова Н. В., Петров Н. В. Цитогенетические эффекты холинотропных препаратов при комбинированном действии на личинок Chironomus plumosus (Diptera) in vivo // Цитология. 2009, Т. 51. № 10. С. 849-855.

Фёдорова Ирина Александровна

ХАРАКТЕР ИЗМЕНЕНИЯ ФУНКЦИОНАЛЬНО АКТИВНЫХ УЧАСТКОВ И КОМПАКТНОСТИ ПОЛИТЕННЫХ ХРОМОСОМ CHIRONOMUS (DIPTERA) ПОД ВЛИЯНИЕМ ХОЛИНОТРОПНЫХ ПРЕПАРАТОВ

Автореферат

_______________________________________________________________

Подписано к печати 16.10.2009г.

Формат 60х84/16. Бумага офсетная. Печать офсетная.

Гарнитура «Таймс». Усл.печ. л. 1,16 (1,25).

Тираж 100. Заказ № 893.

_________________________________________________________

Отпечатано с оригинал-макета

в ООО «Принт-Клуб»

410026, г.Саратов, ул.Московская 160. Тел.: (845-2) 507-888


- использование личинок 7 фазы обусловлено повышением титра гормона линьки – экдизона к стадии предкуколки (Кикнадзе, 1978), способного кратковременно увеличивать концентрацию м-холинорецепторов (Wegener et al., 1996) и обеспечивать повышенную чувствительность слюнных желез к воздействию препаратов этой группы

* - содержание личинок при экотоксикологических исследованиях в стандартном грунте-смеси песка и ила (1:1), приведенном во Временном методическом руководстве (2002), на наш взгляд, нецелесообразно при тестировании лекарственных препаратов т.к., с одной стороны, большинство из них в открытые водоемы и грунт не попадают, а, с другой, - адсорбция препарата на поверхности частиц ила приводит к снижению его концентрации в воде и, в конечном счёте, искажению результатов

- звездочкой отмечены индексы, обозначения для которых предложены нами

- изменение значения индекса компактности обратно пропорционально изменению функциональной активности ПХ

Pages:     | 1 |   ...   | 2 | 3 ||






© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»