WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

загрузка...
   Добро пожаловать!

Pages:     | 1 | 2 || 4 |

Вероятность сходства дисперсий в контроле и в эксперименте при р0.05

CR

5,96

4,57

<0.01

NОR

0,49

0,44

0.02

BRBR

0,17

0,12

<0.01

BR2GR

0,2

0,04

<0.01

PBR

0,05

0,04

<0.01


Влияние акклимации

Для ПХ зимних личинок после акклимации характерны: повышение функциональной активности всех BR, увеличение количества работающих BR ПХ IV и PB и измененная картина пуфинга. Стабильно, в 100% из 500 клеток, как у зафиксированных у проруби личинок, так и акклимированных работал NО; число активных BR ПХ IV и PB повышалось (табл. 4). По индексам CR, NОR, PBR достоверных различий не обнаружено.

Таблица 4

Число работающих активных участков ПХ во время акклимации личинок

Показатель работает, %

BRBR

BR1GR

BR2GR

PBR

У личинок, зафиксированных у проруби

24

85

48

9

У акклимированных личинок

23

91

72

12

Активность политенных хромосом в контроле и под действием препаратов

Определены границы значений индексов функциональной активности и число работающих активных участков ПХ личинок в контроле и эксперименте при действии холинотропных препаратов (табл. 5, 6). Наиболее вариабельным является индекс компактности.

Таблица 5

Значения индексов активности ПХ в контроле и эксперименте

Индексы активности ПХ

контроль

атропин

пилокарпин

CR

4.60-18.00

5.00-16.67

4.60-22.00

NOR

1.00-5.00

1.00-5.00

1.00-5.00

BRBR

1.00-3.00

1.00-2.67

1.00-2.75

BR1GR

1.00-2.50

1.00-2.50

1.00-2.00

BR2GR

1.00-3.00

1.00-2.67

1.00-2.00

PBR

1.00-2.67

1.00-2.67

1.00-2.50

Таблица 6

Число работающих активных участков ПХ в контроле и эксперименте

Индексы активности ПХ

контроль, %

атропин, %

пилокарпин, %

NOR

98

97

99

BRBR

41

30

70

BR1GR

13

9

54

BR2GR

24

10

19

PBR

14

12

13

Глава 4. ДИНАМИКА ФУНКЦИОНАЛЬНОЙ АКТИВНОСТИ ПОЛИТЕННЫХ ХРОМОСОМ ПОД ДЕЙСТВИЕМ АТРОПИНА И ПИЛОКАРПИНА

Динамика активности участка ПХ связана с его функциональной ролью: NO - участок, участвующий в поддержании клеточного гомеостаза, и компактность ПХ рассматриваются как показатели «общих» функций (Ильинская, 1990; Зацепина, 2007), а BR, характерные для клеток ряда органов двукрылых насекомых и ответственными за выработку секрета слюнными железами, как показатели «специфических функций» (Кикнадзе, 1972; Жимулёв, 1992).

Активность NO в момент первичного отклика (к 12 ч) при действии атропина снижалась, пилокарпина – возрастала (рис. 1). При увеличении продолжительности влияния и атропина, и пилокарпина происходило восстановление активности NO до состояния в контроле, что в целом характеризует этот участок как устойчивый к стрессовому воздействию.

I

II

Рис. 1. Изменение индекса NOR под влиянием: I - атропина, II – пилокарпина.

Снижение функциональной активности ПХ по индексу компактности - CR

7 под действием атропина выявлено к 72 ч (рис. 2.I). В момент же первичного отклика активность резко повышалась, что свидетельствовало о включении краткосрочных механизмов клеточной гиперкомпенсации, которого при продолжительном воздействии было недостаточно для сохранения гомеостаза. При действии пилокарпина характер изменений функциональной активности ПХ был прямо противоположным: в момент первичного отклика происходило ее резкое снижение, повышение же отмечалось к 72 ч (рис. 2, II). Результаты свидетельствуют об изменении компактности ПХ, как одного из наиболее чувствительных показателей отклика интерфазного ядра на воздействие.

I

II

Рис. 2. Изменение индекса компактности под влиянием: I - атропина, II – пилокарпина

Активность BRB под действием атропина снижалась (рис. 3-5, I), - BRB, BR1G, BR2G под действием пилокарпина - увеличивалась (рис. 3-5, II), что свидетельствовало о подавлении работы участков, ответственных за секрецию желез под действием атропина и активации под действием пилокарпина, соответственно фармакологическим особенностям влияния этих препаратов на секреторную деятельность слюнных желез. При влиянии атропина, подавляющего секреторную активность желёз, отмечалось угнетение работы BR, участвующих в синтезе тканеспецифических гликозилированных белков секрета. При влиянии пилокарпина, стимулирующего секрецию, активность BR, напротив, возрастала. Характер изменения активности BR при действии холинотропных препаратов коррелировал с реакцией NO.

I

II

Рис. 3. Изменение индекса BRBR под влиянием: I - атропина, II–пилокарпина

I

II

Рис. 4. Изменение индекса BR1GR под влиянием: I–атропина, II–пилокарпина

I

II

Рис. 5. Изменение индекса BR2GR под влиянием: I - атропина, II–пилокарпина

Активность PB в диапазоне исследованных концентраций атропина, не вызывающих летальный эффект у личинок, незначительно изменялась в момент первичного отклика, в отличие от действия пилокарпина (рис. 6). При увеличении экспозиции пилокарпина в концентрации, вызывающей летальный эффект у личинок, равновесие смещалось в сторону снижения активности ПХ. О токсичности препарата на субклеточном уровне может свидетельствовать неадекватная реакция PB.

Атропин и пилокарпин индуцировали появление пуфов de novo, не отмеченных в контроле. Под действием атропина возникали пуфы IА6с-а+7a-l, IA10c-v, IA11s-w+12a-q, IID14z-a+13w-k, пилокарпина–IIC14-15, IIIF13n-p14a-e. При всех исследованных концентрациях и экспозициях препаратов пуфинговая активность возникала у единичных особей и изменялась произвольно.

I

II

Рис. 6. Изменение индекса PBR под влиянием I - атропина, II – пилокарпина

Сравнительный анализ действия LC50 атропина и пилокарпина

Функциональная активность ПХ по индексу компактности при LC50 атропина в целом повышалась, в то время, как работа всех активных участков ПХ была понижена. При действии LC50 пилокарпина отмечалось повышение активности NO и BRB. Повышение активности NO и функциональной активности ПХ по CR отражает отсутствие резкого угнетения деятельности интерфазного ядра под действием заведомо токсичной концентрации препарата. Снижение активности BR и PB свидетельствует о подавлении работы участков, ответственных за секрецию слюнных желез.

Глава 5. ЦИТОГЕНЕТИЧЕСКИЕ ЭФФЕКТЫ АТРОПИНА И ПИЛОКАРПИНА ПРИ КОМБИНИРОВАННОМ ДЕЙСТВИИ

Проведенный анализ функциональной активности ПХ слюнных желез при одновременном действии пилокарпина и атропина на личинок Ch. plumosus in vivo подтвердил закономерность наступления сначала холиномиметического, а затем типичного холиноблокирующего эффекта, что вполне согласуется с данными, полученными при действии этих препаратов на слюнные железы других биологических объектов (Левин, Высотский, 1949; Levin, 1992). Пилокарпин, как агонист м-холинорецепторов, раньше связывался с ними, а антагонистические свойства атропина проявлялись позже, что, возможно, обусловлено различиями этих препаратов по химической структуре и характеру межмолекулярного взаимодействия с аминокислотами в составе м-холинорецепторов (Samarskii, 1996). Повышение функциональной активности ПХ по по индексу компактности через 24 ч при перемещении личинок в раствор пилокарпина (4) после предварительной обработки атропином (раствор 2) свидетельствовало о включении краткосрочных механизмов клеточной адаптации в ответ на стрессовое воздействие (рис. 7). Снижение функциональной активности ПХ по индексу компактности в последующие 2 сут при предварительной обработке атропином (растворы 2 и 3) объяснялось недостаточностью краткосрочного толчка для сохранения гомеостаза и истощением компенсаторных механизмов. Выявленный нами характер изменений значений CR позволяет говорить о чувствительности этого показателя при стрессовом воздействии.

Рис. 7. Изменение индекса компактности при воздействии холинотропных препаратов in vivo. Обозначения в тексте.

На основе динамики работы NO отмечен нами как устойчивый при стрессовом воздействии. Так, после кратковременного снижения активности NO через 24 ч равновесие в работе этого активного участка восстанавливалась при перемещении из раствора 3 в раствор 4 через 48–72 ч (рис 8).

Рис. 8. Изменение индекса NOR при воздействии холинотропных препаратов in vivo. Обозначения в тексте.

Снижение активности NO при добавлении раствора 4 к раствору 3 при всех экспозициях свидетельствовало об угнетении его работы под действием смеси препаратов с более высокой концентрацией атропина.

О снижении компенсаторных реакций свидетельствовало также подавление активности BR1G через 24 ч и 72 ч и - BR2G через 24 ч после перемещения из атропина (растворы 2 и 3) в пилокарпин (4) (рис. 9, 10).

Рис. 9. Изменение индекса BR1GR при воздействии холинотропных препаратов in vivo. Обозначения в тексте.

Рис. 10. Изменение индекса BR2GR при воздействии холинотропных препаратов in vivo. Обозначения в тексте.

Отмечено увеличение активности BRB и PB Ch. plumosus, как участков, ответственных за синтез секрета слюнных желез, вслед за его выведением под влиянием пилокарпина, - BR1G через 72 ч и PB с 24 до 48 ч после перемещения из раствора 3 в раствор 4 (рис 9, 11). Наблюдаемый нами цитогенетический эффект согласуется с данными Валеевой (1975) по особенностям действия пилокарпина на ПХ другого вида Chironomus - Ch. thummi (= Ch. riparius).

Рис. 11. Изменение индекса PBR при воздействии холинотропных препаратов in vivo. Обозначения в тексте.

О токсическом действии смеси атропина и пилокарпина свидетельствовало снижение: функциональной активности ПХ по по индексу компактности через 48 ч; функциональной активности BRВ при всех экспозициях (рис. 12); активности BR1G и BR2G через 24 ч при добавлении раствора 4 к раствору 2 и функциональной активности ПХ по по индексу компактности через 48 ч; а также снижение активности BRВ и BR2G через 24 ч; - BR1G с 24 ч до 48 ч; PB через 72 ч при добавлении раствора 4 к раствору 3.

Рис. 12. Изменение индекса BRВR при воздействии холинотропных препаратов in vivo. Обозначения в тексте.

Pages:     | 1 | 2 || 4 |






© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»