WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

загрузка...
   Добро пожаловать!

Pages:     | 1 || 3 |

Для наблюдения за динамикой эпителизации и оценки площади дефекта эпителия роговицы оценивали с помощью фокального освещения, биомикроскопии, фоторегистрации (цифровой фотокамерой «Nicon»), флюоресцеинового теста. Характер и динамику течения язвенного процесса, а так же эффективность проведенного лечения оценивали по следующим клиническим параметрам: отсутствие воспалительной реакции, сроки исчезновения микрофлоры, отсутствие гнойного отделяемого, сроки начала и завершения эпителизации, степень помутнения роговицы, наличие в ней новообразованных сосудов, сроки выздоровления, количество и характер осложнений.

Для количественной оценки степени помутнения роговицы использовали 5-ти бальную шкалу (разработанную Т.Н. Вовк): 5 –грубое помутнение роговицы с наличием разветвленной сосудистой сети; 4 - выраженное помутнение роговицы, захватывающее оптическую зону и занимающее от до поверхности с выраженными сосудами; 3 – менее выраженное помутнение роговицы, охватывающее часть оптической зоны и не превышающее по площади поверхности с врастанием сосудов по перефирии; 2 – незначительное полупразрачное помутнение роговицы, охватывающее часть оптической зоны, врастание сосудов от зоны лимба до до 2-3 мм в одном или двух квадрантах; 1 – практически прозрачная роговица с единичными запустевшими сосудами у лимба.

Сроки исчезновения микрофлоры определяли методом забора отделяемого из конъюнктивальной полости и язвенного дефекта роговицы а дальнейшим посевом на дифференциально-диагностические среды и окончательной идентификацией микрофлоры по стандартным схемам с определением чувствительности к антибиотикам.

Переносимость препаратов, используемых в эксперименте, оценивали по общему состоянию экспериментальных животных (поведение, нарастание массы тела, наличие или отсутствие аппетита).

Характеристика применяемого в работе биологически активного гидрогеля и методика его исследования

Для реализации методологии местного лечения раневых поверхностей в хирургии разработано и разрешено к медицинскому применению принципиально новый биологически активный антимикробный гель «Апполо» рег. удост. МЗ РФ №29/1111299/0869-00 от 29.08.2000) с обезболивающим и антимикробным действием.

Гель антимикробный "Апполо" представляет из себя гидрогель с введенными в его состав препаратами: мирамистином (антисептиком) и анилокаином (анестетиком). Гидрогелевая основа антимикробного геля «Апполо» содержит акриламид, и/или акрилат натрия, биологически активные вещества, поливинилпирролидон, глицерин, пропандиол и воду. Гель упакован в пакетик или тубу из материала с высокими барьерными свойствами, стерилизован.

Определение кинетики выведения препаратов из гидрогеля определяли методом оценки временной зависимости выделения физиологически активных веществ (красителя конго красного) из гелевой субстанции при температуре 37С и исходной концентрации - Со= 0,08 мг/мл.

Изучение сорбционых свойств гидрогелевой основы и антимикробных свойств гидрогелевой композиции проводили путем определения скорости уничтожения бактериальных клеток через 1, 5 и 24 часа после инкубирования в термостате при Т 370С микробиологическим методом с последующим количественным подсчетом колоний микробов по стандартной методике.

Методика выявления распространенности возбудителей язвы роговицы

С целью выявления распространенности различных видов возбудителей было обследовано 192 пациента в возрасте от 19 до 83 лет с язвами роговицы различной этиологии, с проведением лабораторной диагностики – посевов и мазков из конъюнктивальной полости на флору и чувствительность.

Методы статистической обработки результатов исследования

При обработке полученных данных применены методы вариационной статистики и программа Microsoft Excel с вычислением средней арифметической (), средней ошибки средней арифметической (m), определением критерия достоверности Стьюдента (t) и уровня значимости (р).

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

При создании экспериментальной модели нами использован роговичный трепан диаметром 7,5 мм, в отличие от ранее используемых моделей с диаметром 3, 4, 5 мм, при этом глубина язвенного дефекта составляла толщины роговицы. При этом значительная площадь раны позволяла изучать процессы эпителизации в течение длительного времени, давая возможность наблюдать процесс эпителизации дефекта, заживления и структуризации всех слоев роговицы в течение длительного времени.

В то же время, анализируя полученные данные по распространенности выделенных возбудителей следует отметить, отметить определенную тенденцию к росту удельного веса таких возбудителей, как Pseudomonas aeruginosa (12,0%) и Enterobacter (8,9%), однако на первом месте остаются Staphylococcus epidermidis (18,2%) и Staphylococcus aureus (24,5%).

В связи с чем, эрозированную зону роговицы подопытных животных инфицировали штаммом Staphylococcus aureus, т.е. наиболее распространенным возбудителем по результатам исследования распространенности возбудителей у пациентов с язвой роговицы в клинических условиях.

Оценка временной зависимости скорости выделения водорастворимых физиологически активных веществ, в данном случае красителя (конго красный) из объема гелевой субстанции показала, что в первые 30 мин. происходит достаточно быстрое выделение водорастворимого красителя из объёма гидрогелевой основы с последующим плавным нарастанием эффекта к 6-12 часам. Далее, происходит снижение скорости выделения красителя в течение нескольких суток, что обеспечивает пролонгированный дозируемый эфффект предварительно введенных в объем гидрогелевой основы повязки водорастворимых физиологически активных веществ (рис №1).

Для решения вопроса о возможности адекватной замены антибактериальных препаратов в лечении бактериальной язвы роговицы нами были проведены сравнительные исследования антимикробной активности исследуемого геля «Апполо», антисептика мирамистин в нативном состоянии и препарата офлоксацин, к которому отмечается самая высокая чувствительность штамма Staphylococcus aureus (табл.№1).

Таблица№1

Сравнительная характеристика антимикробной активности офлоксацина, мирамистина и биологически активного геля «Апполо»

Вид (тип)

возбудителя

Кол-во штаммов

Минимально ингибирующие концент

рации антимикробных ср-в, мкг/мл

Офлоксацин

мирамистин

Гель «Апполо»

Staphylococcus aur.

28

1,56 -12,5

3,12-25

0,78 - 12,5

Escherichia coli

17

3,12 - 50

3,12-50

1,56 – 25

Proteus spp

22

1,56 - 100

3,12-50

1,56 – 50

Enterobakter aer.

9

3,12 - 50

6,25-100

1,56 – 50

Psenolomonas aer.

15

1,56 - 100

3,12-100

0,78 – 50

Klebsiella spp.

8

6,25 - 50

4,68-50

3,12 – 25

Из полученных данных видно, что антимикробная активность иммобилизованного в гидрогеле антисептика мирамистин (т.е. в препарате «Апполо»), превосходит его антимикробную активность в нативном состоянии, и что особенно важно, в большинстве случаев превосходит антимикробную активность антибактериального препарата офлоксацин.

Для выяснения причины обнаруженного повышения антимикробной активности антисептика мирамистин в гидрогелевой композиции были изучены антимикробные свойства самой гидрогелевой основы, не содержащей лекарственных веществ (рис.№2).

Как видно из диаграммы, гидрогелевая основа повязки обладает сорбционными свойствами в отношении микроорганизмов, зависящими как от времени контакта, так и от вида изученных возбудителей. Максимальный сорбирующий эффект биологически активной гелевой основы отмечен через 5 часов.

На основании полученных экспериментальных данных было установлено, что гидрогелевая основа геля «Апполо» обладает выраженной антимикробной активностью в отношении таких возбудителей, как Staphylococcus aur., Escherichia coli, Proteus spp, Enterobakter aer., Psenolomonas aer., и Klebsiella spp, в результате чего иммобилизация в гидрогель антисептика (мирамистин) позволяет не только сохранить, но в некоторых случаях существенно увеличить антибактериальную активность антисептических препаратов по сравнению с антибактериальными препаратами.

Полученные результаты, позволили использовать антимикробный гель «Апполо» в качестве основного метода лечения язвы роговицы в эксперименте (без дополнительного применения антибактериальных препаратов).

Клиническую картину течения язвенного процесса роговицы у экспериментальных животных оценивали ежедневно.

Через сутки после моделирования язвенного дефекта роговицы и заражения штаммом Staphylococcus aureus, в опытных и контрольной группах кроликов наблюдалась однотипная клиническая картина: выраженная гиперемия конъюнктивы по всей поверхности, обильное гнойное отделяемое, при проведении флюоресцеиновой пробы – окрашивание дефекта эпителия диаметром 7,5 мм.

Однако на 3-и сутки после начала лечения в глазах у кроликов I и II опытных групп в подавляющем количестве случаев отсутствовало гнойное отделяемое в конъюнктивальной полости, незначительная гиперемия конъюнктивы. У кроликов контрольной группы, сохранялась выраженнная гиперемия конъюнктивы и обильное гнойное отделяемое.

Воспалительная реакция практически полностью купировалась в опытных группах в среднем на 9- 10 сутки, причем существенной разницы по данному показателю между опытными группами отмечено не было (р>0,05), В контрольной группе кроликов на 10-е сутки сохранялись признаки воспаления.

Сравнительная характеристика клинических проявлений течения язвы роговицы по группам показала существенное снижение сроков исчезновения гнойного отделяемого в опытных группах, которые составили 1,5±0,2 дня в I-ой основной группе и 1,3 ±0,1 дня во II-ой контрольной группе (p>0,05 между показателями в опытных группах) по отношению к контрольной группе 5,4±0,8 дня, (р<0,05 по отношению к опытным группам). Сроки исчезновения воспалительной реакции, составили 7,8 ±0,7 и 7,2±0,7 в I и II опытных группах соответственно и 12,5±0,2 в контрольной группе (р<0,05 по сравнению с опытными группами).

При проведении флюоресцеинового теста, было выявлено, что полная эпителизация язвы роговицы в I-ой опытной группе наблюдалась в сроки с 8 до 11 день, во II-ой опытной группе – с 7 по 10 день, в контрольной группе - с 11 по 15 день. Средний срок эпителизации составил 9,6±0,4, 8,1±0,3 и 14,3±0,2 дня соответственно. Следует отметить существенное снижение сроков эпителизации в опытных группах не только по отношению к контрольной группе (р<0,05 по сравнению с I опытной группой, p<0,01 по сравнению со II опытной группой), а так же достоверно значимое снижение сроков эпителизации во II-ой опытной группе по отношению к I-ой опытной группе (р<0,05)(рис.№3).

Исчезновение микрофлоры в мазках и посевах колебались от 4 до 8 дней в опытных группах и от 6 до 10 дней в контрольной группе, средние показатели составили 6,7±0,1 дня в I-ой опытной группе, 6,5±0,3 дня во II контрольной группе и 8,2±0,2 дня в контрольной группе, средний срок выздоровления в группах составил 15,9±0,6, 12,5±0,3 и 21,1±0,2 дня соответственно (р<0,05) (табл.№2).

Таблица №2

Средние показатели течения патологического процесса по группам (cутки)

Изучаемые параметры

I опытная группа

II опытная группа

Контрольная группа

Сроки исчезновения гнойного отделяемого

1,5 ±0,2*

1,3 ±0,1*

5,4±0,8

Сроки эпителизации

9,6 ±0,4*

8,1 ±0,3**•

14,3± 0,5

Сроки исчезновения воспалительной реакции

7,8 ±0,7*

7,2 ±0,7*

12,5± 0,2

Сроки исчезновения микрофлоры

6,7±0,1*

6,5±0,3*

8,2±0,2

Сроки выздоровления

15,9±0,6*

12,5±0,3**•

21,1±0,2

*р<0,05 по сравнению с контрольной группой, **р<0,01 по сравнению с контрольной группой, •р<0,05 по сравнению с I опытной группой

Pages:     | 1 || 3 |






© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»