WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

загрузка...
   Добро пожаловать!

Pages:     | 1 |   ...   | 6 | 7 || 9 | 10 |   ...   | 11 |

Не более 5%

Срок годности

4часа

Испытание препарата настерильность и пирогенность проводилив лаборатории технологии иметодов контроля радиофармпрепаратов ФГУПГНЦ РФ - Институт биофизики и испытательномлабораторном центре ЦНИИэпидемиологии. Все сериипрепарата были стерильнымии апирогенными. Одновременно на кро­ликах оценивалиреакцию на внутривенное введениепрепарата (срок наблюдения - 48 часов).Экспериментальная оценкафункциональной пригодности и безвредностипрепарата «Альбумин,99мТс» была проведенав той же лаборатории на крысах. Былисделаны следующие выводы:

  1. Препарат «Альбумин,99мТс»достаточное времянаходится в сосудистом русле в количестве,которое позволяет адекватно оценитьобъем циркулирующей крови иплазмы.
  2. По своим фармакокинетическимхарактеристикам РФП «Альбумин,99мТс» неотличается от других препаратов альбумина,разрешенных к клиническомуприменению.
  3. Препарат рекомендуется хранить неболее 4 часов.
  4. Радиофармпрепарат «Альбумин,99мТс» невызывают у животныхнежелательных реакций при внутривенномвведении и является безвредным.
  5. Реагент и РФП «Альбумин, 99мТс» могут бытьрекомендованы для клиническогоизучения.

4. Разработка методованализа субстанции ОЭДФ,реагента

и РФП на основеОЭДФ

Разработана схемахимико-фар­­ма­цевтического анализа субстанции ОЭДФ,включающая определе­ние следующих показателей: описание,растворимость, подлиннос­ть, температураплавления, прозрачность и цветностьраствора, рН 1%-ного раствора, посторонниепримеси, сульфатная зола, тяжелые металлы,остаточные органические растворители,коли­чес­твен­ное определение,микробиологическая чистота, упаковка,маркировка, хра­не­ние,срок годности.

ОЭДФ представляет собойпорошок белого или почти белого цве­та.

Субстанция (ОЭДФ) оченьлегко растворима в воде; легко рас­т­во­ри­­ма в метиловом иэтиловом спиртах; очень мало растворима ваце­то­не и эфире.

Для доказательстваподлинности субстанции разработаныметодики: ПМР, ЯМР 31Р; ИК-спектроскопии*. В спектреПМР субстанции ОЭДФ присутствует четкийсимметричный триплет в области = 1,6 ± 0,02 м.д., вспектре ЯМР 31Р– синглет вобласти = 20,38 ± 0,02 м.д.

В ИК-спектре ОЭДФнаблюдаются интенсивные полосы поглощенияв об­ласти 1190– 1120 см-1, относящиеся кколебаниям фосфори­ль­ногокислорода (Р=О ), в области 930см-1 (s Р-ОH ) и 1030 – 1020 см-1 (asР-ОH ), а также при 960 см-1, ответственные заколебание связей в груп­пах Р-ОН и Р-(ОН)2.

Разработана методикаопределения подлинности ОЭДФ с помощьюбу­­маж­ной хроматографии посовпадению величин Rf в сравнении со стан­дартом. Хро­матографированиепроводили на бумаге FN 17 1012 см всистеме н-бутанол – пиридин – этанол – вода, взятых по объему в со­от­ношении 1 : 0,5 : 1 : 4,восходящим способом. После проявленияхроматограммы обнаружились пятна ОЭДФ– белые нарозово-корич­не­вомфоне с Rf = 0,77 ±0,02 (n = 9; P = 0,95).

Был проведен элементныйанализ** для субстанции ОЭДФ (две па­рал­ле­ль­ные пробы). Найдено, %:С – 11,31; 11,46; Н– 3,92; 4,17; Р– 30,04; 29,96.Вычислено, %: С – 11,65; Н –3,88; Р –30,06.

Температура плавленияОЭДФ составила 198-199 оС.

1%-ный водный растворОЭДФ –прозрачный и бесцветный.

Значение рН 1%-ноговодного раствора ОЭДФ изменяется от 1,5 до2,0.

Потерю массы привысушивании определяли при нагреваниина­вес­ки ОЭДФ массой около1,0 г (точная навеска) до 100-105 оС в сушиль­ном шкафу. Потерямассы при высушивании не превышала0,5%.

Содержание сульфатнойзолы из 1 г (точная навеска) субстанции ОЭДФне превышала 0,01% и выдерживала испытание насодержание тяжелых металлов в зольномостатке – неболее 0,001%.

Поскольку на последнейстадии очистки субстанции ОЭДФ ис­по­ль­­зуют ацетон, то быларазработана методика определенияостаточ­но­гоорганического растворителя (ацетона)методом ГЖХ*** с использо­ва­­­ни­ем внешнегостан­дар­та(ацетонитрила). Содержаниеацетона в пре­па­рате– не более 0,5%.

_____________________________________________________________________

* Методики ПМР и ЯМР31Рразработаны нами совместно с к.х.н.Стручковой М.И. и к.х.н. Игнатен­ко А.В., Ин­ституторганической химии РАН им. Н.Д. Зелинского.Методика ИК-спектроскопии разработананами сов­местно с к.х.н. Сенявиным В.М.,Московский государственный уни­вер­ситет им. М.В.Ломоносова.

** Элементный анализвыполнен к.х.н. Анисимовой Г.Ф., Институторганической химии РАН им. Н.Д.Зелинского.

Разработана методикаопределения ОЭДФ в субстанции. Методиказак­лю­ча­е­тся в «мокром»озолении субстанции смесьюконцентрирован­ных серной и хлорной кислот дофосфат-ионов с последующим спек­трофотометрическимопределением в виде «желтого» фос­форно­ва­­надиевомолибде­но­во­­­го комплекса (ФВМК).Для доказательства то­го, что разложениеорганической матрицы идет до фосфат-ионов,в ка­чествестандарта использовали КН2РО4. В процессерабо­тыус­та­нов­ле­ны: оптимальное времяразложения (30-35 мин.), температура раз­ло­же­ния (250-350 С). Подобранынеобходимые для раз­ложения коли­че­с­тва прибавляемых кислот(концентрированной сер­ной кислоты – 2 мл, кон­цен­т­ри­рованной хлорнойкислоты – 0,35мл). После разложения фосфат-ионыпереводили в «желтую» форму ФВМК при­­бавлениемванадомолибденовой смеси.

Установлено, чтоположение максимумов в спектрахпоглощения ста­н­дарта(КН2РО4) и ОЭДФ послеразложения совпадает – при 350±2 нм. Графикизави­симостиоптической плотности от концентрациифосфора в растворе, с учетом относительныхошибок, линейны и нак­ла­дываются друг на друга: у = 0,2х ± 0,03; r = 0,9971 (КН2РО4); у = 0,2х ± 0,04; r = 0,9971 (ОЭДФ).Следовательно, разложение субстанциипроисходит полностью до фосфат-ионов.Выполнение закона Бу­ге­ра-Ламберта-Беера наблю­да­ет­ся в интервалеконцентраций фос­фо­ра от1,0 до 3,8 мкг/мл. Молярные коэффициентыпо­га­ше­ния КН2РО4 и ОЭДФ практическисовпадают: 6720±156 л/моль.см (КН2РО4), 6707±92 л/моль.см (ОЭДФ). Пределобнаружения фосфора по данной ме­то­дике составляет 0,1мкг/мл. Относительная ошибка определенияне пре­вы­шает± 3,6%. Cодержание ОЭДФ в субстанции – не менее 98,0% и неболее 100,5% в пе­ресчете на сухое вещество.

Исследованастабильность ОЭДФ в процессе хранения.Субстанция ОЭДФ хранится в течение 1 годапри температуре не выше 25 оС без из­­­­­­­менения еесвойств (исследования продолжаются).

Характеристики и нормыпоказателей качества субстанции ОЭДФпред­с­тав­лены в табл. 17.

Реагентпредставляет собой стерильный,апирогенный лиофилизат, сос­то­ящий из 10 мг ОЭДФ и 20мкг олова(II), хранящийся в укупорен­­ных и зава­льцо­ванных флаконах.

С учетом ОСТ «Стандартыкачества лекарственных средств.Осно­в­ные поло­жения» разработанасхема химико-фар­ма­­­цевтического анализа реагента дляприготовления РФП «ОЭДФ,99mTc». Она включаетопре­делениеследующих показателей: описание,растворимость, подлинность, проз­рач­ность и цветностьраствора, рН, стерильность, пирогенность,количест­вен­ноеопределение олова(II) и ОЭДФ, упаковка,маркировка, транспортирование, хранение,срок годности.

По внешнему виду реагент представляетсобой лиофилизат белого или почти белогоцвета. Реагент полностью растворим в 0,9%растворе хло­ри­­данатрия в те­че­ние 10секунд в этом раство­ри­те­ле иоб­разуетбесцветный и проз­ра­ч­­ныйраствор.

Для установленияподлинности реагента разработаныметодики, поз­воляющие надежно идентифицироватьего. 1) ИК-спектр испыту­е­мо­го образца в таблеткес KВr в области от 4000 до 400 см-1 должен сов­падать с прилагаемымрисунком спектра по положению полос и ихот­носительныминтенсивностям. 2) Цветные реакции: а) пообразова­ниюсинего комплекса при взаимодействии раствора реагента(в 0,9%­ хлориденатрия) с СоСl2в щелочной среде;

*** Методикаопределения остаточных органическихрастворителей методом ГЖХ быларазра­бо­та­нанами совместно с к.х.н. Хомушку Г.М, НПО«Тайфун» (г. Обнинск).

Таблица 17. Характеристики инормы показателей качества субстанцииОЭДФ

Показатели

Методы анализа

Нормапо

Стандартупредприятия

Описание

Визуальный

Белый или почти белыйпорошок

Растворимость

ГФ XI

Очень легко растворим в воде, легкорастворим в CH3OH,

96% C2H5OH

Подлинность

ПМР

ЯМР 31Р

Спектры испытуемого истандартного растворов должны совпадатьпо положению химических сдвигов и ихотносительным интенсивностям.

ИК-спектроскопия

Элементный анализ

ИК-спектры испытуемого истандартного образцов должны совпадатьпо положению полос и их относительныминтенсивностям.

С – 11,31%; Н – 3,92%; Р – 30,04%.


Цветные реакции


а) по образованию синегокомплекса при взаимодействии ОЭДФ сСоСl2 вщелочной среде;

б) по образованиюжелтого соединения при взаимодействииОЭДФ с Н2О2 имолибдатом аммония в кислой среде.

Прозрачность и цветность 1%-ногораствора

ГФ XI

Прозрачный, бесцветный

рН 1%-ного раствора

ГФ XI,потенциометрический

1,5- 2,0

Температура

плавления, оС

ГФ XI

198– 199

Потеря массы при

высушивании

ГФ XI

неболее

0,5%

Содержание

сульфатной золы

ГФ XI

неболее

0,01%

Содержание

тяжелых металлов

ГФ XI

неболее

0,001%

Посторонние

примеси

Бумажнаяхроматография

Единичной примеси не более 0,5%,сумма примесей - не более 2%

Количественное

определение

Спектрофотометрический

От98,0% до 100,5%

Микробиологическая

чистота

ГФ XI

Изм. 3, категория 1.2

Остаточные органическиерастворители (ацетон)

  • ГЖХ
  • не более 0,5%

    Условия хранения

  • Стандарт предприятия
  • При t 25 °С,

    в сухом, защищенном отсвета месте

    Упаковка

  • Стандарт предприятия
  • По 10 г во флакон из темногостекла.

    Маркировка

  • Стандарт предприятия
  • На этикетке указываютпредприятие-изготовитель и его товарныйзнак, название препарата на русском языке,количество, условия хранения, номерсепии, срок годности.

    Срок годности

  • Стандарт предприятия
  • 1 год

    б) раствор, приго­товленный дляколичественного определения олова(II),должен быть ок­рашен в светло-желтый цвет.

    Для определениявеличины рН раствора реагента в 5 мл 0,9% изо­тонического растворахлорида натрия использовалипотенциометрический ме­тод. Величина рНраствора экспериментальных образцовреа­гентаизменялась от 2,0 до 3,5.

    Разработку методикиопределения ОЭДФ в реагентепредварите­ль­нопрово­дили намодельных смесях, а затем наэкспериментальных се­риях реа­ген­та.При определении ОЭДФ в модельных смесях,реагенте, как и в суб­с­танции, на стадии пробоподготовкибыло проведено разложение ор­га­нической матрицыконцентрированными серной и хлорнойкисло­та­ми до фосфат-ионов.Подоб­ра­ны оптимальное времяразложения, тем­пе­ратура разложения, количествопри­бавляемыхкислот. После раз­ло­же­нияфосфат-ионы переводили в «желтую» формуФВМК при­ба­в­ле­ни­емванадомолибденовой смеси. Максимумыпогло­ще­ния в спектрахрас­т­воров ФВМК (дляКН2РО4, ОЭДФ, модельныхсмесей) сов­падают (при 350±2 нм); молярныекоэффициенты погашения также прак­ти­чес­ки совпадают: 6720±156л/мольсм(КН2РО4), 6707±92 л/мольсм (ОЭДФ), 6667±613л/мольсм(модельная смесь). Присутствие Sn(II) вколичестве 20 мкг не влияет на определениеОЭДФ.

    Результаты валидацииметодики определения ОЭДФ в модельныхсмесях при­ведены в табл. 18.

    Таблица 18. Валидация методикиопределения ОЭДФ

    (в пересчете на фосфор)в модельных смесях

    Валидируемые параметры

    Pages:     | 1 |   ...   | 6 | 7 || 9 | 10 |   ...   | 11 |






    © 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»