WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

загрузка...
   Добро пожаловать!

Pages:     | 1 |   ...   | 2 | 3 || 5 | 6 |   ...   | 11 |

Содержание олова,

мкг/мг МСА

Относительная

Накопление

в легких

NN МСА(Sn)

Введено

Найдено

активность 99м Тс,

99м Тс-МСА(Sn)

через 3 мин


Sn(II) в реак-цию с МСА

Sn(II)

Общееолово

не связанного с

МСА(Sn), %

послеинъекции,

%

1

10

2,5 ± 0,1

2,9 ± 0,1

0,2

94,6 ± 1,2

2

15

6,2 ± 0,2

7,2 ± 0,3

0,7

96,6 ± 0,4

3

20

8,6 ± 0,3

8,7 ± 0,3

0,8

93,7 ± 0,5

4

25

10,2 ± 0,3

12,3 ± 0,5

3,5

93,6 ± 1,4

5

30

13,2 ± 0,4

-

5,9

-

6

35

18,2 ± 0,6

20,1 ± 0,8

7,8

86,3 ± 0,8

7

40

18,5 ± 0,6

21,9 ± 0,9

8,2

86,8 ± 1,5

8

50

23,0 ± 0,7

28,3 ± 1,1

12,4

3,6 ±0,7

Как видно из табл. 5,содержание Sn(II) в МСА(Sn) в значительнойстепени определяет и относительнуюактивность радиохимической примеси.Наименьшая (не более 4,0%) относительнаяактивность радиохимической примесинайдена в препаратах 1-4, содержащих олово(II)от 3 до 10 мкг/мг МСА. Накопление 99мТс-МСА(Sn) в легкихкрыс при введении указанных образцов препарата составило неменее 93%, в печени - не более 1% (данныене приведены втаблице). При этом в течение 1 часа послевведения препарата выводится из легкихкрыс от 10 до 18% от введенной активности99мТс. Вобразцах, приготовленных из МСА(Sn) исодержащих олова(II) более 10-15 мкг/мг МСА,относительная активность радиохимическойпримеси увеличивается до 13%, накоплениепрепарата в легких не превышает 90%, а впечени - увеличивается до 14%.

Таким образом,содержание Sn(II) в МСА(Sn) более 10 мкг/мг неприводит к улучшению качества препарата.Из табл. 5 видно, что оптимальное количествоSn(II), необходимое для проведения процессамодификации и получения качественного РФП,составляет 15 мкг Sn(II) на 1 мгмикросфер.

Исследование образцовМСА(Sn), полученных при использованииуказанного расчетного количества Sn(II),показало, что содержание Sn(II) в МСА(Sn)составляет от 3 до 7 мкг/мг или от 17 до 35мкг/флакон (табл. 6).

Таблица 6. Результатыопределения Sn(II) в МСА(Sn), в реагентах и
накопление 99мТс-МСА(Sn),полученных на их основе, в легкихкрыс


NN

Cодержание Sn(II) в МСА(Sn), мкг/мг

(n=3,P=0,95)

Содержание Sn(II) вреагенте, мкг/флакон

Относительная активность РХП,99мТс, %

Накоплениев легких 99мТс-МСА(Sn) через 3 мин после инъекции,%

(n=3, P=0,95)

27-1

7,1 ± 0,1

32,0; 34,0; 34,8

0,8; 1,2; 1,0

95,5 ± 0,5

27-2

6,9 ± 0,1

33,0; 32,8; 31,7

0,7; 0,9; 0,8

95,5 ± 0,9

27-5

5,3 ± 0,2

24,0; 23,8; 20,9

0,1; 0,7; 2,0

97,1 ± 1,0

28-1

5,9 ± 0,2

28,1; 27,6; 28,0

0,8; 0,5; 0,1

96,8 ± 1,7

28-2

4,8 ± 0,1

21,0; 21,7; 22,4

0,3; 0,1; 0,6

95,9 ± 0,4

28-3

4,1 ± 0,2

24,3; 24,0; 23,5

0,6; 0,2; 0,1

97,5+0,8

28-4

3,4 ± 0,2

19,0; 17,8; 17,5

0,6; 1,0, 0,3

96,2+1,5

Примечание к табл. 6.Каждая цифра в 3 и 4 колонках таблицысоответствует результату анализа одногофлакона с реагентом.

Характеристики и нормыпоказателей качества стандартных образцовМСА(Sn) сведены в табл. 7.

Таблица 7.Характеристики и нормы показателейкачества МСА(Sn)

Наименованиепоказателей

Характеристика показателей инорм

Описание

Сыпучий порошок светло-желтогоцвета

Растворимость

Практически нерастворим в воде, 95%этаноле,хлороформе, эфире (1:10 000)

Подлинность

Е1%1см при 290 нм от 9,8до 10,8; Е1%1см при 540 нм от 2,7до 2,9

Прозрачность ицветность 1% раствора МСА(Sn) в 2 М NaOH

Прозрачный раствор, цветностьмежду 3 и 4 эталонами шкалы "б" эталоновжелтых оттенков

рН 1% воднойвытяжки

2,5 - 3,0

Диаметр 95% МСА(Sn),мкм

10 - 30

Средний диаметр МСА(Sn),мкм

19,2 ±1,3

Потеря массы привысушивании

Не более 4,0 %

Диаметр 95% набухших МСА(Sn),мкм

10 - 35

Средний диаметрнабухших МСА(Sn) в 0,9% NaCl, мкм

23,4 ± 1,3

Содержание Sn(II) в МСА(Sn),мкг/мг

от 3 до7

Содержание Sn(IV) в МСА(Sn),%

не более 10 % от содержания Sn(II)

Реагентпредставляет собой апирогенную,стерильную лиофилизированную смесь,состоящую из МСА(Sn), твина-80 и хлориданатрия.

Помимо контролякачества реагента по таким параметрам, каквнешний вид, растворимость, подлинность,рН, определение диаметра МСА(Sn), числа МСА(Sn)во флаконе, стояла задача по разработкеметодик определения Sn(II), белка, твина-80 ихлорида натрия. По внешнему виду реагентпредставляет собой лиофилизат белого илислегка желтоватого цвета.

Для испытания нарастворимость использовали 0,9% раствор NaCl,поскольку такой же раствор, содержащий99мТс безносителя, применяется для приготовленияпрепарата из реагента. Реагент неполностьюрастворим в этом растворителе и образуетсуспензию желтоватого цвета, при хранениикоторой выпадает осадок, легко переходящийв равномерную взвесь при встряхивании.Жидкость над осадком - бесцветная.

Для разработки теста наподлинность реагента были проведенынесколько испытаний. Микроскопическоеисследование суспензии реагента даетвозможность идентифицировать сферичесуюформу частиц. Подлинность альбуминаустанавливали по методу Лоури, основанномна образовании окрашенных продуктовреакции ароматических аминокислот ицистеина (компонентов молекулы белка) среактивом Фолина, при этом развиваетсятемно-синяя окраска раствора. Наличиедвухвалентного олова устанавливали пометодике с использованием комплексадвухвалентного железа со-фенантролином.

Для определения рНсуспензии реагента в 0,9% изотоническомрастворе NaCl использовалипотенциометрический метод (ГФ XI). Наличиемикросфер в суспензии не мешаетопределению рН, величина которого независит также и от объема суспензииреагента в интервале 1-4 мл. Величина рНсуспензии реагента изменялась в пределахот 3,9 до 4,3.

Для измерения диаметрамодифицированных микросфер в реагентеотбирали пробу суспензии реагента в 0,9%растворе NaCl, поскольку измерению диаметрачастиц в сухом реагенте мешает наличие внем большого количества кристаллов NaCl.Вследствие некоторого набуханиямодифицированных микросфер в водномрастворе диаметр их увеличивается инаходится в интервале от 10 до 35 мкм, тогдакак соответствующий интервал для МСА(Sn) всухом виде, используемых для приготовленияреагента, составляет 10-30 мкм. Не менее 95%частиц в реагенте имеют диаметр от 10 до 35мкм (n=3, P=0,95). Средний диаметр МСА(Sn) вреагенте составляет 21,9 ± 0,6 мкм (n=3,P=0,95).

При определении числамикросфер в камере Горяева пользовалисьправилами, принятыми для подсчеталейкоцитов из-за схожести их размеров.Число частиц во флаконе находилось винтервале от 800 000 до 1 500 000 штук.Относительная погрешность определения непревышала ± 11,0%.

Определение олова(II) вреагенте проводили с помощьюразработанной спектрофотометрическойметодики, основанной на образованииокрашенного комплекса о-фенантролина сFe(II), образующимся в результате реакциивосстановления Fe(III) двухвалентным оловом.Содержание Sn(II) в реагенте изменялось от 0,017до 0,035 мг (т.е. от 3 до 7 мкг/мг микросфер).Содержание Sn(II) в реагентах близко к егосодержанию в соответствующих образцахМСА(Sn) при пересчете на 1 мг белка. Наличие вреагенте твина-80 и хлорида натрия не влияютна результаты определения Sn(II).

Определение белка вреагенте проводили по биуретовой реакции сиспользованием рассчитанного удельногопоказателя экстинкции для биуретовогокомплекса 1%-ного щелочного раствора МСА(Sn):2,79 ± 0,12 (n=5, P=0,95). Наличие в реагенте твина-80 ихлорида натрия не влияет на результатыопределения белка. Относительнаяпогрешность определения не превышает ± 7,2%.Содержание белка в реагенте в видемикросфер составляет от 4,0 до 5,5 мг.

Хлорид натрияопределяли потенциометрическититрованием раствором нитрата серебра (ГФХI). Наличие микросфер альбумина и твина-80не влияет на результаты анализа.Относительная погрешность определения непревышает ± 2,0%. Содержание хлорида натрия вреагенте изменяется от 8,7 до 9,3 мг.

Определение содержаниятвина-80 в реагенте проводилиспектрофотометрически по методике,основанной на взаимодействии твина-80 самилозной фракцией крахмала. В реакциювводили избыточное количество крахмала поотношению к твину. Не вступивший в реакциюс твином избыток крахмала взаимодействуетс вводимым в раствор иодом, образуяокрашенный в синий цвет комплекс, полосапоглощения в спектре которого имеетмаксимум при 680 нм. Оптическая плотностьраствора окрашенного комплекса зависит отсодержания твина в растворе (чем вышеконцентрация твина, тем меньше оптическаяплотность испытуемого раствора).Пропорциональная зависимость оптическойплотности испытуемого раствора отсодержания твина наблюдается в интервалеконцентраций 1-5 мкг/мл. Относительнаяпогрешность определения не превышает ± 10,0%.Наличие микросфер и хлорида натрия невлияет на определение твина-80. Содержаниетвина в реагенте изменяется от 0,17 до 0,25мг.

Pages:     | 1 |   ...   | 2 | 3 || 5 | 6 |   ...   | 11 |






© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»