WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

загрузка...
   Добро пожаловать!

Pages:     | 1 | 2 || 4 | 5 |   ...   | 11 |

Изучены спектрыпоглощения щелочных растворов альбумина,МСА и МСА(Sn) с биуретовым реактивом. Во всехспектрах обнаружены широкие полосыпоглощения с максимумом при 540 нм. Спектрыбиуретовых комплексов альбумина, МСА иМСА(Sn) практически совпадают между собой ис литературными спектрами для биуретовогокомплекса нативного альбумина. Соблюдениезакона Бугера-Ламберта-Беера длякомплексов альбумина, МСА и МСА(Sn)наблюдается в интервале концентраций от 0,25до 2,5 мг/мл основного вещества при 540 нм.Вычислены удельные показатели экстинкции1% щелочных растворов с биуретовымреактивом: 2,75 ± 0,10 (n=5, P=0,95), 2,81 ± 0,13 (n=5, P=0,95) и2,79 ± 0,12 (n=5, P=0,95) для альбумина, МСА и МСА(Sn),соответственно. Они практически совпадаютмежду собой и с литературными данными длябиуретового комплекса нативногоальбумина. Относительная погрешностьопределения не превышала ± 7,2%.

Потерю массы привысушивании определяли при нагреванииобразцов МСА(Sn) до 100-105 С. Этот показатель непревышает 4,0%.

Набухание МСА(Sn), как и вслучае МСА, происходит практическимгновенно. Диаметр МСА(Sn) увеличивается приэтом в среднем на 22%, но не менее 95% частицимеют диаметры от 10 до 35 мкм, что являетсяодним из главных требований к препарату.Средний диаметр набухших МСА(Sn) составляет23,4 ± 1,3 мкм (n=3, P=0,95).

рН фильтратов 1% воднойвытяжки образцов МСА(Sn) изменяются впределах от 2,5 до 3,0.

Содержание Sn(II) в МСА(Sn)является одним из важнейших показателейкачества МСА(Sn), которое, в свою очередь,определяет качество РФП 99мТс-МСА(Sn), а именно:эффективность мечения и, соответственно,относительную активность РХП.

Согласно технологииМСА(Sn) олово осаждается (в основном,по-видимому, на поверхность микросфер) вдвухвалентном состоянии. Проведенныеисследования методом мессбауэровскойспектроскопии показали, что оно содержитсяв МСА(Sn) как в виде Sn(II), так и в видеSn(IV).

Определение Sn(II) вальбуминовых микросферах является сложнойзадачей, поскольку: 1) содержание Sn(II) вМСА(Sn) очень мало (около 3-7 мкг/мг микросфер);2) для одного анализа имеется возможностьиспользовать всего 10-20 мг микросфер; 3)имеет место совместное присутствие Sn(II) ибольшого количества по сравнению с нимбелка; 4) Sn(II) легко окисляется кислородомвоздуха и гидролизуется в присутствиивлаги. Кроме того используемые в анализеметоды предполагают предварительноепереведение анализируемой пробы в раствор,что в случае МСА(Sn) влечет за собойокисление Sn(II) до Sn(IV). Если провестипредварительное отделение олова(II) отмикросфер, то возможна потеряопределяемого элемента, принимая вовнимание указанные выше концентрации Sn(II) вмикросферах и количество пробы дляанализа. Поэтому необходимо былоразработать способ определения Sn(II) при егосовместном с микросферамиприсутствии.

Разработанный способвключает "смывание" олова(II) с микросфер(без их отделения) 2 М раствором НСl, вкотором растворена соль Fe(III). Оказавшееся врастворе Sn(II) восстанавливает Fe(III) до Fe(II),эквивалентное количество которогоопределяют спектрофотометрически вприсутствии о-фенантролина, дающего с Fe(II)окрашенный комплекс с широкой полосойпоглощения, имеющей максимум при

510 нм. Линейнаязависимость оптической плотностирастворов комплекса Fe(II) с о-фенантролиномот концентрации Sn(II) наблюдается винтервале 0,5-7,0 мкг/мл. Рассчитан молярныйкоэффициент погашения, равный 19 800 ± 594л/мольсм (n=5,P=0,95). Относительная погрешностьопределения не превышает ± 5,0%. Результатыопределения Sn(II) в растворах представлены втабл. 2.

Таблица 2. Результатыопределения олова(II) по реакции с Fe(III) вприсутствии

о-фенантролина (n=3, P=0,95);s-стандартное отклонение, Е-полуширинадоверительного интервала, Е%-процентнаяпогрешность

Введено Sn(II), мкг

Найдено среднее для Sn(II), мкг


s


E

E, %

10,0

10,5

0,1

0,3

3,0

15,0

15,0

0,2

0,4

2,6

20,5

20,9

0,3

0,6

3,0

24,5

24,5

0,2

0,5

2,0

28,5

28,8

0,4

1,0

3,5

37,0

36,6

0,2

0,5

1,3

Приведенные данныепоказывают, что методика позволяетполучать правильные и хорошовоспроизводимые результаты.

Круг методов, которыеможно использовать для определения общегоолова (Sn(II)+Sn(IV)) в таком специфическомобъекте, как МСА(Sn), ограничен. Это связано стем, что: 1) большая часть олова в МСА(Sn)находится в виде Sn(II) (около 90%) и,следовательно, содержание общего оловатакже мало (на уровне десятков микрограмм);2) предварительное отделение олова отмикросфер с целью последующего егоопределения, как и в случае со Sn(II),трудновыполнимо из-за малого содержанияолова; 3) при определении общего олова в растворе безего отделения от микросфер неминуемовлияние белковой матрицы на результатыопределения.

Мы сочли необходимымдействовать следующим образом: 1) устранитьвлияние белковой матрицы безпредварительного выделения олова, 2)окислить имеющееся в МСА(Sn) Sn(II) до Sn(IV) изатем 3) найти подходящий способопределения общего олова.

Разработана методикаопределения общего олова в виде Sn(IV),заключающаяся в предварительном "мокром"озолении навески МСА(Sn) концентрированнойсерной кислотой в присутствии хлорнойкислоты в качестве окислителя споследующим спектрофотометрическимопределением олова с пирокатехиновымфиолетовым при рН 3-4. Максимум в спектрепоглощения образовавшегося комплексанаблюдается при 555 нм, коэффициентмолярного погашения составляет 65 400 ± 1140л/мольсм (n=5,P=0,95). Закон Бугера-Ламберта-Бееравыполняется в интервале от 0,2 до

1,6 мкг/мг Sn(IV).Относительная погрешность определения непревышает ± 5,0%.

Для подтвержденияправильности разработанных методикопределения Sn(II) и общего олова в МСА(Sn)содержание олова оценивали cледующимиспособами.

1. Исходя из количестваолова(II), взятого в реакцию модификацииопределенной навески МСА; количестваобщего олова, найденного в фильтрате послезавершения осаждения Sn(II) на МСА (т.е.непрореагировавшего олова с МСА); иколичества общего олова, найденного вготовых МСА (табл. 3).

Таблица 3. Результатыопределения Sn(II) и общего олова наразличных стадиях получения МСА(Sn) (n=3,P=0,95)

Образцы МСА(Sn)

16

от 24.03.92

17

от 27.03.92

18

от 31.03.92

Исходное Sn(II) в р-ре,%

95,7 ± 2,9

103,3 ± 3,1

100,2 ±2,5

В фильтрате общее олово,%

27,0 ± 1,4

13,7 ± 0,7

18,3 ±0,5

В МСА(Sn) общее олово,%

63,7 ± 3,2

87,0 ± 4,4

78,0 ±3,1

Сумма: общее олово,%

90,7 ± 3,2

100,7 ± 4,4

96,3 ±3,1

Данные табл. 3подтверждает правильность контроля Sn(II) иобщего олова по разработанным намиметодикам.

2. Подтверждениемправильности результатов, полученных спомощью разработанных методик определенияSn(II) по реакции восстановления им Fe(III) вприсутствии о-фенантролина (метод А) иобщего олова в виде Sn(IV), основанной наразрушении МСА(Sn) "мокрым" сжиганием вприсутствии окислителя с последующимопределением с пирокатехиновым фиолетовым(метод В), являются также данныеэмиссионного спектрального анализа (методБ), ГФ XI [вып. 1, С. 322-332]. Результатыпредставлены в табл. 4. Спектральномуанализу подвергали микросферы, оставшиесяна фильтре после определения Sn(II), имикросферы без предварительногоопределения Sn(II) (образецы 7 и 8).

Из табл. 4 видно, чтообщее олово, определенное методом В вМСА(Sn), близко к сумме Sn(II)+Sn(IV), найденной спомощью методов А и Б, а также к расчетномусодержанию Sn(II), вычисленному из навескиМСА и SnCl2,взятых в реакцию. В табл. 4 приведены такжезначения общего содержания олова вобразцах 7 и 8, полученные спектральнымметодом без предварительногоопределения Sn(II), чтопрактически совпадает с полученнымсуммарным значением.

3. Подтверждениемправильности разработанных методикопределения Sn(II) и общего олова в МСА(Sn)являются также результаты определениясоотношения содержания Sn(II) и Sn(IV) в МСА(Sn)методом мессбауэровской спектроскопии.Так, в 5-м образце МСА(Sn) (табл. 4) 88% олова былонайдено в виде олова(II) и 12% - в виде олова(IV);в 6-м образце - 70% олова(II) и 30% олова(IV).Полученные результаты хорошо согласуютсяс данными физико-химического анализа (табл.4).

Таблица 4. Результатыопределения Sn(II) и Sn(IV) в экспериментальныхобразцах МСА(Sn) различными методами (n=3,P=0,95)



Введено


Найдено олова,мкг/мг


СвязываниеМСА(Sn) c


Sn(II, мкг/мг

Sn(II)

А

Sn(IV)

Б

Общее Sn

В

99мТс, %

1

6,0

0,5 ±0,1

3,4 ±0,4

3,9 ±0,5

35,5 ± 2,6

2

7,0

0,8 ± 0,1

не более 1,0

не более 1,7

33,1 ±3,4

3

12,0

3,3 ±0,3

8,8 ±1,3

11,9 ±1,0

99,0 ± 0,1

4

12,0

2,5 ±0,2

8,6 ±1,3

11,3 ±1,2

99,0 ± 0,1

5

25,0

19,8 ±0,5

4,4 ±2,0

24,0 ±2,1

75,3 ± 0,2

6

25,0

16,8 ±0,5

5,6 ±0,9

22,7 ±0,9

94,8 ± 0,7

7

25,0

-

24,1 ±1,2

-

-

8

25,0

-

23,4 ±1,2

23,4 ±1,2

-

Разработанные методикиопределения содержания Sn(II) и общего оловав МСА(Sn) позволили определеить тооптимальное количество Sn(II), осаждаемое наМСА, которое обеспечивало бы максимальноесвязывание 99мТс с МСА(Sn) и максимальное накоплениев легких. В табл. 5 представлены результатыанализа образцов МСА(Sn) c различнымсодержанием Sn(II) (от 10 до 50 мкг/мг МСА) инакопления в легких крысрадиофармпрепаратов, полученных из этихобразцов.

Таблица 5. Результатыхимического анализа образцов МСА(Sn)
и накопления в легких крысРФП, полученных на их основе (n=3, P=0,95)

Pages:     | 1 | 2 || 4 | 5 |   ...   | 11 |






© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»