WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

загрузка...
   Добро пожаловать!

Pages:     | 1 |   ...   | 3 | 4 || 6 | 7 |   ...   | 8 |

Патоморфологическое исследование погибших животных. Для установления причин летальности и выявления возможных органов-мишеней, поражаемых при остром токсическом воздействии, проводили патоморфологическое исследование трупов крыс, погибших при внутрибрюшинном введении заведомо летальных доз препарата ГК. Судя по результатам патологанатомического исследования гибель лабораторных животных (крыс) при введении летальных доз ГК наступала от острой сердечной недостаточности, возникающей в результате ишемической дистрофии миокарда.

Исследование кардиотоксического действия ГК. Судя по результатам патоморфологического исследования, одной из причин летальности при внутрибрюшинном введении ГК может быть их прямое кардиотоксическое действие. Мы провели регистрацию электрокардиограммы (ЭКГ) и определение порога фибрилляции желудочков (ПФЖ) у крыс-самцов после внутрибрюшинного введения ГК в заведомо летальной дозе (480,00 мг/кг).

Однократное внутрибрюшинное введение ГК вызывает значительно снижение ПФЖ (в 1,8 раза) в сравнении с интактными животными. В тоже время, наблюдалось достоверное укорочение (в 2,8 раза) комплекса QRS в сравнении с интактными животными. Судя по полученным результатам, однократная инъекция ГК в летальной дозе (480,0 мг/кг) индуцирует снижение электрической стабильности сердца, о чём наглядно говорит падение ПФЖ и снижение величины комплекса QRS. Подобное снижение электрической стабильности сердца может быть причиной внезапной сердечной смерти подопытных животных.

Исследование влияния ГК на реологические свойства крови. Другим возможным механизмом острого нарушения гемодинамики под влиянием ГК может быть их негативное влияние на реологические свойства крови. Мы исследовали влияние ГК на реологические свойства крови фотометрическим вибрационным методом. Судя по полученным результатам, ГК in vitro вызывают существенное (в 2,26 раза) в сравнении с показателями интактной пробы увеличение показателя индекса обратимой агрегации эритроцитов (ОАЭ). Это может приводить к значительному увеличению вязкости крови, усиленному тромбообразованию, нарушению кровоснабжения миокарда и обусловливать негативное кардиотропное воздействие препарата ГК в летальных дозах.

Таким образом, острое нарушение гемодинамики и последующая гибель животных могут быть обусловлены одновременно, как снижением электрической стабильности сердца, так и негативным влиянием ГК на реологические свойства крови.

Исследование динамики концентраций ГК в сыворотке крови крыс. Нами была изучена динамика концентраций ГК в сыворотке крови крыс при обоих способах введения. Для исследования суточного профиля концентраций ГК вводили крысам однократно (внутрижелудочно или внутрибрюшинно) в дозе 100 мг/кг (рис. 5).

Рис. 5. Суточная динамика концентраций ГК в сыворотке крови крыс-самцов после однократного введения в дозе 100 мг/кг при внутрижелудочном и внутрибрюшинном способах введения

Из полученных результатов (рис. 5) видно, что существуют значительные различия в суточных профилях концентраций ГК сыворотке крови животных в зависимости от способа введения:

1. Наблюдается практически 10-кратное различие в максимальных уровнях концентрации Cmax ГК в сыворотке крови животных при внутрижелудочном и внутрибрюшинном введении (0,04 мкг/мл и 0,46 мкг/мл соответственно).

2. Время достижения максимальной концентрации Tmax при внутрижелудочном и внутрибрюшинном введении различается в три раза (2,0 и 6,0 часов соответственно).

3. В данных условиях эксперимента, при внутрижелудочном введении спустя 4,0 часа после введения, ГК не определяются в сыворотке крови, вследствие крайне низкой концентрации. В тоже время, при внутрибрюшинном введении ГК обнаруживаются в сыворотке крови и через 24,0 часа после последнего введения.

С полученными результатами согласуются наши экспериментальные данные о более выраженных токсических свойствах ГК и способности их к кумуляции при внутрибрюшинном введении, что на наш взгляд, может быть обусловлено значительно более длительной циркуляцией ГК в системном кровотоке по сравнению с пероральным введением. Различия в суточных профилях концентраций ГК могут указывать на весьма выраженный эффект «первичного прохождения через печень» при их пероральном введении. По-видимому, в случае внутрибрюшинного введения в брюшной полости создается «депо», из которого ГК, медленно всасываясь, попадают в системный кровоток, не подвергаясь предварительной биотрансформации в печени. Это обуславливает более длительную (более 24 часов) циркуляцию ГК в крови животных, по сравнению с внутрижелудочным введением. При этом, полученные значения Tmax, указывают на то, что ГК при внесосудистых способах введения (как при внутрижелудочном, так и при внутрибрюшинном) довольно медленно всасываются, что вероятно связанно с большими размерами их молекул. С другой стороны, медленное всасывание, существенное влияние «эффекта первичного прохождения через печень» обуславливает значительно менее длительную циркуляцию в крови и невозможность кумуляции ГК при внутрижелудочном способе введения. Вероятно, в данном случае нельзя исключать и возможность потери части невсосавшихся ГК за счет естественной перистальтики кишечника.

Исследование цитопротективных свойств ГК торфа. Анализ литературных данных показывает, что ГК, как правило, проявляют наиболее выраженную биологическую активность в условиях экспериментальных моделей связанных с повреждающим воздействием экстремальных факторов различной природы. Мы провели экспериментальную оценку цитопротективных свойств ГК в условиях острого токсического ССl4-гепатита и различных гипоксических состояний.

Оценка гепатопротективных свойств ГК. Известно, что развитие многих заболеваний обусловлено активацией свободнорадикальных процессов, приводящих к повреждению клеточных структур. Исходя из этих представлений, мы исследовали влияние ГК как потенциальных антиоксидантов на развитие острого токсического CCl4-гепатита, в патогенезе которого существенная роль принадлежит перекисному окислению липидов (ПОЛ). Исследуемые ГК обладают выраженной гепатопротекторной активностью при остром CCl4-гепатите (табл. 11).

Таблица 11

Влияние введения ГК и Карсила на биохимические показатели сыворотки крови и на содержание малонового диальдегида (МДА) в гомогенате печени крыс-самцов

при CCl4-гепатите (±х; n=10)

Группы животных

В сыворотке крови

МДА, Мкмоль/л

ЩФ,

Е/Л

- ГГТ

Е/Л

АсАТ,

Е/Л

АлАТ,

Е/Л

Билирубин общий,

Мкмоль/л

в сыворотке крови

в гомогенате печени

Интактные

350,50

±29,20

5,45

±0,28

167,00

±9,16

84,50

±3,33

2,30

±0,30

1,90

±0,3

1,15

±0,06

CCl4-гепатит

447,60

±25,00*

8,68

±1,53*

416,80

±21,50*

148,30

±8,16*

12,80

±0,72*

3,60

±0,28*

11,98

±0,66*

ГК (25 мг/кг)+ CCl4-гепатит

404,80

±46,20

5,96

±0,96**

347,80

±16,00**

123,80

±1,50

3,10

±0,41**

2,30

±0,15**

4,15

±0,31**

ГК (50 мг/кг)+ CCl4-гепатит

345,60

±18,40**

6,02

±0,28**

292,30

±33,00**

109,50

±8,50**

2,30

±0,08**

1,80

±0,22**

2,62

±0,06**

ГК (100 мг/кг)+ CCl4-гепатит

356,50

±26,50**

4,25

±0,55**

207,50

±22,50**

76,30

±0,33**

2,40

±0,06**

1,30

±0,13**

2,00

±0,12**

Карсил (100мг/кг)+ CCl4-гепатит

395,60

±27,00

6,86

±1,74**

356,80

±19,80**

119,30

±7,19

9,80

±0,86

2,70

±0,19

7,45

±0,43**

Примечание: * - различия достоверны для группы CCl4-гепатит по сравнению с группой интактных животных, при р0,05; **для групп животных получавших ГКТ или Карсил – по сравнению с группой CCl4-гепатит, при р0,05; n - количество животных в группах.

Судя по полученным экспериментальным данным, их внутрижелудочное введение в диапазоне доз 25-100 мг/кг препятствует повреждающему действию тетрахлорметана на функционально-метаболические и морфологические показатели печени крыс: существенно снижается интенсивность процессов липопероксидации и разрушения мембран гепатоцитов, выраженность цитолитического синдрома, улучшается экскреторная функция печени, не развиваются фиброзные изменения в печени экспериментальных животных (табл. 11).

Наиболее выраженные гепатозащитные свойства ГК, превосходящие аналогичное действие препарата сравнения Карсила наблюдаются в дозе 100 мг/кг. Исходя из выраженного снижения концентрации малонового диальдегида в гомогенате печени и в сыворотке крови экспериментальных животных, получавших ГК – их гепатозащитное действие может быть обусловлено выраженными антиоксидантными свойствами (табл. 11).

Исследование антигипоксической активности ГК. Наличие антиоксидантных и хелатирующих свойств у исследуемых ГК указывает на их потенциальные антигипоксические свойства (Лукьянова Л.Д., 1997; Козин В.М., 2005; Кашицкий Э.С., 1999). Это побудило нас оценить их антигипоксическую активность на моделях гистотоксической (тканевой) гипоксии и гипобарической гипоксической гипоксии (гипоксии объема), а также на окислительное фосфорилирование в митохондриях в условиях нормобарической гиперкапнической гипоксии.

Исследование влияния ГК на выживаемость животных при различных гипоксических состояниях. Судя по полученным нами данным, ГК в условиях гипобарической гипоксической гипоксии в дозах 25-100 мг/кг обладают выраженным антигипоксическим действием - на 38-50 % увеличивая продолжительность жизни мышей (табл. 12) и снижая летальность от гипоксии на 24-36 % соответственно.

Таблица 12

Влияние 5-кратного внутрижелудочного введения ГК на продолжительность жизни мышей в условиях гипобарической гипоксической гипоксии, (±х)

Группы животных

Количество животных

Время жизни, мин

(t-критерий Стьюдента)

Летальность от гипоксии

(2 критерий)

Контроль

25

11,88±1,13

92 %

ГК (25 мг/кг)

25

13,72±1,24

84 %

ГК (50 мг/кг)

25

16,44±1,19*

76 %

ГК (100 мг/кг)

25

17,80±1,31*,**

64 %

Примечание: * – достоверное различие (р<0,05) по сравнению с контролем; ** – достоверное различие (р<0,05) по сравнению с гуминовыми кислотами 25 мг/кг.

Аналогичные результаты были получены на модели гистотоксической тканевой гипоксии - ГК в диапазоне доз 25-100 мг/кг в условиях гистотоксической гипоксии проявляют антигипоксическое действие, на 72,6 % увеличивая продолжительность жизни мышей (табл. 13).

Таблица 13

Влияние 5-кратного внутрижелудочного введения ГК на продолжительность жизни мышей в условиях гистотоксической гипоксии, (±х)

Группы животных

Pages:     | 1 |   ...   | 3 | 4 || 6 | 7 |   ...   | 8 |






© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»