WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

загрузка...
   Добро пожаловать!

Pages:     | 1 | 2 || 4 |

25.46

D-лактоза

25.64-25.70

4-O-[2,3,4,6-тетракис-O-(триметилсилил)--D-глюкопиранозил]-1,2,3,6-тетракис-O-(триметилсилил-D-глюкопираноза

D-мальтоза

25.74

D-мальтоза

Кроме этого, установлено, что моносахаридный состав ПСК сфагнума бурого также представлен L-арабинозой, L-рамнозой и D-манитолом, а дисахаридный – D-мелибиозой, D-лактозой и D-мальтозой, наличие которых в ПСК сфагновых мхов ранее в литературе не отмечалось.

Наличие фруктозы и дисахаридов – сахарозы и раффинозы, найденных по данным литературы в других видах, в гидролизате ПСК сфагнума бурого установлено не было.

Помимо идентифицированных, в гидролизате присутствует компонент со временами удерживания 17.19 мин, структуру которого не удалось определить.

Фракционирование экстракта сфагнума бурого на этаноле 70% методом колоночной хроматографии

Для изучения химического состава фенольного комплекса из сфагнума бурого был получен экстракт на этаноле 70%, который разделяли методом колоночной хроматографии с использованием в качестве сорбента полиамида Woelm (Германия). Фракции № 12, 13 и 14, из полученных 27, содержащие по данным ТСХ максимальное количество компонентов, были объединены и разделены на колонке с силикагелем Chemapol (L 40/100 мкм). В результате деления были получены 32 фракции, из которых № 3 (D1), 4 (D2), 5 (D3), 6 (D4), 9 (D5), 10 (D6), 14 (D7) и 16 (D8) отобраны для последующего исследования методами ВЭЖХ и ВЭЖХ-МС, а фракции № 19 и 20 объединены и разделены на колонке с полиамидом. Из полученной 51 фракции для ВЭЖХ и ВЭЖХ-МС были отобраны фракции № 2 (D10), 4 (D11), 8 (D12), 11 (D13), 16 (D14), 22 (D15), 23 (D16), 28 (D17), 33 (D18), 39 (D19), 49 (D20) и 51 (D21).

Критерием отбора фракций являлась максимальная концентрация индивидуального компонента по данным ТСХ, наряду с минимальным содержанием примесей.

Анализ состава фенольного комплекса методами

ВЭЖХ и ВЭЖХ-МС

При идентификации индивидуальных компонентов исследуемых фракций методами ВЭЖХ и ВЭЖХ-МС на жидкостном хроматографе с диодно-матричным УФ- и масс-селективным детекторами (Agilent 1100 Series LS/MSD) нами были использованы некоторые стандартные образцы фенолокислот, кумаринов и флавоноидов. При выборе предполагаемой структуры мы использовали следующие критерии: время удерживания исследуемых веществ; УФ-спектры и масс-спектры соответствующих пиков на ВЭЖХ; базы данных и обзорные статьи по основным спектральным и физико-химическим характеристикам природных соединений.

УФ-спектры компонентов в исследуемых образцах можно разделить по максимумам поглощения на четыре основных типа, характерных для: фенолкарбоновых кислот (галловая, сиреневая, ванилиновая, протокатеховая – 235–270 нм и 290–305 нм); гидроксикоричных кислот (кумаровая, кофейная, феруловая – 230–240 нм и 290–320 нм); кумаринов (230–250 нм и 290–360 нм); флавоноидов (кверцетин, рутин – 250–270 нм и 350–390 нм). Следовательно, основными компонентами исследуемой смеси могут являться производные этих классов соединений.

Методом ВЭЖХ мы провели первичный аналитический скрининг всех полученных фракций. Максимально информативными оказались данные при длине сканирующей волны 274 нм.

На основании анализа полученных УФ-спектров, фракции с высоким содержанием основного компонента (D1, D3, D5, D6, D10, D15, D17, D19) нами были отобраны для дальнейшего анализа методом ВЭЖХ-МС. В результате ВЭЖХ-МС анализа, на основании УФ-спектров и данных величин m/z, нами был предположен ряд структур основных компонентов (табл. 5, 6, 7).

Таблица 5 Состав фракции D1 по данным ВЭЖХ-МС (в режиме ХИ APCI, Pos, Scan и APCI, Neg, Scan)

Время

удерживания,

мин

m\z

Предполагаемая структура

Примечание

13.01–13.22

152,1

3,4-дигидроксикоричный спирт (кофейный спирт)

13.70–14.01

192,1

Скополетин

14.42–14.60

178,1

Эскулетин

15.96–16.12

138,1

3,4-дигидроксибензальдегид

16.87–17.00

180,1 218,2 248,2

Кофейная кислота

(m/z 180,1)

Смесь трех веществ, основной компонент с m/z, равной 218,2.

На УФ-спектрах смеси имеются максимумы 240, 300 и 326 нм (кофейная кислота)

17.66–17.80

208,1 220,2

Ацетоксикофейный спирт

(m/z 208,1)

Смесь двух веществ, основной компонент с m/z равной 220,2.

На УФ-спектрах смеси имеются максимумы в области 259 (наиболее интенсивный) и 350 нм

20.31–20.50

278,2 300,2 308,3 310,3

4-О--D-рамнопиранозил-протокатеховая кислота или

4-О--D-глюкопиранозил-4-гидроксибензойная кислота

(m/z 300,2)

Судя по масс-спектру в режиме APCI, Neg, Scan и УФ-спектру основным компонентом является соединение с m/z 300,2, и это соединение можно отнести к гликозиду фенолокислоты (макс. при 255 нм). В качестве примеси в данной смеси вероятно присутствуют гликозидированные производные умбеллиферона (m/z 308,2) и эскулетина (m/z 310,2) на что указывают УФ-спектры (макс. при 320 и 345 нм)

Таблица 6 Состав фракции D3 по данным ВЭЖХ-МС (в режиме ХИ APCI, Pos, Scan и APCI, Neg, Scan)

Время

удерживания,

мин

m\z

Предполагаемая структура

Примечание

4.17–4.21

138,1 176,1

Тирозол (m/z 138,1)

Максимум в УФ-спектре при 279 нм характерен для тирозола. Максимум в УФ-спектре при 310 нм – возможно производное коричной кислоты.

5.08–5.10

282,3

Не идентифицированный компонент

Максимум в УФ-спектре при 255 нм, можно отнести к производному фенолкарбоновой кислоты

6.67–6.70

122,1

4-гидроксибензальдегид

8.91–8.96

136,1

4-гидроксибензальдегид

10.39–10.43

208,2

3,4-диметоксикоричная кислота

10.84–10.86

284,0 176,1

Метиловый эфир

2-(4-гидроксибензоил)-3-гидрокси-бутандиовая кислота

(m/z 284,0),

Смесь двух соединений с максимумами: при 255 нм для первого соединения (m/z 284,0), 242 нм и 300 нм для второго соединения (m/z 176,1)

11.49–11.52

182,1

Сиреневый альдегид

11.76–11.85

262,1

Не идентифицированный компонент

Максимум в УФ-спектре при 296 нм – характерен для производного коричной кислоты.

Таблица 7 Состав фракции D5 по данным ВЭЖХ-МС (в режиме ХИ APCI, Pos, Scan и APCI, Neg, Scan)

Время

удерживания,

мин

m\z

Предполагаемая структура

Примечание

1

2

3

4

3.10–3.14

154,0, 240,3

Протокатеховая кислота

(m/z 154,0)

Максимум в УФ-спектре при 259 нм относится к протокатеховой кислоте. Максимум в УФ-спектре при 294 нм характерен для производного коричной кислоты

4.14–4.72

138,1, 176,1

Тирозол (m/z 138,1)

Максимум в УФ-спектре при 279 нм относится к тирозолу, а максимум при 310 нм характерен для производного коричной кислоты.

Продолжение таблицы 7

1

2

3

4

5.08–5.13

282,3

Не идентифицированный компонент

Максимум в УФ-спектре при 255 нм, можно отнести к производному фенолкарбоновым кислотам

6.03–6.12

192,1

Метиловый эфир 4-метоксикоричной кислоты

(m/z 192,1)

Максимум в УФ-спектре при 310 нм, характерен для гидроксикоричных кислот

и их производных

8.68–8.73

176,2

Ацетоксикоричный спирт (ацильное производное коричного спирта) (m/z 176,1)

Максимум в УФ-спектре при 275 нм

10.38–10.42

316,2, 346,2

Не идентифицированные компоненты

Два интенсивных максимума в УФ-спектре при 288 и 320 нм

11.79–11.84

218,1, 226,2, 244,1

Дигидросинаповая кислота

(m/z 226,2)

Максимум в УФ-спектре при 296 нм характерна для производных дигидроксикоричной кислоты. Гидрокси- и дигидроксикоричные кислоты имеют несколько максимумов в интервале 298–330 нм. Наличие одного максимума свидетельствует о том, что часть молекулы имеет общий структурный фрагмент

11.76–11.85

262,1

Не идентифицированный компонент

Максимум в УФ-спектре при 296 нм характерен для производного коричной кислоты

В результате проведенных нами исследований химического состава фракций экстракта сфагнума бурого на этаноле 70% с помощью ВЭЖХ- и ВЭЖХ-МС анализа было подтверждено наличие для данного вида ряда ранее известных соединений, а так же выявлены новые для него соединения.

Исходя из УФ- и масс-спектральных данных можно сделать вывод о том, что химический состав объекта в большей степени представлен фенолкарбоновыми (феноло- и гидроксикоричными) кислотами и спиртами.

Исследование элементного состава сырья

При исследовании элементного состава сырья сфагнума бурого нейтронно-активационным методом было выявлено 26 элементов, содержание токсичных из которых не превышает значения допустимых концентраций установленных СанПиН 2.3.2.1078-01 для пищевых продуктов.

Pages:     | 1 | 2 || 4 |






© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»