Показатели жирности,белка, лактозы в молоке определяли спомощью прибора MILKO-SCAN 605 компании“Фос-электрик”. Гематологическиепоказатели определяли в условияхсертифицированной ветеринарнойлаборатории «Шанс» на автоматическомпроточном фотометрическом анализатореТехникон Н 1 по стандартному протоколу по 18параметрам, биохимические показателисыворотки крови - на автоматическомбиохимическом анализаторе «Hitachi» фирмы Rocheс использованием коммерческого набора Roche.Определение концентрации белка и белковыхфракций проводили на электрофоретическойсистеме Paragon (Becman, США) с использованиемкоммерческого набора Paragon. Содержаниекаротина, общего белка, резервнующелочность - общепринятыми методами(Лебедев П.Т., Усович А.Т., 1976).Патоморфологические и гистологическиеисследования внутренних органов проводилипо стандартному протоколу. Дляисследования печени готовили криостатныесрезы, которые с целью выявления липидовокрашивали растворами судана 3 и суданачерного В. Фагоцитарную активность у теляти КРС определяли с 0,1% раствором зимозана, уцыплят с 1% суспензией латекса, уровеньиммуноглобулинов определяли в реакциииммунодиффузии по методу Манчини,количество Т- и В- лимфоцитов определялиметодами розеткообразования, непрямойиммунофлуоресценции ииммунопероксидазного окрашивания (ВоронинЕ.С., Петров А.М. и др., 2002). Напряженностьпоствакцинального иммунитета птицисследовали методом ИФА в референтнойлаборатории МЭБ ФГУ «ВНИИЗЖ», в ФГУЦентральная научно-методическаяветеринарная лаборатория. Титрыпоствакцинальных антител к вирусу болезниНьюкасла определяли в РТГА; титрысальмонеллезных и эшерихиозных антител всыворотках молозива и крови коров исыворотках крови телят в развернутойпробирочной РА. Количествомикроорганизмов (КОЕ) определяли высевамина плотные питательные среды (И.П. Ашмарин,А.А.Воробьев, 1962). Идентификацию бактерийосуществляли в соответствии склассификационной системой Берджи (1984). Длявидовой идентификации энтеробактерийиспользовали системы мультимикротестовММТ Е1 и ММТ Е2. Наличие антибиотиков,токсичных элементов, пестицидов,радионуклеидов, гормонов в продуктахживотноводства определяли всертификационном центре при ФГУ ВНИИветеринарной санитарии, гигиены иэкологии. Исследования Na-зависимого транспорта нутриентовпроводили на конвенциональных и безмикробных поросятах 2 - 6-суточного возраста. Безмикробныхпоросят получали путем кесарева сеченияи содержали по стандартнойметодике в гнотобиотических боксах. Активный Na-зависимый транспортизучалиметодом измерения токакороткого замыкания (ТКЗ) с помощьюнепрерывного фиксатора потенциала (Метельский С.Т., 1984).Фармакоэкономическиеисследования проводили по результатамэкспериментов в опытных и контрольныхгруппах. Доклинические испытания БАДВеленол и Веленол-селен проведены вусловиях сертифицированного вивария илаборатории фармакологии и токсикологииГУ РОНЦ РАМН. Биометрическую обработкурезультатов проводили с использованиемпрограмм Statistica for Windows, v.5.5A (StatSoft, Inc.).
2.2. Результатыисследований
2.2.1.Фармакологическоедействие пробиотика Лактобифадол в
птицеводстве и условия,влияющие на эффективность егоприменения
Установленазависимость фармакологического эффекта отдлительности курса назначения и дозыпробиотика Лактобифадол при производствемяса бройлеров. Лактобифадол содержит в 1 г80 млн. живых клеток бифидобактерий и 1 млн.лактобактерий, которые характерны длямикробиоценоза животных. Обладаетсвойствами синбиотика, штаммы устойчивы кширокому диапазону рН, желчи, имеютвыраженную кислотообразующую,антагонистическую, ферментативнуюактивность. В серии экспериментов вусловиях ОАО «Птицефабрика Безенчукская»использование пробиотика бройлерам первые10 суток (опытные группы 32008 голов,контрольные 51173 голов) в дозе 1 кг/т кормаобеспечило раннее становление нормобиоза,увеличило сохранность на 1,2%,среднесуточный прирост массы на 4,1% всравнении с контролем. Дробное введениепрепарата (суммарно 24 дня с отменойпрофилактической обработки энрофлоном)увеличило среднесуточный прирост массы на5,87%, но снизило сохранность на 0,8% посравнению с контролем (опытные группы 67612голов, контрольные 67926 голов). Оптимальнымбыло использование пробиотика весь периодоткорма без отмены антибиотика (Рис. 1).
Рис. 1. Различие всреднесуточном приросте цыплят накормодень в зависимости
от схемы применения Лактобифадола
Среднесуточный приростмассы увеличился на 7,5%, сохранность на 1,5% всравнении с контролем (опытные группы 64290голов, контрольные 64290 голов). Анализэкономической эффективности показал, чтоотдача на 1 рубль вложений в препарат при24-дневном и непрерывном курсах составила1,72 руб. и 2,52 руб., экономический эффект на 10тыс. голов соответственно 9,2 тыс. руб. и 25,8тыс. руб.
В условиях ООО«Агрофирма «Луч» показано влияние дозы настепень проявления фармакологическихэффектов пробиотика. Его непрерывноевведение в рацион цыплят в дозе 1,2 кг/ткомбикорма (опытная группа 2) в большейстепени увеличило число лакто- ибифидобактерий в ЖКТ на фоне сниженияэнтеробактерий, кокковой и грибковой флорыпо сравнению с дозой 0,8 кг/т корма (табл. 2).
Таблица 2. Составкишечной микрофлоры у цыплят (n = 10)
Наименование
микроорганизмов
Группыцыплят и количество микроорганизмов (lg/г;М+m)
Опытная1
Опытная2
Контрольная
Бифидобактерии
8,86+0,780**
9,49+0,402***
7,28+0,560
Лактобактерии
8,04+0,664*
8,48+0,844**
7,20+0,926
Энтерококки
6,37+0,530**
7,20+0,430*
8,06+0,950
Эшерихии,всего
7,30+0,290*
7,42+0,372*
8,29+0,462
в т.ч. со слабойлактазной активностью (%)
0
0
3,0+1,50
гемолитические (%)
0
0
4,0+2,50
Лактозонегативныеэнтеробактерии(%)
2,0+0,20
2,0+0,60
6,0+0,40
Дрожжи,плесени
1,20+0,572***
2,18+0,327***
4,48+0,680
Примечание: *р<0,1; **р<0,05; ***р<0,01
Результаты получены нафоне циркуляции в хозяйствеэнтеропатогенных эшерихий сгемолитической активностью. Их высевалитолько из материала, полученного от цыплятконтрольной группы. Следовательно, показанфармакологический эффект пробиотика понормализации колонизационнойрезистентности с вытеснениемусловно-патогенной микрофлоры.Сохранность при применении Лактобифадолав дозах 0,8 кг/т и 1,2 кг/т корма увеличилась на2,47% и 4,45%; среднесуточные приросты - на 1,6 г(4,8%) и 5,4 г (16,1%);выход тушек 1-ой категории на 11,6% и 14,6%;конверсия корма - на 10,35% и 17,25%. Приветсанэкспертизе тушек общая микробнаяобсемененность (количество мезофильныхаэробных и факультативно-анаэробныхмикроорганизмов) в опытных группах быланиже по сравнению с контролем: (4,3 ± 0,26)х103 и (9,2± 0,38)х103, р<0,05. В образцах необнаружены возбудители пищевых токсикозови токсикоинфекций.
На 10 тыс. поголовьяэкономический эффект от пробиотика в дозе0,8 кг/т составил 17,9 тыс. руб., в дозе 1,2 кг/т -109,7 тыс. руб. (отдача на 1 рубль вложений впрепарат соответственно 5,3 руб. и 18,5 руб.).Факторным анализом показано, чтоэкономический эффект обеспечен на 57,4%увеличением привесов птицы, на 22,2%повышением конверсии кормов, на 13,1%повышением сохранности и на 7,3% улучшениемкачества тушек. Следовательно, привыращивании бройлеров оптимальной схемойявляется непрерывное использованиеЛактобифадол я в дозе 1,0-1,2 кг/т. Минимальнаяпрофилактическая доза - 0,8 кг/ткомбикорма.
Установлено, чтофармакостимуляция продуктивности птицыпробиотиком зависит от ее генетическиххарактеристик. При непрерывном примененииЛактобифадола с 1 суток (ФГУП «Племптица»РАСХН) перепела мясного направленияпродуктивности породы «Фараон» к 45 днюжизни имели живую массу на 8,87%, а выходтоварного яйца с 45 по 75 сутки на 50,7% больше,чем в контроле. Аналогичные показатели угибридной птицы яичного направления -соответственно на 6,3% и 9,38% (рис. 2). Послеотмены пробиотика на 65 сутки егостимулирующий эффект на яйценоскостьсохранялся 10 дней. Рентабельностьприменения препарата при работе сперепелами «Фараон» составила 67%, а спомесной птицей 15%.
Рис. 2. Яйценоскостьперепелов на фоне примененияЛактобифадола
(стрелка –отмена препарата)
а) перепела породы«Фараон»
б) гибридныеперепела
Установлено, что важнымявляется возраст начала использованияпробиотика. Лактобифадол в дозе 1,5 кг/ткомбикорма применяли с 1 суток и с 16 недельцыплятам прародителей исходных линий ПК1,ПК2, ПК3, ПК4 кросса «Птичное». Применениепробиотика с 1 суток на 80% снизилопроявление энтероколита в первые днижизни, исключило запоры, повысило аппетит иактивность, увеличило до нормы к 28 суткамживую массу и однородность цыплят. Важно,что стимуляция пробиотиком роста цыплят непривела к избыточной массе в продуктивныйпериод. Нормализовалось половоесозревание, которое было более равномернымпо линиям. Применение Лактобифадола с 1суток повысило яйценоскость за 36 недель на19,39%, за 40 недель – на 11,99%, с 16 недель – соответственно на11,61% и 6,01% по сравнению с контролем безснижения массы яйца (рис.3).