WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

загрузка...
   Добро пожаловать!

Pages:     | 1 |   ...   | 2 | 3 || 5 | 6 |   ...   | 11 |

Количество клеток РЭС в одном поле зрения среза (М+m)

ctxA+, tcpA+

49127,53+2774,28

43682,65+17092,83

0,2

9,5+2,82*

ctxA-, tcpA-

23800,41+3110,34

61297,42+21777,73

0,3

11,43+3,12*

ctxA-, tcpA+

47814,69+27466,31

47391,91+9536,68

0,24

10,2+3,02*

Интактный контроль

27356,84+6112,05

50759,18+4043,91

0,28

29,7+3,02

Примечание -* достоверность р<0,05

Таблица 5. Реакция апудоцитов кишечника крольчат-сосунков на внутрикишечное введение холерных вибрионов О139 серогруппы

Группа штаммов

V. cholerae О139 с генетической характеристикой

Количество апудоцитов в одном поле зрения среза кишечника (М+m)

Индекс активности апудоцитов (Иап)

Тонкий кишечник

Толстый кишечник

Тонкий кишечник

Толстый кишечник

Двенадцатиперстная кишка

Тощая кишка

Подвздошная кишка

Двенадцатиперстная кишка

Тощая кишка

Подвздошная кишка

V.cholerae МО45, РО7, 16064 (ctxA+, ace+, zot+ tcpA+)

4,43+0,8*

5,53+0,59

3,23+0,89*

2,5+0,62*

4,03

2,08

3,41

0,63

V.cholerae М62, 170 (сtxA-, ace-, zot-, tcpA-)

6,2+0,69

6,6+1,2

4,7+0,91

3,75+0,55

0,95

0,68

0,94

0,43

Интактный контроль

8,0+1,45

7,8+0,39

6,3+0,89

5,4+0,56

0,29

0,46

0,32

0,35

Примечание -* достоверность р<0,05

Так, Иап на введение ctxА+ штаммов холерных вибрионов в 14 раз превышал аналогичный показатель у контрольных животных и был выше, чем у крольчат, зараженных культурами ctxА- штаммов. У последних реакция клеток APUD-системы сводилась к умеренному функциональному напряжению элементов системы пропорциональному развивающимся адаптационно-компенсаторным процессам в органах.

Холерные вибрионы О139 серогруппы штаммов с генотипом ctxА+ zot+ace+ tcpА+ приводили к быстрой гибели подопытных животных и развитию выраженных изменений во внутрен­них органах близким к патологическим процессам, вызываемым вирулентными холерными вибрионами O1 серогруппы. Но в отличие от холерных вибрионов О1 серогруппы, в кишечнике подопытных крольчат наблюдали проявления воспалительного характера с прева­лированием пролиферативно-инфильтративных процессов над явлениями отека и дистрофического поражения энтероцитов. Эти из­менения в ЖКТ протекали на фоне выраженных токсических поврежде­ний паренхиматозных органов (почки, печень), возможно обусловленных строением патогена - наличием полисахаридной капсулы, соматическо­го антигена О139, некоторыми отличиями в строении ЛПС микроба.

Таким образом, возможность сравнения определяемых количественных параметров позволила выявить среди отобранных штаммов холерных вибрионов как культуры, вызывающие у биомоделей наиболее выраженные типичные для холерной инфекции патоморфологические изменения, так и штаммы, не приводящие к развитию таковых.

На основании этого был предложен принцип выбора контрольных штаммов для экспериментальных исследований инфекционного и вакцинного процессов. Морфометрический анализ с применением компьютерных технологий в исследованиях применяли для повышения качества и информативности экспериментального морфологического заключения.

Использование метода RITARD для воспроизведения холеры у взрослых кроликов позволило провести мониторинг инфекционного процесса (таблица 6). Степень выраженности клинической картины болезни у животных коррелировала с интенсивностью гистологических изменений в ряде функциональных систем макроорганизма и подтверждалась результатами морфометрического анализа, причем изменения учитываемых морфометрических параметров, находились в зависимости от серогруппы холерных вибрионов, используемых для воспроизведения инфекции и носили дозозависимый характер. Так, была отмечена прямая корреляционная связь между количеством апудоцитов тонкого кишечника и величиной отека подслизистой оболочки (r=0,8) у животных, зараженных холерными вибрионами О1 серогруппы.

Содержание клеток в собственной пластинке слизистой (СПС) оболочки во всех отделах кишечника у животных, зараженных холерными вибрионами О1 серогруппы, было ниже, чем в контроле, что отражало величину выраженности отека слизистой и подслизистой оболочек у них, в то время как на введение холерных вибрионов О139 серогруппы регистрировали увеличение плотности клеточного инфильтрата в тонком кишечнике и снижение числа клеток в толстом кишечнике.

Таблица 6. Клинико-морфологическая характеристика холерного инфекционного процесса

Штамм

Число животных

СПЖ павших животных, в (ч)

Клинико-морфологическая характеристика изменений у павших/выживших животных

всего

павшие

выжившие

Диарея

Тонкий кишечник

Толстый кишечник

Объем содержимого

Характер содержимого

Состояние сосудов

Характер содержимого

Состояние сосудов

Выраженность

Длительность (ч)

V. chole- rae Р3122

О1 серогруппы

12

11

1

29,4+3,2

+++

до 30

185,5+12,9

35,6+9,18

серозное

Полнокровие сосудов брыжейки

«кашица»

«орешки»

Умеренное полнокровие сосудов брыжейки

V. chole- rae Р16064 О139 се- рогруп- пы

7

7

0

27,4+2,9

+++

до 30

128,3+14,6

20,5+3,75

Серозно-слизистое

Выраженная инъекция сосудов серозной оболочки

«кашица»

Умеренное полнокровие сосудов брыжейки

Интактный контроль

3

0

3

>124

*

-

4,5+0,85

слизистое

бви

«орешки»

бви

Примечание – +++- выраженная диарея; *- отсутствие диареи; бви – без видимых изменений

То есть, ответная реакция макроорганизма на введение холерных вибрионов О139 серогруппы характеризовалась преимущественно экссудативным характером изменений в толстом кишечнике на фоне воспалительной реакции в тонком кишечнике, что подтверждалось присутствием в слизистой оболочке ПМЯЛ.

Холерные вибрионы О139 серогруппы вызывали более выраженную активацию МЭЛ в тонком кишечнике подопытных животных по сравнению с V.cholerae O1 серогруппы и оказывали значительное влияние на изменение функционального состояния бокаловидных клеток (таблица 7). Так, у всех животных этой группы имела место тенденция к увеличению числа клеток, содержащих КМПС, в то время как число клеток с секретом, представленным НМПС, резко снижалось, что указывало на снижение защитной функции слизи. Общие закономерности в реакции апудоцитов кишечника (таблица 8) как на введение холерных вибрионов как О1 серогруппы, так и О139 серогруппы сохранялись и заключались в уменьшении их количества во всех отделах кишечника на фоне их резкого опустошения и некоторого снижения синтетической активности. В целом реакция апудоцитов зависела от интенсивности развития диареи и тяжести течения заболевания у подопытных животных.

Таким образом, принцип поиска морфологических эквивалентов - маркеров заболевания и состояний реактивности макроорганизма, основанный на оценке клеточных систем защиты организма биомоделей - иммунной, нейроэндокринной и других, является перспективным направлением экспериментально-морфологического исследования патогенеза холеры.

Расширение арсенала методов морфологического исследования, применяемых для учета влияния рекомбинантных штаммов холерных вибрионов на организм биомоделей за счет введения информативных и доступных к определению параметров адаптационно-компенсаторных реакций макроорганизма, позволило провести комплексное исследование холерных вибрионов О1 и О139 серогрупп: штамма V.cholerae eltor КМ184, не имеющего гена, кодирующего синтез холерного токсина (СТ), и несущего гены, детерминирующие экспрессию иммуногенной В-субъединицы СТ и фактора колонизации CFAI E.coli; штамма V. cholerae КМ182, содержащего рекомбинантные плазмиды с протективными антигенами - B-субъединицей холерного токсина и адгезином CFA/I.

В результате проведенных исследований были получены новые знания о механизмах нейроэндокринной регуляции процессов иммуногенеза - определены количественные показатели состояния нейроэндокринной системы кишечника и лимфоидных органов, в том числе лимфоидной ткани, ассоциированной с ЖКТ.

Динамика изменений морфофункционального состояния апудоцитов в кишечнике взрослых кроликов, иммунизированных V.cholerae КМ184, заключались в последовательной смене фаз функциональной активности и покоя клеток (таблица 9). Прослеживалась средней силы корреляционная связь (как прямая, так и обратная) между количеством апудоцитов в кишечнике и иммунологическими показателями в крови биомодели. Наблюдали обратную средней силы корреляционную связь ( = -0,5) между количеством НЭК в лимфоидных органах и уровнем агглютининов к V. cholerae cholerae и прямую средней силы связь ( = 0,5) между количеством НЭК и уровнем агглютининов к V. cholerae eltor.

Таблица 7. Характеристика состояния секреторных клеток ЖКТ и межэпителиальных лимфоцитов (МЭЛ) кроликов, зараженных вирулентными холерными вибрионами по методу RITARD

Штаммы

Количество секреторных клеток в поле зрения среза (М+m)

Индекс секреторной активности (Иса)

Количество межэпителиальных лимфоцитов (МЭЛ) на 100 ядер эпителиальных клеток

Двенадцатиперстная кишка

Подвздошная кишка

Толстый кишечник

Двенадца-

типерстная

кишка

Подвздошная кишка

Pages:     | 1 |   ...   | 2 | 3 || 5 | 6 |   ...   | 11 |






© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»