WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

загрузка...
   Добро пожаловать!

Pages:     | 1 |   ...   | 8 | 9 || 11 |

Алгоритм оценки влияния испытуемых экспериментальных и коммерческих препаратов для специфической профилактики чумы и туляремии разрабатывали таким образом, чтобы: количественно оценить повреждающее действие вакцины (остаточную вирулентность) и возможные побочные реакции макроорганизма на нее; охарактеризовать стресс-реакцию макроорганизма; проанализировать роль клеток APUD-системы как системы реагирования и контроля в реализации защитного потенциала макроорганизма при вакцинном процессе; выявить морфометрические параметры, определяющие специфическую активность вакцины на основании оценки устойчивости функционально значимых систем организма биомодели к повреждающему действию конкретного возбудителя.

Для оценки был отобран ряд формализованных признаков: определение функционального состояния паренхиматозных элементов и характера инфильтративных процессов в печени, отражающих степень нарушения дезинтоксикационной, синтетической и защитной функций органа; учет количества НЭК в легких, обеспечивающих местную регуляцию функций дыхательной системы – приспособление кровотока к вентиляции легких и изменение ПВО; оценка микроциркуляторных нарушений в ренальном звене – функциональное состояние почечных телец и эпителия канальцев, обеспечивающих адекватную работу выделительной системы; анализ морфофункционального состояния НЭК лимфоидных органов, выступающих в роли неспецифических регуляторов иммунологических процессов; количественная характеристика изменений в надпочечниках – органе, ответственном за формирование адаптационных реакций.

Таким образом, применение аппаратно-программных компьютерных комплексов и стандартных схем морфологического анализа по представленным алгоритмам в экспериментальной морфологии особо опасных инфекций, упрощая доклиническую характеристику создаваемых препаратов против холеры, чумы и туляремии, позволит нивелировать зависимость качества конечного результата исследования от субъективизма оценки исследователя.

ВЫВОДЫ

1. В ответ на введение штаммов V. cholerae, Y. pestis, F. tularensis с различной генетической характеристикой, рекомбинантных штаммов V. cholerae, экспериментальных и коммерческих препаратов для специфической профилактики холеры, чумы и туляремии выявлены особенности изменения ряда морфометрических параметров, характеризующих адаптационно-компенсаторные реакции у биомоделей, дополняющие имеющиеся представления о пато- и иммуногенезе указанных инфекций.

2. Введение штаммов холерных вибрионов О1 и О139 серогрупп с генотипом ctxA+ zot+ ace+ tcpA+приводит к развитию выраженных морфологических изменений в желудочно-кишечном тракте и внутренних органах биомоделей, вызывая функциональное напряжение клеток APUD-системы кишечника с увеличением индекса активности апудоцитов по отношению к интактному контролю в 24-14 раз соответственно. Изменения в тонком кишечнике биомоделей на введение культур холерных вибрионов штаммов с генотипом ctxA- tcpA+ и ctxA-tcpA- носят однонаправленный характер, не имеют достоверных отличий между собой и свидетельствуют об умеренном напряжении морфофункционального состояния апудоцитов с увеличением их индекса активности в 3 раза. По предложенным морфометрическим параметрам отобран штамм V. cholerae биовара eltor, серовара Ogawa (ctxA-, zot-, tcpA-, toxR-), предлагаемый в качестве контрольного для морфологических и иммунологических исследований.

3. Установлены различия в течении экспериментальной холерной инфекции у биомоделей, зараженных холерными вибрионами О1 и О139 серогрупп, касающиеся особенностей морфофункционального состояния клеток кишечника, выполняющих барьерные функции: межэпителиальных лимфоцитов, апудоцитов, бокаловидных клеток, клеток собственной пластинки слизистой оболочки кишечника. Изменение соотношения между различными клеточными популяциями, нарушение интенсивности обменных процессов в них отражают уровень повреждающего действия холерных вибрионов на функциональные системы макроорганизма.

4. При испытании эффективности экспериментальных и коммерческих противохолерных вакцин и рекомбинантных штаммов V. cholerae О1 и О139 серо-групп обнаружены изменения числа и морфофункционального состояния апудоцитов кишечника, клеток эффекторной зоны иммунной системы желудочно-кишечного тракта и нейроэндокринных клеток в лимфоидных органах, в том числе в лимфоидной ткани, ассоциированной с кишечником биомоделей, в зависимости от используемого препарата, способа и кратности его введения, степени выраженности иммунологической перестройки в органах иммунной системы на момент заражения.

5. Разработан способ оценки качества вакцинных препаратов против холеры, включающий морфологическое исследование гистологического материала от биопроб с использованием морфометрической характеристики трех групп клеточных элементов в слизистой оболочке кишечника и математическую обработку количественных показателей. Применение предложенных коэффициентов и индексов учета результатов способствует объективизации и унификации оценки качества противохолерных вакцин.

6. При заражении беспородных белых мышей культурами штаммов Y. pestis pFra+, pPst+, pCad+, Pgm+ и Y. pestis pFra+, pPst+, pCad+, Pgm- выявлены отличия в состоянии функционально значимых систем макроорганизма по изменению морфометрических параметров, характеризующих размер органа, число и площадь его функционально активных структур (фолликулов лимфоидных органов, почечных телец и сосудистых клубочков, легочных альвеол и капилляров), количество клеток разных видов, отвечающих на антигены возбудителя, в том числе апудоцитов, клеток ретикулоэндотелиальной системы, гепатоцитов.

7. Об эффективности защиты морских свинок, предварительно иммунизированных вакцинными штаммами Y. pestis EV линии НИИЭГ и F. tularensis 15 линии НИИЭГ, при введении вирулентных культур этих микроорганизмов свидетельствует отсутствие выраженных изменений морфометрических параметров, отражающих функциональное состояние печени, почек, аэрогематического барьера легких, клеток нейроэндокринной системы макроорганизма.

8. Выявлен фазный характер изменений количества и морфофункционального состояния нейроэндокринных клеток в лимфоидных органах и легких при подкожном и аэрогенном способах иммунизации биомоделей вакциной Y. pestis EV, отражающий направленность процессов иммуногенеза и выраженность стресс-реакции макроорганизма.

9. Для повышения объективности характеристики безвредности, реактогенности и иммунологической эффективности живых вакцин против чумы и туляремии с помощью экспертной системы предложен алгоритм оценки степени тяжести экспериментальной инфекции и адаптационно-компенсаторных реакций у биомоделей при моделировании вакцинного процесса, основанный на применении морфометрических показателей: ядерно-цитоплазматического индекса светлых гепатоцитов, деструктивного индекса, перфузионно-вентиляционного отношения, количества и морфофункционального состояния нейроэндокринных клеток (в лимфоидных органах, легких, надпочечниках) и клеток ретикулоэндотелиальной системы, определяемых с использованием аппаратно-программных компьютерных комплексов.

Список работ, опубликованных по теме диссертации

  1. Бугоркова С.А., Грачева И.В., Исупов И.В., Валова Т.В., Плотников О.П. Сравнительная характеристика патогенного действия холерных вибрионов не 01 группы 0139 серовара и 01 группы на APUD-систему кишечника крольчат-сосунков // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. –1999.- № 3.- С. 10-13.
  2. Бугоркова С.А. Экспериментальное изучение состояния апудоцитов кишечника и иммунокомпетентных органов при противохолерной вакцинации // Избранные проблемы педиатрии.- Саратов: Из-во СГМУ, 2000.- С. 13-15.
  3. Бугоркова С.А., Исупов И.В., Бугоркова Т.В., Майоров Н.В., Кутырев В.В. Состояние APUD-системы кишечника и морфологические изменения во внутренних органах взрослых кроликов, зараженных токсигенными холерными вибрионами // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. - 2000.- № 3.- С. 11-14.
  4. Бугоркова С.А., Исупов И.В. APUD- система кишечника животных при холерной инфекции, интоксикации и вакцинальном процессе // Рук. Деп. В ВИНИТИ 09.11.2000 № 2825-В-2000.
  5. Бугоркова С.А., Исупов И.В. Экспериментальные данные сравнительной патоморфологической оценки действия холерных вибрионов 01- и 0139 серогрупп / С.А. Бугоркова, И.В. Исупов // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. - 2001.- № 2.- С. 6-9.
  6. Бугоркова С.А., Чеховская Г.В., Ливанова Л.Ф., Смирнова Н.И. Морфологический анализ инфекционного процесса, обусловленного капсульными и бескапсульными вариантами холерных вибрионов 0139 серовара // Холера и патогенные для человека вибрионы: Матер. пробл. комиссии межведомственного научного совета по санитарно-эпид. охране террит. РФ.- Ростов-н/Д, 2001.- Вып. № 14. - С. 70-72.
  7. Бугоркова С.А., Исупов И.В. Анализ компенсаторных возможностей организма при противохолерной иммунизации // Пробл. особо опасных инфекций.- 2001.- Вып. 81.- С. 141-147.
  8. Бугоркова С.А., Исупов И.В., Назарова Л.С., Елисеев Ю.Ю. Состояние апудоцитов при противохолерной вакцинации в эксперименте // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. - 2001.- № 4.- С. 27-31.
  9. Бугоркова С.А., Назарова Л.С., Задумина С.Ю. Использование морфометрического анализа для оценки качества вакцин // Новые технологии в медицине: Матер. Всерос. науч.-практ. конф.- Саратов.- С. 48-49.
  10. Исупов И.В., Назарова Л.С., Бугоркова С.А., Кутырев В.В. Патоморфологические подходы к доклинической оценке холерных вакцин // Рук. деп. в ВИНИТИ 14.01.02 № 56-В-2002.
  11. Бугоркова С.А., Исупов И.В., Задумина С.Ю. Значение патоморфологической оценки при моделировании холерной инфекции методом RITARD // Проблемы морфологии: Общерос. конф. с междунар. участием.- Сочи.- 2002.- С.12.
  12. Бугоркова С.А., Исупов И.В., Задумина С.Ю. Использование некоторых морфометрических показателей для характеристики инфекционного процесса // Проблемы морфологии: Общерос. конф. с междунар. участием.- Сочи.- 2002.- С.15.
  13. Бугоркова С.А., Задумина С.Ю., Назарова Л.С. Экспериментальное исследование эмбриотропного действия холерных вакцин // Проблемы морфологии: Общерос. конф. с междунар. участием.- Сочи.- 2002.- С.16.
  14. Анисимова Т.И., Дроздов И.Г., Щуковская Т.Н., Ерошенко Г.А., Саяпина Л.В., Назарова Л.С., Адамова Г.В.,. Малыхина З.В.,. Монахова Е.В.,. Куличенко А.Н., Задумина С.Ю., Бардахчьян Э.А.,. Резников Ю.Б., Лоцманова Е.Ю., Миронова Н.П., Пуденкова О.С.,. Емельянова Н.В.,. Фирстова В.В., Клюева С.Н., Малахаева А.Н., Касина И.В., Бугоркова С.А. Государственные доклинические испытания V. cholerae Eltor КМ-184, предлагаемого в качестве вакцинного // Холера и патогенные для человека вибрионы: Матер. пробл. комиссии межведомственного научного совета по санитарно-эпид. охране террит. РФ.- Ростов-н/Д, 2002.- Вып. № 15. - С. 108-109.
  15. Лоцманова Е.Ю., Щуковская Т.Н., Исупов И.В., Емельянова Н.В., Фирстова В.В., Клюева С.Н., Бугоркова С.А., Кривенко Д.В. Моделирование холерной инфекции при помощи метода RITARD // Холера и патогенные для человека вибрионы: Матер. пробл. комиссии межведомственного научного совета по санитарно-эпид. охране террит. РФ.-Ростов-н/Д, 2002.-Вып. № 15.-С.111-112.
  16. Лоцманова Е.Ю., Щуковская Т.Н., Фирстова В.В., Емельянова Н.В., Кравцов А.Л., Клюева С.Н., Бугоркова С.А., Дроздов И.Г., Кутырев В.В. Оценка иммунологической эффективности оральных холерных вакцин при помощи метода RITARD // Холера и патогенные для человека вибрионы: Матер. пробл. комиссии межведомственного научного совета по санитарно-эпид. охране террит. РФ.- Ростов-н/Д, 2002.- Вып. № 15. - С. 100.
  17. Бугоркова С.А., Задумина С.Ю., Лоцманова Е.Ю., Щуковская Т.Н. Экспериментально-морфологическая характеристика эффективности противохолерных вакцинирующих препаратов // Холера: Матер. VIII Рос. Науч.-практ. Конф.- Ростов-н/Д.- 2003.- С. 224-227.
  18. Бугоркова С.А., Задумина С.Ю., Исупов И.В., Лоцманова Е.Ю., Щуковская Т.Н., Кутырев В.В. Морфологические подходы к оценке эффективности противохолерных вакцин в эксперименте // Пробл. особо опасных инфекций.- 2003.- Вып. 86.- С. 108-116.
  19. Исупов И.В., Бугоркова С.А., Кутырев В.В. Патоморфологические аспекты доклинических испытаний различных вакцин против чумы, сибирской язвы и холеры - Саратов.- 2004.- 179 с.
  20. Бугоркова С.А., Щуковская Т.Н., Кутырев В.В. Реакция апудоцитов кишечника у иммунизированных животных при моделировании холерной инфекции // Холера и патогенные для человека вибрионы: Матер. пробл. комиссии межведомственного научного совета по санитарно-эпид. охране террит. РФ.- Ростов-н/Д, 2004.- Вып. № 17. - С. 98-100.
  21. Бугоркова С.А., Задумина С.Ю., Щуковская Т.Н. Нейроэндокринные механизмы регуляции вторичного иммунного ответа при холерной инфекции // Матер. ХIХ съезда физиологического общества им. И. П. Павлова.- Екатеринбург, 2004. - С. 46-47.
  22. Кобкова И.М., Ливанова Л.Ф., Бугоркова С.А., Смирнова Н.И. Конструирование и изучение иммунобиологических свойств рекомбинантных штаммов Escherichia coli и Vibrio cholerae, продуцирующих протективные антигены // Окружающая Среда и здоровье: Матер. Всерос. Науч.-практ. Конф. молодых ученых и специалистов.- Суздаль.- 2005. - С. 350-353.
  23. Бугоркова С.А., Задумина С.Ю., Щуковская Т.Н. Морфофункциональная характеристика кишечного барьера взрослых кроликов при экспериментальной холерной инфекции, обусловленной вибрионами 01- и 0139-серогрупп // Холера и патогенные для человека вибрионы: Матер. пробл. комиссии межведомственного научного совета по санитарно-эпид. охране террит. РФ.- Ростов-н/Д, 2005.- Вып. № 18. - С. 120-122.
  24. Бугоркова С.А., Задумина С.Ю., Щуковская Т.Н., Кутырев В.В. Исследование адаптационно-компенсаторных возможностей иммунного организма при экспериментальной холере // Пробл. особо опасных инфекций.- 2005.- Вып. 1(89).- С. 59-62.
  25. Бугоркова С.А. Состояние эффекторной зоны иммунной системы желудочно-кишечного тракта кроликов при экспериментальной холерной инфекции, обусловленной вибрионами 01- и 0139- серогрупп // Успехи современного естествознания. - 2005.- № 11.- С. 92-93.
  26. Бугоркова С.А., Задумина С.Ю., Щуковская Т.Н., Кутырев В.В. Участие апудоцитов в адаптивном процессе при экспериментальной холере в иммунном организме // Рук. Деп. в ВИНИТИ 18.07.05. № 1045-В-2005.
  27. Бугоркова Т.В., Осина Н.А., Бугоркова С.А., Куличенко А.Н., Кутырев В.В. Авирулентный тест-штамм бактерий Vibrio Cholerae биовара eltor серовара Ogawa (ctxA-, tcpA-, toxR-, zot-), используемый в иммунологических, генетических исследованиях и учебном процессе // Патент на изобретение № 2254371.- Опуб. 20.06.05.- Бюл.
    Pages:     | 1 |   ...   | 8 | 9 || 11 |






© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»