WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

загрузка...
   Добро пожаловать!

Pages:     | 1 |   ...   | 4 | 5 || 7 | 8 |   ...   | 10 |

Известно, что NОявляется свободным радикалом и участвуетв регуляциииммунокомпетентных клеток[Арзамасцев А. П. и др..,2003;Luo В. et al.,2004]. Проведенное исследованиепродемонстрировало, что системаповышенной генерации и метаболизмаNО являетсясоставной частью многокомпонентногоответа у пострадавших с ТСТЖ, осложненнойперитонитом (табл.6).

Полагаем, чтовследствие эндотоксинстимулированнойактивации iNOS вырабатывается избы­точное количествоNО, который,воздействуя на ме­таболизм иммунокомпетентныхклеток, ингибирует в нем три жизненноважных группы ферментов: митохондриальнойдыха­тельнойцепи, цикла Кребса и синтеза ДНК, врезуль­татечего такая клетка может погибнуть из-задефи­цитаэнергии.

Эти данные былиподтверждены при изучении NО -зависимого апоптоза Т-лимфоцитов,показавшие, что токсический эффектNО усиливалапоптоз Т-лимфоцитов, доводя его в среднемдо 59,4±4,1% при тяжеломперитоните (норма 8,9±1,3%).

Полученные нами данныепо исследованию NО как соединения, выпол­няющего функциипосредника в межклеточныхвзаимодействи­ях и цитотоксического эффектораиммунологической защиты организма,позволили прояснить важные аспекты вмеханизмах инициации ипрогрессировании перитонита упострадавших с ТСТЖ.

Таблица 6

Содержаниеконечных продуктов оксида азота(нитритов/нитратов) у пострадавших ссочетанной травмой живота в зависимости оттяжести перитонита (M±m)

Содержание нитритов/нитратов

Контроль

Тяжесть перитонита по МИП,баллы

18,9±1,3

27,1±1,9

38,4±1,8

Плазмакрови, мкМ

59,5±2,8

530±33

631±47

709±46

Моча, мкМ

50,6±2,2

539±32

682±43

745±67

Перитонеальноеотделяемое, мкМ*

0,086±0,001

0,88±0,01

1,51±0,09

1,75±0,19

Супернатат ПЯЛкрови, нмоль/5•106 лейкоцитов

0,39±0,02

1,77±-,10

2,52±0,19

3,26±0,21

iNOS ПЯЛкрови

0,051±0,003

0,12±0,09

0,33±0,08

0,51±0,09

iNOS ПЯЛперитонеального отделяемого*

0,033±0,002

0,09±0,003

0,18±0,01

0,27±0,09

*Отно­сительнымконтролем отделяемого из брюшной по­лости служилажидкость, полученная при хирургическихвмешательствах без перитонита сиспользованием видеолапароскопическойтехники.

Программированнаягибель (апоптоз)иммунокомпетентных клеток представляетсобой процесс, столь же важный инеотъемлемый от формирования ифункциони­рования иммунной системы, как ихпролиферация и дифференцировка.

Избыточный апоптозиммунокомпетентных клеток был характернымявлением для ТСТЖ, осложненной перитонитом(табл.7).

Таблица 7

Характер и динамикаизменений показателей апоптоза лимфоцитов

у пострадавших ссочетанной травмой живота в зависимости оттяжести перитонита, M±m

Показатель

Контроль

Тяжесть перитонита по МИП,баллы

18,9±1,3

27,1±1,9

38,4±1,8

Уровеньапоптоза

лимфоцитов, %

спонтанный

6,8±0,56

9,2±0,89

20,2±1,4

33,1±1,9

конА-инду-цированный

19,6±0,78

26,5±1,4

39,1±1,9

47,2±2,8

Уровеньапоптоза ПЯЛ,%

спонтанный

7,1±0,54

10,4±0,97

21,1±1,1

31,2±1,7

конА-инду-цированный

20,9±1,7

31,1±1,9

42,8±2,7

56,2±2,1

ДоляТ-лимфоцитов сморфоло-гическими признаками NО-зави-симого апоптоза,%

8,9±1,3

17,7±1,2

33,8±2,0

59,4±4,1%

В связи с тем, чтоапоптоз иммунокомпетентных клетокрегулируется Fas (АРО-1/СЕ)95) - антигеном, БТШ, а также рядоммолекулярно-генетических«маркеров» [Барышников А.Ю. и др.,2002; Ohno S. et al., 2000; BernasconiС., 2001; MarktelS. etal., 2001],исследованаих продукция в организмепострадавших в зависимостиот тяжести перитонита (табл.8).

Таблица 8

Характер и динамикаизменений «маркеров» апоптозалимфоцитов

у пострадавших ссочетанной травмой живота в зависимости оттяжести перитонита, M±m

Показатель

Контроль

Тяжесть перитонита по МИП,баллы

18,9±1,3

27,1±1,9

38,4±1,8

СD95+,%

5,7±0,51

7,7±0,56

18,3±1,2

28,9±1,9

Экспрессии СD95+(Fas,АРО-1),%

39,7±2,66

43,4±2,8

56,6±2,9

69,1±2,8

Количество,%

p53

59,9±2,8

66,2±3,4

71,3±3,3

95,7±4,1

Вcl-2

81,9±5,9

58,9±3,8

27,1±0,66

5,17±41

Плотностьрецепторов

p53

4,25±0,22

9,8±0,88

16,0±1,2

19,3±1,7

Вcl-2

7,6±0,29

4,2±0,11

0,61±0,02

0,49±0,01

Экспрессияc-fos, 17e-0,1

2,16±0,09

4,55±0,28

6,97±0,99

10,7±1,09

Экспрессияс-mус, 17e-0,1

3,23±0,12

6,8±0,46

8,2±0,88

11,7±1,0

При анализе полученныхданных, установлено, чтоповышение количества CD95+ клеток и уровняэкспрес­сиина них Fas-рецептора, р53, c-fos и с-mус,являющихся «активаторами» апоптоза, на фоне снижения «блокаторов»апоптоза bcl-2, является реакцией,приводящей к гибели лимфоцитов.

Подтверждениемполученных данных стал корреляционныйанализ, установивший высокую степеньзависимости между долей лимфоцитов сморфологическим признаками апоптоза иуровнем экспрессии СD95+(Fas, АРО-1) (rxy=+0,89±0,005; p<0,01), c-fos и с-mус(rxy=+0,71±0,006; p<0,05),продукцией р53 (rxy=+0,72±0,009; p<0,05) и bcl-2(rxy=+0,77±0,003; p<0,01), а также данные иммуноблоттинга, показавшие оснижении содержания БТШ70, защищающихлимфоциты от апоптоза [Richardson A.et al.,1998;Gray С. et al.,1999].

Рядом авторов показано [Armstrong L. et al., 2000; Schefold J.et al., 2005], чтоисследование иммунологических механизмовразвития итечения ряда гнойно-воспалительныхпроцессов является не полным без изучения секреции ифункции цитокинов.

Наши исследованияпоказали, что продукция провоспалительныхцитокинов в крови многократно превышала нормальныезначения,коррелируя с тяжестью перитонита (rxy=+0,77±0,01; p<0,01). В частности, уровень ИЛ-1 и ИЛ-1,ИЛ-6, ФНО-был повышен в среднем при I ст.тяжести перитонита по МИП соответственно в3,8, 4,9, 12,6 и 7,3 раза по сравнению сконтрольными данными (p<0,01). При II ст.тяжести перитонита по МИП уровень этих жецитокинов повышался в среднемсоответственно в 8,1, 8,3, 15,5, 20,8 раз, а приIII ст.- соответственно в 17,9, 19,8, 24,6, 26,3 раза посравнению с контрольными данными (p<0,01).

Как известно,одновременное повышение уровня ИЛ-1, ИЛ-6 иФНО в циркуляции обусловливаеттолеран­тность иммунокомпетентных клеток кэтим регуляторным сигналам и тем самымпрепятствует развитию клеточных реакцийиммунитета, вследствие чего активацияэффекторных фун­кций фагоцитов супрессируется, чтоможет приводить к генерализации инфекции[Wilson P. et al.,1998; Armstrong L. et al., 2000].

Для устранения отнегативных влияний провоспалительныхцитокинов в организме включаютсямеханизмы, опосредованные продукциейпротивовоспали­тельных цитокинов и растворимыхингибиторов провоспалительных цитокинов [Uin E. etal., 2000; ToftP. et al.,2003]. В нашихисследованиях показано, что их продукциябыла значительно снижена и находилась взависимости от тяжести перитонита (rxy=+0,79±0,02; p<0,01).Так, секреция ИЛ-2, ИЛ-4, ИЛ-10, ТФР-1 была ниже контрольных значений при Iст. перитонита по МИП в среднемсоответственно в 2,8, 1,8, 3,6 и 3,3 раза,при IIст. – в6,0, 6,6, 6,5 и 6,6 раза, а при IIIст. -соответственно в 15,9, 10,2, 10 и 10,4 раза посравнению с контрольными данными (p<0,01).

Нарушение же балансамежду провоспалительными ипротивовоспали-тельными цитокинами ассоциируется с прогрессированиемперитонита, а также cпоследующим развитием инфекционныхинтраабдоминальных и внеабдоминальныхосложнений (rxy=+0,79±0,01; p<0,01), так как происходитснижение бактерицидной активности ПЯЛ(rxy=+0,79±0,02;p<0,01). Это приводит к длительнойперсистенции бактерий как вциркулирующей крови, так и вперитонеальном экссудате, способствуяпрогрессированию инфекционногопроцесса.

В клинической практикедиагностики и лечения ТСТЖ, осложненнойперитонитом, важное значение имеетпонимание механизмов «уклонения«микроорганизмов от иммунологического«надзора».

Определены основныемеханизмы «уклонения» микроорганизмов отиммунологического «надзора», которые обусловленыс одной стороны, синтезом антител, необладающихвысоким сродством (аффинностью) кантигенным эпитопам, что сопровождаетсяснижением эффективности их связывания сантигеном (rxy=+0,71±0,009; p<0,05), с другой – за счет сниженияколичества таких поверхностных антигеновлимфоцитов, как HLA-DR+ и HLA-DQ+(rxy=+0,69±0,005; p<0,05), что согласноданным литературы сопровождается понижем способности организма развивать специфическийиммунный ответ [Баранова И.Н. и др.,2000; Fraser J. et al.,2000], с третьей - за счетизбыточной продукции микроорганизмамиFasL,способного связываться с Fas-рецепторомлимфоцитов и таким путем «включать» у них программуизбыточного апоптоза (rxy=+0,73±0,005; p<0,01), с четвертой- нарушением функциональной активностисистемы комплемента (снижение содержания С1-4 и увеличениеС5компонентов) (rxy=+0,76±0,006; p<0,01).

Однако в большей степениэти механизмы были связаны с количественными и качественнымиизменениями в фагоцитарной системе ПЯЛ, играющихведущую роль в противобактериальнойзащите [Макарьева И.В. и др., 2004;Ando Т. et al., 2000; Boley S. et al., 2006].Полученные нами данными свидетельствуют,что такие показатели фагоцитарнойактивности ПЯЛ как ФАЛ, ПЗФ, ФЧ, ФИ, NBT-тест были снижены упострадавших с ТСТЖ итесно коррелировали с тяжестьюперитонита (rxy=+0,86±0,005; p<0,01). Так, при I ст. перитонита поМИП ФАЛ,ПЗФ, ФЧ, ФИ, NBT-тест были сниженысоответственно на 18,2%, 21,0%, 25,6%, 17,3% и 22,4%,при IIст.-соответственно на 29,3%, 45,7%, 53,1%, 30,2% и 31,4%, приIII ст.-соответственно на 43,5%, 60,2%,63,3%, 48,4% и 51,5% по сравнению снормой.

Pages:     | 1 |   ...   | 4 | 5 || 7 | 8 |   ...   | 10 |






© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»