WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

загрузка...
   Добро пожаловать!

Pages:     | 1 | 2 ||

В отличие от постановки реакций в серологических пробирках, наиболее четко выраженная крупнозернистая агглютинация эритроцитов в лунках планшета была отмечена при концентрации суспензии 1,5% и времени инкубации 1 час. Суспензия с 0,5% концентрацией имела очень бледную окраску, что затрудняло чтение результатов реакции, также как и 2,5% взвесь с излишне интенсивной окраской. Инкубация в термостате в течение 30 и 40 минут было явно недостаточной для полного проявления агглютинации эритроцитов с антителами сыворотки, а прочтение результатов через 1,5 и 3 часа несколько затрудняло дифференциацию бахромчатости краев по причине высыхания взвеси в лунках планшета.

Оптимальная концентрация суспензии эритроцитов для микрометода на планшете составляет 1,5%, время инкубации 1 час.

Экономическая эффективность результатов исследований

Изготовление сывороток-реагентов – это длительный произ-водственный процесс, связанный с содержанием большой группы лошадей – продуцентов. Основной статьей расхода при получении реагентов являются затраты на донорское поголовье, в том числе на приобретение и содержание животных. Поэтому очень важно иметь такое поголовье продуцентов, которое отвечает потребностям лаборатория по генотипам и иммунореактивности.

Расчет экономической эффективности использования аналитической схемы подборов пар доноров к реципиентам при составлении плана иммунизаций показал, что при этом методе один рубль затрат на производство сывороток позволяет получить 85 коп. прибыли, что является хорошим показателем эффективности.

Результаты внедрения микрометода наглядно представлены в таблице 5. Благодаря внедрению микрометода расход дефицитных сывороток-реагентов сократился в 3 раза, существенно снизились затраты рабочего времени и прочие расходы. При этом значительно повысилась чувствительность метода, а срок хранения проб крови увеличился в 1,5 раза.

В настоящее время лаборатория полностью перешла на планшетный микрометод, что позволило существенно сэкономить имеющиеся запасы сывороток-реагентов.

Таблица 5.

Сравнительная оценка эффективности методов определения групп крови лошадей

Показатели

(в расчете на одну голову)

Пробирочный метод

Планшетный микрометод

Экономия при использовании микрометода

1

Расход сывороток-реагентов, µл

75

25

50

2

Расход рабочего времени на операции

30 мин

10 мин

20 мин

3

Дополнительные расходы, включая хим.реактивы и эл. энергию на 1 пробу, руб.

37

9

28

Производственная проверка показала высокую эффективность системного подхода при использовании аналитической модели. Для 15 апробированных подборов результативность составила 73%, т е было получено 11 сывороток из 15 возможных.

ВЫВОДЫ

1. Результативность получения сывороток-реагентов для определения групп крови лошадей в значительной степени определяется планом иммунизации, который должен составляться с учетом генотипических различий доноров и реципиентов, а также возможности последующей адсорбции полученной сыворотки.

2. Большинство аллелей групп крови лошадей включают группы сцепленных антигенов, что необходимо учитывать как при подборах донорских пар, так и при адсорбции «сырых» сывороток.

3. При контроле содержания общего белка в сыворотке крови лошадей в процессе иммунизации не было выявлено четко выраженной зависимости иммунореактивности продуцентов от этого показателя.

4. Установлена достоверная связь между содержанием иммуноглобулинов в сыворотке крови лошадей и их иммунореактивностью. Реактивные лошади-продуценты с высоким титром антител имели достоверно более высокий уровень общего количества иммуноглобулинов еще до иммунизации, который постепенно увеличивался после каждой инъекции крови донора.

5. Анализ показателей воспроизводства кобыл арабской и чистокровной верховых пород, имевших несовместимые жеребости по антигену Dc, не подтвердил связи гемолитической болезни жеребят с этим фактором.

6. В результате проведенных исследований отработаны оптимальные параметры проведения планшетного микрометода: концентрация взвеси эритроцитов должна составлять 1,5%, количество взвеси эритроцитов и сыворотки-реагента 0,25-0,30µл, время инкубации 1 час.

7. Использование микрометода позволяет снизить расход сывороток-реагентов и затраты рабочего времени в 3 раза, а также продолжительность анализа с четырех до одного часа. Планшетный микрометод типирования групп крови можно использовать как в лабораторных, так и в полевых условиях.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. При получении сывороток - реагентов для типирования групп крови лошадей подбор пар «донор-реципиент» следует проводить с учетом групп сцепления и в соответствии с рекомендованной схемой, что позволит избежать получения проблемных сывороток.

2. Для успешной работы необходимо комплектовать донорский табун лошадьми со следующими генотипами Аa, Аadf, Аbc, Аce, Аbce; Dadlnr, Dadlr, Ddlnqr, Dbcm, Ddghm, Dcgm, Ddeloq, Ddek, Ddkl, Dcegimn, Cа, Kа, Uа, Pa, Pb, Qac, Qc, Qabc, Qb.

3. Отбор лошадей-продуцентов проводить с учетом высокого содержания иммуноглобулинов на уровне 11 мг/мл и выше.

4. Иммуногенетическим лабораториям целесообразно полностью перейти на типирование групп крови лошадей планшетным микрометодом, который позволяет существенно экономить сыворотки-реагенты и затраты рабочего времени персонала, а также может быть использован как в лабораторных, так и в полевых условиях.

СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ РАБОТ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Зайцев А.М., Мелентьева Н.М. Характеристика генетической структуры кузнецкой породы лошадей по эритроцитарным антигенам и полиморфным системам белков и ферментов крови// Материалы науч. сессии РСХА «Стратегия развития животноводства –21 век» и координационного совещания по научно-исследовательской работе в коневодстве. – Дивово, 2001.-С.70-72.

2. Мелентьева Н.М. Повышение эффективности изготовления и использования сывороток-реагентов для типирования групп крови лошадей// Сб.науч.тр. –Дивово, 2007. –С.107-111.

3. Мелентьева Н.М. Связь систем групп крови с заболеваемостью жеребят неонатальным изоэритролизисом// Журнал «Коневодство и конный спорт», 2007.- № 4. –С. 21-22.

4. Методические рекомендации по производству и использованию сывороток-реагентов для типирования групп крови лошадей// ВНИИК – 2005/ Храброва Л.А., Дубровская Р.М., Потапова Д.В, Мелентьева Н.М, Орехова Т.М.

5. Мелентьева Н.М., Храброва Л.А. Генетическая детерминация гемолитической болезни жеребят// Науч. основы сохранения и совершенствования пород лошадей. - Дивово, 2003. –С. 74-80.

6. Мелентьева Н.М., Храброва Л.А. Технологические аспекты микрометода определения групп крови лошадей// Итоги исследований по коневодству в первом году 21 века. – Дивово, 2002. – С.38-40

7. Мелентьева Н.М., Храброва Л.А. Усовершенствование методики получения сывороток-реагентов для открытых систем групп крови у лошадей// Проблемы сохранения генофонда, повышения племенных и продуктивных качеств заводских и местных пород лошадей: Тезисы. – Дивово, 2003. –С.41-44.

8. Мелентьева Н.М., Храброва Л.А., Матвиенко А.П. Оценка экономической эффективности применяемых методов изготовления и использования сывороток-реагентов для типирования групп крови лошадей// Сб.науч.тр. –Дивово, 2007. –С.103-106.

9. Угадчиков С.Т., Мелентьева Н.М., Цуцков В.В. Влияние минерально–витаминно–аминокислотного премикса на иммунореак-тивность лошадей-доноров//Материалы науч. сессии РСХА «Стратегия развития животноводства – 21 век» и координационного совещания по научно-исследовательской работе в коневодстве. – Дивово, 2001. С.93-94.

10. Храброва Л.А., Мелентьева Н.М. Гемолитическая болезнь новорожденных жеребят: диагностика и профилактика// Материалы 2-ой научно-практической конференции по болезням лошадей. – М., 2001. – С. 98-99.

11. Храброва Л.А., Мелентьева Н.М. Гемолитическая болезнь новорожденных жеребят: диагностика, профилактика// Материалы научной сессии РСХА «Стратегия развития животноводства – 21 век» и координационного совещания по научно-исследовательской работе в коневодстве. – Дивово, 2001. – С.68-70

Издательская лицензия ИД №05806 от 10.09.2001г.

Подписано в печать 28.09.09. Формат 60х84 1/16

Печатных листов 1,0. Тираж 100 экз. Заказ №28

Участок печати ГНУ ВНИИ коневодства

Рыбновский район, Рязанская область

Тел./факс 8(4912)24-02-65, 24-05-39

E-mail: vniik08@mail.ru

Pages:     | 1 | 2 ||






© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»