WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

загрузка...
   Добро пожаловать!

Pages:     | 1 |   ...   | 3 | 4 || 6 |

4

18

0,64

0,74

CT

1

18

0,12

0,04

TT

7

5

10,08

0,002

TT/CC

6,3

0,02

A1218+8G

(интрон 9)

AA

5

5

2,4

0,42

AG

5

11

0,55

0,68

GG

0**

1

1,6

1

T1684C

(экзон 13)

TT

0

0

TC

1

6

0,26

0,37

CC

9

14

3,86

0,37

C2461-30G

(интрон 18)

CC

0

0

CG

2

6

0,58

0,68

GG

8

14

1,71

0,68

* НО на ХТ – нет ответа на химиотерапию, ЕО на ХТ – есть ответ на химиотерапию; ** ОШ при допущении единицы в ячейке мутантной гомозиготы в группе чувствительных к химиотерапии

Частоты исследованных аллелей гена MRP1 достоверно не отличались в группе с наличием ответа на лечение и в группе больных, устойчивых к лечению. При анализе ассоциации различных генотипов с формирование устойчивости к лечению у больных ХЛПЗ не было выявлено каких-либо достоверно значимых ассоциаций (табл.2).

На сегодняшний день существуют лишь предположения о том, каким образом однонуклеотидные замены могут влиять на развитие предрасположенности к онкологическим заболеваниям. Одной из гипотез является предположение о том, что аллель - специфические различия в укладке РНК могут влиять на экспрессию генов, участвуя, например, в транскрипции, сплайсинге или процессинге (Le Hir H., et al., 2003). Возможно, также, что некоторые однонуклеотидные замены повышают стабильность мРНК, что в последствие приводит к повышенной экспрессии белка. Но, тем не менее, молекулярные механизмы влияния однонуклеотидных замен на функцию Р-ликопротеина и MRP до сих пор остаются неизвестными.

Однако, полиморфизм в индивидуальных генах незначительно увеличивает риск развития заболевания или формирования устойчивости к химиотерапии. Комбинация вариантов аллелей, в том числе и с аллелями других генов, учавствующих в детоксификации ксенобиотиков, вероятно, увеличит эффективность оценки риска. Такой пример увеличения риска не ответить на лечение был продемонстрирован для комбинации генотипов 21 и 26 экзона гена MDR1. Кроме того, неправильно было бы рассматривать полиморфизм гена как единственный механизм формирования различной чувствительности к заболеваниям. Также нужно исследовать экспрессию генов и функциональную активность изучаемых белков, таким образом формируя системный подход к проблеме.

Функциональная активность P-гликопротеина в лимфоцитах контрольной группы и у больных неходжкинскими лимфомами и анализ ассоциации с полиморфизмом гена MDR1

Была проанализирована связь функциональной активности Р-гликопротеина с различными физиологическими и клиническими параметрами: полом, возрастом, степенью злокачественности, схемами лечения, чувствительностью к химиотерапии, а также с наиболее распространенными полиморфизмами гена MDR1.

Не было получено статистически достоверной ассоциации функциональной активности Р-гликопротеина с полом и корреляции с возрастом ни в контрольной группе (r=0.03, p=0.86), ни у больных НХЛ (r=-0.07, p=0.56).

При анализе активности Р-гликопротеина у больных НХЛ выявлена достоверно (р=0,02) более высокая активность по сравнению с группой здоровых.

Рис. 3. Функциональная активность Р-гликопротеина (ЕRh123) в лимфоцитах в контрольной группе (n=49) и у больных хроническими лимфопролиферативными заболеваниями (n=76).

При анализе активности Р-гликопротеина у больных НХЛ с разной степенью злокачественности, определенной на основании результатов гистологического исследования биоптатов лимфоузлов, была выявлена связь повышения уровня функциональной активности с увеличением степени злокачественности опухоли (р=0,01) (рис. 4). Попарное сравнение групп показало, что в группе больных с высокой степенью злокачественности уровень активности Р-гликопротеина достоверно (р=0,009) выше, по сравнению с группой больных с низкой степенью злокачественности.

Рис. 4. Функциональная активность Р-гликопротеина (ЕRh123) в лимфоцитах больных неходжкинскими лимфомами с разной степенью злокачественности опухоли.

Данные об активности Р-гликопротеина у леченых больных НХЛ были проанализированы в зависимости от схемы лечения. Была выявлена тенденция к увеличению функциональной активности Р-гликопротеина при усилении агрессивности химиотерапии (рис. 5).

Рис. 5. Функциональная активность Р-гликопротеина (ЕRh123) у больных лимфопролиферативными заболеваниями в зависимости от схемы лечения.

При анализе взаимосвязи между активностью Р-гликопротеина и эффектом от лечения больные были разделены по клиническим признакам на две группы. В группу больных, чувствительных к химиотерапии, были включены больные НХЛ, у которых наблюдалась стабилизация, частичная ремиссия или продолжительная ремиссия. В группу больных, устойчивых к химиотерапии, были включены больные НХЛ, у которых ответ не достиг уровня стабилизации (имелось прогрессирование).Больные, чувствительные к химиотерапии, имеют более низкий уровень функциональной активности Р-гликопротеина по сравнению с больными, которые устойчивы к химотерапии (рис. 6), хотя различия не были достоверными

Рис. 6. Функциональная активность Р-гликопротеина (ЕRh123) у больных лимфопролиферативными заболеваниями в зависимости от эффекта от лечения (в группах чувствительных и устойчивых к химиотерапии ).

При анализе связи функциональной активности Р-гликопротеина и полиморфизмов гена MDR1 не было выявлено достоверных ассоциаций ни с одним генотипом ни у больных НХЛ, ни в контрольной группе здоровых (рис. 7-10). Интересно отметить, что несмотря на отсутствие достоверных связей, все носители гетерозигот как здоровые, так и больные НХЛ имели более низкий уровень активности Р-гликопротеина.

Функциональная активность MRP в лимфоцитах контрольной группы и у больных неходжкинскими лимфомами и анализ ассоциации с полиморфизмом гена MRP1

Анализ связи функциональной активности MRP с полом не выявил ассоциации активности с возрастом, а также показал отсутствие достоверных корреляций с возрастом как в контрольной группе: так и у больных неходжкинскими лимфомами

Не было получено статистически достоверной ассоциации функциональной активности MRP1 с полом и корреляции с возрастом ни в контрольной группе: r=-0.002, p=0.99 (n=29), ни у больных НХЛ: r=0.12, p=0.51 (n=31).

Анализ функциональной активности MRP1 в контрольной группе и у больных НХЛ показал достоверно (р=0,01) более высокий уровень активности в группе больных (рис.11).

Изучить связь уровня функциональной активности MRP с эффектом от лечения и прогрессией опухоли не представлялось возможным, так как большую часть исследованых больных составляли нелеченые больные.

При анализе связи функциональной активности MRP1 и полиморфизма гена MRP1 ни с одним генотипом не было выявлено достоверных ассоциаций ни у больных, ни в контрольной группе (рис. 12-14), хотя было выявлено, что уровень функциональной активности белка снижается с увеличением количества мутантных аллелей в гене MRP1 во всех изученных полиморфизмах.

Таким образом, результаты исследования показали, что генетический полиморфизм может быть важным фактором, определяющим как предрасположенность к лимфопролиферативным заболеваниям, так и устойчивость к лекарственной терапии. Различные однонуклеотидные замены в гене могут приводить к изменению уровня экспрессии генов, структуры и функции белков, поэтому важно изучать связь полиморфизмов генов GSTP1, MDR1 и MRP1 с функциональной активностью белков, кодируемых этими генами. В нашем исследовании не было выявлено достоверной ассоциации уровня активности Р-гликопротеина и MRP с исследованными полиморфизмами их генов. Также не получено связи активности Р-гликопротеина с ответом на лечение. Известно, что в формировании лекарственной устойчивости принимают участие и другие транспортные белки. Совместное функционирование нескольких белков может приводить к увеличению выведения химиопрепаратов из клетки и, как следствие, к возникновению устойчивости к лечению. Сочетание различных механизмов лекарственной устойчивости в одних и тех же клетках, влияние индивидуального генотипа больного и разнообразие методов исследования определяют необходимость дальнейших исследований роли различных механизмов в возникновении множественной лекарственной устойчивости опухолей различной этиологии. Выделение групп риска по устойчивости к химиотерапии в соответствии с полученными данными поможет разработать индивидуализированные схемы фармакологической терапии с учетом известной устойчивости к используемым лекарственным средствам.

ВЫВОДЫ:

  1. У европеоидов Западной Сибири полиморфизмы гена GSTP1 в 6 экзоне (C341T) и гена MDR1 в 26 экзоне (C3435T) сязаны с хроническими лимфопролиферативными заболеваниями:

– с предрасположенностью к развития заболеваний ассоциированы генотипы 341СТ (ОШ=2.78, р=0.01) и 3435СС (ОШ=2.26, р=0.04);

– с устойчивостью к заболевания ассоциированы генотипы 341СС (ОШ=0.41, р=0.02) и 3435ТТ (ОШ=0.54, р=0.04).

  1. Для формирования лекарственной устойчивости у больных хроническими лимфопролиферативными заболеваниями значимыми являются полиморфизмы в 5 (A313G) экзоне гена GSTP1, 21 (G2677T) и 26 (C3435T) экзонах гена MDR1: – с устойчивостью к химиотерапии ассоциированы генотипы 313АG (ОШ=2.39, р=0.04), 2677ТТ (ОШ=6.8, р=0.008) и 3435ТТ (ОШ=10.08, р=0.002), и комбинация гентипов 2677ТТ/3435ТТ (ОШ=17.73, р=0.00045);

– с чувствительностью к химиотерапии ассоциированы генотипы 313АА (ОШ=0.43, р=0.04) и 3435СТ (ОШ=0.12, р=0.04).

  1. Уровни функциональной активности Р-гликопротеина и MRP в лимфоцитах периферической крови у больных неходжкинскими лимфомами выше, чем в контрольной группе, и активность Р-гликопротеина связан со степенью злокачественности опухоли: достоверно более высокий уровень активности имеют больные с высокой степенью злокачественности.
  2. Уровень функциональной активности Р-гликопротеина в лимфоцитах периферической крови не является показателем для прогноза устойчивости к химиотерапии у больных лимфопролиферативными заболеваниями: результат химиотерапии не зависит от активности Р-гликопротеина.
  3. Ассоциации уровней функциональной активности P-гликопротеина и MRP1 с полиморфизмами С6+139T C1236T, G2677T, C3435T гена MDR1 и T1684C, A1218+8G, C2461-30G гена MRP1 соответственно не выявлены ни в контрольной группе и ни у больных неходжкинскими лимфомами.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

Pages:     | 1 |   ...   | 3 | 4 || 6 |






© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»