WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

загрузка...
   Добро пожаловать!

Pages:     | 1 || 3 |

Концентрацию цитокинов TNF, INF-y, IL-4 в сыворотке крови больных НАСГ и пациентов контрольной группы определяли методом иммуноферментного анализа с использованием коммерческих тест-наборов фирмы «Вектор-Бест, Новосибирск» (Россия).

Статистическая обработка данных проводилась с использованием критерия Стьюдента, корреляционного анализа по Пирсону. Полученные результаты также анализировались при помощи статистической программы Excel. Использованы стандартные методы описательной статистики, дисперсионного и регрессионного анализа. За уровень достоверности статистических показателей принято р<0,05.

Полученные результаты

Характерными клиническими проявлениями у исследованных больных НАСГ явились: наличие астенических проявлений различной степени выраженности - у 35 (32%) больных, субфебрильной температуры - у 8 (7%), синдрома желудочной диспепсии - у 31 (28%), желтухи - у 31 (28%), геморрагического синдрома - у 10 (9%) больных.

Из объективных симптомов у больных НАСГ следует отметить следующие: избыточная масса тела - у 86 (78%) больных (средний ИМТ составил 35,3±4,1 кг\м2), окружность талии у мужчин составила 108,3±5,9 см, у женщин 98,6±7,8 см, лимфаденопатия - у 19 (17%), увеличение печени - у 96 (87%) и селезенки у 15 (14%) больных. Повышение уровня АД установлено у 16 (15%) больных в общей группе, у пациентов с избыточной массой тела у 26 (30%). Выраженность данных симптомов условно оценивалась в баллах.

Результаты биохимического анализа крови показали следующие результаты. Активность сывороточных трансаминаз была практически нормальной (до 1,5 норм) у 55 (50%), незначительно повышенной (1,5-3 норм) – у 38 (35%) и умеренно повышенной (3-5 норм) – у 17 (15%) больных. Повышение уровня билирубина выявлена у 19 (17%) пациентов, щелочной фосфатазы - у 18 (16%) и -ГТП (до 1,5 норм) у 23 (21%), нарушение белковосинтетической функции печени - у 15 (14%) больных. Нарушенная толерантность к глюкозе обнаружена у 16 (15%) больных, наличие сахарного диабета 2 типа у 21 (19 %) пациентов, причем все пациенты имели избыточную массу тела. Гиперлипидемия (гиперхолестеринемия и гипертриглицеридемия) установлена у 39 (35%), в группе с избыточной массой тела нарушения липидного обмена отмечены у 53 (61%) больных.

Распределение больных НАСГ по степени выраженности некровоспалительного процесса, согласно результатам биопсии печени, представлено на рисунке 1. При этом установлено, что 1 степень (умеренная) стеатоза и воспаления наблюдалась у 19 (28%) и у 41 (59%) больных, 2 степень (средняя) у 38 (55%) и у 19 (28%) и 3 степень (тяжелая) у 12 (17 %) и у 9 (13%) больных, соответственно. У 35 (51%) исследованных больных обнаружена 1 стадия фиброза, у 24 (35%) -2 стадия, у 6 (9%) -3 стадия и у 4 (5%) - 4 стадия фиброза (Рис.2).

Рис.1. Распределение больных НАСГ по степени выраженности стеатоза и воспаления печени по данным биопсии (по E.Brant)

Рис.2. Распределение больных НАСГ по стадиям фиброза по данным биопсии печени

Изучение возможной взаимосвязи между клиническими и лабораторными признаками, характеризующими НАСГ позволило установить наличие достоверной прямой связи:

*длительности заболевания, с одной стороны и выраженности астенического синдрома, стадии фиброза, с другой (r=0,47, r=0,45, соответственно);

*выраженности астенического синдрома, с одной стороны и активности цитолитических ферментов, с другой (r=0,52);

*ИМТ, с одной стороны и содержания триглицеридов крови, степени стеатоза печени, с другой (r=0,49, r=0,53, соответственно).

Таким образом, наиболее характерными клиническими симптомами НАСГ по результатам проведенного нами исследования явились: женский пол, избыточная масса тела, увеличение размеров печени, изменение липидного спектра крови, повышение сахара в крови и увеличение цитолитических ферментов. Морфологическая картина печени характеризовалась жировой дистрофией гепатоцитов, внутридольковой воспалительной инфильтрацией и фиброзом.

Полученные нами клинико-лабораторные особенности НАСГ не противоречат литературным данным (Ивашкин В.Т. и соавт., 2000; Карнейро де Мура М., 2001; Хазанов А.И., 2004, 2005; Angulo P., 2002; Burt AD. et al., 1998; James O. et al., 1999; Kuntz E., 1999).

В последние годы большое внимание уделяется изучению патогенеза НАСГ, а именно, факторам, способствующим переходу стеатоза в стеатогепатит. При всем многообразии выделенных этиологических факторов НАСГ, основными патогенетическими механизмами являются: оксидативный стресс и ПОЛ; эндотоксин/ TNF- -опосредованное повреждение печени (Буеверов А.О., 1998, 2002, 2003; Ярилин А.А., 1999; Angulo P., 2002; Niemela O. et al., 1995; Pessayre D. et al., 2002). Продукты ПОЛ (альдегиды) способны повреждать мембраны гепатоцитов, активировать звездчатые клетки печени с развитием воспаления и фиброза (Pessayre D. et al., 2002).

Для характеристики продуктов ПОЛ нами изучено содержание МДА и общей АОА сыворотки крови у исследованных больных НАСГ. Уровень МДА был повышен у 73 (66%) больных, у 37 (34 %) не отличался от соответствующих показателей в группе контроля. Показатель АОА сыворотки крови у 65 (59%) больных был понижен, у 25 (23%) больных повышен и у 20 (18%) не отличался от соответствующего показателя здоровых лиц. Средние значения МДА и АОА сыворотки крови были достоверно изменены по сравнению с таковыми показателями контрольной группы (таблица 1).

Таблица 1.

Содержание МДА и АОА в сыворотке крови у больных НАСГ (x±m).

Показатель

ЗДОРОВЫЕ (n=25)

БОЛЬНЫЕ (n=110)

МДА (мкмоль/л)

7,04 ±1,6

17,46 ±2,9**

АОА (%)

60,7 ±6,8

37,2 ±4,5*

Примечание: * р<0,05, **р<0,01 по сравнению с контрольной группой.

При изучении зависимости уровня МДА сыворотки крови от клинико-лабораторных характеристик больных НАСГ нами установлено наличие достоверной прямой связи данного показателя:

*с длительностью заболевания (r=0,39);

*с увеличением размеров печени ( r=0,37);

*с количеством сахара крови (r=0,36);

*с содержанием АЛТ крови ( r=0,45);

*со степенью стеатоза печени (r=0,49) (Рис.3).

Рис. 3. Корреляционная зависимость уровня МДА от степени стеатоза печени

При сопоставлении показателя общей АОА сыворотки крови с клинико-лабораторными параметрами больных НАСГ выявлена статистически значимая обратная связь данного показателя:

*с длительностью заболевания (r=-0,41);

*с ИМТ (r=-0,38);

*с содержанием триглицеридов крови (r=-0,46);

*со степенью воспаления (r=-0,56);

*со стадией фиброза (r=-0,45) (Рис.4).

Рис.4. Корреляционная зависимость уровня АОА сыворотки крови от стадии фиброза у больных НАСГ

Таким образом, по результатам нашего исследования можно предположить, что усиление процессов ПОЛ у больных НАСГ может быть обусловлено падением уровня тканевых антиоксидантов, так и блокированием путей восстановления их окисленных форм (Chalini V.K. et al., 1987; Chan S.V. et al., 1987; Cross C.E. et al., 1987; Jackson J.H. et al., 1987; Stater T.F., 1987). Наличие отрицательной достоверной связи между уровнем АОА и стадией фиброза печени указывает на то, что продукты ПОЛ играют важную роль в фиброгенезе при заболеваниях печени, активируя звездчатые клетки и повышая синтез коллагена миофибробластами (Bumgardner G.L. et al., 1998; Garca-Trevijano E.R. et al., 1999; Whalen R. et al., 1999). В процессе активации звездчатых клеток наблюдается снижение активности глутатион-S-трансфераз, что делает их более чувствительными к профиброгенным влияниям продуктов ПОЛ (Whalen R. et al., 1999).

Для развития НАСГ помимо окислительного стресса требуется дополнительный фактор, способный инициировать ПОЛ, приводящий к появлению некрозов и вторичного воспаления (Day CP. et al., 1998). Считается, что цитокины, выработка которых индуцируется под влиянием эндотоксинов, включая ТNF- и некоторые ТNF–индуцибельные цитокины, такие, как IL-6, IL-8 и др., также вовлечены в патогенез НАСГ и последующего развития цирроза (Tilg H, et al., 2000).

У 110 обследованных больных НАСГ исследовано содержание в сыворотке крови TNF-, INF- и IL-4. При этом установлено, что концентрация TNF- в сыворотке крови была повышена у 65% больных, у 21% была снижена и у 14% пациентов не отличалась от таковых в группе контроля. Содержание INF- в сыворотке крови у 76% больных было повышено, у 13% было снижено и у 11% больных не отличалось от соответствующих значений контрольной группы. Средние концентрации TNF- и INF- были достоверно повышены от таковых значений в группе контроля (р<0,05, р<0,01, соответственно).

Содержание IL-4 в сыворотке крови было снижено у 46% больных, у 29% пациентов было повышено и у 25% больных не отличалось от такового показателя в группе контроля. Средняя концентрация IL-4 в сыворотке крови у исследованных больных НАСГ достоверно не отличалось от соответствующего значения контрольной группы (р>0,05) (таблица 2).

Высокое содержание TNF- и INF- в сыворотке крови у больных НАСГ указывает на сдвиг в продукции цитокинов в сторону провоспалительных. Вероятными индукторами секреции указанных цитокинов могут служить эндотоксины, а также РФК и продукты ПОЛ. При изучении состояния кишечной микрофлоры у пациентов с НАСГ установлено достоверное повышение количества аэробов и низкие количества кишечной палочки и лактобактерий по сравнению со здоровыми лицами (Никитин И.Г. и соавт., 2002).

Таблица 2.

Содержание цитокинов в сыворотке крови у больных НАСГ, x ± m.

Группа обследованных

TNF- (пг/мл)

INF- (пг/мл)

IL-4 (пг/мл)

Больные НАСГ (n=110)

346,2 ± 32,4*

458,2 ± 53,1**

153,3 ± 19,9

Контрольная группа (n=25)

102,1± 25,6

167,3±38,1

93,5±16,9

Примечание, * р<0,05, **р<0,01 по отношению к контролю.

При сопоставлении уровня цитокинов сыворотки крови с одной стороны, и основных клинико-лабораторных признаков НАСГ, с другой стороны нами установлено наличие достоверной прямой связи TNF- и INF-:

*с выраженностью астенического синдрома (r=0,38 и r=0,46, соответственно);

*с показателем ИМТ (r=0,35 и r=0,53, соответственно);

*с увеличением размеров печени (r=0,37 для TNF-);

*с концентрацией холестерина крови (r=0,37 и r=0,41, соответственно);

*с активностью АЛТ, АСТ (r=0,39, r=0,37 и r= 0,59, r=0,43, соответственно);

* со степенью стеатоза и долькового воспаления (r=0,56, r= 0,43 и r=0,41, r=0,63, соответственно) (Рис.5 и 6).

При сопоставлении показателей исследованных цитокинов сыворотки крови со стадией фиброза достоверной корреляционной связи нами не обнаружено (р>0,05).

Лицам с избыточной массой тела, гиперлипидемией, инсулиннезависимым сахарным диабетом свойственна инсулинорезистентность - ключевое патогенетическое звено в развитии НАСГ (Дедов И.И. и соавт., 2004; Ушкалова Е.А., 2005). Провоспалительные цитокины, в частности TNF- могут участвовать в реализации механизма инсулинорезистентности, посредством угнетения синтеза липопротеинкиназы, что ведет к расходованию запасов жира и потере массы тела (Возианов А.Ф. и соавт., 1998; Кетлинский С. А. и соавт., 1995). Повышенная мобилизация СЖК из жировых депо под воздействием TNF- способствует накоплению жира в ткани печени, на что, косвенно, указывают полученные нами корреляционные взаимосвязи между провоспалительными цитокинами, с одной стороны, и показателями липидного обмена, степенью стеатоза, с другой.

Рис. 5. Корреляционная зависимость уровня TNF-a и INF-у сыворотки крови со степенью стеатоза печени у больных НАСГ

Рис.6. Корреляционная зависимость уровня TNF-a и INF-у сыворотки крови с выраженностью долькового воспаления печени у больных НАСГ

Гибель гепатоцитов при патологии может происходить путем некроза и апоптоза. Установленные нами корреляционные взаимосвязи между уровнями TNF-, INF- и содержанием цитолитических ферментов, морфологическими изменениями печени указывает на участие обоих механизмов в повреждении печени. TNF- при участии INF- способен оказывать прямое цитотоксическое действие на гепатоциты (Xu Y. et al., 1998). Активированные CTL и NK-клетки являются основными продуцентами TNF-, INF-, а также выделяют перфорины и гранзимы, участвующиеся в реализации секреторного механизма апоптоза гепатоцитов (Ярилин А.А. и соавт., 2000; Rodella L. et al., 1998 Roitt I. et al., 1998).

Учитывая, что аутокринная активация системы мононуклеарных фагоцитов под влиянием TNF- сопровождается выработкой избыточных количеств РФК и оксида азота (NO), обладающих цитотоксическим эффектом (Лукина Е.А., 1998; Simpson K.J. et al., 1997; Xu Y. et al., 1998), нами проведено сопоставление уровня исследованных цитокинов и показателей МДА, АОА у больных НАСГ. При этом выявлено наличие достоверной прямой связи концентрации TNF-a и INF-у, с одной стороны и содержания МДА, с другой (r=0,47и r= 0,59, соответственно) (рис.7); отрицательной связи показателя TNF-a и INF-у, с одной стороны, и содержания АОА, с другой (r=-0,44 и r=-0,56, соответственно).

Рис.7. Корреляционная зависимость между уровнем TNF-a, INF-у и содержанием МДА в сыворотке крови у больных НАСГ

Pages:     | 1 || 3 |






© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»