WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

загрузка...
   Добро пожаловать!

Pages:     | 1 || 3 |

Калиевые и натриевые соли (10, 11, 19, 20) получают при взаимодействии соответствующих кислот 6, 9 с 1,3-кратным мольным избытком калия или натрия гидроксида. Соли (10, 11) получают в водной среде с последующим высаживанием ацетоном. Соли (19, 20) получают в среде ацетона при добавлении калия или натрия гидроксида, растворенного в изо-пропаноле. Реакционную смесь кипятят 5 минут, после охлаждения осадок отфильтровывают. Выход солей 83-98% (схема 3).

При получении солей с аминами соответствующие кислоты 6, 9 растворяют в воде очищенной (12-16), ацетоне (21-23) или этаноле (17, 18, 22) при нагревании, добавляют 1,3-кратный мольный избыток амина и кипятят 5 минут. В случае соединений (12, 13, 16) реакционную смесь упаривают досуха и затирают остаток ацетоном. Соединения (17, 18, 21-23) отфильтровывают после охлаждения реакционной смеси, соединения (14, 15) высаживают ацетоном. Выход соединений 12-18, 21-23 составляет 43-97% (схема 3).

Схема 3

Спектры ЯМР 1Н синтезированных соединений 14, 15, 22, кроме сигналов протонов тиетанового, тиетаноксидного и тиетандиоксидного циклов в характерных областях, содержат сигналы протонов CH2CO-группы остатка тиогликолевой кислоты в виде синглета. Протоны остатка бензиламина соединения 14 регистрируются в виде мультиплета в области 7,30-7,48 м.д. и синглета при 3,97 м.д. В спектре соединения 15 два триплета при 2,82 м.д. и 3,56 м.д. принадлежат, соответственно, протонам NCH2- и OCH2-групп остатка моноэтаноламина. Сигналы протонов остатка морфолина соединения 22 наблюдаются в интервале 3,45-3,57 м.д. в виде мультиплета.

В ИК-спектрах солей 10-23 наблюдаются сильные полосы поглощения около 1400 см-1 и 1590 см-1, обусловленные наличием карбоксилат иона, а также группа небольших полос поглощения в интервале 2900-3042 см-1, обусловленная валентными колебаниями OH, NH, NH2+, NH3+-групп остатков аминов.

Данные спектров свидетельствуют о сохранении как остатка тиогликолевой кислоты, так и тиетанового цикла.

4. Синтез эфиров 2-(3-бром-1,2,4-триазолил-5-тио)уксусных кислот

С целью получения биологически активных соединений нами исследованы реакции синтезированных кислот 6, 9 и соли 7 со спиртами.

Установлено, что при кипячении соединений 6, 7, 9 в среде низших спиртов в течение 3 часов в присутствии концентрированной серной кислоты образуются соответствующие эфиры. Эфиры (24-26, 28-31) после охлаждения реакционной смеси отфильтровывают. В случае соединения (27) выделившееся масло извлекают диэтиловым эфиром. Эфиры 2-[3-бром-1-(тиетанил-3)-, 2-[3-бром-1-(1-оксотиетанил-3)- и 2-[3-бром-1-(1,1-диоксотиетанил-3)-1,2,4-триазо­лил-5-тио]уксусных кислот (24-31) образуются с выходом 60-93% (схема 4).

Схема 4

В ЯМР Н спектрах синтезированных соединений 25, 27, 29 наблюдаются сигналы протонов тиетанового, тиетаноксидного и тиетандиоксидного циклов в характерных областях. Образование эфиров подтверждается сигналами протонов СН2СО-группы остатка тиогликолевой кислоты в виде синглета около 3,9 м.д., а также сигналами протонов остатка этанола в виде триплета с центром около 1,2 м.д. и квартета с центром около 4,1 м.д.

В ИК-спектрах эфиров 24-31 наблюдаются полосы поглощения около 1714-1738 см-1, обусловленные валентными колебаниями связи C=O.

5. Синтез гидразидов 2-(3-бром-1,2,4-триазолил-5-тио)уксусных кислот

С целью синтеза гидразидов нами исследованы реакции этиловых эфиров 2-(1,2,4-триазолил-5-тио)уксусных кислот, содержащих тиетановый цикл с различной степенью окисления серы, с гидразингидратом.

Гидразиды 2-[3-бром-1-(тиетанил-3)- (32) и 2-[3-бром-1-(1,1-диоксотиетанил-3)-1,2,4-триазолил-5-тио]уксусных кислот (33) образуются при кипячении этиловых эфиров соответствующих кислот 25, 29 с трехкратным мольным избытком гидразингидрата в этаноле с выходом 82-84% (схема 5).

Схема 5

Как известно, амидная группа является одним из примеров мезомерных структур. Все три заместителя у атома азота расположены в одной плоскости. Связь углерод - азот в амидах короче обычной связи С-N, а связь углерод-кислород длиннее обычной связи С=О. Двоесвязанность связи С-N создает определенный барьер вращения вокруг нее, поэтому появляется возможность существования двух плоских Z- и E-изомеров. Аналогичная возможность существует и у гидразидов.

R=2-[3-бром-1-(тиетанил-3)-1,2,4-триазолил-5-тио], 2-[3-бром-1-(1,1- диоксотиетанил-3)-1,2,4-триазолил-5-тио]

Наличие Z,E-изомерии у соединений 32, 33 подтверждается ЯМР-спектроскопией.

Например, спектр ЯМР Н соединения 32, снятый в дейтерированном диметилсульфоксиде, содержит сигналы протонов тиетанового цикла в характерных областях. Два синглета при 3,83 и 4,27 м.д., принадлежат протонам СН2СО-группы и относятся к Z- и Е-изомерам соответственно. Два уширенных синглета при 8,73 и 9,29 м.д., принадлежащие протону СОNH-группы, соответствуют по интегральным интенсивностям Е- и Z-изомерам. Сигналы протонов NН2- группы также удвоены и регистрируются при 4,30 (Z) и 4,55 (Е) м.д. в виде уширенных синглетов. Преобладающим является Z-изомер, содержание которого вычислено по интегральным интенсивностям синглетов группы СН2СО и приблизительно составляет 90 %.

В спектре ЯМР Н соединения 32, снятом в дейтерированном хлороформе, отсутствует удвоение сигналов CH2CO-, NH- и NH2-групп, что свидетельствует о том, что в хлороформе гидразид 32 существует только в единственной форме, которая по значению химического сдвига протонов группы CH2CO при 3,81 м.д. является Z-изомером.

В ИК-спектрах гидразидов 32, 33 поглощение валентных колебаний NH- и NH2-групп проявляется в виде нескольких полос в интервале 3186-3373 см-1. Валентные колебания C=O-группы обусловливают поглощение при 1670 (32) и 1715 (33) см-1.

УФ спектры соединения 32, снятые в 0,1 М растворе гидроксида натрия и 0,1 М растворе хлористоводородной кислоты, имеют максимумы поглощения при 220 нм и 205 нм, соответственно, что характерно для триазольного цикла.

6. Синтез илиденгидразидов 2-(3-бром-1,2,4-триазолил-5-тио)уксусных кислот

Для подтверждения структуры синтезированных гидразидов и поиска биологически активных соединений реакциями конденсации гидразидов 2-[3-бром-1-(тиетанил-3)- 32 и 2-[3-бром-1-(1,1-диоксотиетанил-3)-1,2,4-триазолил-5-тио]уксусных кислот 33 с ароматическими альдегидами и кетонами получен ряд илиденпроизводных.

Илиденгидразиды 2-[3-бром-1-(тиетанил-3)- (34-42) и 2-[3-бром-1-(1,1-диоксотиетанил-3)-1,2,4-триазолил-5-тио]уксусных кислот (43-51) получают кипячением раствора соответствующего гидразида 32, 33 и 1,1- кратного мольного избытка соответствующего ароматического альдегида или кетона в этаноле в течение 2-5 часов (34-39, 41-45, 48, 50). В случае соединений (40, 46, 47, 49) реакционную смесь кипятят 6-9 часов. Для протекания реакции с 2,5-дигидроксиацетофеноном (42, 51) и 4-гидроксиацетофеноном (41, 46) необходимо присутствие каталитических количеств хлористоводородной кислоты. Выход илиденгидразидов 34-51 составляет 51-97% (схема 6).

Схема 6

Илиденгидразиды 2-(3-бром-1,2,4-триазолил-5-тио)уксусных кислот могут существовать в виде четырех стереоизомерных форм за счет поворотной изомерии вокруг связи C-N (E, Z) и геометрической изомерии относительно связи C=N (E', Z').

Z Z' Z E' E Z' E E'

R = 2-[3-бром-1-(тиетанил-3)-1,2,4-триазолил-5-тио],

2-[3-бром-1-(1,1-диоксотиетанил-3)-1,2,4-триазолил-5-тио]

В ЯМР Н спектрах соединений 34, 42, 43, 51 наблюдаются только два стереоизомера, что следует из удвоения сигналов протонов СН2СО-, N=CH-, NH-групп. По-видимому, появление изомеров обусловлено заторможенным вращением вокруг С-N связи.

Например, спектр ЯМР Н соединения 34 содержит сигналы протонов двух S(CH)2- и NCH- группы тиетанового цикла. Синглеты при 4,01 и 4,40 м. д. принадлежат протонам СН2СО-группы Z- и Е- изомеров соответственно. Протоны N-метильных групп фиксируются в виде синглета при 2,96 м.д. Ароматические протоны наблюдаются при 6,72 м. д. в виде дублета и в интервале 7,40-7,54 м.д. в виде мультиплета с интенсивностью по два протона. Протон группы N=CH также дает два синглета при 7,87 м.д. (Е) и 8,01 м.д. (Z). Уширенные синглеты при 11,39 и 11,41 м.д. с суммарной интенсивностью в один протон принадлежат протону NH-группы (Е- и Z-изомеру соответственно). Содержание изомеров, вычисленное по интегральным интенсивностям синглетов группы СН2СО, приближенно равно 60% (Е) и 40% (Z).

В спектре соединения 42 синглеты метиленовых протонов СН2СО-группы также удвоены и регистрируются при 4,19 (Z) и 4,41 (Е) м.д. В области сильных полей наблюдаются синглеты протонов =ССН3-группы при 2,25 (Е) и 2,31 (Z) м.д. Также в спектре наблюдаются сигналы протона NH- группы виде синглетов при 10,18 м.д. (Е) и 11,23 м.д. (Z). Преобладающим является Z-изомер, содержание которого вычислено по интегральным интенсивностям синглетов группы СН2СО и приблизительно составляет 90%.

Для ИК-спектров илиденгидразидов 34-51 характерно поглощение в области 3005-3523 см-1, относящееся к валентным колебаниям O-H- и N-H-связей. Валентные колебания С=О-группы дают полосу в интервале 1664-1695 см-1. Вторая амидная полоса, связанная с деформационными колебаниями NH-группы, находится в интервале 1509-1539 см-1. Полосы поглощения в интервале 1602-1618 см-1 обусловлены валентными колебаниями азометиновой группы.

В УФ-спектрах соединений 34-37, 41, 42, снятых в 0,1М растворе гидроксида натрия или 0,1 М растворе хлористоводородной кислоты, максимумы поглощения наблюдаются в диапазоне длин волн 205-240 и 305-385 нм, характерных для триазольного цикла и азометиновой группы соответственно.

7. Биологическая активность синтезированных соединений

Биологические исследования новых производных 2-(1,2,4-триазолил-5-тио)уксусных кислот проводились на кафедрах фармакологии № 1, микробиологии, фармацевтической химии с курсами аналитической и токсикологической химии, биологической и биоорганической химии Башкирского государственного медицинского университета и на кафедре фармакологии Волгоградского государственного медицинского университета.

Для скрининга соединений, обладающих влиянием на гемореологический статус, использовали метод воспроизведения нарушений реологических свойств крови in vitro, заключающийся в инкубировании крови при 42,50С в течение 1 часа. В качестве препарата сравнения использовали пентоксифиллин в эквимолярной концентрации. Слабую антиагрегационную активность проявляют соединения 7, 32, а соединения 10, 12 и 15 проявили проагрегантное действие в отношении эритроцитов.

Таким образом, для солей 2-(3-бром-1,2,4-триазолил-5-тио)уксусных кислот, содержащих тиетановый цикл с различной степенью окисления серы, не характерна однонаправленность влияний на гемореологическую активность, они способны оказывать как антиагрегационное, так и проагрегантное действие в отношении эритроцитов.

Антиагрегационную активность производных 2-(1,2,4-триазолил-5-тио)уксусных кислот в отношении тромбоцитов изучали in vitro по методу Born на агрегометре “Thromlite-1006A” с использованием донорской крови человека. В качестве препарата сравнения использовали пентоксифиллин в эквимолярных концентрациях. Влияние соединений на агрегацию тромбоцитов оценивали по степени снижения агрегации при предварительной 5 минутной инкубации вещества в обогащенной тромбоцитами плазме.

Среди 10 исследованных солей 2-(3-бром-1,2,4-триазолил-5-тио)уксусных кислот высокую антиагрегационную активность проявила калиевая соль 10. Введение соединения 10 в концентрации 2 ммоль/л приводит к подавлению агрегации тромбоцитов на 61,0% относительно контроля. Пентоксифиллин в данной концентрации подавляет агрегацию тромбоцитов на 51,9%. При введении соединения 10 в концентрации 1 ммоль/л агрегация тромбоцитов снижается в среднем на 26,4%, что, примерно, в два раза превышает антиагрегационный эффект пентоксифиллина. При уменьшении концентрации до 0,5 ммоль/л агрегация тромбоцитов соединением 10 подавляется в среднем на 13,6%, а пентоксифиллин в данной концентрации активности не проявляет.

Острую токсичность (LD50) соединения 10 и препарата сравнения определяли по методу Литчфилда-Уилкоксона при однократном внутрибрюшинном введении мышам-самцам. Установлено, что LD50 соединения 10 составляет 900 мг/кг, а пентоксифиллина – 239 мг/кг, что позволяет отнести их к IV классу опасности (малотоксичные). Для соединения 10 разработан лабораторный регламент на производство.

Антидепрессивную активность 15 производных 2-(1,2,4-триазолил-5-тио)уксусных кислот определяли методом in vivo на половозрелых неинбредных мышах-самцах. В качестве препарата сравнения использовали флуоксетин, который вводили по схеме, аналогичной изучаемым соединениям в дозе 10 мг/кг. Антидепрессивная активность изучена в тестах принудительного плавания (FST) и подвешивания за хвост (TST). Из 15 исследованных производных 2-(1,2,4-триазолил-5-тио)уксусных кислот антидепрессивной активностью, сравнимой с флуоксетином в тесте FST, обладают соединения 26 и 30 в дозах 20 мг/кг (рис. 2). Соединение 31 в дозе 2 мг/кг проявляет антидепрессивную активность, сравнимую с флуоксетином в обоих тестах (рис. 1, 2). Депрессогенный эффект выявлен у соединения 43 (рис. 3).

Рис. 1. Влияние соединений 26, 30, 31, 43 и флуоксетина на длительность иммобилизации в TST

Примечание: ** - отличие от контроля статистически достоверно (р<0,05) по U-критерию Манна-Уитни.

Рис. 2. Влияние соединений 26, 30, 31, 43 и флуоксетина на длительность иммобилизации в FST.

Pages:     | 1 || 3 |






© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»