WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

загрузка...
   Добро пожаловать!

Pages:     | 1 || 3 | 4 |

Изучение функционального состояния иммунной системы под влиянием ТХДД проводилось на крысах, которым его вводили внутрижелудочно в оливковом масле однократно в дозах 1.0, 4.0 и 8.0 мкг/кг (ЛД50 ТХДД для крыс при внутрижелудочном введении составляет 35 ± 3 мкг/кг). Антиинфекционную неспецифическую резистентность организма (НРО) в сочетании с интегральной иммунологической резистентностью организма оценивали через 5 сут по летальности животных, среднелетальной дозе Escherichia сoli в желудке и среднему времени жизни животных (Еt50) при экспериментальной инфекции, вызванной внутрибрюшинным введением суточной культуры E. сoli (109 микробных тел) после предварительной иммунизации E. сoli (106 микробных тел) в течение 36 ч (Беленький, 1963). Факторы (показатели) НРО – бактерицидную активность сыворотки крови (БАСК), сывороточное содержание лизоцима, тромбоцитарный катионный белок (ТКБ) – -лизин, функциональную активность нейтрофилов в тесте с нитросиним тетразолием (НСТ-тест) – определяли общепринятыми методами (Ремезов, Башмаков, 1976; Гордиенко, 1984; Измайлова, 1985). Активность естественных клеток-киллеров (ЕКК) исследовали по показателю естественной цитотоксичности (ЕЦ) спектрофотометрически по числу оставшихся неразрушенными в ходе цитотоксического теста клеток мишеней по общепризнанному методу (Гордиенко, 1984). Гуморальный иммунный ответ к Т-зависимому (эритроцитам барана (ЭБ)) и Т-независимому (брюшнотифозному Vi-Ag) антигенам оценивали через 5 сут по числу антителообразующих клеток (АОК) в селезенке общепринятыми методами (Белокрылов и др., 1980; Jerne et al., 1963; Kutti et al., 1976). Формирование реакции гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ), отражающей функцию клеточного иммунного ответа (в частности, активность Th1), определяли по приросту (в %) массы стопы задней лапы животных, которых иммунизировали внутрибрюшинным введением 108 ЭБ. Разрешающую дозу ЭБ (5*108) вводили животным под апоневроз стопы задней лапы через 5 сут. Реакцию ГЗТ определяли через 24 ч (Tomas, Imamura, 1986).

Биохимические исследования по оценке динамики изменения показателей белкового и жирового обмена в сыворотке крови, а также перекисного окисления липидов (ПОЛ) проводили в опытах на крысах. Животным внутрибрюшинно вводили ТХДД в дозе 0.5 ЛД50. Применялись общепринятые методы биохимических и клинических исследований (Асатиани, 1956; Биохимические методы…, 1969).

Полученные данные обрабатывались стандартными статистическими методами. Расчеты проводились на персональном компьютере с использованием пакета программ Statgraphics.

Глава 3. характеристикА Биологической активности 2,3,7,8-замещенных полигалогенированных дибензо-n-диоксинов

Галогенированные изостерные аналоги дибензо-n-диоксина проявляют высокую токсичность и биологическую активность (табл. 1). Величины ЛД50 испытуемых ПГДД оказались равными 0.5 мг/кг и менее. В соответствии с классификацией химических веществ по степени токсичности, рекомендуемой Всемирной организацией здравоохранения, вещества, имеющие величины ЛД50 для млекопитающих при внутрижелудочном введении 15 мг/кг и менее, относятся к чрезвычайно токсичным.

Испытуемые соединения оказывают на живые организмы общетоксическое действие со смертельным исходом. Интоксикация развивается медленно, имеет скрытый период и продолжается длительное время. Основными критериями и видимыми проявлениями интоксикации является прогрессирующее общее угнетение, атаксия, алопеция, желтуха, анорексия и кахексия. Смерть животных в острых опытах наблюдается в период от 7 до 45 сут.

Учитывая, что 2,3,7,8-тетрахлордибензо-n-диоксин является наиболее известным ПГДД и опасным загрязнителем ОПС, его токсичность и биологическая активность дополнительно изучена на крысах и морских свинках (табл. 2).

Таблица 1

Токсичность полигалогенированных дибензо-n-диоксинов для белых мышей при однократном внутрижелудочном введении

Химическое соединение

Время гибели, сут

ЛД50, мг/кг

Дибензо-n-диоксин

16-51

534

(178-1552)*

2,3,7,8-тетрабромдибензо-n-диоксин

14-42

0.504

(0.211-0.998)*

2,3,7,8-тетрахлордибензо-n-диоксин

9-42

0.053

(0.022-0.105)*

2,3,7-трибром-8-хлордибензо-n-диоксин

15-45

0.451

(0.196-0.857)*

2,3-дибром-7,8-дихлордибензо-n-диоксин

9-39

0.015

(0.006-0.028)*

2,7-дибром-3,8-дихлордибензо-n-диоксин

8-39

0.019

(0.007-0.039)*

2-трифторметил-3,7,8-трихлордибензо-n-диоксин

7-34

0.005

(0.002-0.012)*

Примечание: *) – p < 0.05

Таблица 2

Токсичность 2,3,7,8-тетрахлордибензо-n-диоксина при однократном внутрижелудочном введении животным

Лабораторные животные

Масса тела,

кг

ЛД50, мг/кг

Время гибели, сут

Снижение массы тела, %

Белая мышь

0.02 ± 0.002

0.053

(0.022-0.105)*

9-42

26 ± 2

Морская

свинка

0.36 ± 0.03

0.0009

(0.0003-0.0026)*

10-34

39 ± 4

Белая крыса

0.24 ± 0.02

0.030

(0.016-0.058)*

12-45

42 ± 3

Примечание: *) – p < 0.05

По чувствительности к диоксину при однократном введении в желудок опытные виды млекопитающих расположились следующим образом: морские свинки > белые крысы > белые мыши. Коэффициент видовой чувствительности (КВЧ) – отношение ЛД50 для наименее чувствительного вида животных к ЛД50 для наиболее чувствительного вида, при однократном внутрижелудочном введении ТХДД равен 58.9, что свидетельствует о резко выраженной чувствительности животных к токсическому действию ТХДД.

Характерным и общим для белых мышей, белых крыс и морских свинок является развитие симптома истощения или общего голодания организма. При введении летальных доз ТХДД снижение массы тела животных может достигать 40%. Длительность жизни у опытных животных от момента введения ТХДД до наступления смерти составляет от 9 до 45 сут.

Экспериментальные данные по изучению динамики интоксикации диоксином (табл. 3) свидетельствуют о том, что внешние проявления отравления ТХДД у исследованных млекопитающих развиваются медленно. Анализ и обобщение клинической картины интоксикации позволяют выделить три периода течения отравления: латентный период интоксикации – от 2 до 9 сут, период ее нарастания – от 3 до 17 сут и разгара – от 4 до 29 сут, заканчивающийся на высоте своего развития, как правило, летальным исходом.

Таблица 3

Динамика интоксикации 2,3,7,8-тетрахлордибензо-n-диоксином у животных при внутрижелудочном введении в дозе 1 ЛД50

Лабораторные

животные

Периоды клинического течения

Время

гибели,

сут

латентный период отравления, сут

период нарастания отравления, сут

период разгара

отравления, сут

Белая мышь

2-8

3-14

4-24

9-42

Морская свинка

3-7

3-10

4-17

10-34

Белая крыса

3-9

5-17

5-29

12-45

Примечание: в таблице указаны минимальные и максимальные варианты совокупности; в каждом опыте 7-18 животных.

Представленные в табл. 4 данные свидетельствуют о высокой хронической токсичности и выраженной кумуляции диоксина у животных. Так, при ежедневном многократном введении в желудок ТХДД в дозе 1/100 ЛД50 в опытах на белых крысах и морских свинках величины ЛД50(хрон.) в сравнении с ЛД50 при остром действии уменьшились соответственно в 3.2 и 12.9 раза. Коэффициент видовой чувствительности при хроническом многократном введении в желудок млекопитающих в дозе 1/100 ЛД50 составил 135.7. Следовательно, видовая чувствительность к ТХДД при хроническом воздействии более выражена, чем при остром. Ккум, установленные при ежедневном введении опытным животным ТХДД в дозе 1/100 ЛД50 и меньше, оказались равными менее 1.0. Т.е. ТХДД обладает сверхкумуляцией как для белых крыс, так и для морских свинок. Причем, кумулятивный эффект возрастает при снижении величины ежедневно вводимой дозы.

Таблица 4

Величины ЛД50(хрон.) и коэффициенты кумуляции 2,3,7,8-тетрахлордибензо-n-диоксина для млекопитающих (n=10)

Лабораторные животные

Ежедневно вводимая доза,

в долях от ЛД50

ЛД50(хрон.) при многократном введении, мг/кг

Ккум,

отн. ед

Белая крыса

1/100

1/1000

1/2000**

0.0095 (0.006…0.014)*

0.001 (0.0006…0.002)*

-

0.3

0.05

-

Морская свинка

1/100

1/500

1/1000**

0.00007 (0.00004…0.0001)*

0.00003 (0.00001…0.00006)*

-

0.1

0.04

-

Примечание: *) – p < 0.05

**) – недействующая доза

В зависимости от норм и показателей в ГОСТ 12.1.007-76, проведено токсиколого-гигиеническое регламентирование ПГДД по основному критериальному уровню вредности. Определено, что испытуемые ПГДД по степени воздействия на организм могут быть отнесены к чрезвычайно опасным химическим веществам – суперэкотоксикантам.

Установлено, что действие ТХДД (I) и 2-амино-3,7,8-трибромдибензо-n-диоксина (II) на растения огурца сорта Льговский, увеличивает прирост его фитомассы. Прирост фитомассы растений, выращенных на зараженном ТХДД эталоне почвы, составил 50% по сравнению с контролем. Фаза цветения растений огурца наступала на 8-10 дней раньше, чем у контрольной группы. Изменения показателей роста и развития растений огурца, выращенного на зараженном соединением II эталоне почвы, аналогичны вышеуказанным, но они менее выражены в количественном отношении.

При ежедневном скармливании морским свинкам зеленой фитомассы растений, выращенных на зараженном ТХДД эталоне почвы, к 20-м сут наблюдалась гибель всех животных с признаками тяжелой интоксикации. В 5-6-ти г ежедневно скармливаемой фитомассы растений вещество содержалось в количестве не менее 1/500 ЛД50. При ежедневном скармливании морским свинкам фитомассы, выращенной на зараженном 2-амино-3,7,8-трибромдибензо-n-диоксином эталоне почвы, на 120-е сут наблюдений в опытной группе из шести животных погибло два. Признаков интоксикации, характерных для отравлений ТХДД, у этих животных не отмечалось. Для всех опытных животных в сравнении с контрольными, характерным явилось значительное увеличение массы тела.

Таким образом, галогенированные дибензо-n-диоксины могут проявлять свойства регуляторов роста растений системного действия. Эти токсические соединения достаточно быстро перераспределяются в объектах ОПС по пищевым цепям: накапливаясь в почве, распространяются по системе растений, делая их на определенное время токсичными и опасными для животных, потребляющих в пищу зараженную фитомассу.

Pages:     | 1 || 3 | 4 |






© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»