WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

загрузка...
   Добро пожаловать!

Pages:     | 1 || 3 | 4 |   ...   | 8 |

Апробация результатов исследований. Основные положения диссертации доложены и получили положительную оценку на ежегодных отчетах аспирантов, докторантов, соискателей на заседаниях Ученого Совета Казахского агротехнического университета им. С. Сейфуллина в 2000-2008 гг., г. Астана и Научно-иследовательского института проблем биобезопасности, в 1998-2008 гг., пгт. Гвардейский, Жамбылской области, заседаниях Координационного Совета при КазНИВИ, по Программе 042 «Прикладные научные исследования в области агропромышленного комплекса» (Ветеринария), 2006-2008 гг., г. Алматы, Международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы биологии и ветеринарии», г. Троицк, 2000 г., Международной научно-практической конференции, посвященной 10-летию Независимости РК, Астана, 2001 г., Международной научно-практической конференции «Современные проблемы аграрной науки и образования», Астана, 2002 г.; Международной научно-практической конференции, посвященной 50-летию освоения целины. Астана, 2004 г., Международной научно-практической конференции «Состояние и перспективы оздоровления хозяйств от инфекционных и незаразных болезней сельскохозяйственных животных», посвященной 100-летию со дня рождения К. П. Студенцова. Алматы 2006 г., 3-й Международной научно-практической конференции. Состояние и перспективы развития производства ветеринарных биопрепаратов. Алматы. 2006 г., 2-й Международной научно-практической конференции «Аграрная наука-сельскому хозяйству», Барнаул, 2007 г., 3-й Международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы ветеринарии и сельскохозяйственной биотехнологии». Павлодар, 2007 г., Международной научно-практической конференции посвященной 50-летию основания АО «Казахский агротехнический университет им. С. Сейфуллина», Астана, 2007 г., Международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы патологии, иммунологии и морфологии», посвященной 80-летию академика УААН Красникова Г.А., г. Харьков, 2008 г., Международной научно-практической конференции, посвященной 50-летию НИИПББ НЦБ РК, Алматы, 2008 г.

Публикация результатов исследований. По материалам диссертации опубликовано 42 научные работы, в том числе 8 предварительных патентов, выданных РГКП «Национальный институт интеллектуальной собственности» Министерства юстиции Республики Казахстан.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 265 страницах компьютерного текста и состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, обсуждения полученных результатов, заключения и списка использованной литературы. Работа иллюстрирована 40 таблицами и 52 рисунками, а также дополнена приложениями. Диссертационная работа процитирована 355 источниками литературы.

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

1 Материалы и методы исследований

Работа выполнена в период 1995-2008 гг. на кафедре ветеринарной санитарии АО «Казахский агротехнический университет им. С. Сейфуллина» МСХ РК и ДГП «Научно-исследовательский институт проблем биологической безопасности» НЦБ РК, а также в животноводческих хозяйствах РК по тематическим планам: «Поддержание и пополнение коллекции музейных (эталонных) образцов и производственных штаммов микроорганизмов возбудителей сельскохозяйственных, диких животных и птиц» (НИСХИ НЦБ РК, пгт. Гвардейский, Жамбылской области), 1992-1995 гг., программе РНТП Ц 0252 «Научно-техническое обеспечение и организация производства биотехнологической продукции в РК» на 2001-2005 гг., бюджетной программе 042 МСХ РК, номер гос. рег. 0106РК01277 (2006-2008 гг.).

В опытах использовали штаммы «Pestis suum «КТ» (аттенуированный) и «Ши-Мынь» (эпизоотический) вируса КЧС, «УБ-95» (аттенуированный), «ВНИЯИ» и «Кордай» (вирулентные) вируса БА. Для изучения иммунобиологических свойств вирусов были использованы овцы породы казахский меринос 3-6 мес. возраста, кролики ж. м. 2,5-3,0 кг, породы «Шиншилла», свиньи крупной белой породы, 2-6 мес. возраста.

Для выделения вирусов, культивирования, титрования, а также изучения антигенных свойств использовали первичные культуры клеток почек ягнят (ПЯ), телят (ПТ), тестикул ягнят (ТЯ), фибробластов куриных эмбрионов (ФКЭ), почек поросят (ПП), почек котят (ПК), почек щенят (ПЩ), клетки щитовидной железы поросят, и субкультуры до десятого пассажа культуры ФКЭ, перевиваемые линии клеток почки овцы (ПО), почки эмбриона свиньи (СПЭВ), почки сирийского хомячка (BHK-21), почки свиньи (PK-15). При работе с вышеперечисленными культурами клеток в качестве питательной использовали среду Игла или ПСП, с 5 % сыворотки крови крупного рогатого скота (КРС).

В исследованиях по обнаружению вируса КЧС в пробах биоматериалов использовали: набор ИФА «Сеditest CSFV Ag», для выявления антигена вируса КЧС, набор ИФА «Сеditest CSFV Ab», для выявления антител к вирусу КЧС, набор для выявления РНК (RNeasy Mini Kit cat 74106 Oiagen), тест-система для выявления вируса КЧС методом ПЦР в режиме реального времени (CSFW Virus RNA Test Kit, Polimerase Chain Reaction Tetracore).

Исследуемые вирусы репродуцировали в монослойных культурах клеток, приготовленных в круговых сосудах, вращающихся с помощью роллерных аппаратов барабанного типа и в суспензионных, поддерживаемых в ферментерах фирмы «Techne».

Эпизоотическую ситуацию по КЧС и БА изучали путем анализа данных ветеринарной отчетности Комитета государственной инспекции в АПК МСХ РК и результатов собственных исследований, полученных в животноводческих хозяйствах, проведенного согласно методическим рекомендациям Джупиной С.И. и Ведерникова В.А.

Определение чувствительности культур клеток к вирусам и пассирование вирусов в культурах клеток проводили общепринятыми методами. Учет результатов титрования осуществляли по цитопатическим изменениям в зараженных культурах клеток при отсутствии таковых в контрольных. Титр вируса рассчитывали по Риду и Менчу.

Вируснейтрализующую активность сывороток крови определяли в реакции нейтрализации. Постановку ИФА для выявления специфических антител проводили согласно наставлению. Иммунизацию животных против КЧС осуществляли вирусвакциной из штамма «КТ» введением ее внутримышечно в объеме 2 см против БА вирусвакциной из штамма «УБ-95», которую вводили подкожно в дозе 2 см.

Контрольное заражение иммунизированных и интактных животных проводили вирулентным штаммом «Ши-мынь» вируса КЧС в дозе не менее 106,0 ЛД50/гол и патогенным штаммом «Кордай» вируса БА в дозе не ниже 105.0 ИД50/гол, заключенных в 1 см вируссодержащей суспензии.

Результаты иммунизации и заражения учитывали по данным клинических наблюдений (общее состояние организма, характер реакции в местах введения вирусвакцины и контрольного вируса, результатам термометрии) и титрам вируснейтрализующих антител в сыворотках крови животных.

Реактогенность и иммуногенность вариантов вирусвакцин из штамма «КТ» против КЧС и штамма «УБ-95» вируса БА проверяли на клинически здоровых, неиммунных овцах и подсвинках. За подопытными животными, вели клиническое наблюдение в течение 21 сутки. Реактогенность препаратов оценивали по характеру местной и общей реакций организма привитых животных.

Для оценки иммуногенности вирусвакцин через определенный промежуток времени после прививки, животных заражали контрольным вирусом, а также определяли титры антител в серологических реакциях (РН, ИФА). Одновременно, с привитыми инфицировали и интактных животных, в качестве контрольных. Иммуногенность вирусвакцин оценивали по реакции привитых животных на контрольное заражение. Вакцинированных животных считали иммунными, если в течение 14 суток после заражения они не заболевали соответствующей болезнью, а температура их не превышала физиологическую норму, при заболевании контрольных животных (подсвинки, овцы) КЧС или БА с проявлением клинических признаков, типичных для данных заболеваний.

Статистическую обработку результатов исследований проводили по методам, описанным в руководстве И.П. Ашмарина, А.А.Воробьева. Экономическая эффективность разработок определена по методике И.Н. Никитина. Определение средних величин, среднеквадратических отклонений доверительных границ и достоверности проводилось с помощью мастера статистических функций программы Microsoft Excel.

2 Результаты исследований

2.1 Оценка риска и прогноз географического распространения классической чумы свиней и болезни Ауески на территории республики

2.1.1 Анализ эпизоотической ситуации по классической чуме свиней и болезни Ауески в Республике Казахстан

Анализ эпизоотической ситуации показал, что КЧС в республике проявляется спорадически. За последние десять лет она регистрировалась дважды. Первая вспышка болезни отмечена в 2001 г. в Тарановском районе Костанайской области, вторая - в Карасайском районе Алматинской области в апреле 2004 г., при которой заболело и пало 4 головы. В результате ветеринарно-санитарных мероприятий по предупреждению распространения инфекции очаг заболевания удалось локализовать своевременно. Общий экономический ущерб составил около 10 млн. тенге.

Анализ ветеринарной отчетности по БА показал, что в РК заболевание в период с 1984 г. по 1995 г. регистрировалось ежегодно и всего за это время отмечено 54 неблагополучных пункта. Количество заболевших и павших свиней составило 4893 и 884 голов соответственно. В среднем за указанный период по республике в год количество неблагополучных пунктов по БА составляло 5-8, количество заболевших животных 500-550 голов, количество павших 80-100 голов свиней. Причем, заболевание отмечалось практически во всех областях республики.

В 1996 г. БА была зарегистрирована на свиноводческой ферме АО «Достык» Кордайского района Жамбылской области. Болезнь отмечалась среди свиней, телят, собак и крыс. Диагноз был установлен нами путем вирусовыделения.

В 1997 г в хозяйствах Южно-Казахстанской и Жамбылской областей среди овец наблюдалось заболевание по клиническим признакам характерное для БА. Заболевание в основном отмечалось среди овец, иммунизированных против оспы. По данным ветеринарных служб указанных областей в течение 10 суток из 13 167 голов вакцинированных овец заболело 10 468, из которых пало 7 657. Заболевание характеризовалось клиническими признаками БА. В результате исследований установлено, что причиной заболевания и падежа овец в указанных областях является вакцина против оспы овец, контаминированая вирулентным вирусом БА. С 1997 года БА среди животных не отмечалась.

Таким образом, за исследуемый период на территории РК имели место спорадические случаи КЧС и БА. Для организации контроля над эпизоотической ситуацией необходимо проведение научно-обоснованного эпизоотологического мониторинга.

2.1.2 Определение плотности поголовья животных на территории Республики Казахстан

В настоящее время поголовье различных видов сельскохозяйственных животных в республике имеет тенденцию к устойчивому развитию, при этом среди хозяйствующих субъектов, занимающихся производством, все большее развитие находят крупные животноводческие предприятия. В крестьянских хозяйствах рост составляет от 21 до 61%, в том числе свиней на - 61%, овец на – 41%, КРС – на 29%, лошадей – на 28%. В сельхозпредприятиях рост поголовья свиней достиг 41,1%. Отмечен рост численности скота и птицы и в домашних хозяйствах, который составил 2,8 - 6,2%.

Свиноводство, как отрасль животноводства до 2000 года не обеспечивала потребности внутреннего рынка. Потеря интегрированных связей с пищевой и перерабатывающей промышленностью привело к свертыванию отрасли в целом и развитию рынка, ориентированного на неорганизованное мелкотоварное и сезонное производство продукции. В результате численность поголовья свиней сократилась на 70%.

Начиная с 2000 года, поголовье свиней и производство свинины динамично стало увеличиваться. Количество свиней было доведено до 1,9 млн. голов, а удельный вес производства свинины в структуре производства мяса всех видов скота и птицы увеличился с 17 до 27,7%, в то время как мировой показатель составляет 41%.

Рост поголовья животных приводит к увеличению плотности поголовья на единицу площади (кв. км.), которая является одним из факторов влияющих на проявление инфекционных болезней. В этой связи, с целью районирования территории страны по плотности поголовья различных видов с/х животных, была проведена работа по определению данных показателей в разрезе сельских административных районов областей республики. Территория страны по плотности животных была распределена на 4 категории: низкая, средняя, высокая и очень высокая. Для свиней выбрана методика оценки с учетом количества голов на один квадратный километр площади: 0-1 – низкая, 1-2 – средняя, 2-5 – высокая, 5 и выше – очень высокая.

К зоне высокой и очень высокой концентрации свиней отнесены северные и восточные регионы республики. К средней зоне отнесены регионы Центрального Казахстана и к зоне низкой плотности отнесены юго-западные и западные регионы страны. Вместе с тем в отдельных административных с/х районах областей, плотность поголовья высокая, хотя средние показатели в целом по области низкие. Такие районы имеются в Алматинской, Жамбылской и Актюбинской областях.

2.1.3 Анализ риска заноса классической чумы свиней на территорию Республики Казахстан

Классическая чума свиней, как заболевание с высокой контагиозностью, приковывает к себе особенно пристальное внимание, при этом возбудитель болезни может контаминировать практически все объекты внешней среды.

На территории Казахстана заболевание с конца 70-х годов носит спорадический характер и, как правило, заносится на территорию страны из сопредельных стран. Поэтому вопрос о риске заноса КЧС на территорию республики представляет несомненный научный и практический интерес.

В силу активных экспортно-импортных взаимоотношений, существующих в настоящее время, представляется реальной возможность завоза в страну возбудителя заболевания с импортируемой с/х продукцией и животными.

Достаточно серьезным в эпизоотическом плане остается положение республики с сопредельными странами. Из стран, имеющих сухопутную границу с Казахстаном, в последние годы неблагополучны по КЧС Китай и Россия. Более дальнее окружение, страны региона Ближнего Востока (Индия, Индонезия, Южная Корея, Таиланд), стационарно неблагополучны по КЧС.

Дополнительным фактором, представляющим потенциальную угрозу, является плохо контролируемая поставка товаров легкой промышленности, которая покрывается за счет мелкооптовой торговли на 50%, причем основными поставщиками являются неблагополучные по КЧС страны: Китай, Россия, Индия, Индонезия, Южная Корея, Таиланд.

Pages:     | 1 || 3 | 4 |   ...   | 8 |






© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»