WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

загрузка...
   Добро пожаловать!

Pages:     || 2 | 3 |

На правах рукописи

АЛЕКСАНДРОВА

Александра Константиновна

Клинико-морфологические особенности вульгарного ихтиоза при комплексной терапии ретинола пальмитатом и цинка сульфатом

14.00.11- кожные и венерические болезни

14.00.15- патологическая анатомия

Автореферат

Диссертации на соискание учёной степени

кандидата медицинских наук

Москва- 2007

Работа выполнена на базе отделений клинической дерматологии и морфологии кожи Федерального государственного учреждения «Центральный научно-исследовательский кожно-венерологический институт Федерального агентства по высокотехнологичной медицинской помощи»

Научные руководители:

Доктор медицинских наук, профессор Суколин Геннадий Иванович

Доктор медицинских наук, Смольянникова Вера Анатольевна

Официальные оппоненты:

Доктор медицинских наук, профессор Суворова Ксения Николаевна

Доктор медицинских наук, профессор Туманов Владимир Павлович

Ведущая организация:

Российская медицинская академия последипломного образования

Защита диссертации состоится 14 ноября 2007 года на заседании диссертационного совета Д.208.115.01 в Федеральном государственном учреждении «Центральный научно-исследовательский кожно-венерологический институт Федерального агентства по высокотехнологичной медицинской помощи» по адресу:

107076, Москва, ул. Короленко, д.3, корп.4.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГУ « ЦНИКВИ Росмедтехнологий».

Автореферат разослан «____» __________ 2007г.

Ученый секретарь

Диссертационного совета

Кандидат медицинских наук Н.К.Иванова

Общая характеристика работы

Актуальность исследования.

Вульгарный ихтиоз относится к группе заболеваний кожи с нарушением процессов кератинизации и в структуре наследственных ихтиозов составляет более 95% от всех форм [Суворова К.Н., Антоньев А.А., 1990; Мордовцев В.Н. с соавт., 2004; Beers M.H., Berkow R., 2002]. Современные представления об этиологии и патогенезе вульгарного ихтиоза противоречивы. Основной дефект - это нарушение экспрессии профилаггрина, основного белка кератогиалиновых гранул, ответственного за агрегацию кератиновых филаментов [Sybert V.P. et.al., 1985; Gunzel S. et.al., 1991; Nirunsuksiri W. et.al., 1995; Compton J.G. et.al., 2002]. Идентифицированные мутации в гене филаггрина, предположительно ответственные за развитие вульгарного ихтиоза, оказались семидоминантными и встречаются только в европейской популяции, у 4-10% населения [Gruber R. et.al., Smith F.J. et.al., 2006]. Возможны нарушения в процессе транскрипции [Nirunsuksiri W. et.al.,1995; DiGiovanna J.J., Robinson-Bostom L., 2003], а также вовлечение несколько генов, один из которых влияет на экспрессию профилаггрина [Sybert V.P., et.al., 1985; Fleckman P., Brumbaugh S., 2002]. Работ, касающихся изучения при вульгарном ихтиозе других маркеров кератинизации, в частности инволюкрина, цитокератинов 1,10 мало [Hohl D., 1993; Fleckman P., 2003], в отечественной литературе такие работы отсутствуют. В последние годы исследований, посвященных вопросам пролиферативной активности клеток эпидермиса при вульгарном ихтиозе, не проводилось. Единичные работы касались изучения митотической активности, которая, по данным разных авторов, была сниженная или нормальная [Wells R.S., Kerr C.B., 1966]. Исследования пролиферативной активности клеток эпидермиса иммуногистохимическим методом практически отсутствуют [Nanney L.B. et.al., 1990; 1992].

Клинические проявления вульгарного ихтиоза отличаются большой вариабельностью, что нередко приводит к ошибкам в диагнозе, учитывая обилие ихтиозиформных поражений кожи и схожесть их клинической картины [Патаридзе И.Ф., 1988; Суворова К.Н., Антоньев А.А., 1990]. Общепризнанной классификации заболевания нет.

Лечение больных вульгарным ихтиозом остается сложной задачей. Единственными эффективными препаратами являются препараты витамина А [Суворова К.Н., Антоньев А.А., 1990; Мордовцев В.Н., Рассказов Н.И., 1996; Happle R. et.al., 1987; Williams M.L., Elias P.M. 2003]. Однако их длительное применение в высоких дозах нередко сопровождается развитием побочных эффектов [Jich H., 1998; Honein M.A. et.al., 2004], поэтому остается актуальной разработка комплексной терапии вульгарного ихтиоза, позволяющей снизить дозу ретиноидов при сохранении их эффективности. Литературные данные о том, что цинка сульфат потенцирует фармакологические эффекты ретиноидов, способствуя утилизации витамина А и в то же время уменьшает их токсичность [Спиричев В.Б. 2004; Stephan F., Revuz J., 2004], обосновывает включение его в комплексную терапию вульгарного ихтиоза.

Цель исследования: изучить процессы кератинизации и пролиферативную активность клеток эпидермиса при вульгарном ихтиозе и разработать патогенетически обоснованную комплексную терапию заболевания ретинола пальмитатом и цинка сульфатом.

Задачи исследования: изучить клинические особенности вульгарного ихтиоза; изучить морфологические и ультраструктурные изменения эпидермиса и дермы при вульгарном ихтиозе до и после терапии ретинола пальмитатом и цинка сульфатом; изучить процессы дифференцировки кератиноцитов по уровню экспрессии ими филаггрина, цитокератина 1 и инволюкрина у больных вульгарным ихтиозом до и после терапии ретинола пальмитатом и цинка сульфатом; оценить степень пролиферативной активности клеток эпидермиса у больных вульгарным ихтиозом по уровню экспрессии Кi-67 до и после терапии ретинола пальмитатом и цинка сульфатом; разработать патогенетически обоснованные методы лечения больных вульгарным ихтиозом ретинола пальмитатом и цинка сульфатом на основе результатов проведенных исследований; предложить рекомендации по ведению больных, страдающих вульгарным ихтиозом, на поддерживающей терапии и в период ремиссии.

Научная новизна. В работе впервые: предложена модифицированная классификация вульгарного ихтиоза по формам; выявлено увеличение пролиферативной активности клеток эпидермиса у больных вульгарным ихтиозом по степени экспрессии Ki-67; показано нарушение терминальной клеточной дифференцировки эпидермиса в виде расширения зоны экспрессии инволюкрина; выявлена взаимосвязь между патологией зернистого слоя, нарушением экспрессии филаггрина, степенью гиперкератоза, и выраженностью клинических проявлений вульгарного ихтиоза; установлено отсутствие нарушений в экспрессии цитокератина 1, что свидетельствует о нормальном кератиновом профиле при вульгарном ихтиозе; показана значимость в патогенезе заболевания не только отсутствия кератогиалиновых гранул, но и резкого снижения количества кератиносом в цитоплазме зернистых эпителиоцитов; получены данные о динамике гистологических, иммуногистохимических и ультраструктурных изменений под воздействием терапии ретинола пальмитатом и цинка сульфатом.

Практическая значимость. Определены наиболее важные клинические, гистологические, иммуноморфологические и ультраструктурные признаки вульгарного ихтиоза, которые могут быть использованы для дифференциальной диагностики с другими ихтиозиформными поражениями кожи.

Разработаны методы комплексной поддерживающей терапии вульгарного ихтиоза ретинола пальмитатом и цинка сульфатом с учетом клинических проявлений заболевания. Показана эффективность и хорошая переносимость монотерапии цинка сульфатом у пациентов со слабыми проявлениями вульгарного ихтиоза, а также при невозможности приема ретинола пальмитата в силу сопутствующей соматической патологии.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Вариабельная экспрессивность вульгарного ихтиоза позволяет выделить абортивную, фолликулярную, чешуйчатую и чешуйчато-фолликулярную формы заболевания и предложить классификацию заболевания.

2. Основную роль в развитии вульгарного ихтиоза играют нарушения терминальной клеточной дифференцировки эпидермиса, проявляющиеся патологией зернистого слоя (от истончения до полного отсутствия слоя), нарушением экспрессии филаггрина (от слабо - положительной реакции до отрицательной) и увеличением экспрессии инволюкрина, которые коррелируют со степенью выраженности клинических проявлений ихтиоза.

3. Увеличение пролиферативной активности клеток эпидермиса, установленное по степени экспрессии Кi-67, свидетельствует о пролиферативном компоненте в формировании гиперкератоза при вульгарном ихтиозе.

4. В патогенезе заболевания большую роль играет отсутствие кератогиалиновых гранул и снижение количества кератиносом, что способствует повышению проницаемости эпидермиса и трансэпидермальной потере воды, приводя к сухости и шелушению кожи.

5. При слабых проявлениях заболевания и абортивной форме ихтиоза эффективна монотерапия цинка сульфатом.

6. Поддерживающая терапия, включающая в себя применение ретинола пальмитата в комплексе с цинка сульфатом, позволяет достоверно увеличить ремиссию и снизить кратность приема ретиноидов.

Внедрение в практику.

Разработанные методы терапии вульгарного ихтиоза внедрены в практическую работу дерматологического отделения Городской клинической больницы №14 им. В.Г.Короленко, кожного отделения КВД №18 (г. Москва), Клинического кожно-венерологического диспансера департамента здравоохранения Краснодарского края (г. Краснодар). Материалы исследования также используются в учебном процессе на кафедре дерматовенерологии и клинической микологии Российской медицинской академии последипломного образования, на кафедре гистологии, цитологии и клеточной биологии Кубанского государственного медицинского университета.

Апробация работы. Результаты исследования доложены на XII российском национальном конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, 2005г), на научно-практических конференциях ЦНИКВИ (2006,2007год), а также на заседаниях московского общества дерматовенерологов.

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 6 научных работ.

Структура и объем работы: диссертация изложена на 123 страницах, состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, одной главы собственных результатов исследования, включающей 4 раздела, одной главы по лечению, а также заключения, выводов и практических рекомендаций. Текст иллюстрирован 11 таблицами,1 диаграммой и 28 рисунками. Список литературы содержит 158 источников, из которых 23 отечественных и 135 иностранных работы.

Материалы и методы

Под наблюдением находились 42 больных вульгарным ихтиозом в возрасте от 5 до 50 лет. Общая продолжительность наблюдения была от 4 месяцев до 2 лет. Пациентам с вульгарным ихтиозом было проведено:

-клиническое обследование;

-гистологическое исследование - материалом служили биоптаты кожи 30 больных вульгарным ихтиозом. Повторная биопсия проводилась 6 пациентам через 1,5-2 месяца после начала терапии ретинола пальмитатом и 5 больным - через 2 месяца приема цинка сульфата.

Материал обрабатывали по стандартной методике, с последующей заливкой в парафиновые блоки, из которых готовили гистологические препараты с окраской гематоксилином и эозином, а также препараты для иммуногистохимических исследований. У 2 пациентов часть биоптата, взятого до и после терапии ретинола пальмитатом, фиксировалась в 2,5% растворе глютаральдегида для проведения электронно-микроскопического исследования.

-иммуногистохимическое исследование - материалом служили парафиновые блоки от 30 больных вульгарным ихтиозом. Полученные парафиновые срезы обрабатывались по стандартной методике с депарафинизацией и обработкой в микроволновой печи. Изучение экспрессии маркеров терминальной клеточной дифференцировки и маркера пролиферативной активности эпидермиса проводилось с использованием набора реактивов и системы визуализации Novostain Super ABCK (universal) и моноклональных антител к филаггрину (в рабочем разведении 1:200), цитокератину (1:40), инволюкрину (1:200), Кi-67 (1:150) производства фирмы Novocastra Laboratories Ltd.

Для контроля исследований использовались биоптаты кожи пациентов, не страдающих заболеваниями кожи, взятые при оперативных вмешательствах по поводу травмы.

-электронно-микроскопическое исследование - биоптаты кожи обрабатывались по стандартной методике, ультратонкие срезы контрастировали уранил-ацетатом и ацетатом свинца по Рейнольдсу. Полученные препараты просматривали и фотографировали на электронном микроскопе Philips. СМ 10 при увеличении от 1000 до 15000.

Статистическая обработка материала проводилась по модулям пакета прикладных программ Excel (Microsoft 2003) и Statistica (Statsoft,v.6). Для проверки нормальности распределения данных для ремиссии и для пролиферативной активности использовали критерий Колмогорова-Смирнова. Коэффициент корреляции определяли в программе Excel (по формуле Пирсона). Достоверность различий двух сравниваемых величин определялась по критериям t-Стьюдента.

Результаты собственных исследований

Клиническая характеристика больных вульгарным ихтиозом.

Под наблюдением находились 42 больных вульгарным ихтиозом: 19 мужчин и 23 женщины в возрасте от 5 до 50 лет. Наибольшее количество пациентов было до 30 лет (35 человек), что связано с уменьшением выраженности симптомов вульгарного ихтиоза с возрастом. Проведенный генеалогический анализ выявил выраженный аутосомно-доминантный тип наследования вульгарного ихтиоза (у 8 пациентов он встречался в III, а у 1 пациента - в IV поколениях), и в 80,9% случаев первые признаки болезни появлялись на первом году жизни. В осеннее - зимний период у 14 больных (33.3%) возникал зуд средней степени интенсивности.

Pages:     || 2 | 3 |






© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»