WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

   Добро пожаловать!


 

На правах рукописи

Филонова Наталья Владимировна

Иммуно-патогенетическая характеристика эффективности применения

полисахаридов из бурых водорослей Тихого океана в комплексе с базисной

терапией у пациентов с хроническим вирусным гепатитом С

14.03.09 – клиническая иммунология, аллергология

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени

кандидата медицинских наук

Владивосток – 2012

Работа выполнена в Федеральном государственном бюджетном учреждении «Научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии»

Сибирского отделения Российской академии медицинских наук, Государственном бюджетном учреждении здравоохранения «Краевая клиническая инфекционная больница»

Научный руководитель: доктор медицинских наук

Запорожец Татьяна Станиславовна

Официальные оппоненты:

Скляр Лидия Фёдоровна - доктор медицинских наук, доцент кафедры инфекционных болезней ГБОУ ВПО «Владивостокский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации

Лазанович Владимир Анатольевич – кандидат  медицинских  наук,  ассистент

кафедры биологической химии, клинической лабораторной диагностики, общей и клинической иммунологии ГБОУ ВПО «Владивостокский государственный медицинский  университет»  Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации

Ведущая организация:

Федеральное государственное бюджетное учреждение «Научно-исследовательский  институт  вакцин  и  сывороток  им.  И.И. Мечникова»

Российской академии медицинских наук

Защита состоится  24 мая  2012г. в 13.00 часов

на  заседании  диссертационного  совета  ДМ  208.007.02 при ГБОУ ВПО

«Владивостокский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации по адресу: 690002, г. Владивосток, проспект Острякова, 2

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГБОУ  ВПО «Владивостокский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации

 

Автореферат разослан « 23 » апреля 2012 г.

Ученый секретарь

диссертационного совета Шаркова Валентина Александровна

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность работы: Вирусный гепатит С является актуальной проблемой современного здравоохранения в связи с распространенностью в популяции, высокой частотой формирования цирроза печени и гепатоцеллюлярной карциномы, развитием внепеченочных проявлений, определяющих трудности диагностики заболевания и его лечения (Радченко В.Г., 2004; Chang K. M., 2003;  Hoofnagle J.H., 2002; Matsuzaki К. et al., 2007).

Важной особенностью HCV-инфекции является способность вируса к длительной персистенции в организме хозяина (Argentini С. et al., 2009). Генетическая вариабельность HCV, высокая скорость мутаций, подавление иммунного ответа под действием структурных и неструктурных белков вируса, а также инфицирование вирусом иммунокомпетентных лимфоидных клеток, являются факторами, способствующими хронизации инфекции (Argentini С. et al., 2009; Blackard J. T. et al., 2008; Yan F. et al., 2000). Персистенция вируса гепатита С в клетках, выполняющих функцию  иммунного надзора, может сопровождаться морфологической и функциональной дезорганизацией иммунной системы, наиболее значимым проявлением которой являются количественные и функциональные нарушения клеток, участвующих в иммунных реакциях (Буеверов А.О. с соавт., 2000; Радченко В.Г., 2004; Серов В.В., 2004). Несмотря на многочисленные исследования в этой области, многие аспекты иммунопатогенеза HCV-инфекции остаются недостаточно изученными.

Трудной и до конца не решенной проблемой современной медицины является лечение хронического вирусного гепатита С (ХВГС), которое предполагает комплексный подход и включает два основных направления: базисное и этиотропное (Соринсон С.Н., 1998). Этиотропная терапия ХВГС предусматривает использование препаратов рекомбинантных интерферонов- в сочетании с синтетическими аналогами нуклеозидов. Базисное лечение включает в себя охранительный режим, лечебное питание, дезинтоксикационную и метаболическую терапию (Блюм Х.Е., 2005; Богословская Е.В. с соавт., 2007; Shepherd  J. et al., 2004). В настоящее время в дополнение к базисному и этиотропному лечению ХВГС используют иммуномодулирующую терапию рекомбинантными интерлейкинами (ронколейкин, беталейкин), ростовыми и колониестимулирующими факторами, индукторами интерферонов (Лобзин Ю.В. с соавт., 2001; Конусова В.Г. с соавт., 2003; Романцов М.Г. с соавт., 2008). Однако, резистентность некоторых пациентов к интерферонам и иммуномодулирующим препаратам, наличие множества противопоказаний к их назначению, побочные эффекты, недостаточная эффективность, длительность терапии и высокая ее стоимость (Ивашкин В.Т. с соавт., 2007; Крель П.Е., 2000) привели к необходимости поиска новых эффективных средств терапии.

Одним из возможных подходов к эффективному патогенетически обоснованному лечению пациентов с ХВГС является включение в комплексную терапию биокорректоров. Среди природных соединений несомненный интерес представляют полисахариды, выделенные из морских бурых водорослей, обладающие противовоспалительными,  цитокининдуцирующими, иммуномодулирующими, гепатозащитными, антивирусными, антиоксидантными  свойствами (Запорожец Т.С., 2006; Кузнецова Т.А. с соавт., 2003; Cumashi А. et al., 2007;  Alekseyenko T.V. et al., 2007;  Mandal P. et al., 2007; Lee J. et al., 2004; Хотимченко М.Ю., 2011). Настоящая работа посвящена исследованию возможности коррекции дисфункции иммунной системы у пациентов с ХВГС при включении в комплекс терапевтических мероприятий биологически активной добавки к пище (БАД) «Фуколам» на основе полисахаридов из бурых водорослей.

Цель исследования: изучить влияние полисахаридов из бурых водорослей на состояние иммунной системы и воспалительный процесс в печени у пациентов с хроническим вирусным гепатитом С для оптимизации базисной терапии.

Задачи исследования:

  1. Исследовать состояние системы врожденного и адаптивного иммунитета у пациентов с хроническим вирусным гепатитом С в фазе реактивации
  2. Исследовать состояние цитокиновой системы у пациентов с хроническим вирусным гепатитом С в фазе реактивации
  3. Оценить иммуно-патогенетическую эффективность применения полисахаридов из бурых водорослей в комплексе с базисной терапией у пациентов с хроническим вирусным гепатитом С в фазе реактивации
  4. Исследовать влияние полисахаридов из бурых водорослей на воспалительный процесс в печени

Научная новизна: установлены особенности дисфункции иммунной системы у пациентов с хроническим вирусным гепатитом С в фазе реактивации с низкой и умеренной степенью биохимической активности, выражающиеся в изменении функциональной активности лимфоцитов (нарушение процессов активации, продукции цитокинов), нейтрофилов (снижение фагоцитарной активности) на фоне  нормальных количественных параметров субпопуляционного состава и активации гуморальных факторов иммунитета. Установлено иммуномодулирующее действие полисахаридов из бурых водорослей, применяемых в комплексе с базисной терапией у пациентов с хроническим вирусным гепатитом С: изменение процессов активации лимфоцитов периферической крови; нормализация баланса Th1- и Th2-цитокинов, уровня иммуноглобулинов и иммунных комплексов; стимуляция фагоцитарной активности нейтрофилов; восстановление баланса между процессами перекисного окисления липидов и антиоксидантной защиты. В экспериментальных и клинических исследованиях доказано, что полисахариды из бурых водорослей Тихого океана снижают воспалительный процесс в печени.

Практическая значимость: Обоснована целесообразность применения полисахаридов из бурых водорослей для коррекции иммунной дисфункции, нормализации свободнорадикальных процессов и снижения воспалительного процесса в печени  у пациентов с хроническим вирусным гепатитом С.

Разработана и внедрена в практическое здравоохранение Приморского края (ГБУЗ «Краевая клиническая инфекционная больница») методика применения полисахаридов из бурых водорослей в комплексе с базисной терапией у пациентов с хроническим вирусным гепатитом С, определена перспектива ее практического использования при гепатитах различной этиологии, представлены методические рекомендации “Применение полисахаридов из бурых водорослей в комплексе с базисной терапией у пациентов с хроническим вирусным гепатитом С” (утверждены Департаментом здравоохранения администрации Приморского края), определены наиболее информативные критерии оценки степени выраженности иммунных нарушений у пациентов с ХГВС (уровень экспрессии активационных антигенов на поверхности лимфоцитов крови).

Апробация материалов работы: Результаты работы были представлены на научно – практических конференциях и симпозиумах международного, российского и регионального уровня: XII Международной научной конференции с международным участием  «Здоровье  семьи – XXI век» и III Международной научной конференции «Онкология - XXI век»  (г.Эйлат, Израиль, 2008), Всероссийской научно-практической конференции «Иммуномодуляторы
природного происхождения» (Владивосток, 2009), V научно-практической конференции «Инфекционная патология в Приморском крае» (Владивосток, 2010), III Съезде военных врачей медико-профилактического профиля Вооруженных Сил Российской Федерации «Достижения науки и практики в обеспечении санитарно-эпидемиологического благополучия Вооруженных Сил Российской Федерации» (Санкт-Петербург, 2010), VIII Российской конференции иммунологов Урала (Сыктывкар, 2010), научной конференции с международным участием «Этиологические, эпидемиологические и клинические аспекты инфекционных болезней» (Иркутск, 2010), III Ежегодном Всероссийском Конгрессе по инфекционным болезням (Москва, 2011), V Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Фундаментальные аспекты компенсаторно-приспособительных процессов « (Новосибирск, 2011), Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Дни иммунологии в Сибири» (Абакан, 2011), Региональной научно-практической конференции «Актуальные вопросы аллергологии и иммунологии» (Владивосток, 2012).

Публикации: По теме диссертации опубликовано 13 научных работ, в том числе 3 статьи в журналах, рекомендованных ВАК Минобрнауки РФ для публикации основных положений диссертации.

Объем и структура диссертационной работы: Диссертация изложена на 166 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, 4 глав результатов собственных исследований, заключения, выводов, указателя литературы, включающего 310 источников, из них 161 отечественных и 149 зарубежных авторов. Работа иллюстрирована 22 таблицами и 7 рисунками.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Состояние иммунной системы у пациентов с хроническим вирусным гепатитом С в фазе реактивации с низкой и умеренной степенью биохимической активности характеризуется нарушением процессов активации лимфоцитов, дисбалансом сывороточных цитокинов, сниженной  интерферонпродуцирующей и фагоцитарной функцией клеток крови, активацией гуморальных факторов иммунитета.

2. Применение полисахаридов из бурых водорослей в комплексе с базисным лечением у пациентов с хроническим вирусным гепатитом С оказывает иммуномодулирующее действие на показатели цитокинового статуса, гуморальные и клеточные факторы адаптивного и врожденного иммунитета, способствуя коррекции метаболической иммуносупрессии.

3. Полисахариды из бурых водорослей снижают воспалительный процесс в печени - нормализуют биохимические и морфометрические показатели печени, восстанавливают баланс системы перекисного окисления липидов и антиоксидантной защиты.

Личный вклад автора: Анализ данных отечественной и зарубежной литературы по теме диссертации, комплексное исследование иммунного статуса пациентов с хроническим вирусным гепатитом С, ретроспективный анализ историй болезни пациентов с хроническим вирусным гепатитом С, статистическая обработка полученных результатов и их анализ, подготовка основных публикаций, написание диссертации выполнено лично автором. Отдельные исследования выполнены совместно со специалистами ФГБУН ТИБОХ им. Г.Б. Елякова ДВО РАН, что нашло отражение в совместных публикациях.

СОДЕРЖАНИЕ, РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ РАБОТЫ

Экспериментальные и клинические исследования проведены в лаборатории иммунологии ФГБУ «НИИЭМ» СО РАМН (заведующая лабораторией д.м.н. Кузнецова Т.А.), а также на базе ГБУЗ «Краевая клиническая инфекционная больница» г. Владивостока (главный врач, к.м.н. Шкляр Г.М.). Отдельные разделы работы выполнены совместно с лабораторией химии ферментов ФГБУН Тихоокеанского института биоорганической химии им. Г.Б. Елякова ДВО РАН (заведующая лабораторией д.х.н. Звягинцева Т.Н.). Все экспериментальные и клинические исследования проведены с разрешения Комитета по биомедицинской этике ФГБУ «НИИЭМ» СО РАМН (протокол № 6 от 17.04.2007 г.)

Контингент, материалы и методы: Обследовано 57 пациентов с ХВГС (37 женщин и 20 мужчин в возрасте от 18 до 49 лет), находящихся на лечении в ГБУЗ «Краевая клиническая инфекционная больница» г. Владивостока в период с 2008 по 2010 годы. Диагноз ХВГС устанавливали на основании клинико-эпидемиологических и биохимических данных и подтверждали выявлением у пациентов специфических серологических маркеров инфицирования методом иммуноферментного анализа (ИФА) (наличие анти-НСV-сум., анти-HCV-IgG, анти-HCV-IgM, анти-HCV-NS(3-5), обнаружением RNA-HCV в крови методом полимеразной цепной реакции (ПЦР), а также данными УЗИ органов брюшной полости и фибросканирования печени. Критерии включения: ХВГС в фазе реактивации (репликации вируса), низкая или умеренная степень биохимической активности гепатита, информированное согласие пациента на участие в проведении исследования. Критерии исключения: ХВГС в стадии фиброза или цирроза печени, наличие хронической алкогольной интоксикации, употребление наркотических и психотропных средств, включение в комплекс лечения пациентов с ХВГС противовирусных и иммуномодулирующих препаратов. Исследование было рандомизированным, обеспечивающим случайное распределение пациентов в однородные группы. Все больные были разделены на 2 группы: контрольная группа (30 человек) - пациенты, получавшие только базисное лечение, включающее охранительный режим, лечебное питание, дезинтоксикационную и метаболическую терапию; опытная группа (27 человек) - пациенты, получавшие в комплексе с базисной терапией БАД «Фуколам»1 по 1 капсуле, содержащей 100 мг фукоидана из Fucus evanescens и 400 мг солей альгиновых кислот из бурых водорослей, внутрь два раза в сутки в течение 21 дня. С целью сравнения исследуемых показателей использовали кровь 22 здоровых доноров. Исследования выполнялись дважды: до начала лечения и после его окончания.

Экспериментальная часть работы выполнена на 40 мышах линии (СВАхС57В1/6) F1, а также на 80 неинбредных мышах массой 18-20 граммов, полученных из питомника РАМН “Столбовая”, находившихся на стандартной диете в боксированных помещениях с соблюдением всех правил и международных рекомендаций Европейской конвенции по защите позвоночных животных, используемых в экспериментальных работах (Страсбург, 1986).

____________________________________________________________________

Направления, методы и объем проведенных исследований

Таблица 1

Направления исследования

Методы исследования

Объем исследования

1

Клинико-лабораторные

исследования

1.Анкетирование пациентов

2.Комплексное клиническое обследование больных в динамике

3.Расширенный мониторинг клинико-биохимических и инструментальных (УЗИ, фибросканирование) показателей

57 чел.

57 чел.

57 чел.

2

Маркерная диагностика ХВГС

4.Определение антител к HCV методом ИФА

5.Качественное определение RNA-HCV в крови методом ПЦР с генотипированием (Simmonds P., 1995)

57 чел.

57 чел


3

Исследование показателей иммунного статуса

6.Определение субпопуляционного состава лимфоцитов периферической крови методом проточной цитометрии (Qouzi A.A. et al.,  2002)

7. Исследование основных классов иммуноглобулинов в сыворотке крови (IgG, IgM, IgA) методом радиальной иммунодиффузии (Manchini G. et al., 1964)

8. Определение уровня и размеров циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) в сыворотке крови (Гриневич Ю.А., 1981;  Стручков П.В. с соавт., 1985)

9. Исследование фагоцитарной активности нейтрофилов крови в латекс-тесте (Лебедев К.А., 1990)

114 проб

114

проб

114

проб

114

проб


4

Исследование показателей цитокинового статуса

10.Исследование концентрации цитокинов в сыворотке крови и супернатантах лимфоцитов периферической крови (ЛПК) методом твердофазного ИФА с помощью диагностических наборов ООО «Цитокин» (Санкт-Петербург), согласно прилагаемой инструкции

228 проб


5

Исследование показателей системы ПОЛ/АОЗ

11.Определение малонового диальдегида (МДА) в эритроцитах крови спектрофотометрическим методом (Новгородцева Т.П., 2003)

12.Определение общей антиокислительной активности плазмы крови спектрофотометрическим методом (Новгородцева Т.П., 2003)

114 проб

114 проб


6

Исследование влияния фукоидана из Fucus evanescens на воспалительный процесс в печени

13.Исследование морфометрических показателей печени у мышей с экспериментальным хроническим токсическим гепатитом методом магнитно-резонансной томографии (МРТ) с использованием томографа высокого разрешения «PharmaScan 70/16 US» фирмы Bruker с программным обеспечением Para Vision 3.0.2

16.Определение массы печени у экспериментальных животных

17.Определение содержания аминотрансфераз (АлАТ, АсАТ), лактатдегидрогеназы (ЛДГ), общего билирубина, глюкозы в сыворотке крови экспериментальных животных при помощи коммерческих наборов «Ольвейкс Диагностикум», Санкт-Петербург  в соответствии с прилагаемой инструкцией.

40 мышей линии (СВАхС57В1/6) F1

80 неинбредных мышей

80 неинбредных мышей

Статистическую обработку полученных данных проводили с помощью прикладной программы “Statistica 7.0”. Использовали следующие методы статистического анализа: проверку нормальности распределения количественных признаков при малом числе наблюдений (W-критерий Шапиро-Уилка), проверку гипотез о равенстве дисперсий (F-критерий Фишера), кластеризацию признаков методом К-средних. Для оценки значимости различий при нормальном распределении количественных признаков использовали t-критерий Стьюдента (для независимых выборок и для двух связанных между собой вариационных рядов), при распределении, отличающемся от нормального - критерий Вилкоксона (W) для связанных вариационных рядов и критерий Манна-Уитни (U) для несвязанных меду собой выборок. Выборочные параметры, приводимые далее в таблицах, имеют следующие обозначения: среднее арифметическое (М), стандартное отклонение (), медиана (Me), нижний и верхний квартили (LQ-UQ), объем анализируемой группы (n), достигнутый уровень значимости (р). Уровень доверительной вероятности был задан равным 95%.

Результаты и их обсуждения:

I. Адаптивный иммунитет при ХВГС и его коррекция полисахаридами из бурых водорослей

Результаты исследования показали, что до начала терапии у пациентов с ХВГС показатели, характеризующие субпопуляционный состав ЛПК, значимо не отличались от таковых в группе здоровых доноров и находились в пределах средне-нормальных значений (рис.1).

Рис.1. Субпопуляционный состав лимфоцитов периферической крови здоровых доноров и пациентов с ХВГС до начала лечения

В результате проведенного лечения в контрольной и опытной группах показатели субпопуляционного состава ЛПК значимо не изменялись.  В тоже время, реактивация хронического гепатита С, связанная с репликацией вируса, отражалась на процессах активации лимфоцитов. Так, у 37% пациентов с ХВГС уровень экспрессии активационных антигенов CD25, CD95 и HLA-DR на ЛПК был повышен, у 34% пациентов – находился в пределах средне-нормальных значений и у 29% пациентов - снижен. Полученные результаты указывают на индивидуальные особенности реакции иммунной системы пациентов с ХВГС: высокий уровень экспрессии активационных антигенов свидетельствует об адекватной реакции на вирусный антиген и эффективном иммунном ответе, низкий уровень активации лимфоцитов отражает супрессию иммунного ответа. Иммунный ответ пациентов со средне-нормальными значениями уровня экспрессии активационных антигенов является  неадекватным  в условиях персистенции HCV и недостаточным для подавления активности вируса. В результате применения полисахаридов из бурых водорослей в комплексе с базисной терапией, у пациентов с исходно высокими значениями активированных лимфоцитов показатели снижались до уровня нормы, с исходно средними значениями активированных лимфоцитов - значимо не менялись, с исходно низкими значениями активированных лимфоцитов - увеличивались. У пациентов контрольной группы, получавших только базисное лечение, подобной закономерности выявлено не было, уровень экспрессии активационных антигенов значимо не менялся по отношению к показателям до начала лечения (табл.2). Содержание иммуноглобулинов в сыворотке крови пациентов с ХГВС до начала терапии (IgM (2,75±1,5 г/л), IgG (20,5±4,6 г/л) и IgА (2,58±0,86 г/л) значимо превышало  соответствующие показатели у здоровых лиц (IgM – 1,3±0,4 г/л, р=0,000; IgG - 10,1±3,2 г/л, р=0,000; IgА - 1,8±0,4 г/л, р=0,000), свидетельствуя об активации гуморального звена иммунитета. Применение полисахаридов из бурых водорослей в комплексе с базисным лечением у пациентов с ХВГС оказывало положительный корригирующий эффект на показатели гуморального звена иммунитета, отражая снижение степени выраженности воспалительного процесса: концентрация IgM в сыворотке крови пациентов контрольной и опытной групп снижалась  с 2,4 (1,7-3,1) г/л до 1,8 (1,1-2,3) г/л, р=0,000 и  с 2,5 (1,4-4,2) г/л до 1,1(0,7-1,8) г/л, р=0,000 соответственно, однако уровень IgM в группе пациентов, получавших полисахариды из бурых водорослей в комплексе с базисной терапией, снижался в большей степени, чем в контрольной группе (р1=0,05). Уровень IgА у пациентов опытной группы нормализовался  (с 2,5 (1,8-3,2) г/л до 2,1 (1,5-2,6) г/л, р=0,028), в то время как в контрольной группе значимо не менялся (2,67 (2-3,1) г/л и 2,7 (2,1-3,3) г/л, р=0,313). Изменений концентрации IgG  после лечения в обеих группах выявлено не было (р>0,05).

Таблица 2

Динамика показателей активационных антигенов ЛПК в зависимости от их исходного уровня у пациентов с ХВГС

Показатели

Условно здоровые доноры (n=22)

Опытная группа (n=27)

Контрольная группа (n=30)

Высокий уровень экспрессии

активационных антигенов

(n=11)

Средний уровень экспрессии

активационных антигенов

(n=8)

Низкий

уровень экспрессии

активационных антигенов

(n=8)

Высокий уровень экспрессии

активационных антигенов

(n=10)

Средний уровень экспрессии

активационных антигенов

(n=11)

Низкий

уровень экспрессии

активационных антигенов

(n=9)

Mе(LQ-UQ)

Mе (LQ-UQ )

Mе ( LQ-UQ )

Mе ( LQ-UQ )

Mе ( LQ-UQ )

Mе ( LQ-UQ )

Mе ( LQ-UQ )

CD25+

%

10,0

(9,5 -12,0)

15,0 (14,3-18,0)

9,8 (9,0-11,0)

5,5 (5,0-6,3)

13,5 (13,0-15,0)

9,5 (8,6-10,0)

6,0 (5,5-6,5)

10,0 (7,5-14,2)

р=0,02

7,5 (5,0-11,5)

р=0,138

8,3 (6,6-9,5)

р=0,006

14,0 (12,5-15,7)

р=0,685

7,0 (8,0-13,8)

р=0,858

6,9 (5,3-8,0)

р=0,074

109/л

0,23

(0,18-0,28)

0,36 (0,20-0,40)

0,21 (0,16-0,20)

0,12 (0,08-0,15)

0,28 (0,20-0,30)

0,20 (0,16-0,25)

0,10 (0,1-0,15)

0,22 (0,17-0,30)

р=0,049

0,18 (0,15-0,20)

р=0,362

0,18 (0,10-0,21)

р=0,092

0,28 (0,18-0,30)

р=0,892

0,15 (0,10-0,30

р=0,678

0,10 (0,13-0,17)

р=0,173

CD95+

%

6,0

(4,0-7,0)

15,10 (12,0-19,6)

7,0 (6,1-7,0)

3,5 (2,7-4,0)

12,2 (10,0-13,0)

6,6 (5,80-7,80)

3,0 (0,4-4,2)

10,0 (5,3-13,0)

р=0,009

10,0 (7,0-11,2)

р=0,128

9,0 (7,2-10,7)

р=0,027

11,2 (8,0-13,6)

р=0,168

7,0 (5,6-8,7)

р=0,575

3,9 (0,4-4,3)

р=0,248

109/л

0,12

(0,08 -0,14)

0,32 (0,26-0,45)

0,13 (0,09-0,10)

0,09 (0,07-0,10)

0,30 (0,24-0,31)

0,12 (0,10-0,13)

0,04 (0,01-0,10)

0,24 (0,13-0,30)

р=0,033

0,14 (0,10-0,18)

р=0,345

0,4 (0,2-0,6)

р=0,027

0,29 (0,10-0,30)

р=0,507

0,14 (0,09-0,20)

р=0,358

0,06 (0,01-0,1)

р=0,715

HLA-DR+

%

17,0

(12,5-18,0)

23,2 (22,0-26,0)

16,9 (16,0-18,0)

10,0 (8,0-11,0)

23,0 (21,0-28,5)

18,0 (15,0-19,0)

12,0 (10,6-12,3)

19,0 (17,0- 22,4)

р=0,012

17,0 (12,7-17,5)

р=0,374

13,0 (12,0-13,7)

р=0,017

21,0 (17,0-30,0)

р=0,905

20,0 (17,0-22,0)

р=0,260

12,0 (11,0-14,0)

р=0,500

109/л

0,35

(0,27-0,42)

0,58 (0,48-0,67)

0,38 (0,30-0,40)

0,17 (0,09-0,17)

0,54 (0,14-0,70)

0,36 (0,27-0,40)

0,27 (0,23-0,30)

0,52 (0,40-0,55)

р=0,284

0,32 (0,27-0,40)

р=0,507

0,20 (0,23-0,31)

р=0,310

0,52 (0,30-0,69)

р=0,798

0,36 (0,24-0,40)

р=0,083

0,23 (0,22-0,30)

р=0,983

Примечание:  в числителе – показатели до начала лечения, в знаменателе – показатели после лечения;  р - значимость различий между показателями до и после лечения

II. Цитокиновый статус у пациентов с  ХВГС и обоснование иммунокорригирующей терапии полисахаридами из бурых водорослей

Согласно современным представлениям, иммунный баланс при ХВГС смещается в сторону Th2-лимфоцитов, сопровождаясь усилением продукции противовоспалительных цитокинов, что может приводить к снижению противоинфекционной защиты и утяжелению течения заболевания (Gao Q.J. et al., 2009).

В наших исследованиях  у пациентов с ХВГС в фазе реактивации до начала терапии наблюдалось снижение концентрации INF- в сыворотке крови, увеличение IL-4, уменьшение соотношения INF-/IL-4, свидетельствующее о девиации баланса цитокинов в сторону Th2, недостаточности клеточного звена иммунитета и преобладании гуморального иммунного ответа (табл.3).

Таблица 3

Динамика уровня цитокинов в сыворотке крови пациентов с ХВГС

Цитокины

(пг/мл)

Здоровые доноры

(n=22)

Опытная группа

(n=27)

Контрольная группа

(n=30)

Mе (LQ-UQ )

Mе (LQ-UQ )

Mе (LQ-UQ )

IL-10

4,8 (4,0-6,0)

4,94 (4,20-5,80)

4,93 (4,00-5,70)

4,8 (3,10-6,30)

4,81 (3,30-5,60)

IL-6

5,0 (4,29-6,92)

5,4 (4,2-6,3)

4,9 (4,0-5,9)

4,8 (4,0-5,9)

4,5 (4,1-5,7)

TNF-

3,01 (2,40-4,38)

3,2 (2,3-4,2)

3,1 (2,3-4,9)

3,05 (2,40-3,80)

2,9 (2,4-3,5)

INF-

14,0 (12,0-18,0)

7,6 (5,9-10,3)3

8,0 (5,5-9,4)3

7,7 (6,4-9,2)3

7,3 (5,9-9,9)3

INF-

23,6 (18,0-29,0)

26,0 (20,0-31,2)

24,8 (18,0-30,7)

26,0 (15,0-30,0)

27,0 (16,6-30,0)

IL-4

4,2 (3,99-5,00)

9,1 (5,7-11,6)3

5,0 (4,8-5,4)1,2

8,0 (6,0-12,1)3

9,6 (5,3-10,7)3

INF-/ IL-4

5,6 (3,7-6,5)

2,7 (2,0-4,6)3

4,6 (3,6-6,2)1,2

2,5 (1,6-5,2)3

2,7 (1,6-4,7)3

Примечание: в числителе – показатели до начала лечения, в знаменателе – показатели после лечения;  1 - различия по отношению к показателям до начала лечения статистически значимы; 2 - различия по отношению к  показателям контрольной группы после лечения статистически значимы. 3 - различия по отношению к показателям здоровых доноров статистически значимы.

По окончании лечения у пациентов опытной группы содержание IL-4 в сыворотке крови снижалось до уровня средне-нормальных значений, сопровождаясь  увеличением соотношения INF-/IL-4, тогда как у пациентов контрольной группы после базисного лечения содержание IL-4 не менялось, не изменялось также и соотношение INF-/IL-4 (табл.3).

Поскольку системный уровень цитокинов не всегда адекватно отражает тяжесть состояния (так как цитокины являются локальными медиаторами, имеют короткий период полураспада в сыворотке крови, способны активно связываться с растворимыми рецепторами к ним (Демьянов А.В. с соавт., 2003), мы оценили способность  клеток цельной крови пациентов с ХВГС, получавших  полисахариды из бурых водорослей в комплексе с базисной терапией,  к продукции цитокинов in vitro.

Полученные результаты свидетельствовали о сохранении резервных возможностей клеток периферической крови  пациентов  с ХГВС в отношении продукции про- и противовоспалительных цитокинов на фоне снижения интерферонпродуцирующей функции: до начала терапии у пациентов с ХВГС способность клеток периферической крови к спонтанной продукции IL-6, TNF-, IL-10 и IL-4 была усилена, способность к выработке  INF- и INF- – снижена - по сравнению с показателями у здоровых доноров; митогенстимулированная продукция  TNF-, IL-6, IL-10, и IL-4 у пациентов с ХГВС  значимо превышала соответствующие показатели стимулированных лимфоцитов у здоровых доноров, в то время как концентрация INF- и INF- в супернатантах стимулированных лимфоцитов пациентов с ХВГС снижалась (табл.4).

В супернатантах ЛПК пациентов контрольной группы после базисного лечения было отмечено незначительное снижение концентрации TNF-, однако этот показатель значимо превышал таковой у пациентов опытной группы. Продукция IL-6 значимо не изменялась и сохранялась на высоком уровне. Наблюдалось незначительное увеличение спонтанной продукции INF-, не достигающее уровня нормальных показателей. Спонтанная и митогениндуцированная продукция INF- значимо не изменялась, способность клеток крови к продукции IL-10 и IL-4 оставалась повышенной (табл.4).

  Применение полисахаридов из бурых водорослей в комплексе с базисной терапией способствовало снижению и нормализации уровня спонтанной продукции провоспалительных цитокинов TNF- и IL-6, индуцированной продукции TNF-, а также противовоспалительных цитокинов IL-10 и IL-4 и усилению интерферонпродуцирующей функции клеток периферической крови пациентов с ХВГС (табл.4). Таким образом, полисахариды из бурых водорослей оказывают иммунорегулирующее действие на измененные показатели цитокинового статуса у пациентов с ХВГС: нормализуют баланс цитокинов Th1- и Th2-лимфоцитов за счет снижения концентрации противовоспалительных цитокинов и усиления интерферонпродуцирующей функции клеток крови, снижают уровень провоспалительных цитокинов.

Таблица 4

Спонтанная и митогениндуцированная продукция цитокинов ЛПК у здоровых доноров и пациентов с ХВГС по окончанию лечения

Цитокины

(пг/мл)

Спонтанная продукция

Индуцированная продукция

Здоровые

Доноры (n=22)

Опытная

Группа (n=27)

Контрольная группа(n=30)

Здоровые

доноры(n=22)

Опытная

группа(n=27)

Контрольная группа(n=30)

IL-10

4,2 (3,1-4,6)

5,3 (5,0-6,1)4

4,3 (2,9-4,9)1,3

5,6 (4,6-6,4)4

5,4 (4,7-5,9)

9,0 (4,8-11,5)2

18,1 (11,3-22,1)2,4

10,8 (6,6-12,0)1,2,3

23,0 (12,1-29,0)2,4

17,6 (6,5-25,0)1,2

IL-6

210,0 (180,0-325,0)

373,0 (319,0-417,0)4

202,0 (146,0-333,0)1,3

353,0 (331,0-388,0)4

357,0 (246,0-423,0)

495,0 (360,0-605,0)2

725,0 (586,0-915,0)2,4

810,0 (559,0-1119,0)2

674,0 (417,0-1000,0)2,4

783,0 (517,0-1134,0)2

TNF-

19,4 (19,1-21,6)

68,0 (45,0-94,0)4

32,0 (23,0-48,0)1,3

66,0 (52,0-76,0)4

55,0 (35,0-70,7)1

165,0 (115,0-200,0)2

224,0 (157,0-246,0)2,4

86,0 (39,0-118,0)1,2

184,0 (145,0-241,0)2,4

96,0 (46,0-125,0)1

INF-

40,0 (34,2-46,3)

14,9 (12,0-18,3)4

18,0 (15,8-20,0)1,3

15,0 (12,7-17,0)4

14,6 (13,5-15,0)

53,0 (47,0-61,0)2

20,8 (19,3-24,0)2,4

21,7 (21,0-25,0)2

21,4 (18,8-24,0)2,4

20,7 (19,6-23,1)2

INF-

58,0 (48,0-69,0)

37,0 (33,0-41,0)4

48,5 (43,0-55,7)1,3

38,0 (35,0-43,0)4

41,9 (35,0-45,0)1

148,0 (136,4-163,2)2

55,2 (51,0-58,0)2,4

40,0 (35,0-46,0)1

55,4 (49,0-57,0)2,4

47,0 (45,0-49,0)1

IL-4

15,1 (11,3-17,0)

23,0 (14,7-29,0)4

12,4 (11,5-17,2)1,3

23,4 (18,0-30,0)4

20,7 (18,0-29,0)

19,7 (15,4-28,0)2

41,7 (29,0-42,0)2,4

28,8 (25,0-36,0)1,2

37,6 (32,0-43,0)2,4

36,3 (28,0-43,0)2

INF-/ IL-4

3,9 (2,6-5,2)

2,0 (1,4-2,5)4

4,4 (2,3-5,0)1,3

1,6 (1,3-2,2)4

1,85(1,50-2,20)1

7,3 (5,1-10,2)2

1,5 (1,3-1,7)2,4

1,35 (1,00-1,50)2

1,5 (1,1-1,8)4

1,26 (1,00-1,50)1,2

Примечание:  в числителе - показатели до начала лечения, в знаменателе -  показатели после лечения;  1 - различия по отношению к показателям до начала лечения статистически значимы;  2 - различия по отношению к показателям спонтанной продукции цитокинов статистически значимы; 3 – различия по отношению к  показателям контрольной группы после лечения статистически значимы. 4 - различия по отношению к показателям здоровых доноров статистически значимы

III. Состояние врожденного иммунитета у пациентов с  ХВГС и его коррекция полисахаридами из бурых водорослей

Воздействие различных инфекционно-токсических агентов, в том числе вирусов, может служить причиной изменения активности гуморальных и клеточных факторов врожденного иммунитета. Мы  исследовали фагоцитарную активность нейтрофилов периферической крови, уровень ЦИК и их размеры у  пациентов с ХВГС, а также влияние  полисахаридов из бурых водорослей на эти факторы. При оценке фагоцитарной системы у пациентов с ХВГС было установлено снижение функциональной активности  нейтрофилов периферической крови (ФП – 65,6±6,6%, ФЧ - 3,8±0,7) по сравнению с показателями у здоровых доноров (ФП - 80±5,0%; р=0,000, ФЧ - 4,5±0,5; р=0,010 соответственно). На фоне проводимой терапии у пациентов, получавших полисахариды из бурых водорослей в комплексе с базисным лечением, наблюдалось значимое увеличение ФП (с 68 (59-69) % до 74 (68-78) %; р=0,003) и ФЧ (с 3,9 (2,9-4,5) до 4,6 (3,6-5,7); р=0,007), в то время как в контрольной группе у пациентов, получавших только базисную терапию, эти показатели не изменялись и сохранялись на сниженном уровне (ФП с 68 (62-72)% до 69 (62-71)%; р=0,117; ФЧ с 3,5 (3,1-4,5) до 3,7 (3,1-4,6); р=0,157). Нарушение равновесия процессов формирования и нейтрализации ЦИК, необходимых для удаления чужеродных антигенов, способствует длительной персистенции иммунных комплексов в организме, фиксации их в тканях и, следовательно, развитию иммунокомплексных повреждений (Дранник Г.Н., 2003; Серов В.В., 2004). При исследовании уровня ЦИК в сыворотке крови пациентов с ХВГС до начала лечения было выявлено увеличение концентрации иммунных комплексов (157,4±46 ед. ОП; у здоровых доноров - 62,4±5,4 ед. ОП, р=0,000) с преобладанием иммунных комплексов мелких размеров, менее эффективно активирующих систему комплемента и длительно циркулирующих в крови. Под влиянием проведенной терапии у пациентов опытной группы отмечено снижение уровня ЦИК в сыворотке крови (с 148 (129-158) ед.ОП до 107 (94-131) ед.ОП, р=0,0003) с уменьшением количества низкомолекулярных и увеличением крупномолекулярных ЦИК. В контрольной группе, получавших базисную терапию, концентрация ЦИК сохранялась на высоком уровне (с 153 (125-202) ед.ОП до 154 (119-181) ед.ОП, р=0,850),  изменения в качественном составе иммунных комплексов выявлено не было. Таким образом, полисахариды из бурых водорослей в комплексе с базисной терапией у пациентов с ХВГС обладают регулирующим эффектом на измененные факторы врожденного иммунитета: снижают уровень ЦИК в сыворотке крови, увеличивают их молекулярную массу, нормализуют измененные показатели активности фагоцитарной системы.

IV. Оценка влияния полисахаридов из бурых водорослей на воспалительный процесс в печени

Наличие репликации HСV в гепатоцитах, а также клетках иммунной системы, циркуляция иммунных комплексов, снижение продукции альфа-интерферона, прямое угнетающее влияние возбудителя на факторы врожденного и адаптивного иммунитета играют важную роль в патогенезе хронического гепатита, приводя к повреждению печеночной паренхимы с развитием воспалительной реакции, цитолитического синдрома и формированием фиброза печени. В предыдущих разделах работы мы установили способность полисахаридов бурых водорослей корригировать нарушения клеточных и гуморальных факторов врожденного и адаптивного иммунитета у пациентов с ХВГС, отражающие степень выраженности воспалительного процесса в печени. В этой связи нам представилось целесообразным оценить влияние полисахаридов из бурых водорослей на воспалительный процесс в органе-мишени (печени). С этой целью мы исследовали влияние полисахаридов из бурых водорослей на биохимические и морфометрические показатели печени и процессы ПОЛ-АОЗ у пациентов с ХВГС в  фазе реактивации.

Анализ биохимических показателей крови у пациентов с ХВГС до начала лечения выявил высокий уровень аминотрансфераз (AлАТ – 132,5 (97,0-195,0) МЕ/л, АсАТ – 101,0 (83,0-151,0) МЕ/л) по сравнению с показателями у здоровых лиц (AлАТ – 25,0 (20,0-31,0) МЕ/л; р=0,000; АсАТ - 20,8 (18,4-23,5) МЕ/л; р=0,000), свидетельствующий о наличии цитолитического синдрома у обследуемых. В результате проведенного лечения наблюдалось снижение активности аминотрансфераз в опытной (AлАТ c 133,0 (90,0-198,0) МЕ/л до 54,0 (46,0-73,0) МЕ/л, р=0,000; АсАТ c 101,0 (83,0-139,0) МЕ/л до 53,0 (42,0-57,0) МЕ/л, р=0,000) и контрольной (AлАТ c 131,0 (99,0-172,0) МЕ/л до 88,0 (66,0-108,0) МЕ/л, р=0,000; АсАТ c 100,0 (83,0-144,0) МЕ/л до 82,0 (65,0-99,8) МЕ/л, р=0,000) группах, однако у пациентов, получавших полисахариды из бурых водорослей в комплексе с базисным лечением, уровень этих показателей был значимо ниже, чем у пациентов в контрольной группе (р1=0,001; р1=0,000 соответственно). Увеличение размеров печени, выявленное при объективном осмотре и свидетельствующее об усилении активности воспалительного процесса, подтверждали данные ультразвукового исследования органов брюшной полости (сагиттальный размер печени по срединно-ключичной линии (17,3±1,3 см) значимо превышал показатели у здоровых доноров - 10,5±1,5 см; р=0,000). На момент окончания терапии у большинства пациентов опытной группы размеры печени уменьшились (с 17,4 (16,2-18)см до 14,0 (12,8-14,9) см, р=0,000), в то время как в контрольной группе нормализации размеров печени выявлено не было (с 17,4 (16,3-18,0) см до 17,0 (16,9-17,9) см, р=0,287).

Нарушения процессов ПОЛ и АОЗ играют важную роль в развитии патологического процесса при хронических вирусных гепатитах (Choi J. et al., 2004), смещая окислительно-восстановительный баланс в сторону активации процессов ПОЛ и приводя к развитию синдрома липидной пероксидации, связанного с накоплением активных форм кислорода и липидных радикалов, участвующих в повреждении биомембран гепатоцитов (Нагоев Б.С., 2003; Choi J., 2006). В наших исследованиях до начала лечения у пациентов с ХВГС в фазе реактивации выявлено высокое содержание МДА (7,2±1,7 мкмоль/гНв) в эритроцитах крови и сниженный  уровень АОА плазмы (75,4±13,4%) по сравнению с показателями у здоровых доноров (5,6±0,64 мкмоль/гНв, р=0,000; 82±7,1%, р=0,043 соответственно), свидетельствующие о смещении окислительно-восстановительного баланса в сторону активации процессов ПОЛ. После применения полисахаридов из бурых водорослей в комплексе с базисной терапией у пациентов опытной группы наблюдалась нормализация показателей системы ПОЛ/АОЗ: уровень МДА в эритроцитах крови снизился с 6,7 (6,0-7,6) мкмоль/гНв до 5,7 (5,4-6,6) мкмоль/гНв; р=0,001, показатель АОА плазмы крови повысился до средне-нормальных значений (с 79 (68-85) % до 87 (78-91) %; р=0,004). В контрольной группе пациентов после базисной терапии изменений показателей ПОЛ/АОА выявлено не было. Окислительно-восстановительный баланс был смещен в сторону процессов липопероксидации, что проявлялось высоким уровнем МДА в эритроцитах крови (до лечения – 6,8 (6,2-8,3) мкмоль/гНв, после лечения - 6,6 (6,0-7,3) мкмоль/гНв; p=0,175) и сниженными показателями АОА плазмы (до лечения 80 (68-85)%, после лечения – 78 (76-85)%; р=0,750).

Таким образом, полисахариды из бурых водорослей в комплексе с базисной терапией у пациентов с ХВГС способствуют снижению воспалительного процесса в печени: уменьшают уровень аминотрансфераз, нормализуют размеры печени, оказывают регулирующее действие на процессы липопероксидации,  восстанавливая баланс между процессами перекисного окисления липидов и механизмами антиоксидантной защиты. С целью доказательства универсальности действия полисахаридов из бурых водорослей на воспалительные процессы в печени,  мы оценили влияние фукоидана из бурой водоросли Fucus evanescens на биохимические и морфометрические показатели печени у мышей с хроническим токсическим гепатитом, индуцированным тетрахлорметаном. Индукция токсического гепатита у мышей сопровождалась статистически значимым увеличением массы печени, содержания аминотрансфераз, лактатдегидрогеназы, глюкозы и общего билирубина в сыворотке крови по сравнению с показателями у интактных животных, свидетельствующим о развитии цитолитического синдрома и нарушении пигментообразующей функций печени (рис.2). Данные магнитно-резонансной томографии свидетельствовали об увеличении линейных размеров печени (рис.2), края долей были неровными, просматривались нечетко, строма и паренхима печени были резко деформированы.

______ интактная группа; _ _ _ _ профилактическая схема;

……  контрольная группа; ______ лечебная схема

Рис.2.  Влияние фукоидана на биохимические показатели крови, массу и линейные размеры печени  у мышей с хроническим токсическим гепатитом (по отношению к контролю, принятому за 100% (различия показателей у интактных животных и животных опытных групп статистически значимы по отношению к показателям у животных контрольной (ССl4) группы (p<0,05).

У животных, получавших фукоидан по лечебной и профилактической схемам, содержание аминотрансфераз, лактатдегидрогеназы, глюкозы и общего билирубина снижалось, приближаясь к показателям у интактных здоровых мышей, нормализовалась масса печени, уменьшались линейные размеры (рис.2). Края печени были ровными, паренхима и строма печени не деформированы,  желчные протоки не изменены.

Таким образом, проведенное исследование выявило нарушения  факторов  врожденного, адаптивного  иммунитета,  цитокинового статуса и системы перекисного окисления липидов/антиоксидантной защиты у пациентов у пациентов  с ХВГС в фазе реактивации. Оценка влияния полисахаридов из бурых водорослей на состояние иммунной системы и воспалительный процесс в печени у пациентов с ХВГС позволила обосновать целесообразность  их применения для оптимизации базисной терапии.

ВЫВОДЫ

  1. Установлены особенности дисфункции иммунной системы у пациентов с ХГВС в фазе реактивации с низкой и умеренной степенью биохимической активности, выражающиеся в активации гуморальных факторов иммунитета,  изменении функциональной активности нейтрофилов (снижение фагоцитарной активности) и лимфоцитов (нарушение процессов активации)  на фоне  нормальных количественных параметров их субпопуляционного состава.
  2. Состояние цитокиновой системы у  пациентов с хроническим вирусным гепатитом С в фазе реактивации с низкой и умеренной степенью биохимической активности характеризуется дисбалансом сывороточных цитокинов с доминированием медиаторов Th2-лимфоцитов, а также снижением интерферонпродуцирующей функции клеток периферической крови на фоне гиперпродукции про- и противовоспалительных цитокинов.
  3. Применение полисахаридов из бурых водорослей в комплексе с базисной терапией у пациентов с хроническим вирусным гепатитом С оказывает иммуномодулирующее действие на факторы врожденного и адаптивного иммунитета, сопровождающееся  изменением процессов активации лимфоцитов, зависящим от исходного состояния клетки, нормализацией уровня основных классов иммуноглобулинов, ЦИК и их качественного состава, увеличением фагоцитарной активности нейтрофилов.
  4. Полисахариды из бурых водорослей в составе базисной терапии у пациентов с хроническим вирусным гепатитом С регулируют цитокиновый баланс, нормализуя соотношение сывороточных цитокинов, продуцируемых Th1/Th2-лимфоцитами. Усиление интерферонпродуцирующей функции клеток крови пациентов с хроническим вирусным гепатитом С, получавших полисахариды из бурых водорослей и снижение секреции про- и противовоспалительных цитокинов, отражает снижение активности инфекционного воспалительного процесса.
  5. Полисахариды из бурых водорослей в комплексе с базисной терапией у пациентов с хроническим вирусным гепатитом С способствуют снижению воспалительного процесса в печени, нормализуя функциональную активность и морфометрические показатели печени, восстанавливая баланс системы перекисного окисления липидов и антиоксидантной защиты.
  6. Фукоидан из Fucus evanescens снижает проявления воспалительного процесса в печени у экспериментальных животных с индуцированным хроническим токсическим гепатитом - нормализует морфометрические показатели и функциональную активность печени.

РЕКОМЕНДАЦИИ ДЛЯ ВНЕДРЕНИЯ В МЕДИЦИНСКУЮ НАУКУ И ПРАКТИКУ

    1. Выявленные наиболее информативные показатели иммунного статуса у пациентов с хроническим вирусным гепатитом С (уровень экспрессии активационных антигенов на поверхности ЛПК - CD25, CD95, HLA-DR), рекомендовано использовать для оценки степени выраженности иммунных нарушений, а также эффективности их коррекции в лечебных мероприятиях.
    2. На основании оценки иммуно-патогенетической эффективности полисахаридов из бурых водорослей рекомендовано включение БАД “Фуколам” в состав базисной терапии у пациентов с хроническим вирусным гепатитом С с целью коррекции дисфункции иммунной системы и нормализации функциональной активности печени. Режим приема - по 1 капсуле 2 раза в день в течение 30 дней в комплексе с базисной терапией.

СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ НАУЧНЫХ РАБОТ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

  1. Функциональная активность лимфоцитов периферической крови пациентов с хроническим вирусным гепатитом С при включении в комплекс лечения фукоидана из Fucus evanescens / Н.В. Филонова, Т.С. Запорожец, С.А. Ермолицкая, Л.В. Лебедева, И.А. Пожидаева, Т.Н. Звягинцева, М.И. Кусайкин // Тихоокеанский медицинский журнал. - 2010. - №3. - С.55-58.
  2. Гепатопротекторные свойства фукоидана из бурой водоросли Fucus evanescens / Т.А. Кузнецова, И.Г. Агафонова, Т.С. Крохмаль, Т.Н. Звягинцева, Н.В. Филонова // Тихоокеанский медицинский журнал.-2010.- №4. -С.32-35.
  3. Влияние фукоидана из Fucus evanescens на показатели цитокинового статуса у пациентов с хроническим гепатитом С / Н.В. Филонова, Т.С. Запорожец, С.А. Ермолицкая, Л.В. Лебедева, И.А. Пожидаева, Т.Н. Звягинцева, М.И. Кусайкин // Цитокины и воспаление. 2011. Т.10, №4. С.105-110.
  4. Клинико-биохимическая эффективность применения БАД “Фуколам“ в комплексной терапии больных с ХВГС / Н.В. Филонова, Н.Н. Беседнова, С.А. Ермолицкая, М.В. Маковкина, Л.В. Лебедева, И.А. Пожидаева, Т.Н. Звягинцева // Материалы XII Международной научной конференции  “Здоровье  семьи – XXI век”, Эйлат, Израиль, 29 апреля – 07 мая. - 2008.- С. 332-333.
  5. Влияние фукоидана на экспрессию активационных антигенов лимфоцитами периферической крови при хроническом вирусном гепатите С / Н.В. Филонова, С.А. Ермолицкая, Л.В. Лебедева, И.А. Пожидаева, Т.Н. Звягинцева // Тихоокеанский медицинский журнал. - 2009. - №3.  - С.138.
  6. Влияние фукоидана  из Fucus evanescens  на показатели иммунного и цитокинового статуса у больных хроническим вирусным гепатитом С при включении в комплекс лечебных мероприятий / Н.В. Филонова, Т.С. Запорожец, С.А. Ермолицкая, Л.В. Лебедева, И.А. Пожидаева, Т.Н. Звягинцева // Вестник Уральской медицинской академической науки. – 2010. - №2/1. – С. 215-216.
  7. Влияние фукоидана из Fucus evanescens на показатели антиоксидантной системы у пациентов с хроническим гепатитом С / Н.В. Филонова, Т.С. Запорожец, С.А. Ермолицкая, Л.В. Лебедева, И.А. Пожидаева, Т.Н. Звягинцева // Достижения науки и практики в обеспечении санитарно-эпидемиологического благополучия Вооруженных Сил Российской Федерации: труды Третьего съезда военных врачей медико-профилактического профиля Вооруженных Сил Российской Федерации. – СПб. – 2010. – С.160.
  8. Филонова, Н.В. Влияние фукоидана из Fucus evanescens на гуморальные факторы естественной резистентности у больных хроническим вирусным гепатитом С / Н.В. Филонова, Т.С. Запорожец, Т.Н. Звягинцева // Журнал инфекционной патологии. – 2010. - Т.17. - №3. – С.203.
  9. Коррекция нарушений интерферонпродуцирующей способности клеток крови у пациентов с хроническим гепатитом С / Н.В. Филонова, Т.С. Запорожец, Л.А. Иванушко, Т.Н. Звягинцева, С.П. Ермакова // Инфекционные болезни. – 2011. – Т.9, Приложение 1. – С. 337.
  10. Филонова, Н.В. Влияние фукоидана из бурой водоросли Fucus evanescens на факторы врожденного иммунитета у пациентов с хроническим вирусным гепатитом С / Н.В. Филонова, Т.С. Запорожец, Т.Н. Звягинцева // Фундаментальные аспекты компенсаторно-приспособительных процессов: Материалы Пятой Всероссийской научно-практической конференции, Новосибирск, 12-14 апреля. - 2011. – С.225-226.
  11. Филонова, Н.В. Коррекция цитокинпродуцирующей функции клеток периферической крови пациентов с хроническим вирусным гепатитом С фукоиданом из морских бурых водорослей / Н.В. Филонова, Т.С. Запорожец, Т.Н. Звягинцева // Дни иммунологии в Сибири: Материалы Всероссийской научно-практической конференции с международным участием, Абакан, 27-28 апреля. - 2011. – С.216-217.
  12. Клинико-патогенетическое обоснование применения фукоидана из бурой водоросли Fucus evanescens в комплексной терапии у пациентов с хроническим вирусным гепатитом С / Н.В. Филонова, Т.С. Запорожец, А.К. Гажа, Л.А. Иванушко, Т.П. Смолина, Т.Н. Звягинцева // Актуальные вопросы аллергологии и иммунологии: Материалы Региональной научно-практической конференции, Владивосток, 19 апреля. – 2012. – С.54-58.
  13. Применение полисахаридов из бурых водорослей в комплексе с базисной терапией у пациентов с хроническим вирусным гепатитом С / Н.В. Филонова, Т.С. Запорожец, Г.М. Шкляр, Т.Н. Звягинцева // Методические рекомендации. Владивосток. - 2012. 16с.

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

АлАТ – аланиновая аминотрансфераза

АОА – антиокислительная активность

АсАТ – аспарагиновая аминотрансфераза

БАД – биологически активная добавка к пище

КонА – конканавалин А

ЛДГ  – лактатдегидрогеназа

ЛПК – лимфоциты периферической крови

МДА – малоновый диальдегид

МРТ – магнитно-резонансная томография

ПОЛ/АОЗ – перекисное окисление липидов - антиоксидантная защита

ФП – фагоцитарный показатель

ФЧ – фагоцитарное число

ХВГС – хронический вирусный гепатит С

ЦИК – циркулирующие иммунные комплексы

CD25, CD95, HLA-DR – молекулы активации

IgA, IgG, IgM – иммуноглобулины A, G, M

IL – 1,4,6,10 – интерлейкины 1,4,6,10

IFN- – интерферон-

IFN- – интерферон-

HCV – вирус гепатита С

Th1 – Т-лимфоциты – хелперы 1 типа

Th2 – Т-лимфоциты – хелперы 2 типа

TNF – туморнекротизирующий фактор







© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.