WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

   Добро пожаловать!


 

На правах рукописи

ЛЮБИНА Екатерина Николаевна

ВЛИЯНИЕ РАЗЛИЧНЫХ КОМБИНАЦИЙ

КАРОТИНОИДОВ, ВИТАМИНА А И БИОФЛАВОНОИДОВ НА АНТИОКСИДАНТНЫЙ

СТАТУС, МИНЕРАЛЬНЫЙ ОБМЕН И

ПРОДУКТИВНОСТЬ СВИНЕЙ

03.01.04 биохимия

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени

доктора биологических наук













БОРОВСК 2012

Работа выполнена в ФГБОУ ВПО «Ульяновская государственная сельскохозяйственная академия» и ГНУ «Всероссийский научно-исследовательский институт физиологии, биохимии и питания сельскохозяйственных животных» Россельхозакадемии

Научный консультант: Галочкин Владимир Анатольевич

доктор биологических наук, профессор

Официальные оппоненты: Боряев Геннадий Иванович

доктор биологических наук, профессор

кафедры  биологии животных и ветеринарии 

ФГБОУ ВПО Пензенской государственной

сельскохозяйственной академии

Громова Елена Викторовна

доктор биологических наук, профессор

кафедры нормальной физиологии с курсом

медицинской биохимии  ФГБОУ ВПО

Мордовского государственного

университета им. Н.П. Огарева

  Логинов Георгий Павлович

  доктор биологических наук, доцент

  кафедры биологической и неорганической 

  химии ФГОУ ВПО  Казанской государствен-

  ной академии ветеринарной

  медицины им. Н.Э Баумана

Ведущая организация:  ГНУ Всероссийский  научно-исследовательский 

  институт животноводства Россельхозакадемии 

Защита  диссертации состоится «24»октября 2012г в 10 часов на заседании диссертационного совета Д006.030.01 при ГНУ «Всероссийский научно-исследовательский институт физиологии, биохимии и питания сельскохозяйственных животных».

Адрес института: 249013, г. Калужская область, г. Боровск, п.Институт, ВНИИФБиП с.- х. животных

телефон 8 (495) 96-34-15, факс 8 (484-38) 4-20-88.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Всероссийского научно-исследовательского института физиологии, биохимии и питания сельскохозяйственных животных Россельхозакадемии, с авторефератом на сайте  Высшей аттестационной комиссии при Министерстве образования и науки Российской Федерации http://vak.ed.gov.ru.

Автореферат разослан «__»_________2012г

Ученый секретарь

диссертационного совета,

кандидат биологических наук  В.П. Лазаренко

  1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ



Актуальность. В условиях интенсивных промышленных технологий производства животноводческой продукции, организм животных испытывает повышенные функциональные нагрузки, снижается интенсивность его адаптивных реакций на все внешние раздражители. В результате этого ухудшается физиологическое состояние животных, нарушаются обменные процессы и ослабевают естественные защитные силы. Прежде всего, это обусловлено развитием хронического стресса и его вредных последствий, которые становятся основными факторами снижения продуктивности (Д.П. Иванов, 1982; С.И. Плященко, В.Т. Сидоров, 1987; Г.М. Бажов и др., 1989;  А. Шахов и др., 2003; Л.К. Хныченко и др., 2003;  М.Н. Рецкий и др, 2004).

  Одним из ведущих адаптивных эффектов ответной реакции организма на стрессы любой этиологии является предотвращение избыточной активации процессов перекисного окисления липидов. Повышенное производство сверхреакционноспособных свободных радикалов приводит к повреждению структур как отдельных биомолекул, так и биологических мембран, в частности их барьерной, рецепторной, каталитической функций. В результате чего  возникают многочисленные нарушения работы тканей и органов, приводящие к дестабилизации гомеостаза и возникновению ряда хронических заболеваний (Ф.З. Меерсон, 1984; В.А. Галочкин, 2001; Р.Х. Кармолиев, 2002; Л.К. Хныченко, 2003; Е.Б. Меньщикова, Н.К. Зенков, 2003).

  Наиболее уязвимыми этапами онтогенеза к повреждающему эффекту реакций перекисного окисления липидов (ПОЛ) являются: поздний предродовой и ранний послеродовой периоды у свиноматок, а также адаптация после рождения и отъема от матерей у поросят (В.А. Антипов и др., 2008). В связи с этим, проблема профилактики окислительного стресса, особенно в критические периоды онтогенеза, у животных в современных условиях ведения сельского хозяйства возрастает и является одной из важных биологических проблем.

Главенствующую роль в поддержании успешного функционирования всех систем иммунобиологического надзора при любых неблагоприятных воздействиях играют биоантиоксиданты. Особенно актуальным представляется оптимизация антиоксидантного статуса с помощью витамина А и его предшественника бета-каротина, поскольку этот вопрос продолжает оставаться дискуссионным (Е.Б. Бурлакова, 1982; A.A. Woodall et.al., 1996; A.S. Young et.al., 2001; И.В. Сидоров и др., 2003). К антиоксидантам относится и ряд соединений растительного происхождения, объединенные под общим названием – биофлавоноиды, среди которых наиболее высокоэффективным в связывании свободных радикалов является дигидрокверцетин (А.В. Саввин, 2006;Ю.П. Фомичев и др., 2008)

  Принимая во внимание, что микроэлементы входят в  активные центры основных антиоксидантных ферментов и являются компонентами  неферментативного звена системы, нормализующей свободнорадикальные процессы, то изменение их концентрации можно рассматривать как один из путей регуляции активности процессов перекисного окисления.  Однако до настоящего времени остается недостаточно изученной взаимосвязь между содержанием витамина А, бета-каротина и минеральным обменом (Н.С. Салий, 1970; В.А. Кокорев, 1999; А.В. Кудрявцев, О.В. Громова, 2007).

  Свиньи чувствительны к недостатку витамина А в рационе, что связано с их биологическими особенностями: высокой плодовитостью, коротким периодом супоросности, активным ростом молодняка в постнатальный период онтогенеза и ставит уровень А-витаминного питания к числу критических, лимитирующих факторов, в значительной степени определяющих проявление генетического потенциала продуктивности у свиноматок, а также темпы роста и развития, полученных от них поросят.

  Таким образом, изучение физиолого-биохимических механизмов действия различных форм каротина и витамина А и их взаимосвязи с интенсивностью процессов перекисного окисления липидов, активностью системы антиоксидантной защиты и минеральными элементами в организме свиней является актуальным, что и определило необходимость проведения наших исследований.

  Цель и задачи исследований.

Целью выполняемой работы было изучение активности процессов перекисного окисления липидов, ферментного и неферментного звеньев антиоксидантной системы, а также ретенции минеральных элементов в организме свиней в зависимости от физиологического состояния и применения бета-каротина, витамина А и его комбинации с биофлавоноидами.

  В связи с поставленной целью решались следующие задачи:

  1. Изучить механизмы антиоксидантного действия бета-каротина, витамина А и комбинации дигидрокверцетина с витамином А в организме супоросных и лактирующих свиноматок, а также у поросят в период раннего постнатального развития.

2. Исследовать взаимосвязи витамина А, каротиноидов, минеральных веществ и функционального состояния антиоксидантной системы в организме свиней.

3. Установить влияние различных источников бета-каротина и витамина А на морфо-биохимические показатели организма свиней.

4. Определить А-витаминный статус животных под влиянием вводимых добавок.

  5. Оценить действие применяемых витаминно-антиоксидантных комплексов на воспроизводительную способность свиноматок, сохранность и рост поросят в подсосный период.

  Научная новизна работы

В работе впервые проведено комплексное изучение воздействия различных новых форм витамина А, бета-каротина и комбинации витамина А с биофлавоноидами на морфо-биохимический статус организма, уровень свободно-радикального окисления, состояние ферментативного и неферментного звеньев антиоксидантной  системы защиты и оптимизацию метаболических процессов у супоросных и лактирующих свиноматок, а также у полученных от них поросят.

  Впервые описана взаимосвязь развития процессов перекисного окисления липидов, функционирования системы антиоксидантной защиты, динамики содержания минеральных элементов и витамина А. Выявлены коррелятивные взаимосвязи между уровнем ряда элементов в крови и печени поросят (Zn, Cu, Fe) и показателями антиоксидантной системы организма (активность супероксиддисмутазы, церулоплазмина,  каталазы, содержание ферритина).

Получены новые данные о возможности всасывания бета-каротина у свиней из воднодиспергированного каротинсодержащего препарата «Бетацинол» и о эффективном депонирование витамина А в печени молодняка из используемых добавок.

Впервые установлено воздействие новых форм витамина А, бета-каротина и сочетания витамина А с биофлавоноидами на минерализацию и механические характеристики костей скелета растущих свиней. Выявлена положительная корреляционная зависимость между прочностью костей скелета и содержанием ретинола в печени поросят. Показано, что более низкая обеспеченность растущих животных витамином А замедляет минерализацию, созревание костной ткани, снижает прочность костей скелета. Проведена оценка влияния испытанных биологически активных веществ на линейные промеры и индексы макроморфометрии костей конечностей поросят.

Теоретическая и практическая значимость работы.

Представленный в работе фактический материал расширяет и углубляет имеющиеся в биохимии представления о роли витамина А, бета-каротина и комбинации витамина А биофлавоноидами на уровень процессов перекисного окисления липидов, состояние ферментативного и неферментного звеньев антиоксидантной защиты организма свиней в критические периоды онтогенеза, на ретенцию минеральных элементов в органах и тканях и продуктивные качества животных.

Практическая значимость работы заключается в том, что дано научное обоснование использования новых воднодисперсионных и порошкообразных форм витамина А и бета-каротина в рационах свиней для улучшения морфо-биохимического и А-витаминного статуса, увеличения темпов роста поросят, повышения минерализации и прочности костей скелета, что  позволяет рекомендовать их в качестве источника ретинола.

Основные результаты научных исследований представлены в информационно-справочном указателе «Научные разработки и научно-консультационные услуги Ульяновской ГСХА» и внедрены в производственной деятельности свинокомплекса ООО «Стройпластмасс-агропродукт»  Ульяновской области.

Теоретические разработки диссертации используются в учебном процессе при чтении лекций и проведении лабораторно-практических занятий по курсам «Физиология» и «Биохимия» в ВУЗах России.

Основные положения, выносимые на защиту:

1.  Воднодиспергированные формы бета-каротина, витамина А и его комбинации с биофлавоноидами, а также порошкообразные формы бета-каротина в применяемых дозах обладают выраженным антиоксидантным действием, предотвращая накопление продуктов перекисного окисления липидов.

2. Выявлены взаимосвязи функционирования системы антиоксидантной защиты, процессов перекисного окисления липидов, показателей минерального обмена и А-витаминного статуса в организме свиней.

3. Активность ферментов антиоксидантной защиты организма сопряжена с уровнем микроэлементов в крови, печени, мышечной и костной ткани. Усиление процессов пероксидации протекает на фоне пониженного содержания микроэлементов, входящих в активные центры ферментов антиоксидантной защиты.

4. Под влиянием вводимых воднодиспергированных форм витамина А, бета-каротина, комбинации витамина А с биофлавоноидами и порошкообразных форм бета-каротина повышается масса, длина, массивность и прочность трубчатых костей скелета молодняка свиней.

5. Включение бета-каротина, витамина А и его комбинации с биофлавоноидами в рационы свиноматок и полученных от них поросят в составе «Витамина А», «Витамина А с гепатопротектором», «Бетацинола», «Бетавитона», «Бета-роста» и «Бета-роста с липидами» положительно влияет на многоплодие свиноматок и рост молодняка.

Апробация работы. Основные положения диссертации доложены:

  1. На VII региональной научно-практической конференции «Естественнонаучные исследования в Симбирско-Ульяновском крае» (г.Ульяновск,  2005г.)

  2. На международной научно-практической конференции «Молодежь и наука ХХI века» (г. Ульяновск, 2006г.).

3. На ХIV международной научно-практической конференции по свиноводству (г.Ульяновск, 2007г.) 

  4.На международной научно-практической конференции посвященной 135-летию КГАВМ им.Баумана  «Современные подходы к развитию АПК» ( г. Казань, 2008 г.)

5. На международной научно-практической конференции посвященной памяти проф. Блинохвастова А.Ф. (г. Пенза,  2008г).

6. На международной научно-практической конференции «Современные методы диагностики, профилактики и терапии заразных и незаразных болезней животных». (г.Ставрополь, 2009г.)

7. На 12 региональном научном семинаре при поддержке программы «Поддержка молодых ученых» (г.Ульяновск, 2009г.)

8. На международной научно-практической конференции «Современные  проблемы интенсификации производства свинины в странах СНГ» (г.Ульяновск, 2010г.)

9. На международной научно-практической конференции «Ветеринарная медицина XX века: инновации, опыт, проблемы и пути их решения»  (г. Ульяновск, 2011г.)

Представленный в диссертации материал изложен в 32 научных статьях, из них – 13 в рецензируемых изданиях, рекомендованных ВАК РФ.

  Объем и структура диссертации. Диссертация состоит из следующих разделов: введения, обзора литературы, материала и методов исследования, результатов исследования и их обсуждения, заключения, выводов, предложений производству, списка литературы и приложений. Изложена на 382 страницах компьютерного текста, содержит 24 рисунка и 75 таблиц. Список литературы включает 435 источников, в том числе 91 на иностранных языках.

 

  1. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Работа выполнена в течение 2004 - 2011 гг на кафедрах: химии и биохимии; биологии, химии и технологии хранения и переработки продукции растениеводства; морфологии, физиологии и фармакологии Ульяновской ГСХА; в клинической лаборатории при областной больнице г. Ульяновска; областной агрохимлаборатории; научной лаборатории кафедры физиологии Ульяновского ГУ и научной лаборатории кафедры физиологии и биохимии животных РГАУ-МСХА им. К.А. Тимирязева в соответствии с государственным планом НИОКР УГСХА (№№ государственной регистрации 0120.0600146 и 01200203524), ГНУ ВНИИФБиП Россельхозакадемии.

Для решения поставленных задач было проведено 3 цикла физиологических и научно-хозяйственных экспериментов на базе свинокомплекса хозяйства «Стройпластмасс-агропродукт» Ульяновского района Ульяновской области, в которых было задействовано 170 свиноматок крупной белой породы и 1700 полученных от них поросят. На рисунке 1 представлена общая схема исследований

Во всех циклах экспериментов отбор животных в группы проводили по принципу аналогов с учетом возраста, живой массы, породности, происхождения. Их содержали в одинаковых условиях, при соблюдении соответствующих ветеринарных и зоотехнических требований.

  Исследования проводили на фоне рациона сбалансированного по основным питательным и биологически активным веществам согласно рекомендуемым нормам (Калашников В.П. и др. 1985, 2003).

В задачу первого цикла экспериментов входило изучить эффективность использования и особенности влияния витамина А, его комбинации с биофлавоноидами и бета-каротина, источником которых послужили новые воднодиспергированные препараты синтезированный в ООО «Полисинтез» (г. Белгород), на антиоксидантный статус, показатели минерального обмена, накопление ретинола,  репродуктивные  и продуктивные качества организма свиней.

  Были сформированы четыре группы животных, по 9 голов в каждой, которых осеменяли искусственно в течение 3 дней. Супоросные и лактирующие свиноматки всех групп получали одинаковый основной рацион (ОР). Первой группе скармливали ОР без дополнительных добавок (контрольная группа). С 87 дня супоросности и в течение лактации свиноматкам 2, 3 и 4 групп дополнительно к основному рациону вводили воднодиспергированную форму витамина А (Витамин А), воднодиспер-гированный каротинсодержащий препарат «Бетацинол» и воднодиспергированную форму витамина А с капилляро-гепатопротектором (Витамин А с гепатапротектором) соответственно.

  Воднодиспергированный витамин А готовили из ретинола французской фирмы «Хоффман-Ля Рош» (активность витамина А 52500 МЕ/мл) с добавлением эмульгатора (твина-80) и стабилизатора (бутилоксианизола).

  «Бетацинол» содержит 20 мг/г бета-каротина, 5 мг/г альфа токоферола, 0,4% аскорбината цинка с добавлением эмульгатора (твина-80) и стабилизатора (бутилоксианизола).

«Витамин А с гепатопротектором» в качестве гепатопротектора использовался биофлавоноидный комплекс лиственницы (содержащий 30% дигидрокверцетина, остальное  - изопреноиды, органические кислоты и смолы) производимый фирмой «Аметис» из корня и комлевой части лиственницы даурской (активность витамина А 52500 МЕ/мл; смолы лиственничной экстракционной 20мг/мл).

Скармливание препаратов проводилось 10-дневными циклами с интервалами в 10 суток из расчета: «Витамин А», «Витамин А с гепатопротектором»  - 0,3 мл на животное для супоросных, 0,55 мл – подсосным свиноматкам; «Бетацинол» - 2 мл для супоросных, 3 мл – подсосным свиноматкам на животное в сутки. В 30-суточном возрасте поросят был проведен их отъем.

Материалом для исследований у свиноматок являлась кровь, взятая у трех животных из каждой группы, на 94 сутки супоросности и 35 сутки лактации из сосудов хвоста на морфо-биохимические показатели, также проводилось изучение элементного состава покровных волос.

В 1- и 40-суточном возрасте был проведен убой поросят по три головы из каждой опытной группы и на анализ взяты пробы крови, печени, костной и мышечной ткани для исследования гематологических и биохимических показателей, содержания витамина А, состояния антиоксидантной системы и активности процессов перекисного окисления липидов, минерального состава печени, костной  и мышечной тканей.

Во втором цикле экспериментов проводилось изучение влияния  бета-каротина на активность процессов перекисного окисления липидов, состояние системы антиоксидантной защиты, ретенцию минеральных веществ, А-витаминный статус  и продуктивность свиней.

  Опыты проводили на супоросных, лактирующих свиноматках и полученных от них поросятах крупной белой породы. По принципу аналогов были сформированы три группы животных, по 13 голов в каждой,  которых осеменяли искусственно в течение 3 дней.  Супоросные и лактирующие свиноматки всех групп получали одинаковый основной рацион (ОР). С 85 дня супоросности и в течение лактации свиноматкам 2 и 3 групп в рацион дополнительно вводили препараты микробиологического -каротина: «Бетацинол» и «Бетавитон» соответственно, синтезированные в ООО «Полисинтез» (г. Белгород). 

«Бетацинол» представляет собой жидкость от оранжевого до темно-красного цвета, со специфическим запахом. Хорошо растворим в воде. Содержит 20мг/г -каротина, 5 мг/г витамина Е и 2, 5 % аскорбината цинка с добавлением эмульгатора (твина-80) и стабилизатора (бутилоксианизола).

  «Бетавитон» представляет собой жидкость от оранжевого до темно-красного цвета, со специфическим запахом. Хорошо растворим в воде. Содержит 20 мг/г -каротина, 5 мг/г витамина Е и 2,5 мг/г витамина С с добавлением эмульгатора (твина-80) и стабилизатора (бутилоксианизола).

Скармливание препаратов проводилось 10-дневными циклами с интервалами в 10 суток из расчета: 2 мл на супоросную свиноматку в сутки, а в период лактации  - 3 мл на животное. В 40- суточном возрасте  поросят был проведён их отъем, после которого поросятам-отъёмышам, полученным от свиноматок 2 и 3 групп, скармливали соответствующие препараты «Бетацинол» и «Бетавитон» по 0,5 мл на животное в сутки 10 суточными курсами с таким же интервалом.

  Материалом для исследований свиноматок служила кровь,  взятая у трех животных из каждой группы на 96 сутки супоросности и 43 сутки лактации из сосудов хвоста на гематологические, биохимические показатели. Отбор образцов крови проводили  в одно и то же время - до утреннего кормления у трех животных из каждой  опытной группы.

В 1- и 60-суточном возрасте поросят проводили убой животных, по три головы из группы для исследования содержания витамина А в печени, состояния антиоксидантной системы и активности процессов перекисного окисления липидов, минерального состава печени и костной ткани.

  В третьем цикле экспериментов изучалось влияние каротиноидов, источниками которых послужили порошкообразные  кормовых препараты бета-каротина, созданные методом микробиологического синтеза, на интенсивность свободнорадикальных процессов, антиоксидантный потенциал, гомеостаз минеральных элементов и обеспеченность животных витамином А.

Были сформированы три группы свиноматок по 13 голов в каждой. До 46-суточного возраста поросята содержались под матками. Первая группа получала ОР без дополнительных добавок (контрольная группа). Супоросным и лактирующим свиноматкам, а также поросятам (в послеотъемный период) 2 и 3 опытных групп дополнительно в основной рацион вводили препараты -каротина: «Бета-рост» и «Бета рост с липидами» полученные в ООО «Полисинтез» (г. Белгород).

  «Бета-рост» - комплексный кормовой препарат, полученный методом микробиологического синтеза путем экстракции растворителями из каротинсодержащей биомассы Blakeslea trispora (ТУ 9291-082-5465560-05).  По внешнему виду представляет собой сыпучий порошок от кирпично-красного до коричневого цвета со слабым запахом, с массовой долей каротиноидов в пересчете на бета каротин – 2,6%, массовой долей влаги – 6,23%

  «Бета-рост с липидами» - комплексный кормовой препарат, полученный смешиванием биомассы, липидов, муки и крахмала с соотношением биомассы и липидов 2:1 (ТУ 9291-082-54655661-54). По внешнему виду представляет собой сыпучий порошок желтого цвета со слабым запахом с массовой долей каротиноидов в пересчете на бета каротин – 0,67%, массовой долей влаги – 5,04%

Супоросным свиноматкам изучаемые препараты давали ежедневно во время утреннего кормления из расчета:  «Бета-рост» -  1,3 г, а  «Бета-рост с липидами» – 5 г на животное  в сутки. Лактирующие свиноматки и поросята отъемыши получали  препараты ежедневно из расчета «Бета рост» - 1,9 г – подсосным свиноматкам и по 0,31 г на голову для поросят; «Бета рост с липидами» -  7,6 г – подсосным свиноматкам и по 1,2 г на голову для поросят.

В 1- и 60-суточном возрасте был проведен убой поросят по три головы из каждой опытной группы и на анализ взяты кости, печень и мышцы животных для исследования содержания основных макро- и микроэлементов, витамина А, интенсивности свободно-радикальных процессов и активности системы антиоксидантной защиты.

Во всех циклах экспериментов комбикорма для свиноматок  и поросят готовили в хозяйстве, используя собственные корма и добавки. Все применяемые препараты в соответствии с ГОСТ 12.1.007-76 в нативном виде относятся к 4 классу- малоопасное вещество. ЛД50 более 10000 мг/кг.

  В работе использовались следующие методы исследований.

  1. Гематологические -  подсчет количества эритроцитов и лейкоцитов в счетной камере Горяева, определение уровня гемоглобина гемометром Сали. Лейкоцитарную формулу получали посредством дифференцированного подсчета форменных элементов белой крови на мазках, приготовленных общепринятым способом (И. Карпищенко, 1998).Системный  индекс красной крови рассчитывали по формуле (В. С. Камышников, 2003): СИИК=К·Er·Hb

2. Биохимические – определение в сыворотке крови содержания общего белка и альбуминов, ферритина, активности щелочной фосфатазы, лактатдегидогеназы, соотношения активности лактатдегидрогеназы к гидроксибутиратдегидрогеназе устанавливали при помощи автоматического биохимического анализатора OLYMPUS AU 400, и акустического анализатора биосред БИОМ- 01М.

  Состояние процесса свободнорадикального окисления у свиноматок оценивали по содержанию в сыворотке крови малонового диальдегида (МДА) (Л.И. Андреева, 1988);функционирование антиоксидантной системы  -  по активности ферментов: каталазы (А.И. Карпищенко, 1998),  глутатионредуктазы (ГР) (В.С. Асатиани, 1969), супероксиддисмутазы (Nishikimi M.et.al.,1972), церулоплазмина (А.М. Горячковский, 1998 ).

  Для изучения интенсивности процессов ПОЛ у поросят в гомогенате печени определяли содержание МДА (Л.И. Андреева, 1988), а состояние антирадикальной системы защиты  -  по активности ферментов: каталазы (А.И. Карпищенко, 1998), супероксиддисмутазы (М. Nishikimi et.al.,1972),  глутатионредуктазы (В.С. Асатиани, 1969), церулоплазмина (А.М. Горячковский, 1998).

Оценку обеспеченности организма поросят макро- и микроэлементами осуществляли с помощью анализа крови, печени, костной и мышечной тканей. У свиноматок объектом для изучения служили кровь и покровные волосы. Исследование концентрации минеральных элементов проводили по методам описанных в справочном пособии (Кальницкий Б.Д., 1997).Ca, Mg, Fe, Cu, Zn Mn, Co, Mo определяли c помощью метода атомно-абсорбционной спектрофотометрии на спектрофотометре фирмы Perkin Elmer,  Na и К -  на пламенном фотометре. Определение содержания фосфора проводили с ванадомолибденовым реактивом (по методу  Pulls G. в модификации В.Ф. Коромыслова с соавтор. 1972), йода  - по методике Аброськиной Л.С.(1985). Для количественного определения содержания витамина А в печени использовали классический метод  на применении  реакции  Карр-Прайса (В.Я. Антонов и др., 1971), а также метод жидкостной хроматографии высокого разрешения на автоматическом хроматографе ВЭЖК-система фирмы Summit.

  3.Морфометрические - изучение изменения линейных промеров, массы и индексов макроморфометрии бедренных, большеберцовых и пястных костей поросят по методике Жукова В.М. (1988). Механические свойства костей изучали при помощи разрывной машины  МИП-100-2 по методу, описанному в справочном пособии под редакцией Б.Д. Кальницкого (1997).

4. Зоотехнические -  воспроизводительные функции свиноматок изучали путем оценки:

а) многоплодия –  учета количества поросят при опоросе,

б) крупноплодности – подсчетом средней живой массы 1 поросенка при взвешивании,

в) молочности свиноматки – взвешиванием всех поросят гнезда в 21 день,

г) изменения живой массы поросят за период подсоса - индивидуальным взвешиванием поросят при рождении, в 21 день и при отъеме,

д) сохранности поросят

5. Экономические - оценка эффективности применения препаратов

Статистическая обработка полученных результатов осуществлялась общепринятыми методами вариационной статистики. Результаты экспериментов обработаны методом регрессионного и корреляционного анализа (Г.Ф. Лакин, 1980). При определении достоверности использовали коэффициент Стьюдента и критерий достоверности. Результаты рассматривали как достоверные начиная с р0,05.

3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

3.1.  Оценка эффективности использования воднодисперги-рованных  форм витамина А и бета-каротина из препаратов  «Витамин А», «Бетацинол», «Витамин А с гепатопротектором»  в рационах свиней

      1. Гематологические показатели  свиноматок и

полученных от них поросят

  Введение в рационы свиноматок «Витамина А» и «Витамина А с гепатопротектором» не оказало существенного влияния на содержание красных клеток крови. Была отмечена тенденция увеличения содержания эритроцитов у маток третьей опытной группы, получавших «Бетацинол» как в последнюю треть супоросности, так и в период лактации на 4,62% и 7,62% соответственно по отношению к контрольным животным, что свидетельствует об улучшении эритропоэза. 

  В крови супоросных животных первой, второй и четвертой опытных групп содержание гемоглобина было примерно на одном уровне. Однако у свиноматок третьей опытной группы его содержание было на 4,37% выше, чем в контроле.

  У лактирующих животных повысился уровень гемоглобина в третьей и четвертой опытных группах на 12,70 и 5,54% соответственно по сравнению с аналогами из контрольной группы. Таким образом, изменение концентрации гемоглобина в основном соответствовало характеру содержания эритроцитов в крови.

  Анализируя данные по лейкоцитам, можно отметить, что в результате применения воднодиспергированных форм витамина А, бета-каротина и сочетания витамина А с биофлавоноидами число нейтрофилов у маток снизилось, а  лимфоцитов  увеличилось. У свиноматок контрольной 





группы наблюдалось перераспределение клеток белой крови в сторону увеличения нейтрофилов и снижения лимфоцитов.

  У новорожденных поросят установлено повышение количества эритроцитов во второй, третьей и четвертой опытных группах на 14,41%, 9,20% и 13,49% соответственно по сравнению с аналогами из контрольной группы. Выявленная тенденция сохранилась и у 40-суточных животных.

  Концентрация гемоглобина в крови поросят соответствовала динамике числа эритроцитов. Таким образом, применяемые воднодиспергированные формы витамина А и бета-каротина за счет повышения содержания эритроцитов и гемоглобина активизировали дыхательную функцию крови, оказывая положительное влияние на течение окислительно-восстановительных реакций и стимулирование эритропоэза в организме поросят.

  В лейкограмме молодняка свиней наблюдались изменения в соотношении между количеством нейтрофилов и лимфоцитов, что согласуется с результатом исследований лейкограммы свиноматок и рассматривается нами как проявление у животных контрольной группы стресс-реакции адаптационного синдрома. 

  Во все исследуемые периоды выявлено повышение процента эозинофилов в крови у поросят контрольной группы, в то время как у животных второй, третьей и четвертой опытных групп эозинофилия отсутствовала, поскольку применяемые добавки, вероятно, снижали последействие стресса.

  Таким образом, в результате проведенных гематологических исследований было установлено, что воднодиспергированные формы витамина А и бета-каротина оказывают стимулирующее влияние на гемопоэз, особенно в период раннего постнатального развития молодняка свиней, о чем свидетельствует более высокое содержание гемоглобина и эритроцитов в крови животных этих групп.  Анализ лейкограмм свиней позволяет заключить, что воднодиспергированные формы бета-каротина, витамина А, и его комбинации с биофлавоноидами источниками которых послужили «Витамин А», «Бетацинол», «Витамин А с гепатопротектором» в критические периоды онтогенеза оказывают протекторное действие на лимфоциты крови, разрушающиеся под воздействием свободных радикалов, что указывает на повышение иммунобиологических свойств животных.

3.1.2 Биохимические показатели крови

Существенного влияния на содержание общего белка и альбуминов в сыворотке крови свиноматок и полученных от них поросят применяемые воднодиспергированные формы витамина А и бета-каротина не оказали.

Установлено, что концентрация ферритина в крови у лактирующих животных, которым скармливали «Витамин А» и «Бетацинол» повысилась на 34,59% и 15,17% соответственно по сравнению с контролем. Учитывая, что ферритин является основным белком млекопитающих, депонирующим железо, то более низкие значения его содержания у животных контрольной группы могут свидетельствовать о более низкой обеспеченности железом.

  Активность щелочной фосфатазы (ЩФ) возрастала в сыворотке крови у супоросных свиноматок четвертой опытной группы, а у лактирующих маток – во второй, третьей и четвертой опытных группах по сравнению с животными из контроля.

  В сыворотке крови супоросных свиноматок второй, третьей и четвертой опытных групп отмечено повышение активности общей лактатдегидрогеназы (ЛДГ) на  9,60%, 22,55% и 9,86% соответственно по сравнению с показателями животных контрольной группы. Сходная тенденция выявлена и в период лактации. Поскольку ЛДГ катализирует конечную реакцию гликолиза, то повышение её активности в пределах физиологических норм, можно трактовать как интенсификацию гликолитического пути катаболизма глюкозы, что косвенно свидетельствует об активации биоэнергетических процессов.

  Полученные нами данные отражают взаимосвязь между активностью ЩФ, ЛДГ и введением в рацион маток воднодиспергированного витамина А и бета-каротина. Наблюдаемый факт, прежде всего, связываем с неодинаковой обеспеченностью свиноматок цинком, в усвоении которого важное значение играет ретинол, так как дефицит лабильной формы этого микроэлемента естественно ведет к снижению активности цинк-зависимых металлоферментов. Проведенный корреляционный анализ подтвердил зависимость между содержанием цинка в крови супоросных и лактирующих свиноматок и ферментативной активностью ЩФ (r=0,53 и r=0,60 соответственно) и ЛДГ (r=0,44 и r=0,47 соответственно).

У поросят, полученных от свиноматок которым скармливали «Витамин А», «Бетацинол», «Витамин А с гепатопротектором», по сравнению с животными из контрольной группы выявлено большее содержание железа в сыворотке крови. Поскольку молодняк изначально использует железо, накопленное еще во время внутриутробного развития, то меньшее количество этого микроэлемента в сыворотке крови поросят контрольной группы свидетельствует о более низкой обеспеченности железом свиноматок.

Удобным тестом для оценки обеспеченности организма железом является также определение ферритина в сыворотке крови. Проведенные исследования показали, что у 1-суточных поросят второй, третьей и четвертой опытных групп его содержание превышало уровень контрольной группы на 41,07%, 77,32% и 18,77% соответственно. Аналогичная направленность изменений сохранилась и у 40-суточного молодняка.

  Учитывая, что ферритин обладает антиоксидантным действием, связывая ионы металлов переменной валентности и тем самым препятствуя их вовлечению в реакции разложения перекисей (К.Б. Меньщикова, Н.К. Зенков, 1993; В.И. Журавлев и др., 2008), то полученное нами повышение его содержания в сыворотке крови можно рассматривать как защитный эффект в условиях окислительного стресса. Это подтверждается выявленной отрицательной коррелятивной зависимостью между интенсивностью реакций перекисного окисления липидов и содержанием ферритина как у 1- суточных, так и у 40-суточных поросят.

  В сыворотке крови новорожденных поросят второй и четвертой опытных групп отмечено повышение активности щелочной фосфатазы на 9,18% и 7,88% соответственно по сравнению с поросятами из контрольной группы. Различий по активности ЩФ у поросят первой и третьей опытных групп установлено не было. У 40-суточных животных «Бетацинол» и «Витамин А с гепатопротектором» повысили активность ЩФ в сыворотке крови на 9,92% и 11,73% по сравнению с первой группой, тогда как воднодиспергированный «Витамин А» в этот период не оказал существенного влияния.

  Известно, что общая активность щелочной фосфатазы в циркулирующей крови складывается из активности её печеночных и костных изоферментов, причем у растущих животных вклад костной изо-ЩФ в общую активность фермента наиболее высока. Поэтому, повышение активности ЩФ в группах, получавших воднодиспергированные формы витамина А и бета-каротина, полагаем, связано с большей массой поросят и их усиленным ростом, так как щелочная фосфатаза катализирует минеральный обмен и принимает участие в фосфорилировании костной ткани. Кроме того, установлена положительная корреляция между уровнем Zn в крови 1- и 40-суточных животных и активностью ЩФ.

Активность лактатдегидрогеназы в сыворотке крови новорожденных поросят была выше во второй группе на 25,65%, в третьей группе на 14,37%, в четвертой группе на 22,39% по сравнению с животными из контрольной группы, что свидетельствовало об интенсивно идущем гликолизе.

  К 40-суточному возрасту отмечено снижение активности ЛДГ у поросят, полученных от свиноматок в питании которых использовали «Витамин А», «Бетацинол», «Витамин А с гепатопротектором» на 7,31%, 6,97% и 4,99% соответственно по сравнению с контрольной группой. Возможно, это связано с тем, что при интенсивном росте животных происходит коррекция метаболических процессов на тканевом уровне, с целью обеспечения организма необходимым количеством энергии в виде АТФ для синтетических процессов. В связи с этим  в печени  поросят видимо преобладает аэробный гликолиз, который заканчивается образованием пирувата, а последний сразу поступает в митохондрии для дальнейшего окисления в цитратном цикле с образованием АТФ. Восстановление пирувата в лактат под действием фермента ЛДГ при этом не происходит, так как этот процесс для организма является энергетически невыгодным. Таким образом, при интенсивном росте снижается скорость анаэробного гликолиза, что, по-видимому, инициирует более низкую активность ЛДГ.

      1. Функциональное состояние системы антиоксидантной

защиты и свободнорадикального окисления у свиней в

разные физиологические периоды

  Очевидно, что супоросность и роды являются физиологическим стрессом для организма (В.А. Антипов и др., 2008), одним из универсальных механизмов реакции на который является активация свободно-радикального окисления. 

  Так, в группе, где супоросным маткам скармливали «Витамин А» показатель интенсивности реакций перекисного окисления липидов (ПОЛ), оцениваемый нами по уровню малонового диальдегида (МДА), образующегося при кипячении в кислой среде метаболитов пероксидации, был ниже на 8,90% (Р>0,05) в группе, где животные получали «Бетацинол» - на 9,42% (Р>0,05), в группе где свиноматки получали «Витамин А с гепатопротектором» - на 25,65% (Р<0,01)  по сравнению с контрольной группой.  Выявленная коррелятивная взаимосвязь (r= -0,45) между содержанием МДА в крови супоросных свиноматок и их обеспеченностью витамином  А, которую оценивали по содержанию ретинола в печени новорожденных поросят подтверждает антиоксидантные свойства ретинола.

В подсосный период у лактирующих животных второй, третьей и четвертой опытных групп уровень МДА снизился на 3,68%, 5,52% и 9,81% соответственно по сравнению с контролем, хотя это понижение не было статистически достоверным.

  Более значительное снижение уровня МДА у свиноматок, получавших «Витамин А с гепатопротектором» как в период супоросности, так и в период лактации, полагаем, связано с присутствием дигидрокверцетина, который является эффективным антиоксидантом. А высокие значения уровня МДА у животных контрольной группы можно объяснить тем, что их антиоксидантные системы не справлялись с проявлением повреждающего действия свободных радикалов и перекисных соединений.

  Применение воднодиспергированных форм ретинола в рационах супоросных и лактирующих  свиноматок оказало существенное влияние на активность ферментов антиоксидантной системы защиты (АОЗ) организма. Установлено повышение активности супероксиддисмутазы, церулоплазмина, каталазы и глутатионредуктазы у маток получавших «Витамин А» и «Витамин А с гепатопротектором» во все исследуемые периоды (табл.1), что в целом отражает активацию ферментного звена антиоксидантной системы защиты, направленного на поддержание гомеостаза организма. 

При введении в корма супоросных и лактирующих свиноматок бета-каротина в составе «Бетацинола», выявлено повышение активности церулоплазмина и каталазы. Однако на активность супероксиддисмутазы и глутатионредуктазы в сыворотке крови маток воднодиспергированная форма бета-каротина  влияния не оказала.

1. Активность ферментов АОС в сыворотке крови свиноматок (M±m, n=3)

Физиологическое состояние

1  группа

(контроль)

2 опытная

группа

3 опытная

группа

4 опытная

группа

Супероксиддисмутаза (СОД), ед.ак.10-2

Супоросные свиноматки

49,22±7,21

80,29±15,13

51,38±9,54

83,74±15,18

Лактирующие свиноматки

64,94±8,21

87,55±14,51

64,13±7,91

81,41±10,21

Глутатионредуктаза (ГР), мкмоль/сл

Супоросные свиноматки

0,05±0,01

0,06±0,01

0,05±0,01

0,06±0,01

Лактирующие свиноматки

0,08±0,02

0,09±0,01

0,08±0,02

0,09±0,01*

Каталаза, мкмоль Н2О2 /лс 103

Супоросные свиноматки

7,26±0,26

13,76±1,17**

13,60±1,31**

12,86±0,43***

Лактирующие свиноматки

25,74±3,61

27,06±1,02

25,58±2,95

30,83±1,66

Церулоплазмин (ЦП), мг/л

Супоросные свиноматки

156,04±8,12

158,95±5,25

169,16±5,26

180,83±2,92*

Лактирующие свиноматки

210,00±22,02

277,08±42,36

320,83±17,68*

239,16±27,82

*Р<0,05 в сравнении с контрольной группой, **Р<0,01 в сравнении с контрольной группой, ***Р<0,001 в сравнении с контрольной группой

  Важнейшим этапом онтогенеза животных является адаптация после рождения и в раннем постнатальном периоде, что, прежде всего, связано с существенными различиями метаболизма плода и новорожденного, обусловленными особенностями поступления и использования питательных веществ, а также  снабжения кислородом (И.А. Аршавский, 1976). Переход к легочному типу дыхания при рождении, а также температурный и физический стрессы могут оказывать существенное влияние на процессы ПОЛ, интенсивность которых после рождения возрастает (М.И. Рецкий и др., 2004).

  Результаты определения уровня малонового диальдегида в гомогенатах печени выявили, что у новорожденных поросят второй, третьей и четвертой опытных групп его содержание было на 62,34% (Р<0,05), 71,75% (Р<0,01) и 72,52% (Р<0,01) соответственно ниже в сравнении с аналогами из контрольной группы. В 40-суточном возрасте установленная закономерность сохранилась, что свидетельствует об более активном течении  реакции перекисного окисления липидов в контрольной группе.

  Проведенный корреляционный анализ выявил достоверную взаимосвязь между содержанием ретинола в печени 1- и 40-суточных поросят и уровнем МДА: r=-0,88 (Р<0,001) и r=-0,67 (Р<0,05), что является отражением антиоксидантных свойств витамина А и может быть описано соотношениями: у=10,20-3,21х и у=7,04-0,43х соответственно, где: х -количество витамина А в печени поросят (мкг/г ткани) , у – уровень МДА  в печени животных (мкмоль/г белка · 10).

Изучение динамики интенсивности свободно-радикальных процессов у молодняка показывает, что содержание малонового диальдегида в гомогенатах печени  у новорожденных поросят было выше, чем в период их отъема, подтверждая, что высокая скорость ПОЛ в раннем постнатальном онтогенезе находится во взаимосвязи с высокой интенсивностью их роста.  По-видимому, при активации процессов липолиза, увеличении концентрации свободных жирных кислот и активных форм кислорода вследствие развития гипоксии при рождении и последующей реоксигенации (при переходе на новый тип снабжения организма кислородом) в первые часы и сутки жизни происходит интенсификация процессов свободнорадикального окисления липидов. Кроме того, постепенное повышение функционального состояния ферментативного звена системы АОЗ способствует уменьшению накопления в крови поросят продуктов перекисного окисления липидов.

  Исследование показателей антиоксидантной системы защиты в гомогенатах печени у 1- и 40-суточных поросят второй и четвертой опытных групп в целом отражает активацию ферментативного звена АОС.

  Так, активность супероксиддисмутазы у новорожденных животных второй и четвертой опытных групп повысилась на 33,79% и 28,63% соответственно по сравнению с аналогами из первой группы. К 40-суточному возрасту активность СОД снизилась во всех опытных группах, однако у животных, полученных от свиноматок которым в корма вводили воднодиспергированные формы ретинола «Витамин А» и «Витамин А с гепатопротектором», она была на 59,79 и 51,08% выше относительно животных контрольной группы.

  У новорожденных поросят второй и четвертой опытных групп выявлено увеличение активности каталазы на 67,25%(Р<0,01) и 80,94% (Р<0,01), церулоплазмина на 34,67%(Р>0,05) и 31,99% (Р>0,05), глутатионредуктазы  на 6,26 и 3,96% соответственно в сравнении с контрольными животными. Повышенную активность каталазы, церулоплазмина, глутатионредуктазы в этих же группах мы регистрировали и в 40-суточном возрасте, при этом активность ферментов с возрастом уменьшалась.

Применение воднодиспергированной формы бета-каротина привело к усилению активности супероксиддисмутазы в 1,24(Р>0,05) и 1,40(Р<0,05)раза, каталазы в 1,73(Р<0,01) и 2,01(Р<0,05) раза, церулоплазмина в 1,47(Р<0,05) и 1,20(Р>0,05) раза, сопровождающееся снижением малонового диальдегида на 71,75(Р<0,01) и 83,90% (Р<0,01) относительно аналогов из контрольной группы, что свидетельствует о коррекции общего окислительного стресса у поросят. Учитывая установленную достоверную коррелятивную взаимосвязь между активностью ГР и содержанием  бета-каротина в крови 40-суточных поросят  третьей опытной группы

(r=-0,81), а также то, что степень ПОЛ, оцениваемая нами по уровню МДА обратно коррелирует с уровнем в крови каротина (r= -0,67) у животных этой же группы, можно предположить, что бета-каротин способен перехватывать свободные радикалы, включаясь в цепь неферментативных реакций антирадикальной системы организма и в том числе проявлять глутатионсберегающую функцию.

Таким образом, по результатам биохимических исследований воднодиспергированные формы витамина А и бета-каротина проявили себя как эффективные антиоксиданты, приводящие к снижению токсичных продуктов перекисного окисления липидов (МДА) как у свиноматок, так и у полученных от них поросят. Следовательно, более низкая обеспеченность организма ретинолом, бета-каротином и биофлавоноидами является одной из причин возникновения сдвига тканевого баланса в системе антиоксидантов и прооксидантов в сторону последних, что проявляется увеличением перекисного окисления липидов. Применение воднодиспергированных форм витамина А, его комбинации с биофлавоноидами и бета-каротина позволило снизить  интенсивность процессов перекисного окисления липидов за счет активации ферментного звена АОС, что, однако, не исключает возможное влияние бета-каротина и биофлавоноидов, как факторов неферментного происхождения.

3.1.4. Содержание макро и микроэлементов в

органах и тканях свиней

  Оксидативному повреждению могут подвергаться любые органы и ткани. Согласно существующему представлению о единстве структуры и функции, повреждение тканей и органов свободными радикалами должно найти свое отражение в изменении их минерального обмена.

  В ходе проведенного анализа проб сыворотки крови и покровных волос супоросных и лактирующих свиноматок были установлены сдвиги их элементного состава при применении воднодиспергированных форм витамина А, бета-каротина и комбинации витамина А с биофлавоноидами. Наиболее выраженные различия исследованных групп животных выявлены по содержанию цинка, меди, марганца, железа, йода и селена. Установлена сопряженность изменений между содержанием некоторых из этих микроэлементов и активностью ферментов в крови. Так, уровень меди в крови супоросных и лактирующих маток коррелировал с активностью церулоплазмина (r=0,63;Р<0,05 и r=0,54) и с активностью СОД (r =0,46 и r=0,38); концентрация железа  - с активностью каталазы (r=0,53 и r=0,55). Также у супоросных животных выявлена взаимосвязь между уровнем селена в сыворотке крови и обеспеченностью маток витамином А, которую определяли по содержанию ретинола в печени новорожденных поросят (r=0,73;Р<0,01). 

Поскольку большинство из этих микроэлементов входят в состав металлоферментов антиоксидантной системы организма: супероксиддисмутазы, церулоплазмина, каталазы и глутатионпероксидазы, возможно, изменение их концентрации можно рассматривать как способ регуляции интенсивности процессов перекисного окисления в последнюю треть супоросности и в период лактации. Более низкое содержание у маток контрольной группы цинка, меди, селена и железа можно считать началом формирования антиоксидантной недостаточности с учетом повышения уровня малонового диальдегида. 

В сыворотке крови у 1- и 40-суточных поросят,  полученных от маток, которым скармливали «Витамин А», «Бетацинол» и «Витамин А с гепатопротектором» отмечалось повышение содержания кальция, фосфора, магния, цинка, меди, марганца и селена.

Установлена взаимосвязь между уровнем меди в сыворотке крови и активностью церулоплазмина у новорожденных поросят (r=0,60;Р<0,05), а также между содержанием меди в крови и активностью супероксиддисмутазы как у 1-суточных, так и у 40-суточных животных (r=0,57;Р>0,05 и r=0,59;Р<0,05) соответственно), что подтверждает влияние применяемых форм ретинола и бета-каротина на активацию ферментативного звена антиоксидантной системы защиты путем изменения концентрации металлов.  Кроме того, у новорожденных и 40-суточных поросят  выявлена коррелятивная взаимосвязь между концентрацией в сыворотке крови селена, являющимся одним из мощных антиоксидантов, и содержанием в печени ретинола (r=0,61;Р<0,05 и r=0,75;Р<0,01 соответственно).

  Достаточно надежным показателем обеспеченности организма животных минеральными элементами служит содержание их в печени животных, где было установлено повышение уровня меди, цинка, железа, марганца в группах, полученных от маток, которым в рацион вводили «Витамин А», «Бетацинол» и «Витамин А с гепатопротектором» (табл.2).

2. Содержание микроэлементов в печени поросят (мг/кг) (M±m, n=3)

Показатели

Первая

группа

(контроль)

Вторая

опытная

группа

Третья

опытная

группа

Четвертая

опытная

группа

1-суточные поросята

Zn

139,96±8,49

153,98±10,90

148,01±9,89

144,65±11,61

Fe

199,89±6,23

198,09±14,96

211,95±9,71

206,31±5,79

Cu

39,91±4,12

43,09±0,32

41,61±1,70

45,84±5,37

Mn

16,65±0,91

17,93±1,29

18,31±0,61

16,82±1,01

40-суточные поросята

Zn

138,82±3,52

146,00±3,34

148,90±6,88

144,56±2,95

Fe

197,23±6,30

211,27±5,59

222,38±12,78

217,52±15,93

Cu

43,75±3,68

52,90±4,18

44,18±4,23

50,45±4,48

Mn

17,19±0,78

19,91±1,37

18,60±0,58

18,55±0,65

  Содержание элементов в мышечной ткани поросят также изменилось под влиянием применяемых новых форм витамина А и бета-каротина. У новорожденных животных второй, третьей  и четвертой опытных групп в мышцах концентрация цинка повысилась на 12,23%, 20,87% и 20,14% соответственно; уровень меди на 4,88%, 12,65% и 7,77%; содержание марганца на 15,13%, 21,62% и 3,24% по сравнению с первой группой.  Выявленная тенденция по накоплению в мышцах цинка, меди и марганца сохранилась и у 40 суточных животных.

Костная ткань молодняка, полученного от свиноматок в питании которых использовали воднодиспергированные формы витамина А и бета-каротина содержала больше кальция в 1-и  40-суточном возрасте по сравнению с контролем.

Установлено достоверное увеличение отношения Са/Р в костях у новорожденных поросят второй, третьей и четвертой опытных групп, что связано с увеличением уровня кальция на фоне неизменного уровня фосфора в костной ткани у этих животных (табл.3). В костной ткани 40-суточных поросят отношение Са/Р также было выше во второй, третьей и четвертой опытных группах, относительно первой,  хотя эти изменения носили характер тенденции. 

3. Минеральный состав костной ткани у  поросят (M±m, n=3)

Показатели

1 группа

(контроль)

2 опытная группа

3 опытная группа

4 опытная группа

1-суточные поросята

Кальций, г/100 г

18,2±1,1

20,4±1,2

20,0±0,9

20,6±1,2

Фосфор, г/100 г

9,90±0,72

9,93±0,52

9,93±0,47

9,90±0,49

Са/Р

1,83±0,03

2,05±0,05*

2,01±0,01**

2,07±0,02**

40-суточные поросята

Кальций, г/ 100г

18,5±0,6

23,1±1,0*

21,7±1,2

22,1±0,5**

Фосфор, г/ 100г

9,20±0,43

10,7±1,0

10,1±0,7

10,3±0,4

Са/Р

2,01±0,04

2,13±0,08

2,16±0,04

2,16±0,08

*Р<0,05 в сравнении с контрольной группой

**Р<0,01 в сравнении с контрольной группой

  В целом, за период от 1- до 40-суточного возраста во всех группах величина коэффициента Ca/Р повышалась, что характеризует качественные изменения в составе костного аппарата. Согласно литературным данным  (Прохончуков и др., 1984), при этом уменьшается доля растворимого оксикальцийфосфата и возрастает доля нерастворимого оксиапатита. Возможно, более низкие значения соотношения Ca/Р у поросят контрольной группы свидетельствуют о том, что в костной ткани этих животных кристаллы оксиапатита недостаточно сформированы.

  Кроме того, в ходе проведенного исследования минерального состава костной ткани  у поросят, полученных от свиноматок которым скармливали «Витамин А», «Бетацинол» и «Витамин А с гепатопротектором»,  выявлено накопление в большеберцовой кости цинка, меди, железа, марганца, селена, которые участвуют в катализе ферментативных реакций, протекающих в остеогенных клетках.

3.1.5. Динамика абсолютных промеров, индексов макроморфо-

  метрии и биомеханические свойства костной ткани у свиней

  По сравнению с контрольными животными у новорожденных поросят масса бедренной кости была выше во второй, третьей и четвертой опытных группах, масса большеберцовой – в группах, где поросята были получены от свиноматок которым скармливали «Бетацинол» и «Витамин А с гепатопротектором». В то же время физиологическая длина бедренной и большеберцовой костей у новорожденных поросят во всех группах была приблизительно одинаковой.

  У 40-суточного молодняка под влиянием вводимых воднодиспергированных форм ретинола и бета-каротина отмечено увеличение массы и длины большеберцовых и пястных костей. Установлена взаимосвязь между длиной большеберцовой кости и массой поросят как в 1-, так и в 40-суточном возрасте (r=0,48;Р>0,05 и  r=0,68;Р<0,05).

  Анализ макроморфометрических индексов за период от рождения до 40-суточного возраста поросят выявил повышение массивности и грациальности костей у животных второй, третьей и четвертой опытных групп по сравнению с аналогами из контроля. Поскольку современное свиноводство нацелено на получение свиней с крепкой конституций, скелет которых обладает оптимальным уровнем массивности и грациальности, то полученные изменения можно рассматривать как положительные.

Механическая прочность бедренной, большеберцовой и пястной костей растущих поросят, полученных от свиноматок которым скармливали «Витамин А», «Бетацинол» и «Витамин А с гепатопротектором» была выше по сравнению с животными из контрольной группы.  Кости имели большую предельную прочность на изгиб (ППИ) и несколько меньший, по сравнению с контрольными животными, момент инерции (табл.4).

Выявленная нами положительная корреляционная зависимость между пределом прочности бедренной кости на изгиб и уровнем ретинола в печени у 1-суточных поросят (r=0,62;Р<0,05), а также между прочностью пястной кости и количеством ретинола в печени у 40-суточных животных (r=0,58; Р<0,05) свидетельствуют о взаимосвязи между этими показателями.

Таким образом, в результате проведенного исследования установлено повышение прочности и массивности костей у поросят,  увеличении в них накопления кальция, фосфора и отношения Са/Р, что свидетельствует о положительном влиянии изучаемых форм ретинола, его комбинации с биофлавоноидами и бета-каротина на зрелость костной ткани и состояние костяка в целом.

  4. Механические свойства  костей конечности  у  поросят (M±m, n=3)

Показатели

Группы

1( контроль)

2 опытная

3 опытная

4 опытная

Большая берцовая кость 1-суточных поросят

ППИ, кг/см2

821±108

1058±205

980±119

1164±45

Момент инерции, см4 103

5,75±0,91

3,20±0,62

3,47±0,17

3,35±0,17

Бедренная кость 1-суточных поросят

ППИ, кг/см2

1292,00±214,45

2259,07±127,64

1948,84±361,60

2168,91±836,01

Момент инерции, см4 103

4,00±0,10

2,10±0,10

3,00±0,10

3,00±0,10

Пястная кость 40-суточных поросят

ППИ, кг/см2

225,06±47,88

284,19±38,53

298,64±25,53

392,11±44,88

Момент инерции, см4 103

1,2±0,40

0,80±0,20

1,1±0,20

0,8±0,10

*Р<0,05 в сравнении с контрольной группой

 

3.1.6. А-витаминный статус поросят

  Одним из важных критериев полноценности кормления поросят является уровень обеспечения их жирорастворимыми витаминами, и в первую очередь витамином А. Особенно это относится к раннему периоду жизни, потому что у молодняка признаки недостаточности ретинола проявляются раньше, чем у полновозрастных животных вследствие его малых запасов в организме.

  По данным наших исследований в сыворотке крови 40-суточных поросят, полученных от свиноматок второй и четвертой опытных групп концентрация ретинола была выше в 3,93(Р<0,05) и 1,38(Р<0,05) раза соответственно по сравнению с поросятами из контрольной группы.  Наиболее существенное повышение ретинола в сыворотке крови выявлено у животных второй опытной группы, полученных от свиноматок, которым вводили в рацион воднодисперсионный «Витамин А». Поскольку уровень ретинола в крови молодняка свиней в период молочного питания находится в зависимости от кормления маток, то большее его количество  в крови поросят этой группы объясняется тем, что они получали молоко более богатое витамином А.

  Применение  воднодиспергированного бета-каротина из «Бетацинола» также в 2,0 раза (Р<0,01) повысило уровень ретинола в крови поросят, по сравнению с аналогами из контроля, что указывает на способность бета-каротина всасываться из желудочно-кишечного тракта в трансформированном в витамин А виде.

По мнению ряда авторов в том числе Н.Т. Емелиной (1970), А.А. Душейко (1989), А.И. Свеженцева (2002) каротин у свиней в желудочно-кишечном тракте всасывается только в трансформированном в витамин А виде и поэтому в крови его не обнаруживают. С другой стороны в работах Л.М. Двинской (1991),  Л.М. Двинской, В.Ю. Ивановой и др. (1992-1993), P. Kostoglou et.al. (2000) указано, что у свиней часть бета-каротина корма может всасываться в желудочно-кишечном тракте нетрансформированном в витамин виде и поступать в кровь. В наших исследованиях в сыворотке крови 40-суточных поросят, полученных от свиноматок, которым скармливали «Бетацинол» отмечена четко выраженная тенденция увеличения уровня каротина по сравнению с аналогами из контрольной группы, что указывает на способность бета-каротина всасываться из желудочно-кишечного тракта как в чистом, так и в трансформированном в витамин А виде. Предполагаем, это связано с  диспергированием каротина  в воде в виде тонкой эмульсии способной проходить кишечный барьер. 

  Учитывая, что концентрация ретинола в плазме может колебаться в весьма широких пределах и не всегда является гарантией хорошей обеспеченности организма витамином А, было проведено исследование влияния скармливания свиноматкам исследуемых форм витамина А и бета-каротина на накопление ретинола в печени полученных от них поросят, где депонируется до 90-95% всего количества этого витамина. 

  У новорожденных животных, полученных от свиноматок в питании которых использовали «Витамин А» и «Витамин А с гепатопротектором» концентрация ретинола в печени была на 33,98% (Р<0,01) и 27,83%(Р<0,05) выше по сравнению с аналогами из контрольной группы. В дальнейшем в течение первых четырех недель количество витамина А в печени поросят быстро нарастало, при этом у 40-суточных животных второй и четвертой опытных групп его количество было на 17,91% и 18,55% соответственно выше, чем у поросят первой группы.

  Применение бета-каротина из «Бетацинола» также повысило уровень витамина А в печени у новорожденных поросят на 38,83% (Р<0,01) по сравнению с контрольными животными. Аналогичная направленность изменений по содержанию в печени ретинола сохранилась и у 40-суточных поросят третьей опытной группы (рис.2).

Воднодиспергированный бета-каротин, источником которого послужил «Бетацинол», как было установлено в наших исследованиях, обладает антиоксидантными свойствами, поэтому его скармливание, видимо, оказало протекторное влияние на каротиндиоксигеназу, способствуя депонированию  ретинола у поросят также эффективно, как и применение чистого витамина А.

  Рис. 2 Содержание витамина А в печени поросят (мкг/г ткани)

3.1.7. Репродуктивные показатели свиноматок и рост поросят

  Включение в рационы животным «Витамина А», «Бетацинола», «Витамина А с гепатопротектором» в последнюю треть супоросности, когда происходит максимальная интенсивность роста плодов, положительно повлияло на воспроизводительные показатели свиней. Так поросята, полученные от свиноматок которым скармливали воднодиспергированные формы витамина А и бета-каротина, имели большую массу, чем новорожденные животные в контрольной группе. В итоге средняя живая масса гнезда поросят во второй, третьей и четвертой опытных группах была выше на 1- и 30- сутки по сравнению с животными из первой группы (табл.5).

5. Репродуктивные показатели свиноматок и рост поросят(M±m, n=6)

Показатели:

1 группа

(контроль)

2 опытная группа

3 опытная группа

4 опытная группа

Количество поросят, гол.:

всего

в т.ч. живых (многоплодие)

10,00±1,73

9,6±2,03

10,30±0,61

10,30±0,61

10,00±1,00

9,8±1,07

10,00±0,32

9,8±0,49

Живая масса поросят при рождении, кг

0,87±0,03

1,05±0,02

1,07±0,02

1,00±0,02

Живая масса гнезда при рождении, кг

8,70±1,12

10,20±0,52

10,50±1,08

9,80±0,29

Живая масса гнезда на 30 сут., кг

43,4 ±0,84

58,8±4,21**

61,0 ±4,91**

58,2 ± 2,94**

Сохранность к отъему, %

73,3

91,5

96

92

**Р<0,01 в сравнении с контрольной группой

  Эффективность применения воднодисперсионных форм подтвердилась не только улучшением интенсивности роста опытных животных, но и более высокой сохранностью, которая к моменту отъема у поросят, полученных от маток которым в основной рацион вводили «Витамин А» , «Бетацинол» и «Витамин А с гепатопротектором», была выше на 24,83%, 30,96% и 25,51% соответственно.

3.2. Изучение физиолого-биохимического статуса организма

свиноматок и их потомства при использовании воднодиспер-сионных форм микробиологического бета-каротина из препаратов «Бетацинол» и «Бетавитон»

3.2.1. Морфологические показатели крови

  Анализируя изменения гематологических показателей свиноматок, а также  полученных от них поросят, можно отметить, что применение воднодисперсионных форм микробиологического бета-каротина «Бетацинол» и «Бетавитон» в целом не оказало существенного влияния на содержание эритроцитов и лейкоцитов на протяжении всего экспериментального периода.

  Исследование лейкограммы двухмесячных животных после их отъема от свиноматок указывает на наличие у поросят контрольной группы стресс-реакции адаптационного синдрома (Л.Х. Гаркави и др.,1990). У поросят контрольной группы увеличивался процент нейтрофилов при уменьшении числа лимфоцитов, а у животных, получавших воднодисперсионные формы  бета-каротина, количество нейтрофилов снижалось, лимфоцитов - увеличивалось

3.2.2. Биохимические показатели крови

  Включение в рацион свиноматок каротинсодержащего «Бетавитона» не оказало заметного влияния на содержание белка и его фракций в сыворотке крови как в период супоросности, так и в период лактации. Хотя применение «Бетацинола» в эти периоды способствовало снижению А/Г коэффициента, за счет стимуляции синтеза глобулинов.

Кроме того, у лактирующих свиноматок, получавших «Бетацинол» отмечено большее содержание общего белка и альбуминов, что было на 15,90% и 10,60% выше, чем у животных контрольной группы, отражая улучшение белоксинтетической функции печени.

  В сыворотке крови 1- и 60-суточных поросят всех опытных групп содержание общего белка было практически одинаковым и соответствовало физиологическим нормам.

Установлена тенденция увеличения концентрации гамма-глобулинов во второй и третьей опытных группах на 41,15 и 36,70% у 1-суточных и на 7,89 и 15,11% у 60-суточных поросят по сравнению с контрольной группой. Это может свидетельствовать об усилении неспецифической резистентности организма и более высокой адаптационной способности молодняка.

3.2.3. Оценка интенсивности процессов ПОЛ и состояния антиоксидантной системы у свиней в разные физиологические периоды

  Включение в рацион  свиноматок воднодиспергированых форм микробиологического бета-каротина привело к ингибированию процессов перекисного окисления липидов. Так, концентрация малонового диальдгида в крови супоросных свиноматок второй опытной группы снизилась на 20,02% по сравнению с первой группой, хотя это снижение не было статистически достоверным. В то же время, по содержанию МДА в третьей и первой группах не было существенных различий.

В подсосный период нами было отмечено снижение содержания малонового диальдегида в сыворотке крови свиноматок второй опытной группы на 57,25% (Р<0,01), а в группе, где животные получали «Бетавитон» - на 50,13% (Р<0,01) по сравнению с контрольной группой, что свидетельствует о повышении антиоксидантной системы организма, приводящее к снижению токсичных продуктов перекисного окисления липидов и восстановлению функций мембраны клеток. Выявлена взаимосвязь между уровнем МДА в крови супоросных свиноматок и их обеспеченностью витамином А (r = – 0,43)  (которую определяли по содержанию ретинола в печени новорожденных поросят), что доказывает антиоксидантные свойства ретинола.

Существенных различий по активности глутатионредуктазы между всеми группами свиноматок в конце супоросности не установлено. Однако в подсосный период, во второй и третьей опытных группах мы наблюдали снижение ГР на 41,58% (Р>0,05) и 48,32%(Р<0,05) соответственно, по сравнению с аналогами из первой группы. Очевидно, что вводимые в корма воднодиспергированные формы -каротина сократили количество свободных радикалов, в результате этого и произошло снижение активности фермента.

  В организме у новорожденных поросят второй и третьей опытных  групп содержание МДА было на 40,43% (Р>0,05) и 49,69% (Р<0,01) соответственно меньше в сравнении с аналогами из контрольной группы. Тенденция к снижению этого показателя сохранилась и в 60-суточном возрасте. Можно предположить, что накопление МДА в крови поросят контрольной группы свидетельствует об активации процессов перекисного окисления липидов. Установлена отрицательная корреляционная зависимость(r=-0,52) между уровнем МДА и содержанием витамина А в печени у 1-суточных поросят, что связано с антиоксидантными свойствами ретинола. 

  Определение активности супероксиддисмутазы (СОД) в раннем онтогенезе показало, что у 1-суточных поросят  второй и третьей опытных групп, которые пренатально получали исследуемые формы -каротина, она снизилась в сравнении с контролем на 65,58%(Р<0,05) и 53,13% (Р<0,05) соответственно. Тенденция снижения активности СОД у поросят получавших «Бетацинол» и «Бетавитон» сохранилась и у 60-суточного молодняка.  Как видно из представленных на рис.3 данных наиболее высокая активность супероксиддисмутазы наблюдалась в первые сутки после рождения, что обусловлено повышенной генерацией супероксид-анион радикала  в условиях резко возрастающей обеспеченности организма новорожденных кислородом, что согласуется  с  данными,  полученными И.Г. Харитоновой (1991), R. Robles  et.al.( 2001), М.И. Рецким и др. (2004). Резкое возрастание ПОЛ в стрессовых ситуациях мобилизует антиоксидантную систему новорожденного организма, направленную на ингибирование свободных радикалов, с чем связано увеличение СОД в этом возрасте. У поросят 60-суточного возраста активность этого фермента снижалась.

Рис.3 Активность супероксиддисмутазы в печени поросят

(ед.акт. / мг белка10-2)

Активность глутатионредуктазы у новорожденных поросят второй и третьей опытных групп снизилась в сравнении с контролем на 36,42% (Р>0,05) и 49,70 (Р>0,05)% соответственно. Пониженную активность глутатионредуктазы в этих же группах в сравнении со сверстниками  из контрольной группы  мы регистрировали  и в 60-суточном возрасте, при этом с возрастом активность этого фермента уменьшалась (рис.4).

Высокая активность ГР у новорожденных животных была установлена также  М.И. Рецким и др. (2005). Возможно, повышение уровня свободнорадикальных процессов активизирует антиоксидантную систему организма. Именно с этим и связано увеличение активности ГР у новорожденных  и снижение у 60-суточных поросят. 

Установлена взаимосвязь между активностью глутатионредуктазы и содержанием витамина А в печени  как у 1-суточного, так и 60-суточного молодняка (r = – 0,53 и – 0,51 соответственно), что может быть связано со способностью ретинола перехватывать свободные радикалы, включаясь в цепь неферментативных реакций антирадикальной системы организма.

 

  Рис.4. Активность глутатионредуктазы в печени поросят

(мкмоль/г белка 10-2)

  Введение в корма свиноматок воднодиспергированных форм -ка-ротина  вызвало изменение активности каталазы  у новорожденных поросят. У молодняка второй и третьей опытных групп установлена пониженная, в сравнении с контролем, активность этого фермента, что  вероятно связано со снижением количества свободных радикалов (рис. 5).

Рис.5  Активность каталазы в печени 1-суточных поросят

(мкмоль Н2О2с мг белка10-2)

Таким образом, на основании полученных результатов можно сделать вывод о том, что каротинсодержащие воднодисперсионные формы «Бетацинол» и «Бетавитон» способствуют коррекции общего окислительного стресса  как у свиноматок, так и у полученных от них поросят за счет влияние бета-каротина как фактора неферментного происхождения.

3.2.3. Минеральный состав тканей поросят

  Использование в рационах свиноматок, а также полученных от них поросят воднодисперсионных форм микробиологического бета-каротина способствовало повышению содержания цинка в печени у 1-суточных поросят, получавших «Бетацинол» и «Бетавитон» на 10,71% (Р<0,05) и 10,61% (Р<0,05) соответственно по сравнению с контролем. Аналогичная тенденция по накоплению цинка наблюдались у молодняка и в 60-суточном возрасте.

  Содержание меди в печени увеличилось у новорожденных животных, получавших «Бетацинол» и «Бетавитон» и у 60-суточных поросят третьей опытной группы.

  В костной ткани у 1-суточных поросят второй и третьей опытных групп отмечен более высокий уровень кальция, что было на 20,93% и 9,66% выше по сравнению с контролем. Выявленная тенденция по накоплению этого макроэлемента сохранилась и у 60-суточного молодняка.

  Содержание фосфора в костной ткани новорожденных поросят во всех опытных группах было одинаковым. В то время как у двухмесячных животных контрольной группы уровень фосфора был выше по сравнению со второй и третьей опытными группами на 6,92% и 7,10% соответственно.

Таким образом, отношение Са/Р  в костях было более высоким в группах, где животные получали «Бетацинол» и «Бетавитон» как в 1-, так и в 60-суточном возрасте, что соответствует большей зрелости минеральной фазы.

Кроме того, включение в основной рацион свиней воднодисперсионных форм микробиологического бета-каротина отразилось на содержании многих микроэлементов в костной ткани поросят: увеличилось депонирование цинка, меди, железа и марганца.

3.2.4. Возрастные особенности морфометрических показателей и механико-прочностных свойств костей поросят

  В результате проведенных исследований, установлено, что масса большеберцовой кости у новорожденных поросят третьей опытной группы была выше на 10,74% по сравнению с контрольными животными. Однако у 1-суточных поросят первой и второй опытных групп по этому показателю не было выявлено существенных межгрупповых различий.

  В подсосный период у животных масса большеберцовой кости была выше во второй и третьей опытных группах на 3,82% и 8,46% соответственно по сравнению с аналогами из первой группы.

  Длина большеберцовой кости у новорожденных поросят всех опытных групп практически не отличалась, однако у двухмесячных животных, наиболее интенсивный рост кости был отмечен в группах, где свиньи получали «Бетацинол» и «Бетавитон»

Индекс абсолютной массивности, определяемый как отношение массы кости к ее длине, у 1-суточных поросят 2-й и 3-й групп был на 4,65% и 11,63% выше по сравнению с контролем. Аналогичная тенденция сохранилась и у двухмесячных поросят.

  Индекс грациальности, характеризующий изящность контуров диафиза большеберцовой кости, у новорожденных животных всех опытных групп существенных различий не имел. У двухмесячных животных грациальность находилась в зависимости от применяемых добавок: в группах, где молодняк получал «Бетацинол» и «Бетавитон», она повысилась на 10,08% и 9,24% соответственно по сравнению с контрольными животными. 

  Указанные изменения вызвали изменение предельной прочности кости на изгиб, более высокие значения которой были выявлены у животных, получавших препараты -каротина хотя, момент инерции у 1-и 60-суточных поросят был одинаковым во всех опытных группах (табл.6).

6. Механические свойства большеберцовой кости (M±m, n=3)

Физиологическое

Состояние

1 группа

(контроль)

2 опытная

группа

3 опытная

группа

Предел прочности кости на изгиб (ППИ), кг/см2

1-суточные поросята

747,04±118,15

878,15±57,379

790,00±124,23

60-суточные поросята

1102,20±104,75

1263,32±143,64

1394,38±389,47

Момент инерции, см4 103

1-суточные поросята

3,42±0,14

3,40±0,13

3,42±0,14

60-суточные поросята

3,73±0,23

3,60±0,32

3,76±0,06

Установленная положительная корреляционная зависимость между прочностью большеберцовой кости и уровнем ретинола в печени 1-и 60-суточных поросят (r=0,71;Р<0,05 и r=0,46;Р>0,05), свидетельствует о взаимосвязи этих показателей.

3.2.5. А-витаминный статус поросят

  В результате проведенных исследований нами установлено, что в печени 1суточных поросят контрольной группы содержалось 3,59 мкг витамина А в 1 г сырой ткани, а у животных второй и третьей опытных групп концентрация витамина составляла 6,92 (Р<0,05) и 6,12 (Р>0,05) мкг/г ткани, что соответствовало физиологической норме (рис.6).

  В дальнейшем  по мере роста поросят запасы витамина А в печени  увеличились. Так в печени 60-суточных поросят первой опытной группы его содержание составило 24,86 мкг/г ткани. В тоже время во второй опытной группы его количество составило 30,54 мкг/г ткани, а в третьей опытной группе – 33,87 мкг/г ткани, что было на 22,84% (Р>0,05) и 36,24% (Р<0,05) соответственно выше, чем у поросят первой группы.

  Таким образом, проведенными исследованиями было установлено наибольшее накопление ретинола в печени поросят, полученных от свиноматок, которым скармливали воднодисперсионные формы микробиологического бета-каротина.

Рис. 6 Содержание витамина А в печени поросят (мкг/г ткани)

  Мы предполагаем, что это связано с витаминной обеспеченностью маток, так как известна положительная корреляция между количеством витамина А в организме свиноматок и запасами его в печени новорожденных и двухнедельных поросят (А. Хенниг, 1976; А.А. Душейко, 1989). 

Низкое содержание ретинола у поросят контрольной группы характеризует недостаточное поступление витамина с молозивом и молоком и отражает плохую обеспеченность свиноматок этой группы ретинолом.

3.2.6. Показатели воспроизводительной способности

свиноматок и роста поросят

  Применение в рационах супоросных и лактирующих свиноматок воднодиспергированного -каротина микробиологического синтеза привело к тому, что животные были лучше подготовлены к опоросу, что выразилось в увеличении крупноплодности на 12,59% (Р<0,001) и 13,38% (Р<0,001) и повышением многоплодия на 12,69% и 22,62% у маток второй и третьей опытных групп соответственно, по сравнению с контрольной группой (табл.7).

7. Воспроизводительные показатели свиноматок, рост поросят

(M±m, n=10)

Показатели

1 группа

(контроль)

2 опытная

Группа

3 опытная

Группа

Количество поросят, гол.:

всего

в т.ч. живых (многоплодие)

9,66±0,85

9,06±0,76

10,28±0,54

10,21±0,54

11,33±0,72

11,11±0,63

Живая масса поросят при рождении, кг

1,27±0,02

1,46±0,03**

1,39±0,03**

Живая масса гнезда при рождении, кг

11,39±0,95

15,02±0,70*

15,94±0,93*

Живая масса поросят на 40 сут., кг

7,92±0,21

8,74±0,24**

9,60±0,29**

Сохранность к отъему, %

86,36

90,90

88,63

*Р<0,05 в сравнении с контрольной группой

**Р<0,01 в сравнении с контрольной группой

  У 1-суточных поросят средняя живая масса в первой, второй и третьей опытных группах составляла 1,27; 1,46 и 1,39 кг соответственно. Таким образом, установлено достоверное  повышение средней массы суточных поросят на 14,96%  - во второй и на 9,44%  - в третьей опытных группах по сравнению с контрольными животными.

Полученные нами данные свидетельствуют о том, что, родившись более крупными, поросята лучше развивались и в подсосный период. Так, в первой опытной группе средняя живая масса поросят к 40-суточному возрасту была 7,92 кг, а у молодняка второй и третьей опытных групп составляла 8,74 и 9,60 кг, что было на 10,35% (Р<0,01) и 21,21% (Р<0,01) больше, чем в первой. 

3.3. Свободно-радикальные процессы, ретенция минеральных

элементов у свиней при применении бета-каротина из порошкообразных препаратов «Бета рост» и «Бета рост с липидами»

3.3.1. Интенсивность процессов перекисного окисления липидов и активность антиоксидантной системы защиты у поросят

В результате проведенных исследований установлено, что новорожденные животные, полученные от свиноматок, которым скармливали «Бета-рост» и «Бета-рост с липидами», были менее уязвимы к оксидативному повреждению печени, что подтверждается снижением в ней уровня малонового диальдегида по сравнению с контрольной группой. Так, в организме 1-суточных поросят второй и третьей опытных групп уровень МДА был на 6,5% и 17,88% соответственно меньше в сравнении с аналогами из контрольной группы. В 60-суточном возрасте существенных различий по содержанию малонового диальдегида у поросят всех опытных групп установлено не было.

  Определение активности супероксиддисмутазы показало, что у 1-суточных поросят  второй опытной группы она повысилась в сравнении с контролем на 25,97% (табл. 8).

8. Активность СОД, каталазы и ГР в ткани печени поросят (M±m, n=3)

Физиологическое

Состояние

1 группа

(контроль)

2 опытная

группа

3 опытная

группа

Супероксиддисмутаза (СОД), ед.ак./мг белка10-2

1-суточные поросята

126,45±13,03

159,29±26,53

125,70±32,38

60-суточные поросята

103,77±7,81

141,61±17,80

158,86±12,24*

Каталаза, мкмоль Н2О2 /лс мг белка10-2

1-суточные поросята

12,37±2,62

15,38±0,96

17,00±2,59

60-суточные поросята

14,64±0,48

14,93±1,12

15,16±0,68

Глутатионредуктаза мкмоль/г белка 10-2

1-суточные поросята

19,38±1,67

20,83±1,12

21,79±4,03

60-суточные поросята

12,47±2,05

18,36±3,24

19,81±4,41

Эта же направленность изменения активности фермента сохранилась и у 60-суточных поросят второй и третьей опытных групп.

Введение в рационы свиней порошкообразных форм бета-каротина изменило активность каталазы. Так, у молодняка второй и третьей опытных групп установлена повышенная, в сравнении с контролем активность этого фермента в 1-суточном возрасте. У двухмесячных животных существенных различий по активности каталазы между всеми опытными группами установлено не было.

  Активность глутатионредуктазы у новорожденных поросят второй и третьей опытных групп увеличилась в сравнении с контролем на 7,48% и 12,43% соответственно. Более высокую активность глутатионредуктазы в этих же группах в сравнении со сверстниками из контрольной группы  мы регистрировали и в 60-суточном возрасте, при этом с возрастом активность этого фермента уменьшалась (табл. 8).

  Таким образом, в наших исследованиях было установлено, что у поросят контрольной группы наблюдалось усиление процессов перекисного окисления липидов, о чем свидетельствует повышенное содержание в гомогенатах печени продуктов свободнорадикального окисления.

  Использование каротинсодержащих порошкообразных форм бета-каротина «Бета-рост» и «Бета-рост с липидами» в рационах свиноматок, а также полученных от них поросят привело к снижению уровня МДА на фоне повышения активности супероксиддисмутазы, каталазы и глутатиоредуктазы в гомогенатах печени  молодняка, как в 1-, так и в 60-суточном возрасте, что в целом, отражает активацию ферментативного звена АОС.

3.3.2 Распределение минеральных элементов в тканях свиней

в период постнатальной адаптации

Применение порошкообразных форм бета-каротина «Бета-рост» и «Бета-рост с липидами» повысило содержание кальция и фосфора в сыворотке крови 1-суточных поросят второй и третьей опытных групп соответственно Ca - на 38,63 и 12,75%, а P - на 42,62 и 9,01% по сравнению с животными из контрольной группы. Выявленная тенденция сохранилась и в 60-суточном возрасте. Низкое соотношение концентрации в сыворотке крови общего кальция и неорганического фосфора у животных контрольной группы свидетельствует о нарушении фосфорно-кальциевого обмена, которое с возрастом усиливается.

  Обнаружена тенденция повышения в сыворотке крови у 1-суточных поросят второй и третьей опытных цинка на 40,03 и 19,27%, меди на 10,39 и 43,79% соответственно в сравнении с аналогами из контрольной группы. Сходная картина по содержанию этих микроэлементов была выявлена и у 60-суточных животных.

  У новорожденных поросят, получавших «Бета-рост» в сыворотке крови повысилось содержание йода на 17,64%, в группе, где поросятам скармливали «Бета-рост с липидами» концентрация йода увеличилась на 14,70%, железа на 12,10% относительно уровня у молодняка из контрольной группы. К отъему,  различий  по уровню этих микроэлементов в крови установлено не было.

  Установлено повышение содержания Zn на 5,6% (P>0,05) и 18,47%(P<0,05),Cu–на 6,75(P>0,05) и 10,38%(P>0,05),Со– на 14,00(P>0,05) и 23,65(P<0,05), Мо – на 10,00(P>0,05) и 12,62%(P>0,05) в тканях печени у 1- и 60-суточных поросят третьей опытной группы, получавших  «Бета-рост с липидами» относительно контрольной группы.

  Применение «Бета-роста» оказало менее существенное влияния на депонирование макро- и микроэлементов в печени. Так, у 60-суточных животных второй опытной группы выявлено повышение содержание меди на 10,38%(P<0,01), кобальта на 7,52% (P>0,05) и молибдена 10,00%(P>0,05) соответственно в сравнении с аналогами из первой группы.

  В ходе проведенного корреляционного анализа установлена взаимосвязь между активностью СОД и количеством меди и цинка в ткани печени. Так, уровень меди в печени у 1-и 60-суточных поросят тесно коррелировал с активностью супероксиддисмутазы (r=0,75;Р<0,05 и r=0,67; Р<0,05 соответственно). Сходная корреляционная зависимость была выявлена также между содержанием цинка и активностью СОД у новорожденных и подсосных животных (r=0,72; Р<0,05 и r=0,76; Р<0,05). Очевидно, что применяемые порошкообразные формы бета-каротина за счет изменения концентрации цинка и меди, то есть за счет активации СОД, влияют на интенсивность реакций ПОЛ.

  Результаты исследования костной ткани свидетельствуют, что у 1- и 60-суточных поросят выявлена слабо выраженная тенденция повышения уровня кальция и фосфора у животных второй и третьей опытных групп полученных от маток которым скармливали  «Бета-рост» и «Бета-рост с липидами». Также в костной ткани у поросят второй и третьей опытных групп выявлено повышение содержания кобальта и снижение уровня молибдена по сравнению с аналогами из контрольной группы.

3.3.3. Изменение морфофункциональных характеристик

костной ткани у поросят

  Анализируя изменения линейных промеров костей, нами установлено, что у 1-и 60-суточных поросят, полученных от маток которым вводили в корм порошкообразные формы бета-каротина, наблюдалось увеличение абсолютной массы большеберцовой кости, а у новорожденных животных еще и её длины.

Индекс абсолютной массивности большеберцовой кости у 1-суточных поросят второй и третьей опытных групп был на 17,5 и 7,9% выше по сравнению с контролем. Аналогичная тенденция сохранилась и у двухмесячных животных.

Изменение индекса грациальности большеберцовой кости у новорожденных поросят также находилось в зависимости от применяемых добавок. Так, у животных, полученных от свиноматок которым вводили в рационы «Бета-рост» и «Бета-рост с липидами», он повысилась на 5,1 и 9,8% соответственно по сравнению с аналогами из контрольной группы. У двухмесячных поросят по индексу грациальности существенной разницы между группами зарегистрировано не было.

  Функциональное состояние костной ткани определяется её прочностью, опороспособностью. Проведенные нами исследования показали, что в постнатальном онтогенезе поросят наблюдается повышение предельной прочности  большеберцовой кости на изгиб, причем наиболее существенно в группах, где животные получали каротинсодержащие порошкообразные формы «Бета-рост» и «Бета-рост с липидами» (табл.9). 

9. Механические свойства большеберцовой кости (M±m, n=3)

Показатели

Возраст, группы

1 сутки

60 суток

Группы

1

2

3

1

2

3

ППИ, кг/см2

575±79

672±3

949±238

919±88

1120±108

1243±134

Момент инерции,

См4 103

4,5±0,2

3,5±0,1

4,6±0,1

3,46±5,0

4,18±4,5

2,9±1,6

*Р<0,05 в сравнении с контрольной группой

  Таким образом, в результате проведенного исследования следует отметить положительное влияние порошкообразных форм бета-каротина на прочность костей, что при одновременном росте их массивности можно рассматривать как фактор, повышающий надежность и крепость костяка.

3.3.4 Обеспеченность организма поросят витамином А

В результате проведенных исследований нами установлено, что в печени 60-суточных животных контрольной группы содержалось 22,00 мкг витамина А в 1г сырой ткани, а у поросят второй и третьей опытных групп концентрация витамина составляла 28,22 и 27,60мкг/г ткани, что было на 28,27 и 25,45% выше (рис.7).

 

Рис. 7 Уровень ретинола в печени поросят

  Полученные данные позволяют заключить,  что порошкообразные формы бета-каротина оказывают положительное влияние на накопление ретинола в печени у молодняка свиней.

3.3.5. Репродуктивные качества свиноматок, рост поросят

  Средняя живая масса поросят при рождении в первой и во второй опытных группах была практически одинаковой, а к двухмесячному возрасту в группе, где животные получали «Бета-рост» этот показатель был выше на 18,3% по сравнению с контролем. Таким образом к отъему во второй опытной группе общая масса гнезда была выше на 27,8% (Р<0,01) по сравнению с контрольной группой .

  Поросята, полученные от свиноматок, которым скармливали «Бета рост с липидами», имели более низкую массу при рождении по сравнению с аналогами из контроля, что вероятно связано с большим количеством поросят в гнезде (табл.10). Но под влиянием применяемой каротинсодержащей добавки поросята лучше развивались в подсосный период – в итоге общая масса гнезда к отъему составила 119,4кг, что было значительно выше чем в контроле.

  10.  Репродуктивные качества свиноматок, рост поросят (M±m, n=10)

Показатели

1 группа

(контроль)

2 опытная

группа

3 опытная

Группа

Количество поросят, гол.:

всего

в т.ч. живых (многоплодие)

10,70±0,48

9,60±0,43

10,30±0,38

9,9±0,31

11,90±0,31

11,00±0,27

Крупноплодность, кг

1,55±0,71

1,56±0,04

1,43±0,15

Живая масса гнезда при рождении, кг

14,8±0,7

15,4±0,3

15,7±0,7

Живая масса поросят на 60 сут., кг

10,15±0,40

12,01±0,17

11,83±0,43

Живая масса гнезда при отъеме, кг

84,6±4,3

108,1±2,8**

119,4±4,7**

Сохранность при отъеме, %

86,77

91,00

91,73

**Р<0,01 в сравнении с контрольной группой

Эффективность применения порошкообразных форм бета-каротина подтвердилась более высокой сохранностью поросят с момента рождения и до 1,5 месячного возраста.

  1. ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Высокая скорость окислительного и энергетического метаболизма, свойственная животным в критические периоды онтогенеза: поздний предродовой и ранний послеродовой периоды у свиноматок, а также после рождения и отъема от матерей у поросят, сопровождается образованием большого количества активных форм кислорода, вызывая напряжение, а в ряде случаев  - истощение механизмов антиоксидантной защиты. Поэтому для обеспечения высокой продуктивности при интенсивном выращивании свиней необходимо, прежде всего, повысить их устойчивость к различным стресс факторам.

  Полученный в результате проведенных исследований экспериментальный материал свидетельствует о том, что более низкая обеспеченность организма ретинолом, бета-каротином и биофлавоноидами является одной из причин возникновения сдвига тканевого баланса в системе антиоксидантов и прооксидантов в сторону последних, что проявляется увеличением перекисного окисления липидов. Применение различных форм бета-каротина, воднодиспергированного витамина А и его комбинации с биофлавоноидами позволило снизить интенсивность процессов перекисного окисления липидов за счет активации ферментного звена антиоксидантной системы, что, однако, не исключает влияние бета-каротина и биофлавоноидов как факторов неферментного происхождения.

  Анализ воздействия воднодиспергированных форм витамина А, бета-каротина, комбинации витамина А с биофлавоноидами, а также порошкообразных форм бета-каротина на уровень макро- и микроэлементов в крови, печени, мышечной и костной тканях показал возможность их использования в качестве регуляторов уровня биоэлементов в организме. Установлено, что при более низкой обеспеченности животных ретинолом и каротином происходит снижение накопления кальция, фосфора, а также микроэлементов - цинка, меди, железа, селена, входящих в активные центры ферментов, что, видимо, является причиной депрессии антиоксидантной системы защиты организма.

Выявленные закономерности служат теоретическим обоснованием для разработки практических приемов регуляции уровня свободно-радикальных реакций, в пределах биологических возможностей организма свиней, что имеет важное практическое значение, открывающее перспективы управления процессами адаптации и повышения резистентности животных, стимулирования роста, развития и повышения продуктивности.

  В ходе проведенных экспериментов показана взаимосвязь изменения линейных промеров, массивности и прочности костей конечностей у поросят в зависимости от применяемых форм добавок, что доказывает роль ретинола и каротина в формировании надежности костяка.

  Поэтому использование новых воднодиспергированных форм витамина А и его комбинации с биофлавоноидами, а также бета-каротина из препаратов «Бетацинол», «Бетавитон», «Бета-рост» и «Бета-рост с липидами» для балансирования А-витаминного питания может явиться серьезным инструментом в снижении  отрицательного действия на организм животного факторов окружающей среды и стресса, что необходимо для реализации большинства жизненно важных функций организма.

       

5. ВЫВОДЫ

1. Использование в критические периоды онтогенеза в питании свиней воднодиспергированных форм витамина А, бета-каротина, комбинации витамина А с биофлавоноидами, а также порошкообразных форм бета-каротина стабилизирует морфо-биохимический статус, течение обменных процессов в организме свиноматок и полученных от них поросят, за счет оптимизации: соотношения интенсивности свободнорадикального окисления и антиоксидантного потенциала, гомеостаза минеральных веществ и А-витаминного питания, что необходимо для реализации большинства функций организма.

  2. Недостаточная обеспеченность организма ретинолом и бета-каротином является одной из причин возникновения сдвига тканевого баланса в системе антиоксидантов и прооксидантов в сторону последних, что проявляется усилением свободно-радикальных процессов. В экспериментальных условиях доказано, что изучаемые формы витамина А и бета-каротина в применяемых дозах в условиях современной технологии свиноводства проявляют себя как эффективные антиоксиданты, приводящие к торможению процессов перекисного окисления липидов, которое выражается в снижении уровня малонового диальдегида: за счет воднодиспергированных форм витамина А и бета-каротина на 8,90-25,65% у свиноматок и 40,00-72,52% у полученных от них поросят, а при введении в корма порошкообраных каротинсодержащих добавок на 6,5-17,88% у молодняка свиней.

  В группах,  получавших «Витамин А», «Витамин А с гепатопротектором» и «Бетацинол» выявлена взаимосвязь между содержанием МДА в крови супоросных свиноматок и  их  обеспеченностью витамином А

(r=-0,45), а также между содержанием ретинола в печени 1- и 40-суточных поросят и уровнем МДА (r=-0,88; Р<0,05 и r=-0,67; Р<0,05 соответственно); при использовании воднодиспергированых форм, содержащих микробиологический бета-каротин «Бетацинол» и «Бетавитон» установлена сопряженность между уровнем МДА в крови супоросных животных и их обеспеченностью витамином А (r =- 0,43), а также между уровнем МДА и содержанием витамина А в печени у новорожденных животных (r =-0,52), что подтверждает антиоксидантные свойства ретинола.

3. Снижение интенсивности реакций перекисного окисления липидов в группах, где животные дополнительно к основному рациону получали витамин А содержащие добавки, происходило путем активации ферментативного звена антиоксидантной системы защиты , что однако не исключает влияние  биофлавоноидов как фактора неферментного происхождения в составе «Витамина А с гепатопротектором».

3.1. Применение воднодиспергированных форм ретинола: «Витамина А» и «Витамина А с гепатопротектором» стимулировало у свиноматок и полученных от них поросят активность: супероксиддисмутазы на 25,36 -70,13% и 28,63-56,79%; каталазы на 5,13-89,53% и 67,25-97,75%; церулоплазмина на 13,88-89,53% и 11,64-34,67%; глутатионредуктазы на 12,50-20,00% и 3,96-39,39% соответственно по сравнению с аналогами из контрольной группы.

4. Включение в рационы животных каротинсодержащих добавок способствовало оптимизации функционирования антиоксидантной системы защиты.

4.1. Введение в корма животных порошкообразных форм бета-каротина «Бета-рост» и «Бета-рост с липидами» позволило снизить интенсивность реакций перекисного окисления липидов за счет активации ферментативного звена антиоксидантной системы защиты: у поросят установлено увеличение активности СОД на 25,97-53,08%, каталазы на 3,55-37,43%, глутатионредуктазы на 7,48-58,86% соответственно.

4.2. Воднодиспергированный «Бетацинол» содержащий импортный бета-каротин повысил активность церулоплазмина на 8,41-52,77% и 20,51-47,73% у свиноматок и поросят; каталазы на 82,33% у супоросных  маток и 73,68-101,12% у молодняка.  На активность супероксиддисмутазы , глутатионредуктазы «Бетацинол» влияния не оказал.

4.3. Воднодисперсионные формы микробиологического бета-каротина способствовали коррекции окислительного стресса, о чем свидетельствует снижение уровня МДА у свиноматок и у полученных от них поросят на 20…61,31% относительно контрольной группы за счет влияния бета-каротина как фактора неферментного происхождения.

5. У свиноматок, а также у полученных от них поросят установлена сопряженность изменений в системе антиоксидантной защиты и сдвигов в элементном статусе организма, а также взаимосвязь между уровнем содержания цинка, меди, селена и железа в крови, печени поросят и обеспеченностью животных ретинолом. 

6. Установлена взаимосвязь изменения линейных промеров, индексов макроморфометрии, прочности и минерализации костей скелета от витаминной обеспеченностью животных ретинолом и каротином, положительное влияние применяемых воднодиспергированных и порошкообразных форм витамина А и бета-каротина на прочность костей, что при одновременном росте их массивности можно рассматривать как фактор, повышающий надежность и крепость костяка в целом.

7. Введение в рацион свиноматок в последнюю треть супоросности и подсосный период  витамина А и бета-каротина способствует повышению их репродуктивной функции и улучшению внутриутробного развития плодов, о чем свидетельствует увеличение многоплодия на 3,12…22,62% и снижение случаев мертворождения, а также повышение сохранности, роста и развития поросят.

6. ПРЕДЛОЖЕНИЯ ПРОИЗВОДСТВУ

  В целях предупреждения А-авитаминозов, нарушений минерального обмена, а также для повышения интенсивности роста и сохранности поросят, рекомендуем использовать в качестве адаптогенного и антиоксидантного средства:

- «Витамин А» или «Витамин А с гепатопротектором» 10-дневными циклами с интервалами в 10 суток из расчета: «Витамин А», «Витамин А с гепатопротектором»  - 0,3 мл на животное в последнюю треть супоросности, 0,55 мл – подсосным свиноматкам на животное в сутки (перорально)

- «Бетацинол» или «Бетавитон» 10 дневными курсами с таким же перерывом из расчета на голову в сутки: свиноматкам -  2 мл за 30 дней до опороса, 3 мл  - в период лактации и 0,5 мл поросятам-отъемышам (перорально)

- «Бета-рост» из расчета: 1,3 г на животное в последнюю треть супоросности, 1,9г подсосным свиноматкам и по 0,31 г на голову для поросят в период отъема в составе комбикормов. «Бета-рост с липидами» из расчета: 5; 7,6; 1,2 г на животное соответственно. 

  Полученные новые теоретические и экспериментальные данные по взаимосвязям между системой антиоксидантной защиты, развитием процессов перекисного окисления липидов, динамикой уровня минеральных веществ и содержанием витамина А в организме, а также материалы по метаболизму бета-каротина у свиней целесообразно использовать в лекционных курсах по биохимии и физиологии  животных в высших учебных заведениях.

Список опубликованных работ по теме диссертации

Публикации в журналах из списка ВАК:

1. Любина Е.Н. Влияние препаратов -каротина на иммунологические показатели организма свиней/ Е.Н. Любина // Ветеринарный врач. – Казань, 2007, №2. – С.29-32

2. Любина Е.Н. Динамика показателей липидного обмена поросят при применении препаратов -каротина / Е.Н. Любина  // Материалы международной научно-практической конференции посвященной 135-летию академии «Современные подходы к развитию АПК» Ученые записки КГАВМ им.Баумана. – Казань, 2008 -том.192. - С.337-340

3. Любина Е.Н. Свободнорадикальное окисление липидов, активность антиоксидантной системы защиты у свиней в зависимости от обеспеченности их организма витамином А / Е.Н. Любина  // Ветеринарный врач. – Казань, 2008, №2.-  С.28-31

4. Любина Е.Н. Взаимосвязь между перекисным окислением и активностью антиоксидантной системы в условиях различной обеспеченности организма поросят витамином А / Е.Н. Любина // Ученые записки КГАВМ им И.Э. Баумана -Казань, 2008.- том 191. – С.162-168

5. Любина Е.Н. Морфобиохимические показатели крови свиноматок в связи с физиологическим состоянием на фоне применения препаратов витамина  А и бета-каротина / Е.Н. Любина // Ученые записки КГАВМ им. И.Э. Баумана.том 197. - Казань, 2009,  - С.–263-269

6. Любина Е.Н. Изменение физиологических показателей организма поросят в послеотъемный период под влиянием препаратов витамина А и бета-каротина / Е.Н. Любина //  Ученые записки КГАВМ им. И.Э. Баумана. том 204. - Казань, 2010,  - С.–140-148

7. Любина Е.Н.  Изменение морфофункциональных характеристик костной ткани поросят при использовании в их рационах препаратов витамина А и бета-каротина / Е.Н. Любина // Вестник Ульяновской ГСХА, 2011, №3 (15). – с.54-61

8. Любина Е.Н. Эффективность использования новых форм препаратов витамина А и бета каротина в рационах моногастричных животных /Е.Н. Любина // Ученые записки КГАВМ им. И.Э. Баумана. том 205. - Казань, 2011,  - С.–130-135

9.Любина Е.Н. Минерализация и биомеханические свойства костной ткани у поросят при использовании воднодисперсных добавок витамина А и бета-каротина / Е.Н. Любина, Б.Д. Кальницкий // Проблемы биологии продуктивных животных, 2011, №4. – с. 22-27

10.Любина Е.Н. Изменение морфофункциональных характеристик костной ткани у поросят при использовании каротинсодержащих кормовых добавок / Е.Н. Любина // Проблемы биологии продуктивных животных, 2011, №4. – с. 27-33

11.Любина Е.Н. Определение химического элементного состава волосяного покрова свиноматок в связи с физиологическим состоянием и обеспеченностью организма каротином и витамином А / Е.Н. Любина // Вестник Ульяновской ГСХА, 2011, №2 (14). – с.46-52

12.Любина Е.Н. Изменение морфофункциональных характеристик костной ткани поросят при использовании в их рационах препаратов витамина А и бета-каротина /Е.Н. Любина //  Вестник Ульяновской ГСХА, 2012, №1. – с. 59-64

13. Любина Е.Н. Перекисное окисление липидов и система антиоксидантной защиты у свиноматок при использовании новых воднодисперигированных препаратов витамина А и бета-каротина / Е.Н. Любина, В.А. Галочкин // Проблемы биологии продуктивных животных, 2012, №1. – с. 37-46 

Публикации в прочих изданиях:

1.Любина Е.Н.  Витаминно-комплексные препараты «Бетацинол» и «Бетавитон» как экологически перспективные источники витамина А / Е.Н. Любина // Сб. науч.трудов VII обл.науч.-прак. конф. «Естественные исследования в Симбирско-Ульяновском крае».- Ульяновск.- 2005.-с.212-217.

2.Любина Е.Н. Влияние препаратов «Бетацинол» и «Бетавитон» на динамику некоторых показателей белкового обмена у супоросных и лактирующих свиноматок / Е.Н. Любина, Е.М. Романова // Сб. матер.конф. « Актуальные проблемы физиологии, физического воспитания и спорта».- Ульяновск.- 2005.-с.94-98

3.Любина Е.Н. А-витаминная обеспеченность свиней при разном уровне -каротина в рационах / Е.Н. Любина, Е.М. Романова // Матер.междун.науч.-прак. конфер. «Молодежь и наука XXIвека».Часть I. – Ульяновск. -2006.- с.288-291.

4.Любина Е.Н. Оценка состояния ПОЛ-антиоксидантной системы у свиноматок под влиянием различных соединений -каротина / Е.Н. Любина, Е.М. Романова // Матер. междун. науч.-прак. конфер. «Молодежь и наука XXIвека».Часть I. – Ульяновск. -2006.- с.292-295.

5. Любина Е.Н. Свободнорадикальные процессы и их коррекция препаратами -каротина у свиноматок и полученных от них поросят /Е.Н. Любина // Бюллетень научных работ Белгородской ГСХА, выпуск 5.- Белгород, 2006. –С. 108-112.

6.Любина Е.Н. Использование водно-дисперсных витаминно-комплексных препаратов микробиологического -каротина в свиноводстве / Е.Н. Любина, И.И. Стеценко, Е.М.Романова // В книге «Научные разработки и научно-консультационные услуги Ульяновской ГСХА».-Ульяновск: УГСХА, 2006. – С.69-70

7. Любина Е.Н. Иммунологическая реактивность и биохимические показатели организма свиней при использовании препаратов -каротина / Е.Н. Любина, И.И. Стеценко, Н.А. Любин// Матер.IV Международ. Конференции посвященной 100-летию со дня рождения Н.А. Шманенкова «Актуальные проблемы биологии в животноводстве» часть 1.- Боровск , 2006. – С.90-92

8. Любина Е.Н. Оценка состояния процессов свободно-ради-кального окисления липидов и активности антиоксидантной системы защиты у поросят в результате применения препаратов «Бета-рост» и «Бета –рост с липидами»/ Е.Н. Любина // Материалы II открытой Всероссийской научно-практической конференции молодых ученых- часть 1.- Ульяновск: УГСХА, 2007. – С.90-92

9. Любина Е.Н. Минеральный состав сыворотки молодняка свиней разного возраста под влиянием препаратов -каротина / Е.Н. Любина // Материалы научных трудов ХIV международной научно-практической конференции по свиноводству.-Ульяновск,2007–С. 202-208

10. Любина Е.Н. Содержание макро и микроэлементов в организме поросят в связи с возрастом и применением биологически активных добавок «Бета-рост» и «Бета-рост с липидами»/ Е.Н. Любина // Материалы научных  трудов ХIV международной научно-практической конференции по свиноводству.- Ульяновск, 2007 – с.229-234

11.Любина Е.Н. Использование водно-дисперсных витаминно-комплексных препаратов микробиологического бета-каротина в свиноводстве / Е.Н. Любина, Н.А. Любин, И.И. Стеценко, Е.М. Романова// В книге «Научные разработки и научно-консультационные услуги Ульяновской ГСХА».-Ульяновск: УГСХА, 2007. – С.81-83

12. Любина Е.Н. Влияние добавок препаратов -каротина на содержание микроэлементов и окислительные процессы в тканях молодняка свиней / Е.Н. Любина // Материалы международной научно-практической конференции «Актуальные вопросы аграрной науки и образования». Т.2- Ульяновск, 2008. – С.86-89

13. Любина Е.Н. Влияние препарата «Бетацинол» на содержание макро и микроэлементов в организме поросят / Е.Н. Любина // Материалы международной научно-практической конференции посвященной памяти проф. Блинохвастова А.Ф.- Пенза,  2008. – С.464 – 465

14. Любина Е.Н. Влияние  добавок бета каротина на окислительные процессы в тканях молодняка свиней / Е.Н. Любина // Научные труды II съезда физиологов.- Кишинэу, Молдова, 2008. –С.290

15. Любина Е.Н. Изучение влияния препаратов бета каротина на минеральный состав печени и костной ткани / Е.Н. Любина // Материалы международной научно-практической конференции «Современные методы диагностики, профилактики и терапии заразных и незаразных болезней животных». - Ставрополь, 2009.  – С. 98-102

16. Любина Е.Н. Повышение биологического ресурса свиноматок крупной белой породы и полученных от них поросят на фоне применения новых витаминно-комплексных препаратов витамина А и бета-каротина / Е.Н. Любина // Материалы 12 регионального семинара «Актуальные проблемы физической и функциональной электроники» при поддержке программы «Поддержка молодых ученых». -Ульяновск: УГСХА, 2009. – С.128-131

17. Любина Е.Н. Показатели крови молодняка свиней при использовании в их рационах препаратов витамина А и бета каротина / Е.Н. Любина // Материалы международной научно-практической конференции «Современные проблемы интенсификации  производства свинины в странах СНГ».-Ульяновск: УГСХА, 2010. – С.168-172

18. Любина Е.Н. Продуктивные показатели свиноматок крупной белой поды при использовании в их рационах препаратов витамина А и бета каротина/ Е.Н. Любина // Материалы международной научно-практической конференции «Современные проблемы интенсификации производства свинины в странах СНГ». – Ульяновск, УГСХА, 2010. – С. 172-176

19. Любина Е.Н. Исследование влияния препаратов витамина А и бета каротина на состояние кальций-фосфорного обмена и механические показатели костной ткани / Е.Н. Любина // Мат.междун.научно-прак.конф. «Ветеринарная медицина XX века: инновации, опыт, проблемы и пути их решения», Ульяновск, 2011- том.2 – с.184-188

Список использованных сокращений

А/Г – альбумин глобулиновое соотношение

АОЗ – антиоксидантная защита

АОС – антиоксидантная система

ГР – глутатионредуктаза

ЛДГ – лактатдегидрогеназа

МДА – малоновый диальдегид

ПОЛ – перекисное окисление липидов

ППИ – предел прочности кости на изгиб

ЩФ – щелочная фосфатаза

Отпечатано в типографии ООО «Вега-МЦ»

г. Ульяновск, 9-й пр-д Инженерный, д.10

Подписано в печать…………2012г

Бумага писчая, печать оперативная, объем 2,0 п.л.

Тираж 100экз., заказ №________






© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.