WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

   Добро пожаловать!

ОГЛАВЛЕНИЕ ОГЛАВЛЕНИЕ.....................................................................................................................................................................2 Предисловие.......................................................................................................................................................................4 1. Введение.........................................................................................................................................................................5 2. Основы капиллярного электрофореза (КЭ)..................................................................................................................7 3. Эпектрофоретическое перемещение............................................................................................................................9 4. Электроосмотический поток (ЭОП).............................................................................................................................10 5. Уширение полос............................................................................................................................................................15 5.1. Потеря эффективности вследствие диффузии...................................................................................................15 5.2. Потеря эффективности в результате температурных эффектов.......................................................................17 5.3 Потеря эффективности в результате электрической дисперсии........................................................................19 5.4. Адсорбция на стенках............................................................................................................................................21 5.5. Перегрузка системы разделения..........................................................................................................................22 5.6. Наложение профилей потока................................................................................................................................23 5.7. Резюме....................................................................................................................................................................23 6. Аппаратура....................................................................................................................................................................24 6.1. Источники напряжения...........................................................................................................................................24 6.2. Капилляры..............................................................................................................................................................24 Характеристики капилляра...........................................................................................................................................26 Таблица 7...................................................................................................................................................................26 6.3. Ввод пробы.............................................................................................................................................................27 6.3.1. Ввод пробы давлением.......................................................................................................................................27 6.3.3. Электрокинетический ввод пробы..................................................................................................................29 Таблица. 10................................................................................................................................................................29 6.3.4. Делитель пробы...............................................................................................................................................30 6.3.5. Эффекты обогащения при вводе пробы (стэкинг)........................................................................................32 6.4. Термостатирование................................................................................................................................................34 6.5. Детектирование......................................................................................................................................................35 6.5.1. Уф-детектирование.........................................................................................................................................35 Методы концентрирования («стэкинг»-мвтоды) в КЭ..........................................................................................36 6.5.2. Фпуоресцентное детектирование...................................................................................................................39 6.5.3. Прочие методы детектирования.....................................................................................................................40 6.6. Количественный анализ........................................................................................................................................42 Методы детектирования в КЭ......................................................................................................................................42 Таблица 13.................................................................................................................................................................45 Зависимость времени прохождения пиками «окна» детектора от............................................................................45 Таблица 14.................................................................................................................................................................45 Таблица 16.................................................................................................................................................................47 7. Капиллярный зонный электрофорез (КЗЭ).................................................................................................................48 7.1. Влияние рН.............................................................................................................................................................49 7.2. Влияние концентрации буфера.............................................................................................................................51 7.3. Выбор буфера........................................................................................................................................................51 7.4. Области применения.............................................................................................................................................51 8. Непрямое Уф-детектирование в КЭ............................................................................................................................53 8.1. Непрямое Уф-детектирование анионов...............................................................................................................53 8.2. Непрямое Уф-детектирование катионов..............................................................................................................58 8.3. Сопоставление методов прямого и непрямого Уф-детектирования..................................................................64 9. Капиллярный зонный электрофорез (КЗЭ) белков....................................................................................................66 9.1. Оптимизация разделения в немодифицированных капиллярах........................................................................66 9.1.1. Значения рН.....................................................................................................................................................66 9.1.2. Добавление солей к буферу...........................................................................................................................67 9.1.3. Добавка органического модификатора к буферу..........................................................................................67 9.1.4. Применение буферных добавок для разделения белков.............................................................................67 (динамическое наполнение капилляров).................................................................................................................67 9.2. Использование капилляров с модифицированной поверхностью.....................................................................69 9.2.1. Типы покрытий поверхности в КЭ...................................................................................................................70 9.2.2. Изготовление химически модифицированных капилляров..........................................................................71 9.2.2.1. Предварительная обработка кварцевых капилляров............................................................................71 9.2.2.2. Методы покрытия......................................................................................................................................71 9.2.3. Характеристики заполненных капилляров в КЭ............................................................................................72 9.3. Обзор важнейших химических покрытий..............................................................................................................72 9.3.1. Общепринятые покрытия................................................................................................................................72 9.3.1.1. Алкил-силановые покрытия......................................................................................................................72 9.3.1.2. Арилпентафторидные покрытия..............................................................................................................73 9.3.1.3. Гидрофильные гидрокоил- и полиэфирные покрытия...........................................................................74 9.3.1.4. Покрытия на основе белков.....................................................................................................................75 9.3.2. Полимерные покрытия....................................................................................................................................75 9.3.2.1. Покрытия на основе линейных полиакриламидов..................................................................................75 9.3.2.2. Покрытия на основе поли(винилпирролидона).......................................................................................76 9.3.2.3. Покрытие капилляров поли(этиленимином)...........................................................................................77 (нанесение ионных слоев).....................................................................................................................................77 9.3.2.4. Покрытие капилляров поли(метилглутаматом)......................................................................................78 9.3.2.5. Капилляры для ГХ и СКФХ с нанесенным полимером, используемые в КЗ.........................................78 9.4. Выводы...................................................................................................................................................................79 10. Мицеллярная электрокинетическая хроматография...............................................................................................80 11. Разделение энантиомеров.........................................................................................................................................88 11.2. Смешанные химические разделяющие системы...............................................................................................90 11.3. Капилляры с ЭОП и без него...............................................................................................................................91 11.4. Выбор подходящего LLQ.....................................................................................................................................91 11.5. Оптимизация концентрации ЦД..........................................................................................................................91 11.6. Оптимизация значений рН...................................................................................................................................93 11.7. Оптимизация фоновых электролитов.................................................................................................................94 11.8. Буферные добавки...............................................................................................................................................95 12. Капиллярный гепь-эпектрофорез..............................................................................................................................96 12.1. Гели на основе акриламида................................................................................................................................96 12.1.1. Поперечносшитые полиакрипамидные гепи................................................................................................97 12.1.2. Линейные полиакриамидные цепи...............................................................................................................98 12.1.3. Полиакриламидный гелевый электрофорез белков с ДДСН...................................................................101 12.2. Гепи на основе пописахаридов и других полимеров.......................................................................................102 12.3. Модели миграции биополимеров в полимерных растворах...........................................................................103 13. Изоэлектрическая фокусировка (ИЭФ) в капиллярах............................................................................................105 14. Изотахофорез (ИТФ).................................................................................................................................................108 15. Эпектрохроматография (ЭХ)....................................................................................................................................109 16. Перспективы..............................................................................................................................................................110 Рекомендуемые книги:.........................................................................................................................................110 Обзорные статьи..................................................................................................................................................110 Список сокращений, часто встречающихся в тексте:........................................................................................



© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.