WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

   Добро пожаловать!

Pages:     || 2 | 3 | 4 |
-- [ Страница 1 ] --

Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова Материалы Международной конференции молодых учёных по фундаментальным наукам «ЛОМОНОСОВ - 2006» ХИМИЯ том 2 12-15 апреля 2006 года Москва

2006 Московский государственный университет им. М. В. Ломоносова Материалы Международной конференции молодых учёных по фундаментальным наукам «ЛОМОНОСОВ-2006» ХИМИЯ (12-15 апреля 2006 года) том 2 1 Материалы Международной конференции молодых учёных по фундаментальным наукам «Ломоносов-2006» – Химия, т. 2, М.: 2006 С 12 по 15 апреля 2006 года в Московском Университете прошла Международная конференция молодых учёных по фундаментальным наукам «Ломоносов-2006». Цель конференции – развитие творческой активности молодых учёных, привлечение их к решению актуальных задач современной фундаментальной науки, сохранение и развитие единого научнообразовательного пространства, установление контактов между будущими коллегами. Рабочие языки: русский и английский.

Undergraduate and Postgraduate Student International Conference in Fundamental Science “Lomonosov-2006”. Moscow State University. April 12-15, 2006. The purposes of the conference are: developing the creative activities of undergraduate students, attracting them to solutions of the modern fundamental science actual problems, maintenance and developing the common space of science and education, establishing the contact between colleagues. Working languages are: Russian and English.

©Химический факультет МГУ, 2006 г. Компьютерная вёрстка: Федосов Д.А.

Фирма ChemBridge Corporation c 1993 года работает в области тонкого органического синтеза соединений для фармакологических исследований В лабораториях Фирмы проводятся научные исследования, связанные с тонким органическим синтезом и медицинской химией. Активно применяются современные технологии, параллельный и комбинированный синтез, компьютерное моделирование. Для поиска новых лекарственных соединений наши библиотеки химических веществ используют более 300 компаний, включая все ведущие фармацевтические корпорации США, Европы и Японии. ChemBridge Corporation ежегодно проводит научные конференции и сипозиумы по органической химии. Фирма реализует программу грантов, направленную на выявление и поддержку талантливых молодых ученых.

V ВСЕРОССИЙСКАЯ ОЛИМПИАДА ПО ОРГАНИЧЕСКОЙ ХИМИИ 13 апреля 2006 г. в Москве Призовой фонд составляет более 150 000 рублей! Химический факультет МГУ, ChemBridge Corporation, Высший химический колледж РАН, при информационной поддержке журнала «Химия и жизнь — XXI век» проводят V Всероссийскую олимпиаду по органической химии для студеентов старших курсов, аспирантов и молодых ученых. Олимпиада состоится на химическом факультете МГУ, в южной химической аудитории, в рамках конференции «Ломоносов-2006». Председатель: В. В. Лунин, академик РАН, профессор, декан химического факультета МГУ им. М.В. Ломоносова, Заместитель председателя: А. В. Анисимов, профессор, д. х. н., заместитель декана по научной работе химического факультета МГУ им. М.В. Ломоносова, Организационный комитет: С. Е. Семёнов, Московский химический лицей № 1303 С. Е. Сосонюк, МГУ им. М. В. Ломоносова А. В. Куракин, ChemBridge Corporation Победителей ожидают призы: • • • • • первый приз — 10000 рублей, два вторых приза — по 5000 рублей, специальный приз — 5000 рублей лучшему среди участвующих в Олимпиаде повторно.

6 олимпииских стипендий по 1000 рублей в месяц для студентов МГУ, МГАТХТ, РХТУ и ВХК РАН, попавших в первую десятку победителей Олимпиады, а также учреждаются 2 олимпийские стипендии по 1000 рублей в месяц обладателям лучших работ среди участников из региональных ВУЗов.

почтовый адрес: 119048 Москва а/я 424 для вопросов по олимпиаде: olympiada@chembridge.ru для общих вопросов: info@chembridge.ru для резюме: vacancy@chembridge.ru www.ChemBridge.ru тел: (495)775-06-54, факс: (495) 956-49- Исследовательский Институт Химического Разнообразия Основной специализацией ИИХР являются доклинические разработки синтетических лекарств нового поколения в рамках международной кооперации. Институт отвечает самым современным международным требованиям, предъявляемым к научным центрам. Лабораторные помещения ИИХР соответствуют стандарту GLP и оснащены новейшим научным оборудованием.

Новые технологии в ИИХР:

Высокопроизводительный твердо- и жидкофазный синтез и анализ новых гетероциклических соединений для биоскрининга. Реакции под действием микроволнового излучения. Компьютерное моделирование фармакологически значимых свойств химических соединений. Высокопроизводительный роботизированный биоскрининг. Исследование перспективных биологических мишеней в наиболее актуальных областях современной медицины.

Приглашаем на работу химиков-органиков!

Проект ИИХР является примером практического решения ряда актуальных проблем российской науки, таких как: освоение новейших исследовательских технологий, «утечка мозгов», невостребованность ученых, старение научных коллективов и др. ИИХР позволяет российским ученым занять достойное место в международной интеграции биотехнологических исследований.

Приглашаем к сотрудничеству все заинтересованные организации и институты!

За дополнительной информацией обращайтесь на www.iihr.ru и по тел: 995 49 Оргкомитет конференции "Ломоносов-2006"-ХИМИЯ благодарит за помощь в организации и проведении конференции:

• Российский Фонд Фундаментальных Исследований • Компанию "ChemBridge Corporation" • Исследовательский Институт Химического Разнообразия (ИХХР) • Научно-внедренческую фирму «ТИМИС» • Компанию "Акзо Нобель" • Студенческую комиссию профкома химического факультета МГУ • Международный Благотворительный Научный Фонд им. К. И. Замараева • Российское отделение Общества Информационных Дисплеев (Society of Information Display - SID) Отделение "Науки о живом" Состав жюри: Клячко Н.Л. Белова А.Б. Александрова Н.А. Белогурова Н.Г. Гладченко М.А. Ефимова А.А. Еремеев Н.Л. Зубин Е.М. Левашов А.В. Лысогорская Е.Н. Пышкина О.А. Родина Е.В. Спиридонова В.А. Ужинова Л.Д. Черникова Е.В. профессор, д.х.н. – прредседатель ст. науч. сотр., к.х.н. - зам. председателя науч. сотр., к.б.н. доцент, к.х.н. ассистент, к.х.н. ассистент, к.х.н. вед. науч. сотр., д.х.н. науч. сотр., к.х.н. профессор, д.х.н. ст. науч. сотр., к.х.н. науч. сотр., к.х.н. доцент, к.х.н. вед. науч. сотр., к.х.н. доцент, к.х.н. ст. преподаватель, к.х.н.

КОМПЛЕКСЫ ЗВЕЗДООБРАЗНОЙ ПОЛИАКРИЛОВОЙ КИСЛОТЫ С КАТИОННЫМИ ПОЛИЭЛЕКТРОЛИТАМИ Бабин И.А. МГУ им. М.В. Ломоносова, Химический факультет Исследовано взаимодействие полиакриловой кислоты звездообразного строения (ПАК)N с числом лучей N = 5, 8 и 21 (Pn, луч = 100) с сильными катионными полиэлектролитами – поли-N-этил-4-винилпиридиний бромидом (Pw = 600, 3000) – в водно-солевых средах (pH 7, 0.05 M < [NaCl] < 0.4 M). Впервые показано, что при составах смесей противоположно заряженных полимерных компонентов Z (Z = [+]/[(COOH + COO-)], в квадратных скобках указаны молярные концентрации ионогенных групп полимерных компонентов) меньше некоторого предельного значения ZM, Z < ZM, такое взаимодействие может приводить к образованию водорастворимых архитектуры. интерполиэлектролитных что значения комплексов (ИПЭК), в которых с функцию лиофилизирующего компонента выполняет полиэлектролит нелинейной Обнаружено, ZM закономерно понижаются уменьшением N, причем этот эффект существенно возрастает с повышением концентрации NaCl. Методами скоростной седиментации и динамического светорассеяния определены гидродинамические характеристики (коэффициент седиментации, гидродинамический радиус) частиц ИПЭК. Обнаружено, что при достаточно высоких концентрациях низкомолекулярного электролита в системе ИПЭК на основе (ПАК)N разрушаются на составляющие их полимерные компоненты вследствие эффективного экранирующего действия малых ионов. Установлено, что концентрация соли, при которой происходит диссоциация ИПЭК, определяется химической природой низкомолекулярного электролита, увеличиваясь в ряду [NaCl] ( 0.45 М) < [KCl] ( 0.55 М) << [(CH3)4NCl] ( 1.2 М). В то же время показано, что устойчивость ИПЭК на основе (ПАК)N в водно-солевых средах практически не зависит от N. Работа выполнена при поддержке проекта РФФИ № 06-03-32696а.

МЕЖМАКРОМОЛЕКУЛЯРНЫЕ РЕАКЦИИ СОПОЛИМЕРА 2-ГИДРОКСИЭТИЛАКРИЛАТА И БУТИЛАКРИЛАТА Бейсегул А.Б., Уркимбаева П.И., Мун Г.А. Казахский национальный университет им. аль-Фараби, Алматы, Казахстан Новые термочувствительные сополимеры получены радикальной сополимеризацией 2-гидроксиэтилакрилата (ГЭА) и бутилакрилата (БА). Методом ЯМР(Н1) - и (С13) -спектроскопии определены составы сополимеров, найдены константы сополимеризации. Показано, что водные растворы сополимеров (СПЛ) ГЭА-БА характеризуются наличием нижней критической температуры растворения (НКТР), значение которой удается регулировать варьируя содержание гидрофобного БА в составе СПЛ. Методами турбидиметрии, вискозиметрии и ИК-спектроскопии изучено взаимодействие СПЛ ГЭА-БА с полиакриловой кислотой (ПАК) в водных растворах. В качестве количественного критерия способности макромолекул к образованию интерполимерных комплексов (ИПК) использована критическая величина рН комплексообразования (рНкрит.). Исследовано влияние различных факторов на устойчивость ИПК. Показано, что рост концентрации полимеров, молекулярной массы поликислоты, ионной силы раствора, а также содержания мономерных звеньев БА в составе СПЛ сопровождается повышением способности данной системы к комплексообразованию. Вместе с тем, наличие добавок поверхностноактивного вещества катионного и анионного типа в растворе снижает эффективность комплексообразования. Изучено влияние взаимодействия СПЛ ГЭА-БА с ПАК на температуру фазового разделения (Тф.р.) водных растворов. Установлено, что в зависимости от кислотности среды присутствие ПАК может способствовать как повышению, так и снижению Тф.р.. Показано, что наблюдаемый эффект обусловлен формированием гидрофобных ИПК при низких значениях рН, а также возможностью образования гидрофильных ассоциатов с участием макромолекул СПЛ ГЭА-БА и ПАК при рН, незначительно превышающих критические значения рН комплексообразования [1].

1. Khutoryanskiy V.V., Dubolazov A.V., Nurkeeva Z.S., Mun G.A. pH Effects in the Complex Formation and Blending of Poly(acrylic acid) with Poly(ethylene oxide)// Langmuir, 2004, 20, С.3785-3790.

Н+-ПИРОФОСФАТАЗЫ БАКТЕРИЙ: ГЕТЕРОЛОГИЧЕСКАЯ ЭКСПРЕССИЯ И ЗАВИСИМОСТЬ ОТ Na+ И K+ Белогуров Г.А. МГУ им. М.В. Ломоносова, Химический факультет, Университет г. Турку, Финляндия Мембранная протон-переносящая пирофосфатаза (H+-PPаза) катализирует перенос протонов через мембрану за счет энергии, высвобождаемой при гидролизе пирофосфата, и отличается по первичной структуре от других ионных транслоказ. H+-PPазы были идентифицированы как необходимые ферменты во многих растениях и некоторых водорослях, простейших, бактериях (в том числе, патогенных) и археях. В энзимологическом аспекте бактериальные H+-PРазы почти не исследованы. В данной работе впервые осуществлена гетерологическая экспрессия активных H+PPаз трех бактерий (Rhodospirillum rubrum, Carboxydothermus hydrogenoformans и Thermotoga maritima) в Еscherichia cоli. Обнаружено, + что H+-PPаза C.

hydrogenoformans требует для активности ионы К. Из сравнения первичных структур H+-PPаз следует, что зависимость от К+ наблюдается только для тех из них, в которых отсутствует остаток Lys в положении 460 (нумерация по ферменту C. hydrogenoformans). Этот вывод подтвержден превращением данного фермента из K+зависимого в K+-независимый в результате замены Ala460Lys. Мембранная пирофосфатаза T. maritima требует для активности ионы Na+ и принадлежит к ранее неизвестному семейству Na+,K+-зависимых мембранных пирофосфатaз. Методом стационарной кинетики в ней обнаружены два Na+-связывающих центра и один K+связывающий центр. Замена Asp703Asn маскирует один из Na+-связывающих центров, что делает вероятным участие Asp703 в связывании Na+. Замены консервативных остатков Asp 187, 191, 642, 669, 673 и 677 и Lys 184, 195 и 646 в предсказанных цитоплазматических петлях пирофосфатaзы R. rubrum инактивируют фермент. Замены остатков Glu 197, 202, 505 и 649 снижают активность фермента при низких концентрациях Mg2+ и (кроме остатка 505) сродство к аналогам субстрата, указывая на возможную роль остатков Glu в качестве лигандов Mg2+ в активном центре. Инактивация пирофосфатазы R. rubrum мерсалилом происходит вследствие модификации остатков Cys 222, 185 и 573, что согласуется с их предсказанной немембранной локализацией.

ПОЛИМЕРНЫЕ ПЛЕНКИ С ИММОБИЛИЗОВАННЫМИ КРАУНСОДЕРЖАЩИМИ КРАСИТЕЛЯМИ Бондаренко В.В., Царькова М.С., Зайцев С.Ю. ФГОУ ВПО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии им. К.И.Скрябина» В последнее время активно изучаются свойства нового класса фотохромных соединений – краунсодержащих красителей общей формулы:

Me RN + N O O O O O Благодаря своим комплексообразующим свойствам они взаимодействуют с катионами металлов в растворах. Подобное взаимодействие сказывается на спектральных характеристиках подобных соединений, что может быть использовано при создании сенсорных материалов. Целью работы было получение полимерных пленок из поливинилбутираля (ПВБ) с иммобилизованными краунсодержащими красителями вышеприведенных формул и их использование в качестве сенсоров на катионы Ba и Sr. Полимерные пленки получали из ПВБ методом полива на стеклянную подложку. В процессе работы был проведен выбор растворителей и определена совместимость полимера с краунсодержащими красителями. Получали оптически прозрачные пленки полимера с иммобилизованными краунсодержащими красителями, которые исследовали по спектрам поглощения в видимой области и спектрам флуоресценции на возможность комплексообразования с катионами Ba и Sr. Максимум поглощения краунсодержащего красителя иммобилизованного в полимерную пленку из ПВБ – 303 при = 409нм. В зависимости от сдвига максимума Таким полосы образом, поглащения судили о степени комплексообразования краситель можно краунсодержащего красителя с катионами. исследованный краунсодержащий использовать в качестве сенсоров на катионы Ва и Sr.

ВЗАИМОДЕЙСТВИЕ ПОЛИКИСЛОТ С ЛИПИДНЫМИ МЕМБРАНАМИ РАЗЛИЧНОГО СОСТАВА Веремеева П.Н., Беркович А.К., Мелик-Нубаров Н.С. МГУ им. М.В. Ломоносова, Химический факультет Множество исследований в различных областях химии в настоящее время связаны с созданием новых лекарственных препаратов и усовершенствованием уже существующих. Важными проблемами при лечении, например, раковых заболеваний являются необходимость направленной доставки лекарственных препаратов в раковые клетки, а также повышение эффективности доставки. Обе эти проблемы можно решать, применяя для доставки сложные многокомпонентные комплексы. Одна из задач такого комплекса – обеспечение выхода лекарства из эндосом. Ранее на модельной липидной мембране, построенной из фосфатидилхолина, было показано, что в слабокислой среде (рН 4.5-5 соответствует рН среды внутри эндосом) различные синтетические поликислоты, и в первую очередь полиакриловая кислота [1], вызывают образование пор, проницаемых для заряженных низкомолекулярных соединений. Цель данной работы – определить как изменится скорость и эффективность воздействия поликислот на целостность мембраны, при изменении ее липидного состава. В работе на примере двух поликислот, полиакриловой и полиметакриловой, показано, что введение отрицательно заряженных липидов не оказывает значительно влияния на процесс образования пор. Введение холестерина приводит к снижению как скорости, так и эффективности воздействия полимеров, однако не устраняет его полностью.

1. Беркович А.К., Мелик-Нубаров Н.С. «Взаимодействие полиакриловой кислоты с бислойными мембранами из фосфатидилхолина в слабокислой среде», Биологические мембраны, 2005, 22(4), с.370-7.

ОЧИСТКА ВОДЫ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ БИОЦИДНЫХ ФЛОКУЛЯНТОВ Голубев Ю.Л. Белорусский государственный университет, Минск Ухудшение состояния водоисточников, особенно поверхностных, а также ужесточение требований, предъявляемых к качеству питьевой воды, заставляет внедрять новые методы очистки. Особенно это касается периодов массового размножения планктона (конец июля – август), когда в воде резко повышается содержание органических веществ, что на фоне повышения доз дезинфицирующего реагента, в качестве которого в основном используют хлор, приводит к образованию значительного количества хлорорганических соединений. Их содержание, оцениваемое по концентрации хлороформа, в соответствии с СанПиНом РФ и РБ не должно превышать200 мкг/дм3. Одним из вариантов предотвращения образования хлорорганических соединений является процесс хлораммонизации. В этом методе в воду перед вторичным хлорированием вводится аммиак, который эффективнее по сравнению с органическими соединениями связывает хлор, снижая тем самым количество образующихся побочных продуктов. К сожалению, при этом дезинфицирующая активность связанного хлора снижается в пять и более раз, а образующиеся хлорамины являются небезопасными для человека веществами. И если растворенный в воде хлор можно удалить отстаиванием в течение нескольких часов, то хлорамины остаются в воде в течение нескольких дней. При этом существенного снижения содержания хлороформа не происходит т.к. согласно используемым сегодня технологическим схемам аммиак перед первичным хлорированием не вводится. Влияние хлорирования и хлораммонизации на показатели качества воды (анализ проводился через 72 часа после обработки) Мутостат. остат. своб. ЦветCHCl3м ОМЧ, ность, Al, хлор, хлор, Проба о ность, кг/дм3 КОЕ/м3 мг/дм3 мг/дм3 мг/дм3 мг/дм3 1.Исходная вода 3,4 63 0 0 0 0,00 79 2.Стандартная очистка 1,0 22 0,22 0,2 0,03 0,15 16 с хлорированием 3.Стандартная очистка 1,3 33 0,27 1,6 0,02 0,16 25 с хлораммонизацией 4.Стандартная очистка без хлора, но с 1,3 19 0,30 0 0 0 19 добавлением ПАГа (5 мг/ дм3) В этой связи целесообразным представляется поиск альтернативных способов обеззараживания воды. Нами были исследованы новые биоцидные флокулянты на основе полиалкиленгуанидинов (ПАГов). Известно, что производные гуанидина обладают широким спектром бактерицидной и вирулицидной активности. В применяемых концентрациях они безвредны для человека. Показано, что введение таких флокулянтов в дозах до 5 мг/л позволяют достигать необходимой степени очистки (см. таблицу). При этом ПАГи надежно защищают воду от повторного обсеменения. Полностью отказаться от использования окислителя при очистке воды нельзя. Хорошей альтернативой хлору является озон. Он обладает значительно более высокой бактерицидной активностью, но, к сожалению, не обладает необходимым последействием. Этот недостаток можно устранить при использовании совместно с озонированием биоцидных флокулянтов.

ИССЛЕДОВАНИЕ ПРОЛИЛЭНДОПЕПТИДАЗ ИЗ КИШЕЧНИКА ЛИЧИНОК БОЛЬШОГО МУЧНОГО ХРУЩАКА TENEBRIO MOLITOR Гоптарь И.А. МГУ им. М.В. Ломоносова, Химический факультет Пролилэндопептидазы, или постпролинрасщепляющие ферменты, - это специфические микроорганизмов, эндопептидазы, грибов и гидролизующие пептидный что субстрат по карбоксильной группе остатка пролина. Эти ферменты были найдены у животных, растений. Известно, пролилэндопептидазы участвуют в метаболизме биологически активных пептидов. Мы впервые докладываем о двух постпролинрасщепляющих ферментах, содержащихся в кишечнике личинок насекомого-вредителя большого мучного хрущака Tenebrio molitor, где эти ферменты этих могут двух участвовать в протеолизе заметно проламинов, различаются. содержащихся в больших количествах в пище этого вредителя. Характеристики пролилэндопептидаз Молекулярные массы, определенные методом гель-фильтрации, составляют 92 и 65 кДа (пептидаза 1 и 2 соответственно). рН-Оптимум гидролиза специфического пептидного субстрата Z-Ala-Ala-Pro-pNA пролилэндопептидазой 1 лежит в кислой области и соответствует значению 5,6, а пролилэндопептидаза 2 активна в широком диапазоне рН, хотя ее рН-оптимум – 8,5. Предварительные опыты показали, что на скорость гидролиза этими протеиназами не оказывают влияние ни ЭДТА, ни ДТТ. Скорость гидролиза протеиназой 1 увеличивается в присутствии солей – KCl и CaCl2, в то время как скорость гидролиза протеиназой 2 значительно уменьшается в присутствии этих солей. Обнаружено, что субстратная специфичность пептидаз 1 и 2 различна. Пролилэндопептидаза 2 не гидролизует короткие субстраты (например, Boc-PropNA) и субстрат Z-Gly-Gly-Pro-pNA,, хотя наблюдается гидролиз этих субстратов пептидазой 1. Скорость гидролиза Z-Ala-Ala-Pro-pNA обоими ферментами выше, чем скорость гидролиза более короткого субстрата Z-Ala-Pro-pNA. Комбинацией методов гель-фильтрации и гидрофобной хроматографии ферменты были очищены в 50 раз. В настоящее время разрабатываются методы дальнейшей очистки этих протеаз.

ВОДОРАСТВОРИМЫЕ ИНТЕРПОЛИЭЛЕКТРОЛИТНЫЕ КОМПЛЕКСЫ НА ОСНОВЕ «ЩЕТКИ» ПОЛИАКРИЛОВОЙ КИСЛОТЫ Гришагин И.В., Пермякова Н.Г. МГУ им. М.В. Ломоносова, Химический факультет Впервые исследовано взаимодействие «щетки» полиакриловой кислоты, которая представляет собой сополимер с полигидроксиэтилметакрилатной основной цепью (Pn = 1500) и короткими привитыми цепями полиакриловой кислоты (Pn = 25), с сильным катионным полиэлектролитом – поли-N-этил-4-винилпиридиний бромидом (ПЭВПБ, Pw = 600, 3000) – в водно-солевых средах (pH 7 и 9;

0.05 M [NaCl] 0.6 M). Установлено, что продуктами такого взаимодействия могут являться водорастворимые интерполиэлектролитные комплексы (ИПЭК), если состав смеси противоположно заряженных полимерных компонентов Z = [+] / ([(COO- + COOH)]) (в квадратных скобках указаны молярные концентрации ионогенных групп полимерных компонентов) не превышает некоторого предельного значения ZM: Z < ZM < 1. В таких ИПЭК «щетка» полиакриловой кислоты выполняет функцию лиофилизирующего полимерного полимерного компонента. компонента, Анализ обеспечивающего смесей растворимость комплексных частиц, а катионный полиэлектролит играет роль блокирующего водно-солевых противоположно заряженных полимерных компонентов методом скоростной седиментации свидетельствует о том, что все макромолекулы поликатиона включены в состав частиц ИПЭК, коэффициент седиментации которых составляет 25 30 Св. Обнаружено, что значения ZM практически не зависят от концентрации низкомолекулярной соли (NaCl), находясь в пределах ZM 0.2 0.3 (при [NaCl] 0.25 0.3 M для ПЭВПБ с Pw = 600 и при [NaCl] 0.3 0.4 M для ПЭВПБ с Pw = 3000). Показано, что при высоких концентрациях NaCl в системе ИПЭК на основе «щетки» полиакриловой кислоты разрушаются на составляющие их полимерные компоненты, причем концентрация соли, соответствующая диссоциации таких комплексов, увеличивается от 0.35 М до 0.5 М (pH 9) с повышением длины цепи ПЭВПБ. Работа выполнена при поддержке проекта РФФИ № 06-03-32696а.

ВЛИЯНИЕ ПАТОЛОГИЙ ПЕЧЕНИ НА ЭКСКРЕЦИЮ ЛАКТАТА КОЖЕЙ 1 Гурина Е.Ю., 2Савин Г.А.

Волгоградская государственная сельскохозяйственная академия, Волгоградский государственный педагогический университет Кожа – важный орган выделения человека, и через неё выводятся конечные продукты углеводного и азотистого обмена. Однако в кожном экскрете были обнаружены также и полезные для организма вещества (например, аминокислоты), что свидетельствует о кожной перспирации как довольно сложном и неоднозначном явлении, требующем детального изучения. Ранее нами было показано, что через кожные покровы человека экскретируется молочная кислота (лактат), и её содержание в выделениях кожи зависит от различных факторов. Так выявлена зависимость количественного содержания лактата в кожном экскрете от стресса [1], физических нагрузок [2]. Настоящая работа является продолжением упомянутых выше исследований и посвящена изучению зависимости количества экскретируемой кожей молочной кислоты от различных патологий, например, от заболеваний печени (холецистита). Забор кожного экскрета и определение в нём количественного содержания лактата проводили по ранее разработанному методу [3]. При этом установлено, что уровень лактата в выделениях кожи у больных холециститом превышает норму в 2-3 раза. Исследования также показали, что высокий уровень экскретируемого кожей лактата сохраняется у реципиентов и после холецистэктомии. По нашему мнению, причиной этого может служить нарушение процесса превращения молочной кислоты в гликоген, который, как известно, происходит в печени. Важно отметить, что при других видах патологий (сердечно-сосудистые и онкологические заболевания, сахарный диабет) уровень лактата в кожном экскрете заметно не отличался от нормы. Данные исследовательской работы могут быть использованы в клинической практике для раннего диагностирования заболеваний печени. Список литературы. 1. Савин Г.А., Перфильева О.Н. // Клиническая лабораторная диагностика, 1998. № 11. С. 7. 2. Савин Г.А., Ушакова Е.В., Перфильева О.Н. // Теория и практика физической культуры, 2000. № 1. С. 18. 3. Храмов В.А., Савин Г.А. // Гигиена и санитария, 1995. № 4. С. 52.

ВЛИЯНИЕ рН НА КИНЕТИКУ ГИДРОЛИЗА ПЕНИЦИЛЛИНОВЫХ АНТИБИОТИКОВ Демская Е.В. Тверской государственный университет Антибиотики группы пенициллина широко применяются в медицинской практике для лечения различных инфекционных заболеваний. Исследованию химии этих веществ посвящены многочисленные работы. Литературный поиск показал, что проведенные исследования кинетики гидролиза пенициллинов отрывочны, а их результаты в ряде случаев опубликованы в труднодоступных источниках. В то же время есть все основания полагать, что детальное исследование кинетики гидролиза в растворах пенициллинов может представлять как научный, так и практический интерес. В данной работе поляриметрическим методом исследована кинетика распада в водных растворах антибиотиков группы пенициллина: бензилпенициллина, ампициллина и амоксициллина. Получены результаты исследования растворов антибиотиков при различных pH среды: для бензилпенициллина pH = 1, 6.25, 8.9;

для ампициллина pH= 1, 5.33, 9.5;

для амоксициллина pH = 1, 5.33, 8.9;

что соответствует различным формам существования антибиотиков в водных растворах (недиссоциированная кислота, катион, биполярный ион, анион). В качестве буферных растворов были использованы универсальные буферные растворы и соляная кислота. Рассчитаны средние константы скорости распада при различных pH среды. Средние константы скорости kср, (1/мин) pH 1 5.33 6.25 8.9 9.5 бензилпенициллина 0.00354 0.0002 0.0025 ампициллина 0.00358 0.00132 0.00556 амоксициллина 0.0017 0,0001 0.0027 На основе полученных данных был сделан вывод, что распад антибиотика проходит в одну стадию и скорость распада зависит от pH среды. Показано, что в слабокислой среде антибиотик наиболее стабилен, так как при сильнокислой и щелочной средах скорость реакции распада значительно ускоряется.

КОМПЛЕКСООБРАЗОВАНИЕ СЕРЕБРА(I) С АМПИЦИЛЛИНОМ, АМОКСИЦИЛЛИНОМ И ЦЕФАЛЕКСИНОМ Демская Л.В. Тверской государственный университет Ампициллин, амоксициллин и цефалексин – широко применяемые в медицинской практике -лактамные антибиотики. В отличие от многих других пенициллинов и цефалоспоринов молекулы HAmp, HAxn и HCpx содержат аминогруппу, которая придает им способность образовывать устойчивые комплексы с катионами металлов. Целью данной работы было исследование взаимодействия Amp–, Axn– и Cpx– с серебром(I), которое обладает своеобразными комплексообразующими свойствами и высокой биологической активностью. Какихлибо литературных данных по исследованию комплексообразования в этих системах нами найдено не было. Для исследования комплексообразования кислые растворы, содержащие AgNO3 и антибиотик в форме катиона (H2L+) в мольном соотношении 1:3 на фоне 0.1 моль/л KNO3 титровали раствором NaOH, измеряя одновременно рН и потенциал Ag-селективного электрода (E) относительно электрода сравнения, соединенного с титруемым раствором электролитическим ключом, заполненным 1 моль/л раствором KNO3. Для определения состава и устойчивости образующихся комплексов был проведен математический анализ результатов титрования нелинейным методом наименьших квадратов с использованием специализированной программы New DALSFEK, которая позволяет учитывать несколько откликов (в данном случае pH и p[Ag]). Критерием адекватности математической модели равновесий является минимизация суммы квадратов отклонений (SS). Было обнаружено, что в нейтральной и щелочной среде Amp–, Axn– и Cpx– взаимодействуют с Ag(I) с образованием моно- и билигандных комплексов, сосуществующих в растворе, а также определены константы образования данных комплексов. L Amp– Axn– Cpx– lg1 3.37 ± 0.03 3.26 ± 0.04 3.72 ± 0.03 lg2 6.27 ± 0.07 6.05 ± 0.06 7.36 ± 0.04 Условия определения 20 C, I = 0.1 (KNO3) 20 C, I = 0.1 (KNO3) 20 C, I = 0.1 (KNO3) SS 0.72 0.73 0. ВЛИЯНИЕ ПОЛИМЕРНЫХ ПАВ НА ФОТОКАТАЛИТИЧЕСКУЮ АКТИВНОСТЬ ПОРФИРИНОВ Жиентаев Т.М., 1Мелик-Нубаров Н.С., 2Соловьёва А.Б.

МГУ им. М.В. Ломоносова, Химический факультет, Институт химической физики им. Н.Н. Семёнова Российской Академии Наук Большой интерес к порфиринам вызван их способностью избирательно накапливаться в опухолевых клетках. Если впоследствии облучить такую клетку светом с определённой длиной волны, то молекула красителя переходит в возбуждённое состояние. При столкновении такой молекулы с растворённым кислородом, он может переходить в синглетное состояние. В свою очередь, известно, что синглетный кислород является очень сильным окислителем, поэтому генерация таких молекул в клетке приводит к разрушению внутриклеточных компонентов и гибели. Этот подход носит название фотодинамической терапии и уже применяется для лечения рака. В настоящее время известно большое количество различных порфириновых красителей, различающихся по фотокаталитической активности. Однако в медицинской практике могут применяться лишь водорастворимые порфирины. В то же время большинство соединений этого типа плохо растворимо в воде. В настоящей работе мы исследовали способность как растворимого, так и нерастворимого в воде порфирина взаимодействовать с мицеллами полимерных ПАВ и проявлять фотокаталитическую активность в водной среде. Оказалось, что изученные порфирины способны с высокой эффективностью включаться в мицеллы блок-сополимеров этиленоксида и пропиленоксида (плюроников). При этом его фотокаталитическая активность, измеряемая по скорости фотоокисления водорастворимого субстрата, сильно зависела от природы ПАВ и соотношения порфирин/ПАВ в мицелле, а также от способа приготовления исследуемого раствора. В то же время, фотокаталитическая активность порфиринов по отношению к мембранному пептиду, встроенному в липидные везикулы, наоборот, либо снижалась с ростом концентрации плюроника, либо оставалась неизменной в зависимости от используемого порфирина. Также были поставлены эксперименты с нормальными и трансформированными фибропластами мыши. Полученные Работа данные поддержана указывают грантом на возможность регуляции РАН ГК фотокаталитической активности порфиринов при их взаимодействии с полимерами. Президиума № 10002-251/ОХНМ-04/125-121/200504- ИЗУЧЕНИЕ БИОПОДОБНОСТИ РЕЦЕПТОРНЫХ СВОЙСТВ НЕСШИТОГО ПОЛИ-N-ИЗОПРОПИЛАКРИЛАМИДА В УСЛОВИЯХ ПОНИЖЕННОЙ ГИДРАТАЦИИ Жукова С.В., Зиганшин М.А., Горбачук В.В. Химический институт им. А. М. Бутлерова КГУ, Казань Изучение влияния структурных параметров, таких как сшивка и состав макромолекул, на способность полимеров проявлять биоподобные рецепторные свойства (рецепторные свойства близкие к свойствам белков) по отношению к органическим сорбатам, является важным элементом рационального дизайна соединений и материалов для химических сенсоров. К настоящему времени достигнут относительно скромный прогресс в определении структурных параметров полимера, необходимых для проявления им рецепторных свойств близких к свойствам белков. В настоящей работе был проведен сопоставительный анализ рецепторных свойств несшитого поли-N-изопропилакриламида с рецепторными свойствами белков: трипсина, рибонуклеазы, а также с сорбционными свойствами его сшитого аналога. Статическим методом парофазного газохроматографического анализа были определены изотермы сорбции паров органических соединений на осушенных полиN-изопропилакриламиде, трипсине и рибонуклеазе, в сопоставимых условиях. Изотермы сорбции паров органических соединений на сшитом поли-N-6аминогексилакриламиде были получены в нашей лаборатории ранее, [1]. Показано, что рецепторные свойства высушенного полимера существенно отличаются от сорбционных свойств высушенных белков. Видимо это является следствием пластификации полимера растворителями с относительно крупными молекулами, такими как бензол, диоксан, хлороформ. Также было обнаружено, что высушенный поли-N-изопропилакриламид в отличие от высушенных белков не проявляет эффекта «исключения сорбата по объему». Работа выполнена при финансовой поддержке РФФИ (грант №03-03-96188р2003татарстан), программы «Фундаментальные исследования и высшее образование» с участием CRDF и Министерства образования и науки РФ (проект REC007), программы «Университеты России» (грант УР.05.01008). Литература 1. Gorbatchuk V.V., Mironov N. A., Solomonov B. N., Habicher W. D. «Biomimetic Cooperative Interactions of Dried Cross-Linked Poly(N-6-aminohexylacrylamide) with Binary Mixtures of Solvent Vapors» // Biomacromolecules, 2004, V.5, P. 1615-1623.

ВЛИЯНИЕ СТРУКТУРЫ АМФИФИЛЬНОГО БЛОК-СОПОЛИМЕРА НА ПРОНИЦАЕМОСТЬ ЛИПИДНЫХ МЕМБРАН РАЗЛИЧНОГО СОСТАВА Заборова О.В., Павлов Д.Н. МГУ им М.В. Ломоносова, Химический факультет Амфифильные блок-сополимеры этиленоксида и пропиленоксида (плюроники, проксанолы), встраиваясь в липидную мембрану влияют на ее структуру и барьерные свойства. Изменения, производимые плюрониками в структуре мембран раковых клеток, позволяют понизить устойчивость раковых клеток по отношению к противоопухолевым антибиотикам. В работе было исследовано влияние ряда блок-сополимеров этиленоксида и пропиленоксида различной структуры на проницаемость модельных липидных мембран. Было показано, что в случае лецитиновых липосом более сильный эффект по дестабилизации липидного бислоя проявляют полимеры с более сложной структурой. При переходе к смешанным лецитин-холестериновым липосомам, более точно моделирующим состав и физико-химические свойств клеточных мембран, снижается эффект от воздействия всех исследованных в работе сополимеров. Нами было установлено, что качественная зависимость эффектов полимеров от их структуры сохраняется, при этом присутствие холестерина сильнее сказывается на полимерах с более сложной структурой.

ПОЛИМЕРИЗАЦИЯ МЕТИЛМЕТАКРИЛАТА В ПРИСУТСТВИИ МЕТАЛЛОЦЕНА И АМИНА Заикина А.В., Пузин Ю.И., Монаков Ю.Б. Институт органической химии УНЦ РАН В работе рассматривается влияние N,N-диметил-N-(метилферроценил)амина (ФЦАМ) и N,N-диметил-N-бензиламина на процесс радикальной полимеризации метилметакрилата (ММА).

CH3 CH2 Fe ФЦАМ N CH3 CH2 N CH3 CH N,N-диметил-N-бензиламин Введение добавки ФЦАМ в инициирующую систему с пероксидом бензоила (ПБ) приводит к повышению начальной скорости полимеризации ММА по сравнению со скоростью полимеризации без добавки. По концентрационным зависимостям скорости полимеризации были рассчитаны порядки по инициатору – ПБ при 60, 45, 30 и 0 °С: 0,21, 0,33, 0,29, 0,04;

и ФЦАМ: 0,22, 0,3, 0,34, 0,41, соответственно. Суммарный порядок близок к 0.5, что свидетельствует об образовании инициирующей системы радикального типа. Аналогичные значения были получены ранее и для системы ферроцен – ПБ [1]. По температурным зависимостям рассчитано значение энергии активации полимеризации, инициируемой системой ПБ – ФЦАМ, равное 45,7 кДж/моль и близкое к энергии активации для системы ПБ – ферроцен (48,3 кДж/моль [1]). При исследовании полимеризации ММА в присутствии инициирующей системы ПБ - N,N-диметил-Nбензиламин порядок по бензиламину оказался равным 0,1 (60 °С), 0 (45 °С), -0,1 (30 °С), а порядок по ПБ в этой системе составил 0,4 (60 °С), 0,37 (45 °С), 0,27 (30 °С). Энергия активации полимеризации с участием N,N-диметил-N-бензиламина - 130 кДж/моль, что превышает величину для обычной радикальной полимеризации ММА, инициированной ПБ. Можно заключить, что определяющую роль при полимеризации в присутствии системы ПБ – ФЦАМ играет ферроценильная функциональная группа. Работа выполнена при финансовой поддержке Российского фонда фундаментальных исследований (код проекта 05-03-32087а), Фонда поддержки научных школ (грант НШ-728.2003.3). 1. Юмагулова Р.Х. Автореф. дис....канд. хим. наук. Уфа: Ин-т органич. химии Уфимского научного центра РАН, 2000.

СРАВНЕНИЕ ДВУХ- И ТРЕХКОМПОНЕНТНЫХ ИНИЦИИРУЮЩИХ СИСТЕМ НА ОСНОВЕ ЦИРКОНОЦЕНОВ РАЗЛИЧНОГО СТРОЕНИЯ Исламова Р.М., Пузин Ю.И. Институт органической химии Уфимского научного центра РАН, Уфа Исследовано влияние цирконоцендихлорида ЦРЦ, инденцирконоцендихлорида ИЦРЦ и системы ИЦРЦ + 3,6-бис-(о-карбоксибензоил)-N-изопропилкарбазол ДКN на радикальную полимеризацию метилметакрилата ММА, инициированную пероксидом бензоила ПБ. При полимеризации ММА, инициированной ПБ в присутствии ЦРЦ, наблюдается увеличение начальной скорости полимеризации в интервале температур 30-60°С, сопровождающееся уменьшением средневязкостной степени полимеризации. Эффективная энергия активации полимеризации в присутствии ЦРЦ составила 25,7±0,5 кДж/моль, что заметно ниже, чем в случае инициирования только ПБ (80 кДж/моль). Исследование полимеризации ММА, инициированной системой ПБ + ИЦРЦ, показало, что ИЦРЦ практически не влияет на начальную скорость процесса при 60 и 45С и снижает ее при 30С по сравнению с полимеризацией, инициированной ПБ и ЦРЦ + ПБ. При этом средняя степень полимеризации уменьшается при всех исследованных температурах. Энергия активации полимеризации составила 29,5±0,5 кДж/моль. Введение ДКN в инициирующую систему ИЦРЦ + ПБ приводит к синергическому влиянию добавок на скорость полимеризации. Начальная скорость полимеризации этой системы больше по сравнению со скоростями полимеризаций, инициированных 50,0 кДж/моль. Комплексообразование компонентов инициирующих систем изучали методом ИК-спектрометрии. структур, Микроструктура 65-70%. ПММА, этом полученного полимеры, в присутствии с соединений циркония, отличается высоким содержанием синдиотактических достигающих При синтезированные использованием системы ИЦРЦ + ПБ и ИЦРЦ + ДКN + ПБ имеют заметное содержание фрагментов изострения. Работа выполнена при финансовой поддержке Российского фонда фундаментальных исследований (код проекта № 05-03-32087а), Фонда поддержки научных школ (грант НШ-728.2003.3). двухкомпонентными системами. Энергия активации равна СТИМУЛЧУВСТВИТЕЛЬНЫЕ ГЕЛИ НА ОСНОВЕ СОПОЛИМЕРОВ -ВИНИЛОКСИЭТИЛАМИДА АКРИЛОВОЙ КИСЛОТЫ Кажмуратова А.Т., Ряскова У., Тажбаев Е.М., Буркеев М.Ж. Карагандинский государственный университет им. Е.А.Букетова, Казахстан Объектами нашего исследования являются гели на основе сополимеров винилоксиэтиламида акриловой кислоты (-ВОЭА АК) с ненасыщенными карбоновыми кислотами акрилового ряда – акриловой и метакриловой (АК и МАК). Синтезированный на кафедре органической химии и полимеров мономер - -ВОЭА АК, имея в своем составе две неравнозначные связи, выступает в роли как сомономера, так и сшивающего агента. Полифункциональность данного соединения определяет высокую чувствительность его гидрогелей к внешним стимулам и делает перспективными объектами для практического применения. Следует отметить, что полимеры на основе акриловых мономеров относят к известным стимулчувствительным гидрогелям благодаря наличию в их составе достаточного количества реакционноспособных групп. В настоящем докладе представлены результаты исследования влияния различных внешних факторов (рН среды, ионной силы, качества растворителей) на поведение гелей на основе вышеупомянутых сополимеров. Так, исследуемые нами гели проявили высокую чувствительность к изменению кислотности среды. Являясь анионными, гидрогели на основе сополимеров -ВОЭА АК с АК и МАК набухают в щелочной, а в кислой среде коллапсируют. Наряду с этим, полученные гели восприимчивы и к добавкам низкомолекулярных солей (NaCl и CaCl2). Анализ экспериментальных данных показал, что изучаемые полимерные сетки проявляют свойства, характерные для типичных полиэлектролитных гелей, контрактируя по мере увеличения концентрации электролита. При изучении влияния смеси органических растворителей с водой установлена аналогичная закономерность – по мере возрастания доли органической составляющей смеси происходит заметное уменьшение набухающей способности образцов полимеров. В наиболее практически значимом Таким интервале образом, температур нами (25- С) исследуемые гели оказались с термически устойчивыми. получены новые восприимчивые гидрогели избирательной чувствительностью к внешним стимулам.

СИНТЕЗ ЗАМЕЩЕННЫХ ОКСИМОВ ТИЛОЗИНА, СОДЕРЖАЩИХ ОСТАТКИ АРОМАТИЧЕСКИХ И НУКЛЕОАМИНОКИСЛОТ Карпенко В.В., Сумбатян Н.В. МГУ им. М.В. Ломоносова, Химический факультет Тилозин, антибиотик - макролид, является ингибитором биосинтеза белка на стадии трансляции. Его действие основывается на том, что он связывается с рибосомным туннелем (РТ) таким образом, что его лактонное кольцо располагается перпендикулярно РТ, перекрывая большую часть его отверстия, то есть антибиотик механически препятствует прохождению синтезируемой полипептидной цепи белка сквозь РТ. Основываясь на известных данных о механизмах устойчивости микроорганизмов к макролидам, с одной стороны, и результатах рентгеноструктурного анализа комплексов пептидных аналогов антибиотиков тилозинового ряда с большой субъединицей рибосомы, с другой стороны, мы сконструировали серию новых потенциально активных аналогов тилозина, O O O N R действующих против резистентных штаммов бактерий.

CH H3C O H3C O 1''' H3C 11 O 3''' HO 2''' 5''' Tyl 10 8 13 H3C 14 O 18 4 15 O 1 2 7 6 20 O HO OH R=Tyr, Phe, Aal, Cal 2' H3C N CH O 4''' H3C O CH 1' 3' 5' 4' O CH3 O OH 1'' 5'' 2'' 4'' 3'' CH OH CH Новые аналоги тилозина получены путем модификации альдегидной группы тилозина псевдодипептидами, включающими остатки ароматических аминокислот и аминокислот, несущих в своей боковой цепи нуклеиновые основания (аденин и цитозин). В рамках исследования осуществлен синтез ряда пептидов, в состав которых входят остатки 2-аминооксиуксусной кислоты, а также ароматических аминокислот (фенилаланин (Phe), тирозин (Tyr)) либо нуклеоаминокислот (3(аденин-9-ил)аланин (Aal), 3-(цитозин-1-ил)аланин (Cal)). Разработан способ присоединения полученных псевдопептидов к антибиотику путем взаимодействия гидроксиламинной функции пептида с С-20 альдегидной группой тилозина.

ПОЛУЧЕНИЕ АЛКОКСИСИЛИЛЬНЫХ ПРОИЗВОДНЫХ ГУМИНОВЫХ ВЕЩЕСТВ Карпюк Л.А., Перминова И.В., Пономаренко С.А. МГУ им. М.В. Ломоносова Гуминовые вещества (ГВ) представляют собой обширный класс природных соединений, входящих в состав органического вещества почв, природных вод и твердых горючих ископаемых [1]. ГВ определяют формы существования редоксактивных металлов и органических соединений в окружающей среде, связывают их в комплексы, снижая миграционную способность в окружающей среде и биодоступность для живых организмов. Указанные свойства определяют возможность практического применения ГВ в качестве комплексонов и сорбентов при очистке грунтовых вод. При этом для повышения эффективности ГВ особенно перспективной представляется их направленная модификация алкоксисиланами с целью получения высокоадгезионных производных, способных сорбироваться на минеральных поверхностях. Предложено и реализовано два способа введения алкоксисилильных групп в структуру гуминовых веществ: с использованием 3-аминопропилтриметоксисилана и 3-глицидоксипропилтриметоксисилана. Показано явное преимущество метода с использованием аминосилана, который позволяет получать гуминовые производные с высокой степенью модификации. Для выборки препаратов различного происхождения показано, что степень модификации возрастает в ряду: угольные < водные < торфяные гуминовые кислоты, что связано с увеличением содержания карбоксильных и карбонильных групп в указанном ряду. Методами ИК- и ЯМР-спектроскопии показано, что в результате присоединения 3-аминопропилтриметоксисилана к гуминовому каркасу образуются как амидная, так и иминная связи. При этом для ГВ различного происхождения характерен сходный набор продуктов реакции. Установлено, что все алкоксисилильные ГВ обладают способностью необратимо сорбироваться на силикагеле из водной среды. При этом количество иммобилизуемых ГВ составляет от 80 до 100 мг на 1 г силикагеля. Показано, что предложенный способ иммобилизации гуминовых производных из водной среды сравним по эффективности с общепринятым подходом, основанном на иммобилизации гуминовых веществ на аминированном силикагеле в среде органического растворителя [2, 3]. 1. Орлов Д.С. Химия почв. Москва, Изд-во МГУ. 1992. 259 с. 2. Alexandre G.S.Prado, Barbara S. Miranda, JoseA.Dias. Attachment of two distinct humic acids onto a silica gel surface. //Coll. And Surf. 2004. V. 242. P. 137-143. 3. L.K.Koopal, Y.Yang, A.J.Minnaard. Chemical immobilization of humic acid on silica. //Coll.and Surf. 1998.V. 141. P. 385-395.

ПУТИ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ N-ЗАМЕЩЁННЫХ ЛАКТАМОВ В ПОЛИМЕРОНОЙ ХИМИИ Колчин Д.В., Герасимова А.О., Галимов Л.Р., Спиридонова Р.Р., Галибеев С.С. Казанский государственный технологический университет Гетероциклические соединения, содержащие подвижный атом водорода, вырожденный на N-H связи, представляют существенный интерес с точки зрения взаимодействия с N=C=O группой изоцианатов с образованием N-замещённых лактамов. Подобные вещества способны при нагревании распадаться на исходные соединения, что и предопределяет их использование как модификаторов промышленных полиолефинов с улучшением адгезионных характеристик, так и активирующих агентов при получении полиамидов (ПА). Кроме того, квантовохимические расчёты показали, что N-замещённые лактамы могут быть использованы в качестве самостоятельного мономерного сырья при получении новых ПА. Поэтому целью данной работы являлось синтезирование и изучение структуры и свойств N-замещённых лактамов на основе ряда моно- и диизоцианатов и лактамов с различным размером цикла и поиск путей их использования в полимерной химии. Так в ходе работы методами H1-ЯМР и ИК-спектроскопией была подтверждена химическая структура синтезированных соединений, степень чистоты которых определялась жидкостной хроматографией и составила 97-99%. Установлены температуры деблокирования и проведён анализ этой величины в зависимости от строения соединения. Полученные N-замещённые лактамы были заполимеризованы в присутствии Nа-КЛ при температуре 150С. С помощью гельпроникающей хроматографии была изучена молекулярная масса полученных полимеров и показано, что в процессе синтеза происходит нарастание молекулярной массы. Что свидетельствует о возможности использования их в качестве мономеров для получения новых ПА. Использование данных соединений в качестве активирующего агента анионной полимеризации -капролактама, показало, что эффективность их активирующего действия выше по сравнению с используемыми в промышленности активаторами, например, такими как N-ацетилкапролактам. Кроме того, введение синтезированных лактамов в полиолефины (полиэтилен, полипропилен, сополимер этилена с винилацетатом, поливинилацетат) позволило достичь значительных эффектов по увеличению адгезионных характеристик, при этом происходило повышение физико-механических свойств.

ИЗУЧЕНИЕ СТРУКТУРЫ КОМПЛЕКСА ИНТЕГРАЗЫ ВИЧ-1 С ДНК МЕТОДОМ АФФИННОЙ МОДИФИКАЦИИ Королев С.П. МГУ им. М.В. Ломоносова, Химический факультет Интеграцию кДНК вируса иммунодефицита человека в геном зараженной клетки осуществляет вирусный фермент интеграза. Она катализирует две реакции: 3'-процессинг вирусной ДНК и встраивание вирусной ДНК в клеточную. С вирусной ДНК (ДНК-субстрат) интеграза взаимодействует строго сиквенс-специфично, тогда как в клеточной (ДНК-мишень) узнается любая нуклеотидная последовательность. Ранее показано, что взаимодействие с субстратом и мишенью происходит с одинаковой аффинностью, а так как структура комплекса интегразы и ДНК не известна, было интересно выяснить, происходит ли связывание вирусной и клеточной ДНК в одном или разных сайтах. Для ответа на этот вопрос мы решили использовать метод аффинной модификации. Были синтезированы олигонуклеотиды, содержащие модификацию у 2’-атома углерода в различных положениях цепи. Из них формировали дуплексы, аналоги субстрата и мишени, способные ковалентно присоединяться к остатка лизина белка. Были получены зависимости выходов ковалентного комплекса от положения модификации в аналогах субстрата и мишени. Выбраны положения, для которых выход ковалентного комплекса максимален. Для этих комплексов проведен протеолиз белка и выделены анализа конъюгаты олионуклеотида и и пептида для последующего методом масс-спектрометрии определения аминокислотного остатка, ковалентно присоединенного к ДНК. Другим важным аспектом изучения стуктуры комплекса интегразы ВИЧ-1 и ДНК, является изучение мультимерной организации интегразы. В литературе нет однозначной точки зрения, утверждается, что для реакции 3’-процессинга необходимы от 1 до 8 субъединиц интегразы. Для определения числа субъединиц интегразы были синтезированы модифицированные олигонуклеотиды. Из них сформированы дуплексы, аналоги субстрата, которые содержат модификацию в одном или нескольких положениях в одной или обеих цепях. Установлено, что к ДНК-субстрату Работа ковалентно поддержана присоединяется, РФФИ как минимум, 3 субъединицы интегразы. грантами 05-04-48743_а, РФФИ-НЦНИ 04-04-22000_а, МНТЦ 3197р.

СУПРАМОЛЕКУЛЯРНЫЕ СИСТЕМЫ НА ОСНОВЕ БУТАДИЕНИЛЬНЫХ БЕНЗО-15(18)-ДИТИА- КРАУН-5(6)-ЭФИРОВ Коршикова А.В., Царькова М.С., Зайцев С.Ю. ФГОУ ВПО «Московская Государственная Академия ветеринарной медицины и биотехнологии имени К.И. Скрябина» Супрамолекулярные системы на основе монослоев бутадиенильных бензо15(18)-дитиа- краун-5(6)-эфиров (БДКЭ) (см. рисунок 1) на поверхности раздела фаз воздух- вода являются уникальными моделями для исследования процессов молекулярного узнавания и самоорганизации молекул, а введение таких соединений в полимерные пленки позволит получать молекулярные сенсоры, чувствительные к катионам тяжелых металлов.

n=1 (I);

n =2 (II). Целью работы является формирование стабильных монослоев БДКЭ на поверхности раздела фаз. Изучены изотермы поверхностного потенциала (V) на поверхности воды (отмечен постепенный рост значений до 380 мВ) и на поверхности 1 мМ растворов солей Hg(ClO4)2 и Ag ClO4 (резкое увеличение величины примерно до 800 мВ). Эти результаты объясняются способностью БДКЭ к комплексообразованию с катионами тяжелых металлов (Hg+ образования прочных координационных связей с двумя и Ag+ ) за счет атомами серы дитиокраунэфирного фрагмента красителя. Изменение параметров для монослоев БДКЭ на поверхности растворов солей тяжелых металлов и воды свидетельствуют о комплексообразовании между макроциклом БДКЭ в монослое и катионом металла из водной субфазы. Полученные результаты позволяют использовать БДКЭ для иммобилизации в различные типы пленок с получением сенсоров для мониторинга загрязнений водных сред катионами тяжелых металлов.

ИЗУЧЕНИЕ СТАБИЛЬНОСТИ ЛИПОСОМ, СОДЕРЖАЩИХ ЛИПИДНОЕ ПРОИЗВОДНОЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВОГО ПРЕПАРАТА МЕТОТРЕКСАТА Кузнецова Н.Р., Кандыба А.Г., Водовозова Е.Л. Институт биоорганической химии им. М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН Включение химиотерапевтических препаратов в липосомы позволяет уменьшить их системную токсичность за счет пассивного транспорта липосомносителей среднего диаметрa 100-150 нм к опухолям. Ранее нами показано in vivo, что липосомы, несущие в мембране липофильное биодеградируемое производное сарколизина, обладают более сильным противоопухолевым эффектом по сравнению с исходным лекарством [1]. Цитостатик метотрексат (MTX) также широко используется в онкологической клинике. Недавно мы синтезировали производное MTX (I), предназначенное для встраивания в мембрану липосом: Целью данной работы явилось исследование стабильности липосомной H2N N N N N NH2 Me N O NH COOH COO H N O COO OOC OOC конструкции и возможности получения препаратов длительного хранения.

Моноламеллярные липосомы, состоящие из природных фосфолипидов и конъюгата (I) получали экструзией через мембранные фильтры с порами диаметром 100 нм. Дисперсии фракционировали по размерам методом гель-хроматографии и определяли содержание фосфолипидов колориметрически [2], a производного (I) - с помощью УФ-спектрометрии. Более 95% соединения (I) содержалось во фракции липосом. Показано, что липосомные дисперсии в физрастворе сохраняются без заметной агрегации в течение нескольких дней. По данным динамического лазерного светорассеяния и электронной микроскопии, после замораживания в жидком азоте и последующего размораживания наблюдались агрегаты липосом, которые диспергировались обработкой на УЗ-бане с образованием липосом начальных размеров. 1. Vodovozova E.L., Moiseeva E.V., Grechko G.K., Gayenko G.P., Nifant'ev N.E., Bovin N.V., Molotkovsky J.G. // European Journal of Cancer. 2000. V. 36. P. 942 – 949. 2. Леменовская А.Ф., Коен Я.М., Перевощикова К.А., Збарский И.Б., Дятловицкая Э.В., Бергельсон Л.Д. // Биохимия. 1976. Т. 41. С. 1000 – 1003.

ПОЛУЧЕНИЕ МУТАНТОВ КРАСНОГО ФЛУОРЕСЦЕНТНОГО БЕЛКА MRFP1 МЕТОДОМ САЙТ-НАПРАВЛЕННОГО МУТАГЕНЕЗА Куклина Е.Н. МГУ им. М.В. Ломоносова, Химический факультет Флуоресцентные белки используются в современной молекулярной биологии для визуализации процессов, происходящих этого в биологических является системах. способность Отличительным свойством белков семейства образовывать хромофор (гетерогруппу, отвечающую за флуоресценцию и окраску белка), путём посттрансляционной модификации полипептидной цепи без участия каких-либо кофакторов или специфических ферментов. Спектральный диапазон флуоресценции этих белков простирается от голубой области спектра при 460нм до 640нм в красной области. Длинноволновое излучение флуоресцентных белков имеет большее практическое значение по сравнению с излучением, приходящемся на другие области спектра, с точки зрения увелечения отношения уровня сигнала к шуму. Методом сайт-направленного мутагенеза были получены мутанты мономерного красного флуоресцентного белка mRFP1 с целью исследования взаимосвязи структуры белка и его флуоресцентных свойств. Точечные мутации производились по 66 положению (первый из аминокислотных остатков в триаде, образующей хромофор) методом перестройки плазмидной ДНК. Полученными плазмидными векторами, несущими соответствующий ген белка-мутанта, были трансформированы клетки E.coli. Плазмидные ДНК выросших клонов были выделены и проанализированы. Отбор мутантов производился с применением методов рестриктного анализа, ПЦР и частичного секвенирования. Структура генов полученных мутантов была доказана с помощью полного секвенирования. Мутантными плазмидными ДНК были трансформированы клетки E.coli. Из выросшей биомассы клеток-суперпродуцентов методом никель-афинной хроматографии были выделены экспрессируемые белки. Пробы белков были подвергнуты диализу для очистки. Далее были определены спектральные свойства мутантов. Для каждого белка были получены спектры поглощения, спектры возбуждения и эмиссии флуоресценции.Установленно, что замена в 66 положении Gln на любую другую аминокислоту приводит к значительным изменениям оптических свойств исходного белка. Это свидетельствует о чувствительности флуоресценции белка к аминокислотным заменам по данной позиции.

МЕТИЛ[5-(2-ТИЕНИЛ-КАРБОНИЛ)-1Н-БЕНЗИМИДАЗОЛ-2-ИЛ]КАРБАМАТ КАК КОАКТИВАТОР АПОПТОЗА В КЛЕТКАХ ЛИНИИ HELA, ГИПЕРЭКСПРЕССИРУЮЩИХ АНТИАПОПТОТИЧЕСКИЙ ОНКОГЕН bcl-2 Ломакин А.Ю. НИИ физико-химической биологии им. А.Н. Белозерского, МГУ им. М.В. Ломоносова Исследованиям по проблеме апоптоза, или программированной клеточной гибели (PCD), с течением времени отводится все больше места в современной молекулярной генетике и клеточной биологии. В ходе работ по данному направлению было установлено, что в регуляции PCD принимают участие гены семейства bcl-2. Показано, что гиперэкспрессия антиапоптотического белка Bcl-2 повышает Была жизнеспособность клеток и, в большинстве случаев, снижает опухолей, чувствительность опухолевых клеток к воздействию химиотерапевтических агентов. предпринята попытка проведения фармакотерапии характеризующихся повышенной экспрессией Bcl-2, с использованием цитокинов семейства факторов некроза опухолей (TNF). Однако широкое применение TNFs в клинической практике оказалось ограниченным, ввиду их низкой апоптогенной активности в отношении многих типов карцином. В настоящем исследовании нами была получена клеточная модель карциномы с гиперэкспрессией Bcl-2: клоны клеток карциномы шейки матки человека линии HeLa, вставку стабильно кДНК трансфецированные ДНК-конструкцией, несущей антиапоптотического онкогена bcl-2 (HeLa-bcl-2). На данной модели проводилась оценка эффективности стимуляции PCD при комбинированном воздействии лигандов семейства TNF и метил[5-(2-тиенил-карбонил)-1Н-бензимидазол-2-ил]карбамата – синтетического соединения, называемого в медико-биологической литературе «нокодазол». Нокодазол, специфически взаимодействует с тубулином микротрубочек и вызывает их быстрое разрушение в культивируемых клетках млекопитающих. Нокодазол работает как антимитоген и стимулирует гибель клеток по типу «митотической катастрофы», за счет разрушения веретена деления. В наших экспериментах ни лиганды семейства TNF, ни нокодазол не инициировали PCD в клетках HeLa-bcl-2. Однако их совместное воздействие приводило к 40-50%-ной гибели клеточной популяции путем PCD. Таким образом, нокодазол, традиционно используемый как антимитоген, может выступать и как коактиватор апоптоза в резистентных опухолевых клетках. Работа выполнена при поддержке Стипендиального Фонда Президента РФ (00-43).

ОПТИМИЗАЦИЯ УСЛОВИЙ ПОЛУЧЕНИЯ ФУНКЦИОНАЛЬНО АКТИВНОГО ИНТЕРЛЕЙКИНА-6 ЧЕЛОВЕКА Лыгина А.С., Спиридонова В.А. МГУ им. М.В. Ломоносова, Химический факультет Целью данной работы является оптимизация условий экспрессии, выделения и ренатурации рекомбинантного интерлейкина-6 человека (hIL-6), а так же изучение его стабильности. Ген рекомбинантного IL-6 человека (rhIL-6) был наработан методом PCR и заклонирован в плазмиду pET 28а+ по участкам рестрикции NdeI и XhoI. Использованная схема клонирования привела к синтезу рекомбинантного белка, содержащего 20 дополнительных аминокислотных остатков, включая 6 остатков гистидинов на N-конце, что позволило очистить белок методом аффинной хроматографии при использовании специального сорбента с иммобилизованными ионами Ni2+ (Ni-NTA-агароза). Выход белка составил 5 мг/л культуры клеток. Поскольку для выделения белка используются денатурирующие агенты, его функциональная активность определяется условиями ренатурации. В связи с этим большое внимание было уделено выбору условий ренатурации. Были использованы различные системы диализов для перехода от денатурирующего раствора с 6М гуанидин-гидрохлоридом к буферу, содержащему 10% глицерин. Эффективность ренатурации белка и его функциональную активность оценивали следующими методами: ЕLISA, проточной цитометрией, круговым дихроизмом (КД) и калориметрией. Сравнение спектров КД препаратов rhIL-6 отличающихся условиями ренатурации с тестом на функциональную активность (димеризация рецептора gp130 ) показало корреляцию между содержанием -спиралей и эффективностью воздействия на рецепторный аппарат клетки. Работа поддержана грантами РФФИ 05-04-49750, РФФИ-ГФЕН 04-04-39014.

ВЫБОР СИСТЕМЫ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ СВОБОДНОЙ ЛИНОЛЕВОЙ КИСЛОТЫ ПУТЕМ ФЕРМЕНТАТИВНОГО ГИДРОЛИЗА МАСЛА СОФЛОРА Майдина, Белова А.Б. МГУ им. М.В. Ломоносова, Химический факультет В последнее время линолевая кислота (цис,цис-октадекадиен-9-12-овая кислота) широко используется в качестве компонента лекарственных средств в терапии и при профилактике многих серьезных заболеваний, таких как метаболическтий синдром А, атеросклероз, дислипопротеидемия, ишемическая болезнь. В организме человека и животных линолевая кислота является предшественником арахидоновой кислоты. Известно, что из всех известных в настоящее время масличных культур наибольшее содержание остатков ненасыщенных кислот - линолевой и олеиновой наблюдается в масле софлора красильного (Carthamus tinctori) – 92%. Наиболее перспективным способом получения свободных жирных кислот из триглицеридов растительных масел представляется ферментативный гидролиз под действием липаз, в процессе которого не происходит окисления двойных связей жирных кислот. Методом рН-статирования были изучены параметры реакции ферментативного гидролиза масла софлора под действием липазы в микрогетерогенной системе водамасло-ПАВ, в качестве ПАВ стабильность эмульсии использовали дезоксихолат натрия. от условий ее Изучена Из в зависимости приготовления.

стехиометрии реакции следует, что продуктами гидролиза являются два остатка жирных кислот и моноглицерид. Были получены полные кинетические кривые накопления свободной жирной кислоты в данной системе. Изучено влияние содержания масла на положение равновесия в системе. Для подтверждения наличия в системе искомого продукта – свободной линолевой кислоты был подобран элюент (гексан:этилацетат:уксусная кислота) и проведен анализ методом ТСХ. Варьируя рН среды после проведения ферментативной реакции удалось выделить свободную жирную кислоту путем последовательных экстракций в органическую фазу, а также отделить продукт от ПАВ, в качестве органической фазы использовали гексан.

КОНСТРУИРОВАНИЕ ПРОИЗВОДНЫХ ИБУПРОФЕНА СО СНИЖЕННЫМ УРОВНЕМ УЛЬЦЕРОГЕННОГО ДЕЙСТВИЯ Мухаметов А.Д., 1Утяшева А.С., 1Хайруллина В.Р., 1Гарифуллина Г.Г., 1 Герчиков А.Я., 2Тюрина Л.А., 3Зарудий Ф.С.

Башкирский государственный университет, Уфа, Уфимский государственный нефтяной технический университет, Уфа, Институт органической химии уфимского научного центра РАН, Уфа К настоящему времени известно, что основной причиной возникновения ульцерогенного эффекта от применения нестероидных противовоспалительных препаратов (НПВП) является ингибирование активности циклооксигеназы-1 (ЦОГ1), представляющей собой ключевой фермент в метаболизме арахидоновой кислоты – предшественника простагландинов. В то же время механизм действия НПВП связан с ингибированием её структурного изомера – циклооксигеназы-2 (ЦОГ-2), экспрессия которого существенно увеличиваеся на фоне развития воспаления. С использованием методов теории распознавания образов, на базе компьютерной системы SARD-21 (Structure Activity Relationship & Design) сформирована математическая модель прогноза избирательности ингибирующего действия НПВП с уровнем распознавания 85 %. На базе ЦОГ-2 –селективных структурных признаков проведена модификация структуры неселективного препарата ибупрофена. Первоначально в рамках сформированной модели определена приоритетность мест замены в исходной структуре с целью выявления высокоульцерогенных фрагментов. В дальнейшем осуществлена поочередная замена соответствующих фрагментов структуры, в результате которой получено 8 потенциально высокоселективных ингибиторов ЦОГ-2. Кроме того, осуществлен выход на 1 структуру с известной избирательностью относительно ЦОГ-2, что доказывает высокую вероятность наличия у спрогнозированных структур заявленной активности. Все 8 полученных модификаций ибупрофена рекомендуются к синтезу и дальнейшим испытаниям как возможные перспективные представители НПВП. Работа выполнена при финансовой поддержке в рамках проекта «Развитие научного потенциала высшей школы» (2006-2008 годы).

ЭПИТОПНОЕ КАРТИРОВАНИЕ С-ДОМЕНА АНГИОТЕНЗИН-ПРЕВРАЩАЮЩЕГО ФЕРМЕНТА 1 1 Напёрова И.А., 1Кост О.А., 2Данилов С.М.

МГУ им. Ломоносова, Химический факультет Department of Anesthesiology, University of Illinois at Chicago Ангиотензин-превращающий фермент (АПФ) - ведущий фактор ренинангиотензиновой системы, Zn2+-зависимая пептидаза, состоящая из двух доменов, каждый из которых содержит каталитически активный центр. Одним из методов выявления функционально важных участков на поверхности белков является определение эпитопов связывания специфических антител. В данной работе мы провели эпитопное картирование поверхности С-домена АПФ человека с помощью панели из 8 моноклональных антител (mAb). Определено связывание mAb с С-доменом АПФ и выявлено антитело, ингибирующее активность фермента (4Е3). Определена конкуренция mAb за связывание с С-доменом АПФ методом иммуносорбции: три пары антител имеют сильную степень перекрывания эпитопов связывания (>75%), для одной пары характерна средняя степень перекрывания (около 50%) и для трех пар – слабая степень (менее 25%). На основе полученных данных построена диаграмма, показывающая конкурентный или неконкурентный характер связывания mAb с ферментом. Сравнение первичных аминокислотных последовательностей С-доменов АПФ человека и шимпанзе выявило три отличающихся аминокислотных остатка - 677, 730 и 1269. С АПФ шимпанзе не связывались антитела 1В8, 1Е10 и 4Е3, при этом mAb 1B8 не конкурировало за эпитоп связывания с двумя другими антителами. Оказалось, что остаток 1269 не является функционально важным и не влияет на связывание антител с С-доменом. С другой стороны, мутация 616 остатка в С-домене (находящегося рядом с 677 остатком в структуре белка) привела к полной отмене связывания mAb 1E10, но не mAb 1B8 и 4Е3. Таким образом, остаток 616 и 677 входит в эпитоп связывания mAb 1Е10, остаток 677 – в эпитоп связывания mAb 4Е3, остаток 730 – в эпитоп связывания mAb 1В8. Анализ всех полученных данных позволил нам очертить две области на поверхности С-домена АПФ, где находятся эпитопы связывания 7 антител.

ВЛИЯНИЕ ПОРФИРИНА И ЕГО МЕТАЛЛОКОМПЛЕКСОВ НА МОЛЕКУЛЯРНЫЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ ПОЛИМЕТИЛМЕТАКРИЛАТА Насретдинова Р.Н., Койфман О.И., Монаков Ю.Б. Башкирский Государственный университет, Ивановский государственный химико-технологический университет В настоящей работе исследованы молекулярные характеристики полиметилметакрилата, полученного в присутствии инициирующей системы: пероксид бензоила - 5,10,15,20-тетракис(3,5-ди-трет-бутилфенил)порфирина (I), а также его металлокомплексов. Полимеризация проводилась при температуре 600С и различных концентрациях порфирина. В качестве металлов в металлокомплексах выступили Ti (II), Zr (III) и Со(IV). Установлено, что значения молекулярных характеристик (среднечисленная и среднемассовая молекулярные массы) полимеров, полученных в присутствии порфиринов, снижаются по сравнению с полимерами, синтезированными в присутствии только перекиси бензоила. Наличие атомов металлов в комплексах порфиринов заметно усиливает влияние соединений на свойства полимера. Влияние комплексов II, III на молекулярные характеристики во многом сходно с безметальным порфирином. Специфичным является изменение молекулярных масс ПММА в присутствии кобальтпорфирина (IV). С увеличением его концентрации Рис. 1. Кривые ММР ПММА, значения молекулярных масс резко полученного на системе ПБ-IV при снижаются, а при концентрации 1*10-3 различных концентрациях IV. Tпм=600 моль/л выделить полимер не удалось. С. Также было установлено, что с изменением концентрации кобальтпорфирина меняют вид и кривые молекулярномассовых распределений (рис. 1). Если в отсутствии добавки и при концентрации кобальтпорфирина 0,25*10-3 моль/л кривые имеют мономодальный вид, то при концентрации 0,5*10-3 моль/л появляется бимодальное распределение. Вероятно, это связано с тем, что для комплексов кобальта характерно образование комплекса с радикалами роста, что ограничивает процесс кинетически, но дает возможность его осуществления в режиме "живых" цепей.

ИССЛЕДОВАНИЕ ДИНАМИКИ МИОЗИНА ПРИ ПОМОЩИ СПЕКТРОСКОПИИ ЭПР И МЕТОДА МОЛЕКУЛЯРНОЙ ДИНАМИКИ 1,2 1 Новиков В.В., 2Burr A.R., 2Thomas D.D., 2Несмелов Ю.Е.

Институт Молекулярной Биологии им. В.А.Энгельгардта РАН, Москва, Department of Biochemistry, Molecular Biology, and Biophysics, University of Minnesota, Minneapolis, Minnesota, USA В настоящее время активно предпринимаются попытки одновременного использования методов спиновых меток и молекулярной динамики (МД) для исследования структурных изменений глобулярных белков и других биологических макромолекул [1]. Целью настоящего исследования была разработка методики сравнения данных, полученных из спектроскопии ЭПР и из расчетов, проведенных при помощи метода молекулярной динамики. В качестве исследуемого вещества был использован мышечный миозин. Такие попытки уже имели место ранее (см., например, [2]), но достичь однозначно трактуемых результатов, хорошо согласующихся с экспериментом, не удавалось. Были рассчитаны траектории МД для трех основных состояний миозина во время взаимодействия с актином. Для расчета спектров ЭПР была использована следующая модель: быстрая переориентация спиновой метки относительно носителя приводит к частичному усреднению компонент магнитных тензоров, а медленное движение всей белковой глобулы описывается как изотропная броуновская диффузия в растворе. Исходя из траекторий МД, были вычислены угловые функции распределения, описывающие переориентацию спиновой метки. Эти данные затем использовались для частичного усреднения компонент магнитных тензоров, которые впоследствии применялись для расчета спектров ЭПР при помощи стандартного метода решения стохастического уравнения Лиувилля [3]. Симулированные спектры демонстрируют весьма хорошее согласование с экспериментом. Разработанный в этом исследовании метод может найти применение не только в исследовании актин-миозинового АТФ-азного цикла, но и для изучения механизмов функционирования любых других белков. Литература. 1. H.J. Steinhoff, W.L. Hubbel, Biophys. J., 1996, 71, 2201. 2. L.E. LaConte, V. Voelz, W. Nelson, M.Enz, D.D.Thomas, Biophys. J,, 2002, 83, 1854. 3. D.E. Budil, S. Lee, S. Saxena, J.H. Freed, J. Magn. Res., 1996, 120, АНТИМИКРОБНАЯ АКТИВНОСТЬ СУЛЬФАТОВ ЦЕЛЛЮЛОЗЫ 1 Тураев А.С., 1Нормахаматов Н.С., 2Мухаммедов И.М., 1Чуркина К.М.

Институт Биоорганической химии Академии Наук Республики Узбекистан Ташкентский Медицинская Академия Республики Узбекистан Поиск, создание и разработка антимикробных препаратов является актуальной проблемой в лечении различных инфекционных заболеваний. В этом отношении представляется важным сульфат производные полисахаридов и разработаны на их основе от высокоэффективные антибактериальные препараты, в том числе против массы и от расположения сульфатных групп в ВИЧ/СПИД – инфекции. Причем антибактериальная активность препаратов зависит молекулярной ангидроглюкопиранозном звене полисахарида. В данном сообщении обсуждаются результаты регулируемого синтеза сульфат производных целлюлозы и испытание антимикробной их активности. Проведены исследования по синтезу сульфатов целлюлозы с различной степенью замещения (СЗ), с регулируемым расположением сульфатных групп в ангидроглюкопиранозном звене и молекулярной массой (ММ). Исследована в условия in vitro антимикробная активность полученных образцов сульфатов целлюлозы и доказано, что сульфаты целлюлозы начиная, со СЗ 1.0 проявляет антимикробную активность по отношению к грамотрицательным и грамположительным микробам, причем активность препаратов скачкообразно усиливается при СЗ, больше чем 2,2. Чувствительность микроба Эшерихин ЛН резко увеличивается с увеличением СЗ. Зона задержки роста микробов Эшерихин ЛН при СЗ 2.1 равна 6.0 мм., тогда как при СЗ 2.7.равна 16 мм. Наблюдается, что сульфаты целлюлозы с определенными молекулярными характеристиками действуют, только на определенные типы микробов, тогда как она не действует на другие микробы. Монотонное увеличение антимикробной активности препаратов наблюдается с увеличением ММ образцов. Например, при характеристической вязкости сульфата целлюлозы (со СЗ 2.1) равной 1,6 в водном растворе зона задержки роста микробов эшерихии равна 15 мм, тогда как подобный препарат с характеристической вязкостью равной 2.6 задерживает рост на 22 мм. Проведенные исследования позволяют установить, определенные закономерности зависимости антимикробной активности сульфатов целлюлозы от молекулярных характеристик.

ИССЛЕДОВАНИЕ ИММУНОМОДУЛИРУЮЩЕЙ СПОСОБНОСТИ И СОРБЦИОННЫХ СВОЙСТВ ВОДОРОСЛЕВОЙ КЛЕТЧАТКИ Плечова О.Г. Архангельский государственный технический университет Водорослевая клетчатка бурых водорослей Laminaria digitata в настоящее время считается отходом альгинатного производства [1]. Проведенные ранее исследования показали, что данный препарат представляет собой эффективный сорбент по отношению к ионам тяжелых металлов [2]. С целью возможного расширения потребительских свойств водорослевой клетчатки были проведены исследования ее биологической активности и иммуномодулирующих свойств. Работа выполнена нами совместно с Институтом физиологии природных адаптаций УрО РАН. Исследование сорбционой способности водорослевой клетчатки по отношению к E. coli, St. aureus, Bac. subtilis и C. tropicalis, показало, что данный препарат снижает содержание микроорганизмов на 39,0 – 88,1%. Эффективность сорбции зависит от размера микроорганизмов и не зависит от уровня их патогенности. Изучение влияния водорослевой клетчатки на уровень патогенности микроорганизмов проводилось на модели золотистого стафилококка. Установлено, что инкубация стафилококков с водорослевой клетчаткой в 80% лишает микроорганизмы первой генерации способности к гемолизу, при этом происходит задержка коагуляции плазмы стафилококками в 60% опытов на 2 часа и в 30 % на 4 часа. Иммуномодулирующая способность водорослевой клетчатки оценивалась по способности снижать количество ЦИК в сыворотке крови. После контакта с сорбентом содержание ЦИК снижается на 47,9%. 1 Авакова О.Г. Изучение состава и физико-химических свойств препаратов, выделенных из бурых водорослей// Материалы международной конференции студентов и аспирантов по фундамент. наукам «Ломоносов – 2003». – Москва, 2003. – Т.1. – С. 99. 2 Авакова О.Г. Водорослевая клетчатка как эффективный энтеросорбент по отношению к соединениям тяжелых металлов // Материалы международной конференции студентов и аспирантов по фундамент. наукам «Ломоносов – 2005», Москва - 2005 – Т.1. – С. 53.

СИНТЕЗ КАТИОННЫХ ЛИПИДОВ ДЛЯ АДРЕСНОЙ ДОСТАВКИ ТЕРАПЕВТИЧЕСКИХ ГЕНОВ Поденок С.В., Гурьева О.А., Маслов М.А., Морозова Н.Г., Серебренникова Г.А. Московская государственная академия тонкой химической технологии им. М.В. Ломоносова, е-mail: httos.mitht@g23.relcom.ru Одним из методов доставки генетического материала в эукариотические клетки является липофекция, использующая в качестве транспортного вектора катионные липиды. На поверхности гепатоцитов экспонированы рецепторы, с помощью которых клетки селективно узнают, связывают и поглощают молекулы, содержащие галактозу, что позволяет направленно доставлять лекарственные препараты к клеткам печени путем создания липосом, в состав которых входят синтетические галактолипиды. К катионным липидам предъявляются следующие структурные требования: наличие гидрофобного домена для погружения в липосомальный бислой, наличие положительно заряженной аммониевой «головки» для связывания и компактизации молекулы ДНК, и присутствие углеводного адресного маркера для связывания с асиалогликопротеиновыми рецепторами гепатоцитов. Для придания углеводному звену пространственной подвижности использовался гексаметиленовый спейсер, гидрофобная составляющая присоединялась к катионной «головке» непосредственно или через спейсер. Получение катионных липидов включало три основных этапа: связывание гидрофобного звена (1,2-дитетрадецилглицерин или холестерин) с прокатионным центром, присоединение углеводных остатков (галактоза и лактоза) и формирование положительно заряженной аммониевой группы. Создание азотсодержащего домена проводили гидрофобной путем N-алкилирования 2-нитрофенилсульфониламиногексанола гликозилирование осуществляли компонентой. Последующее действием ацетобромгалактозы или ацетобромлактозы в присутствии карбоната кадмия, получая гликозиды с подавляющим содержанием -аномеров. После удаления вторичный ацетильных амин и 2-нитрофенилсульфонильной исчерпывающему защит, образующийся действием подвергали алкилированию метилиодида с образованием целевых катионных глицеролипидов. Структура всех соединений была подтверждена данными масс-спектрометрии. H- и С-ЯМР-спектроскопии и ИССЛЕДОВАНИЕ РОСТОРЕГУЛИРУЮЩЕЙ АКТИВНОСТИ ФУРИЛЗАМЕЩЕННЫХ МОЧЕВИН, ОКСИАЛКИРПИРРОЛИДИНОВ И ПРОИЗВОДНЫХ ХИНОЛИНА Пузаткина Г.А. ФГОУ ВПО «Саратовский ГАУ им.Н.И.Вавилова» С целью поиска новых биологически активных веществ (БАВ), обладающих росторегулирующей активностью нами были изучены три группы гетероциклических соединений, являющихся фурилзамещенными мочевинами: N-фурилбутилмочевина (1), N--фурилбутил-N'-метадихлорфенилмочевина (2), N-фурилдибутилмочевина (3), N--фурилбутил-N'-фенилмочевина (4), оксиалкилпирролидинами: гидротартрат цис-3-(5-метил-2-пирролидинил)пропанола1 (5), гидротартрат (+) (2R,5S) цис-3-(1,5-диметил-2-пирролидинил)пропанола-1 (6), гидротартрат (-) (5R,2S) цис-3-(1,5-диметил-2-пирролидинил) пропанола-1 (7), производными хинолина (8), а также производное кетона (9). Препараты применялись в виде водных растворов с концентрацией 10-3 % и 10-4 %. Контролем являлась дистиллированная вода. Стандартом служил промышленный стимулятор и иммуномодулятор роста растений - иммуноцитофит. Изучено влияние БАВ на энергию прорастания, массу проростков и активность фермента пероксидазы у яровой пшеницы. Эксперименты показали, что наибольшую биологическую активность проявили препараты 2 (ДХБФМ), 5 (цис-ОПП), 8 (ДФП). В полевых мелкоделяночных опытах зернового севооборота Саратовской и Волгоградской областей изучено влияние ДХБФМ, цис-ОПП и ДФП на показатели продуктивности (фотосинтетический потенциал, количество продуктивных стеблей, число и массу зерен в колосе, массу 1000 семян), а также урожайность яровой пшеницы сорта Альбидум 188 на фоне свинцового загрязнения. Следует отметить, что наибольший эффект нивелирования негативного действия свинца получен при использовании - комплексов препарата цис-ОПП с различными концентрациями - свинца (10 – 10 %): возросло количество продуктивных стеблей на 10-40%, масса зерна с колоса на 5-43%, масса 1000 зерен на 5-20%. Урожайность яровой пшеницы под влиянием цис-ОПП возросла, по сравнению с контролем, на 15-26%. Таким образом, исследования показали перспективность синтеза оксиалкилпирролидинов, обладающих росторегулирующей активностью.

СИНТЕЗ КАТИОННЫХ ГЛИЦЕРОЛИПИДОВ С ПРОСТОЙ ЭФИРНОЙ СВЯЗЬЮ Романова С.Г., Плявник Н.В., Серебренникова Г.А. Московская государственная академия тонкой химической технологии им. М.В. Ломоносова, е-mail: httos.mitht@g23.relcom.ru В последние годы большое внимание уделяется новому типу модифицированных глицеролипидов, содержащих короткоцепной заместитель в С(2) положении глицеринового скелета. Интерес к этому классу соединений обусловлен возможным появлением у них антибактериальных, противоопухолевых, противовирусных (анти-ВИЧ-1), ФАТ-антагонистических свойств. Одним из таких липидов, обладающих сильной противоопухолевой активностью, является Эдельфозин (Edelfosine, ЕТ-18-ОМе), который ингибирует рост и пролиферацию опухолевых клеток in vivo и in vitro. В связи с этим актуальной задачей является получение аналогов Эдельфозина, отличающихся определёнными структурными доменами, с целью поиска среди них потенциальных противоопухолевых агентов. В настоящей работе были получены катионные глицеролипды алкильного типа (аналоги ЕТ-18-ОМе), отличающиеся длиной спейсерной группы, соединяющей гидрофобную и гидрофильную части молекулы, и содержащие полярные «головки», представленные остатками N,N-диметилэтаноламина соединением и N,N,N’,N’-тетраметилэтилендиамина. Исходным для проведения синтеза служил rac-1,2-О-изопропилиденглицерин, алкилирование которого октадецилбромидом проводили в присутствии КОН с азеотропной отгонкой образующейся воды и, затем удаляли изопропилиденовую защиту действием НСl. Для избирательного введения метильного заместителя во второе положение глицерина осуществляли предварительное блокирование первичной гидроксильной группы с помощью тритильной защиты и последующее алкилирование MeI в присутствии КОН. Далее 1,2-диалкилглицерин, образующийся в ходе удаления тритильной защиты подвергали ацилированию хлорангидридами 5-бромвалериановой и 4-броммасляной кислот. Введение в молекулу липида катионной «головки» проводили путём кватернизации Структура N,N-диметилэтаноламина полученных и N,N,N’,N’–тетраметилэтилендиамина подтверждена данными полученными бромсодержащими триглицеридами в присутствии NaI. соединений Н-ЯМР-спектроскопии и масс-спектрометрии.

СОПОЛИМЕРИЗАЦИЯ N,N-ДИМЕТИЛ-N,N-ДИАЛЛИЛАММОНИЙ ХЛОРИДА С ВИНИЛОВЫМ ЭФИРОМ ЭТИЛЕНГЛИКОЛЯ Сагитова Д.Р., Садыкова Г.Р., Воробьева А.И. Институт органической химии Уфимского научного центра РАН, Уфимская государственная академия экономики и сервиса Сополимеры на основе N,N-диметил-N,N-диаллиламмоний хлорида (МААХ) относятся к числу соединений, интерес к которым неуклонно растет. Они находят широкое применение в качестве флокулянтов, в частности при очистке питьевой и технической воды химических, бумажных производств, в биотехнологии и т.д. В этом плане большой интерес представляют водорастворимые сополимеры МААХ с доступным мономером - виниловым эфиром этиленгликоля (ВЭЭГ), полимеры, на основе которого обладают выраженной дезинтоксикационной активностью. В данной работе представлены результаты исследований радикальной сополимеризации МААХ с ВЭЭГ в водной среде в области малых конверсий. В качестве инициатора использовали персульфат калия. Исследования показали, что реакция протекает с образованием сополимеров со статическим распределением сомономерных звеньев в полимерной цепи. Известное уравнение сополимеризации, используемое для расчета эффективных констант сополимеризации, оказалось приемлемым только при содержании МААХ в исходной мономерной смеси не более 60 мол.%. Полученные константы сополимеризации однозначно свидетельствуют о значительно большей активности МААХ в исследуемой системе. В результате кинетических исследований были определены порядки реакции по инициатору и мономеру. Энергия активации, рассчитанная из аррениусовской зависимости, составляет 97,4 кДж/моль. При увеличении концентрации ВЭЭГ в исходной мономерной смеси скорость реакции снижается. Методом ЯМР-спектроскопией установлено, что МААХ вступает в реакцию сополимеризации с участием обеих двойных связей с образованием пирролидиниевых структур:

+ N Cl CH3 CH3 + O OH m + N Cl CH3CH3 O OH n Изучены сополимеров.

вязкостные, термомеханические и термические свойства Работа выполнена при финансовой поддержки Фонда поддержки ведущих научных школ (грант НШ-728.2003.3).

ОЧИСТКА И ИНТЕРКАЛЯЦИЯ УГЛЕРОДНЫХ НАНОТРУБОК Селезнев А.В., Кирикова М.Н., Савилов С.В. МГУ им. М.В. Ломоносова Углеродные нанотрубки (УНТ) являются уникальными структурированными квазимолекулярными системами c характеристиками, позволяющими использовать их не только в различных областях химии, но и в качестве носителей для целевой доставки лекарственных средств в медицине и биологии. На сегодняшний день существует две основные проблемы при работе с УНТ. Первая – это невозможность воспроизводить синтез больших количеств многостенных УНТ (МУНТ) с заданными характеристиками, а вторая, являющаяся следствием первой, различие в методиках очистки и функционализации УНТ. Для очистки МУНТ от аморфных и частично структурированных примесей углерода используется термическое окисление кислородом воздуха. Методика очистки и условия реакции окисления разрабатываются по данным дифференциальнотермического анализа. Уникальный метод синтеза, используемый в лаборатории КГЭ [1], Для позволяет удаления получить частиц МУНТ большие количества и МУНТ с заданными характеристиками. металла-катализатора продукты синтеза одновременной обработке функционализации подвергают концентрированной азотной кислотой при повышенной температуре. Анализ препаратов УНТ проводят методами сканирующей и просвечивающей электронной микроскопии;

спектроскопии КР. В данной работе изучена иммобилизация модельных и физиологически активных органических соединений, таких как оксалат N-бензилморфолина, Nбензилморфолинамин и феназепам, в глобулы на поверхность нанотрубок, а также модификация поверхности МУНТ посредством присоединения к ним производных малоновой кислоты и образования диэтиламида. Продукты иммобилизации изучены методами ИК-, КР- и ЯМР спектроскопии. Работа выполнена при финансовой поддержке ФЦНТП 2005-РИ-112.0/001/056 и МК-4037.2005.3. Список литературы: 1. Савилов С.В., Зосимов Г.А., Лунин В.В. Способ получения и установка для синтеза УНТ с инкапсулированными частицами никеля и кобальта. Заявка на патент № 2005132267.

ФЕРМЕНТАТИВНЫЙ СИНТЕЗ СУБСТРАТОВ ЦИСТЕИНОВЫХ ПРОТЕИНАЗ СЕМЕЙСТВА ПАПАИНА 1 1 Семашко Т.А., 2Беляева А.В.

МГУ им. М.В. Ломоносова, Химический факультет, Институт элементоорганических соединений им. А.Н. Несмеянова РАН Цистеиновые протеиназы семейства папаина находятся в большинстве живых организмов, играют роль во многих биохимических процессах и важны для биотехнологии, медицины, пищевой технологии и сельского хозяйства. В связи с этим актуальной является разработка специфичных субстратов для их определения в присутствии других ферментов. На основании данных о специфичности цистеиновых протеиназ были синтезированы пептиды общей формулы A-Phe-X-B, где A – флуорогенная или N-защитная группа;

X – L-аминокислота, удовлетворяющая требованиям специфичности цистеиновых протеиназ семейства папаина;

B – флуорогенная или хромогенная группа. Получение пептидов включало в себя стадии химического и ферментативного синтеза. На последней стадии в качестве катализатора использовались нативные и иммобилизованные на криогеле поливинилового спирта препараты химотрипсина и субтилизина. Реакцию проводили по схеме: A-PheOMe + X-B = A-Phe-X-B + MeOH. На разных типах флуорогенных субстратов было показано, что они являются субстратами цистеиновых протеиназ семейства папаина. При добавлении папаина происходил гидролиз пептидов по реакции: A-Phe-X-B + H2O = A-Phe-X + B, и наблюдалось разгорание флуоресценции. Таким образом, комбинацией химического и ферментативного синтеза были получены пептиды, которые являются предполагаемыми субстратами цистеиновых протеиназ, а субстраты с разными флуорогенными группами были тестированы как субстраты для папаина.

ГИДРОЛИЗ КОЛЛАГЕНА МЕТАЛЛОПРОТЕИНАЗОЙ КАМЧАТСКОГО КРАБА PARALITHODES CAMTSCHATICA Семенова С.А. МГУ им. М.В. Ломоносова, Химический факультет Протеиназы, способные гидролизовать коллаген – фибриллярный белок соединительной ткани животных - находят широкое применение в медицине и биотехнологии. Изучение структуры и свойств этих ферментов представляет как теоретический, так и практический интерес. Гепатопанкреас камчатского краба P. camtschatica продуцирует сложную смесь протеаз, обладающую значительной коллагенолитической активностью. Изучение коллагенолитического действия протеиназ из этого источника необходимо для оптимизации в медицине. В работе с помощью электрофореза изучено действие металлопротеиназы камчатского краба на коллагены различных типов: коллаген быка II и III типа, коллаген крысы I типа, коллаген человека Х типа. Металлопротеиназа камчатского краба расщепляет как нативный коллаген (при 20°С), так и коллаген, частично денатурированный нагреванием (при 37°С). Активность по отношению к коллагену I типа сохраняется при пониженной температуре (5°С). Протеолиз хромогенного субстрата – коллагена, импрегнированного азокрасителем – происходит в диапазоне рН от 5,5 до 9,5;

рН-оптимум коллагенолитического действия равен 8. Работа поддержана грантом РФФИ № 05-04-49087. условий использования препаратов из гепатопанкреаса краба ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ПОЛИАНИЛИНОВЫХ ПЛЕНОК ДЛЯ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПУРИНОВ В ДНК Сергеева О.В. МГУ им. М.В. Ломоносова, Химический факультет Иммобилизация фрагментов ДНК на различных поверхностях может использоваться для создания биосенсоров при определении повреждений или замен азотистых оснований. Известно, что аденин и гуанин в ДНК способны к окислению и восстановлению [1, 2, 3]. При контакте пуринов с электропроводящим полианилином полимер претерпевает окислительно – восстановительные превращения, что позволяет использовать его для количественного определения гуаниновых оснований в олигонуклеотидах. Целью данной работы являлась проверка возможности использования полианилиновых пленок для детекции количества гуаниновых оснований в синтетических фрагментах ДНК. Исследования проводились потенциометрическим методом: пленка из полианилина являлась рабочим электродом *. Варьировали количество гуаниновых оснований в олигонуклеотидах одинаковой длины: 2 G, 4 G, 6 G, 7 G. Результаты показали, что адсорбция отрицательно заряженного олигонуклеотида на поверхности положительно заряженной пленки из полианилина приводит к изменению потенциала относительно Ag/AgCl электрода – сравнения. Адсорбция происходит в течение 30 мин и сопровождается падением потенциала. Установлено, что потенциометрический сигнал зависит от количества гуаниновых оснований в олигонуклеотиде. 1. A. A. Voityuk, K. Siriwong, N. Rosch. Charge transfer in DNA. Sensitivity of electronic couplings to conformational changes. Phys. Chem. Chem. Phys., 2001, V. 3, p. 5421-5425. 2. M. Bixon, B. Giese, S. Wessely, T. Langenbacher, M. E. Michel-Beyerle, J. Jortner. Long-range charge hopping in DNA. PNAS, 1999, V. 96, N 2, p. 11713– 11716. 3 B. Giese, M. Spichty, S. Wessely. Long-distance charge transport through DNA. An extended hopping model. Pure Appl. Chem., 2001, V. 73, N 3, p. 449–453. * пленки из полианилина предоставлены кафедрой ВМС, МГУ.

ИСПОЛЬЗОВАНИЕ МЕТИЛЕНОВОГО ГОЛУБОГО В КАЧЕСТВЕ МОДЕЛИ НИЗКОМОЛЕКУЛЯРНЫХ ТОКСИНОВ ДЛЯ ХАРАКТЕРИСТИКИ УГЛЕРОДНЫХ ЭНТЕРОСОРБЕНТОВ Сергей Е.В., Белорусский государственный университет Активированные угли (АУ) относятся к препаратам, традиционно используемым при эфферентных методах лечения, поскольку они способны за счет неспецифической энтеросорбции выводить из организма различные ксенобиотики. В качестве веществ, с помощью которых можно моделировать класс низкомолекулярных токсинов (креатинин, мочевая кислота, барбитураты и др.) и оценивать эффективность терапевтического действия сорбентов, фармакопеи рекомендуют метиленовый голубой (МГ) и йод. Однако объективность моделирования данными маркерами ограничена, поскольку, не учитывается агрегация в растворе, на поверхности адсорбента и вклад специфической сорбции. Это приводит к неоднозначности оценки активности энтеросорбентов разными исследователями и затрудняет их анализ и стандартизацию. Целью настоящей работы явилось изучение влияния адсорбционно-структурных характеристик различных углей, температуры, полимерного связующего на параметры процесса адсорбции МГ. Были исследованы измельченные образцы (волокнистый АУ марки АУТ-МИ, древесный АУ марки ОУ-А), и таблетки с традиционным крахмалом, а также новым водорастворимым производным целлюлозы (ВРПЦ), синтезированным в НИИ физикохимических проблем БГУ. Сопоставление порометрических характеристик, полученных из изотерм низкотемпературной сорбции азота, показало, что все исследованные образцы обладают значительным объемом сорбционного пространства (0,42-0,54 см3/г), содержат как микро-, так и мезопоры, причем в последних адсорбция идет по механизму объемного заполнения. Древесный уголь отличается от волокнистого более высокой мезопористостью. Модификация поверхности АУТ-МИ полимерами приводит к снижению всех адсорбционно-структурных характеристик, независимо от природы полимерного связующего. При этом время полусорбции (а, следовательно, и скорость адсорбции) для угля ОУ-А, по сравнению с АУТ-МИ, в четыре раза выше за счет большего количества транспортных мезопор. В то же время величина предельной адсорбции для этих образцов практически одинакова, что коррелирует с близкими значениями суммарного объема пор. Как оказалось, наличие в образцах АУТ-МИ полимеров ведет к изменению величины предельной адсорбции красителя. Для образца, модифицированного крахмалом, она на 24 % меньше, чем для исходного. Присутствие ВРПЦ, напротив, повышает ее значение на 20%. Спектрофотометрически было показано, что увеличение величины предельной адсорбции на угле, модифицированном ВРПЦ, связано со специфическим взаимодействием МГ с полимером. В присутствии ВРПЦ происходит метахроматическое изменение окраски раствора МГ. Гипсохромный сдвиг максимумов поглощения для моно- и димерной форм красителя (=670 нм и =615 нм, соответственно) в область =560 - 570 нм обусловлен влиянием полимера на степень ассоциации красителя. Наличие специфического взаимодействия полимера с красителем количественно подтверждается увеличением константы адсорбционного равновесия на порядок по сравнению с исходным углем. При росте температуры от 280 до 308 К наблюдается увеличение адсорбции красителя на модифицированном ВРПЦ угле на 26 % (с 1,11 до 1,50 ммоль/г), а объема адсорбционного слоя на 30 % (с 0,23 до 0,33 см3/г). Рассчитанные значения энергии активации позволяют связать это с диссоциацией красителя до мономерной формы. Даны рекомендации по правильному использованию МГ для оценки эффективности терапевтического действия углеродных энтеросорбентов.

ИЗУЧЕНИЕ ВЛИЯНИЯ -МЕРКАПТОЭТАНОЛА И ДИТИОТРЕИТОЛА НА АКТИВАЦИЮ БРОМЕЛАИНА Смирнова Ю.А. МГУ им. М.В. Ломоносова, Факультет Биоинженерии и Биоинформатики Получение информации о структурной организации компонентов мембранного протеома вируса гриппа важно для понимания механизмов его жизнедеятельности. Один из подходов при проведении структурных исследований белков, играющих ключевую роль в проникновении вируса в клетку, предполагает обработку вирусных частиц протеолитическими ферментами, в частности, цистеиновой протеиназой бромелаином. Для оптимизации процесса ферментативной обработки вирусных частиц нами было изучено влияние на гидролитическую активность и стабильность коммерческого препарата бромелаина двух часто используемых для восстановления SH- групп реагентов, -меркаптоэтанола и дитиотреитола (DTT). Было показано, что при инкубации бромелаина в системах, содержащих от 1 до 50 мМ меркаптоэтанола, наибольшая активация фермента достигается при концентрации меркаптоэтанола 1-5 мМ, причем наибольший эффект наблюдается за небольшое время инкубации (0,5-1 ч). При длительном выдерживании в системе с меркаптоэтанолом (16,5 ч) происходит потеря каталитических свойств препарата, которая оказалось усиливается значительно по мере менее увеличения эффективным содержания и меркаптоэтанола к в реакционной смеси. Использование высоких концентраций меркаптоэтанола приводило наибольшей инактивации фермента. При использовании в качестве восстанавливающего реагента дитиотреитола наибольшая активация фермента достигалась в системах, содержащих 1 мМ DTT, причем за 1 ч оказываемый эффект был выше, чем в случае использования меркаптоэтанола. Однако при длительной инкубации (16,5 ч) в присутствии DTT происходила инактивация препарата фермента. Подобранные условия были использованы для изучения кинетики срезания шипов гемагглютинина с поверхности вирионов и сопряженного с этим процессом ограниченного протеолиза матриксного М1 белка.

СИНТЕЗ БЛОК-СОПОЛИМЕРОВ 1-ТРИМЕТИЛСИЛИПРОПИНА-1 С 4-МЕТИЛПЕНТИНОМ-2 ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОЙ ПОЛИМЕРИЗАЦИЕЙ ПО МЕХАНИЗМУ “ЖИВЫХ” ЦЕПЕЙ Султанов Э.Ю. Институт Нефтехимического Синтеза им. А.В. Топчиева Ключевую роль в развитии новых технологий мембранного газо- и пароразделения играeт материал мембраны и эффективность процессов разделения во многом связана с созданием новых материалов. Мембранная технология могла бы сыграть решающую роль в разделении смесей содержащих органические компоненты. Привлекательным материалом для этого является представитель 1,2дизамещенных полиацетиленов – поли-1-триметилсилилпропин-1 (ПТМСП) [1], имеющий очень высокие коэффициенты проницаемости паров углеводородов и селективность их выделения из смесей с другими газами. Недостатком этого полимера является его растворимость в некоторых жидких углеводородах. Напротив, другой представитель этого класса поли-4-метилпентин-2 (ПМП) нерастворим в алифатических и ароматических углеводородах [2], но имеет недостаточно высокие параметры селективного газо- и паропереноса. В работе рассмотрен путь синтеза нового полимерного материала – блоксополимеров 4-метилпентина-2 (МП) с 1-триметилсилилпропином-1 (ТМСП), сочетающих положительные свойства двух гомополимеров. Впервые показана возможность получения блок-сополимеров МП с ТМСП по механизму “живых” цепей последовательной полимеризацией на каталитических системах NbCl5 и NbCl5/Et3SiH. В результате получены блок-сополимеры типа АВ с различным содержанием звеньев МП и ТМСП, а также установлено влияние состава и характера распределения мономерных звеньев на структуру, растворимость в углеводородах различных классов и коэффициенты проницаемости газов. Показано, что блоксополимеры МП с ТМСП при преимущественном содержании МП нерастворимы в углеводородах, что в сочетании с высокими коэффициентами проницаемости делает эти материалы перспективными для практического использования в процессах разделения смесей содержащих углеводороды. 1. Nagai K., Masuda T., Nakagawa T., Freeman B., Pinnau I., Prog. Polym. Sci., 2001, V. 26, P. 721-798. 2. Хотимский В.С., Матсон С.М., Литвинова Е.Г., Бондаренко Г.Н., Ребров А.И. Высокомол. Соед., Сер. А., 2003, Т. 45, №8, С. 1259-1267.

ВЛИЯНИЕ СОСТАВА СМЕСЕВОГО ЭМУЛЬГАТОРА НА ОСНОВЕ К-СОЛЕЙ ЖИРНЫХ КИСЛОТ НА УСТОЙЧИВОСТЬ ЛАТЕКСА СКС-85 Султанова Г.И., Рахматуллина А.П., Лиакумович А.Г., 1Головачева О.А. Казанский государственный технологический университет, ООО «Тольяттикаучук», Тольятти Известно, что при совместном использовании в качестве эмульгаторов калиевых солей синтетических жирных кислот и диспропорционированной канифоли достигаются максимальная степень превращения мономеров в процессе эмульсионной полимеризации и оптимальные свойства латексов [1]. Нами установлено, что эмульгатор на основе калиевой соли смеси стеариновой и олеиновой кислот состава 40:60% мас., соответственно, (К(Ст:Ол)) оказал синергическое влияние на кинетику эмульсионной полимеризации стирола с получением полистирола с более высокой молекулярной массой [2]. В данной работе исследовано влияние состава смесевого эмульгатора на основе К-солей стеариновой и олеиновой кислот на коллоидно-химические свойства бутадиен-стирольных латексов СКС-85. Установлено, что латекс, полученный в присутствии в качестве эмульгатора (К(Ст:Ол)), характеризуется более высокой механической устойчивостью и адсорбционной насыщенностью, а также имеет больший размер латексных частиц (табл.). Таблица. Коллоидно-химические свойства и характеристики латекса СКС-85 Поверхностн Адсорбцион Размер Механическая ое ная Эмульгатор латексных устойчивость, натяжение, насыщеннос частиц, А0 % коагулюма ть, % мН/м СЖК prifak 359,1 0,46 87,1 39,9 7908,(контрольный) Стеариновая :олеиновая, % мас. 100:0 351,3 0,42 84,2 35,5 40:60 387,1 0,38 72,4 39,2 0:100 372,1 0,39 51,2 38,1 80:20 351,4 0,75 20:80 353,9 0,55 1. Аверко-Антонович И.Ю. Синтетические латексы, М.: Альфа-М, 2005, С.116. 2. Султанова Г.И., Рахматуллина А.П., Ахмедьянова Р.А., Лиакумович А.Г. // Журнал прикладной химии, 2005, Т.78, № 8, 1353.

УХУДШЕНИЕ МЕТИЛИРОВАНИЯ ДНК, СОДЕРЖАЩЕЙ АДДУКТЫ (+)-ТРАНС- И (+)-ЦИС-АНТИ-БЕНЗО[А]ПИРЕН-DG, ДНК-МЕТИЛТРАНСФЕРАЗОЙ DNMT3А Тамьяр Е.Л., Баскунов В.Б., Громова Е.С. МГУ им. М.В. Ломоносова Метилирование ДНК является природной эпигенетической модификацией генома и играет важную роль в регуляции экспрессии генов. Метилирование ДНК осуществляется ДНК-метилтрансферазами (МТазами), использующими в качестве донора метильной группы S-аденозил-L-метионин. В клетках высших эукариот метилирование происходит по атому углерода С5 остатков цитозина в СG последовательностях. Полициклические ароматические углеводороды, к числу которых относится бензо[а]пирен (B[a]P), являются широко распространенными загрязнителями окружающей среды и канцерогенами. В организмах, подверженных воздействию B[a]P, отмечено образование множественных мутаций и возникновение рака. В процессе метаболизма B[a]P превращается в с реакционноспособные ДНК с +t +c B[a]P диолэпоксиды, образованием ковалентно связывающиеся преимущественным также образуется (+)-транс-анти-B[a]P-N -dG аддуктов (B );

некоторое количество (+)-цис-анти-B[a]P-N -dG аддуктов (B ). B[a]P-ДНК-аддукты могут вызывать нарушение взаимодействия ферментов клеточного аппарата, в том числе МТаз, с ДНК. Целью настоящей работы явилось изучение кинетики метилирования каталитическим доменом эукариотической МТазы Dnmt3a (Dnmt3a-CD) ДНК дуплексов, содержащих B+t и B+с аддукты в участке узнавания Dnmt3a и в прилегающих к нему нуклеотидных последовательностях. Показано, что рассматриваемые аддукты приводят к ухудшению метилирования ДНК МТазой Dnmt3a-CD по сравнению с немодифицированным субстратом. Степень ухудшения метилирования определяется стереоизомерией аддукта и его локализацией относительно метилируемого цитозина. Наибольшее ухудшение метилирования (4-5 раз) наблюдалось при локализации (+)-транс-аддуктов в участке узнавания и (+)цис-аддуктов в позиции, прилегающей к участку узнавания с 5’-конца. Наблюдаемые эффекты, по-видимому, объясняются структурными различиями ДНК, содержащих B+t и B+с аддукты. Работа поддержана грантами РФФИ 04-04-49488 и 05-04-49690 и Fogarty TW05689.

ИЗУЧЕНИЕ ВЛИЯНИЯ ПОЛИЭЛЕКТРОЛИТОВ НА АКТИВНОСТЬ ЛИПАЗЫ ИЗ ПОДЖЕЛУДОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ СВИНЬИ Тульская Е.В., Зайцев С.Ю. ФГОУ ВПО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии им. К.И. Скрябина» Изучение влияния различных факторов среды на активность липаз представляется важным и перспективным как в фундаментальном, так и прикладном аспектах. В первую очередь это касается их использования в медицине, пищевой и биотехнологической промышленновти. Важную роль в оптимизации биотехнологических производств играет поиск новых экономичных источников липаз (например липазы бактериального или грибкового происхождения), а также выбор оптимальных условий проведения реакции (температура, рН среды, присутствие неорганических солей, а также использование метода иммобилизации). Целью числе иммобилизации возможности является повышение использования устойчивости и легкости ферментов выделения к из денатурирующим агентам и придание им заданных технологических свойств, в том повторного реакционной смеси [1]. Цель нашей работы - исследовать изменение ферментативной активности липаз из поджелудочной железы свиньи в присутствии полиэлектролитов полистиролсульфоната хлорида (ПАМА). Активность липазы была измерена с помощью метода потенциометрического титрования в присутствии ПАМА и ПСС в соотношениях липаза : полимер 1:1, 1:10, 1:100 при рН 7,0 и 25С. Наивысшая ферментативная активнось липазы из поджелудочной железы свиньи наблюдалась при соотношении липаза : ПАМА 1:10 (94%). В случае ПСС при соотношениях 1:10 и 1:100 активность панкреатической липазы различалась незначительно и и была максимальной важны процессов для с (117 и 115% соответственно). биотехнологических Полученные результаты оптимизации использованием натрия (ПСС) и полидиаллилдиметиламмоний биохимических иммобилизованных ферментов. Список литературы: 1. Иммобилизованные ферменты / Березин И.В., Клячко Н.Л., Левашов А.В. и др. - М.: Высш. шк., 1987, 159 с.

РЕКОМБИНАНТНАЯ ФОРМИАТДЕГИДРОГЕНАЗА ИЗ ДРОЖЖЕЙ C. BOIDINII. ИССЛЕДОВАНИЕ ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИХ СВОЙСТВ Угланова С.В., Садыхов Э.Г., Тишков В.И. МГУ им. М.В. Ломоносова Одним из ферментов, который в настоящее время представляет большой теоретический и практический интерес, является NAD+-зависимая формиатдегидрогеназа (КФ 1.2.1.2., ФДГ). Этот фермент катализирует реакцию окисления формиат-иона до углекислого газа при сопряжённом восстановлении NAD+ до NADH и интересен тем, что является наилучшим для систем регенерации NADH, благодаря чему используется в промышленности в процессе ферментативного синтеза оптически активных соединений [1]. В нашей лаборатории активно изучались формиатдегидрогеназы из пекарских дрожжей, метилотрофных бактерий, растений - сои, A.thaliana. Целью данной работы было изучение свойств рекомбинантной ФДГ из дрожжей C. boidinii (CboФДГ). Ген ФДГ из C. boidinii ранее был клонирован в нашей лаборатории. Нами осуществлена экспрессия rCboФДГ в клетках E. coli и разработана методика ее очистки. Согласно данным электрофореза в полиакриламидном геле в присутствии SDS препараты фермента были не менее 95% степени чистоты. и изучены основные физико-химические свойства. Далее была изучена термостабильность rCboФДГ и определены кинетические параметры фермента. Анализ зависимости остаточной активности от времени при различных концентрациях фермента свидетельствует, что термоинактивация rCboФДГ протекает по мономолекулярному механизму. Из зависимости константы скорости инактивации от температуры были определены активационные параметры процесса термоденатурации. Изучено влияние рН и концентраций формиата и фосфата на процесс термоинактивации. Исследована зависимость величины Км по NAD+ от концентрации субстрата. Работа выполнена при финансовой поддержке гранта РФФИ 05-04-49073. 1. Тишков В. И., Попов В. О.\\ Биохимия, 2004, том 69, вып. 11, с. 1537 – КИНЕТИЧЕСКИЕ И МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ ГЕЛЕОБРАЗОВАНИЯ В СИСТЕМЕ ПОЛИАКРИЛОНИТРИЛ-ПРОПИЛЕНКАРБОНАТ Удра С.А, Мащенко В.И., Казарин Л.А., Герасимов В.И. МГУ им. М.В. Ломоносова, Химический факультет Хорошо известно, что одним из распространенных и эффективных путей создания надмолекулярной структуры полимеров является фазовое разделение в «бесструктурных» системах, таких как растворы или расплавы. В случае растворов важным этапом на пути от жидкого состояния к твердому является этап формирования гелей. Причем, именно структура гелей во многом определяет строение и свойства соответствующих полимерных материалов. В этой связи центральной является проблема получения возможно полной информации о строении на различных масштабных уровнях формирования исследуемых гелей. В предыдущей работе [1] кинетические характеристики фазовых разделений в системе полиакрилонитрил – пропиленкарбонат (ПАН-ПК) были измерены распространенным и достаточно простым методом точек мутности (метод Алексеева). Данный метод имеет ограниченные возможности, поскольку может быть использован только для исследования визуально мутных систем и, кроме того, этот метод не позволяет определить, особенно на начальных стадиях фазового разделения, находится ли полимерная фаза в виде отдельных частиц или в виде геля. В данной работе для установления размеров частиц полимерной фазы в широком диапазоне значений (от 0.05 мкм до 2 мкм) использован метод спектров мутности. Процесс гелеобразования исследовался с привлечением метода малоамплитудной динамической реометрии. Также проведен анализ морфологии сколов образцов сухих гелей, изображения которых получены методом электронной сканирующей микроскопии. Анализ экспериментальных данных показал, что комплексные исследования позволяют, с одной стороны, охарактеризовать одно и то же свойство гелей независимыми методами, повысив при этом надежность полученных результатов, с другой, - получить новую дополнительную информацию о свойствах исследуемых систем. Данная информация позволяет эффективно управлять свойствами получаемых на основе гелей функциональных материалов. Работа выполнена при финансовой поддержке РФФИ (проекты 05-03-32711, 05-03-08025). 1. В.И. Герасимов, Л.А. Казарин, А.В. Гопоненко, А.А. Миронова, В.И. Луховицкий, В.В. Поликарпов // ВМС, сер. А, т.40, №2, с.325-330, (1998) ВЛИЯНИЕ АМИНОКИСЛОТНЫХ ЗАМЕН НА ФУНКЦИОНИРОВАНИЕ ДНК-МЕТИЛТРАНСФЕРАЗЫ SsoII КАК РЕГУЛЯТОРНОГО БЕЛКА 1 1 Федотова Е.А., 2,3Проценко А.С.

МГУ им. М.В. Ломоносова, Химический факультет, Институт биохимии и физиологии микроорганизмов РАН, Пущинский государственный университет Фермент модификации II-го типа SsoII (M.SsoII) представляет собой бифункциональный белок, выступая с одной стороны как С5-цитозиновая ДНКметилтрансфераза, а с другой – как фактор транскрипции, связывающийся с «регуляторным» участком, локализованным в промоторной области генов системы рестрикции-модификации SsoII. Транскрипционная активность M.SsoII определяется наличием в ее составе протяженной N-концевой области (1-71 а.о.). Связываясь с промоторной областью, М.SsoII ингибирует свой собственный синтез, и активирует синтез эндонуклеазы рестрикции SsoII. В данной работе получено делеционное производное M.SsoII, представляющее собой N-концевую область белка. Показано, что такой полипептидный фрагмент практически не связывается с «регуляторным» участком и не влияет на экспрессию генов метилтрансферазы и эндонуклеазы рестрикции. Таким образом, наличие Сконцевой области, ответственной за метилирование, необходимо для поддержания регуляторной функции M.SsoII. Согласно данным компьютерного моделирования с «регуляторной» последовательностью в ДНК сближены остатки K21, K31, R35, R38, R39 и R42. Получены мутантные формы M.SsoII, в которых одна из этих аминокислот заменена на Ala. Мутантные формы M.SsoII R15А, K46А или K53А использовались в качестве контролей. Установлено, что остатки R35 и R38 играют ключевую роль в связывании субстрата. Вместе с тем, остатки K21, K31, К46 и К53, по-видимому, не вовлечены во взаимодействие с «регуляторным» участком. Мутантные формы M.SsoII – R15A, R39A и R42A – обладают повышенным сродством к 31-звенному ДНК-лиганду. Все мутантные формы M.SsoII за исключением M.SsoII(К21А) не способны влиять на экспрессию генов метилтрансферазы и эндонуклеазы рестрикции. Можно предположить, что практически любое изменение в структуре N-концевой области M.SsoII, даже не приводящее к понижению сродства белка к «регуляторному» участку, нарушает регуляцию транскрипции генов системы рестрикциимодификации SsoII. Работа поддержана грантом РФФИ № 04-04-48714.

СТРУКТУРИРОВАНИЕ ГИДРОФИЛЬНЫХ ПОЛИМЕРОВ В РАСТВОРЕ И МЕТОДЫ ИХ ИССЛЕДОВАНИЯ Филатова.А.В, Джурабаев Д.Т Институт биоорганической химии имени акад. Садыкова А.С. АН РУ,. Ташкент Гелевые системы обладают рядом важных практических аспектов, особое место среди них занимают гидрогели, предназначенные для медицины. Они перспективны в качестве материалов для получения полупроницаемых мембран, контактных линз, эндопротезирования, антитромбогенных покрытий. Исследовано химическое сшивание гуаровой камеди (ГК), карбоксиметилцеллюлозы(КМЦ) и сульфоцеллюлозы(СЦ) в растворе с солями поливалентных металлов Аl3+, Со3+, Mg+2, В4+.Установлено, что эти ионы посредством ионной связи с -О-SО3Н и -СООН группами проводят химическую сшивку, тогда как ионы В(ОН)4- сшивают полисахариды через ОН группу. Химическое сшивание полисахаридов доказано методами потенциометрических исследований и реологическими исследованиями, ИК-спектроскопией. При химической сшивке КМЦ и СЦ дополнительное присутствие в растворе многоосновных кислот типа: лимонная, янтарная, глутаровая кислоты даже в разбавленном мольном растворе ( 0,156 г/дл) приводят к резкому увеличению вязкости системы. Подобная картина наблюдается при химической сшивки ГК с борат ионами в присутствии многоосновных спиртов. Аналогичная реакция в случае СЦ не протекает. Это обусловлено влиянием химической природы функциональных групп в макромолекуле на ее химическое сшивание. Химическая сшивка КМЦ, с солями алюминия и его комплексными солями с многоосновными кислотами приводит к гелеобразным системам. Студни на основе Na-КМЦ по своим показателям (по вязкости, по прозрачности, по эластичности) полностью отвечают требованиям, необходимым для дальнейшей переработки их в гелевую композицию. Таким образом, впервые установлена возможность структурирования растворов Na-КМЦ, ГК иСЦ солями поливалентных металлов в присутствии многоосновных кислот, которое приводит к скачкообразному увеличению вязкости системы. Исследования в этом направление продолжаются.

КОНТРОЛИРУЕМАЯ РАДИКАЛЬНАЯ ГОМО- И СОПОЛИМЕРИЗАЦИЯ БУТИЛАКРИЛАТОВ С N-ВИНИЛПИРРОЛИДОНОМ В ПРИСУТСТВИИ АГЕНТОВ ОБРАТИМОЙ ПЕРЕДАЧИ ЦЕПИ Филиппов А.Н., Павлов А.С., Терпугова П.С., Гарина Е.С., Черникова Е.В., Голубев В.Б. МГУ им. М.В. Ломоносова, Химический факультет В последние десятилетия активно разрабатываются различные подходы к синтезу полимеров с заданными молекулярно-массовыми характеристиками и необходимой структурой макромолекул. Одним из наиболее эффективных методов получения полимеров с заданными свойствами является контролируемая радикальная полимеризация, в частности полимеризация по механизму обратимой реакции передачи цепи (ОПЦ). В настоящей работе впервые исследована контролируемая радикальная гомополимеризация н-бутилакрилата (нБА), трет-бутилакрилата (тБА) и Nвинилпирролидона (ВП), а также сополимеризация БА и тБА с ВП в присутствии дибензилтритиокарбоната (БТК) в качестве ОПЦ-агента. Показано, что полимеризация нБА и тБА является контролируемой, причем среднечисловая молекулярная масса полимеров растет линейно с ростом конверсии, а коэффициенты полидисперсности снижаются в ходе процесса и изменяются в интервале от 1,3 до 1,1. Также исследована кинетика полимеризации ВП в присутствии различных ОПЦ-агентов использовании (дитиобензоатов и тритиокарбонатов). она только Показано, что при использовании дитиобензоатов полимеризация ингибируется, в то время как при тритиокарбонатов замедляется. Кинетические закономерности полимеризации позволяют с высокой степени достоверности утверждать, что полимеризация ВП в присутствии исследованных ОПЦ-агентов, и в частности БТК, является контролируемой. Исследована влияние состава сомономерной смеси на кинетику сополимеризации нБА и тБА с ВП в присутствии БТК. Изучены молекулярномассовые характеристики продуктов сополимеризации. Определены константы сополимеризации для обеих пар сомономеров. Работа выполнена при финансовой поддержке Российского фонда фундаментальных исследований (код проекта 05-03-33069).

РАЗРАБОТКА ВЫСОКОЧУВСТВИТЕЛЬНОЙ МЕТОДИКИ ДЕТЕКЦИИ ОКСИДАЗЫ D-АМИНОКИСЛОТ Хороненкова С.В., Тишков В.И. МГУ им. М.В. Ломоносова FAD-зависимая оксидаза D-аминокислот (КФ 1.4.3.3, ДАО) катализирует окислительное дезаминирование D-аминокислот в -кетокислоты и представляет интерес с теоретической и практической точек зрения. Фермент играет важную роль как в метаболизме микроорганизмов, а также в утилизации млекопитающих. На практике фермент используется для эндогенных превращения D-аминокислот, регуляции работы нервной системы и процессов старения у цефалоспорина С в 7-аминоцефалоспорановую кислоту – исходное соединение для получения полусинтетических цефалоспоринов. Оксидаза D-аминокислот также применяется в биосенсорах. В настоящее время прикладная наука использует генноинженерные ферменты с улучшенными свойствами, которые получают с помощью различных методов мутагенеза. Для отбора мутантных форм с заданными свойствами необходимо провести анализ большого количества мутантных клонов (до 500 тыс.). Эта процедура невозможна без простой и высокочувствительной методики скрининга. Нами была разработана методика детекции оксидазы D-аминокислот по активности на мембранах. После оптимизации условий проведения эксперимента чувствительность метода составила менее 1 нг в пробе. для получения -кетокислот, неприродных L-аминокислот и ТЕОРЕТИЧЕСКИЙ ПРОГНОЗ И СИНТЕЗ ПЕПТИДНЫХ ИНГИБИТОРОВ ЭЛАСТАЗ Чемитова Л.М., Поликарпова В.И., Голубович В.П. Государственное научное учреждение «Институт биоорганической химии Национальной академии наук Беларуси» Методами теоретического конформационного анализа с моделированием белково-липидной среды были исследованы фрагмент 60-63 H2N-Thr -Asn -Val Val -OH белка Eglin C – естественного ингибитора эластаз, аналоги этого фрагмента 2 2 с модификацией по Asn X, где X – все аминокислоты «магического» набора, а 1 также с удалением Thr. 4 1 2 Установлено, что основную роль в формировании пространственной структуры играют гидрофобные остатки Val, Val, находящиеся в RB-конформации, которая стабильна за счет внутримолекулярных водородных связей с Thr. При наличии этих трех аминокислотных остатков в структуре природа аминокислотного остатка в положении 2 не играет роли. Конформационные свойства последовательности Val Val не менялись и при укорочении структуры путем удаления Thr, а при введении на N-конец остатка гидрофобной аминокислоты (например, Leu) стабильность этой последовательности усиливалась. Из данных расчета следует, что в составе комплекса с эластазой спиральная гидрофобная часть Val -Val, определяющая связывание с гидрофобным молекуле участком молекулы, в не дает и возможности образовывать трансформироваться ингибитора -структуру 3 4 4 1 3 1 3 продуктивный комплекс. По результатам этих исследований были спрогнозированы и синтезированы 12 новых пептидных структур, которые могут проявлять ингибиторное действие по отношению к протеолитическому ферменту эластазе: Thr-Arg-Val-Val-OH, Leu-ValVal-OMe, Thr-Lys-Val-Val-OH, Boc-Thr-Asn-Val-Val-OMe, Thr-Met-Val-Val-OH, BocThr-Met-Val-Val-OH, Thr-Pro-Val-Val-OH, Boc-Thr-Arg-Val-Val-OMe, Boc-Leu-ValVal-OMe, Boc-Thr-Pro-Val-Val-OH, Boc-Leu-Val-Val-OH, Boc--Ak-Leu-Val-Val-OMe. Синтез ингибиторов проводили постепенным наращиванием пептидной цепи по Nконцу. При этом использовали такие методы пептидной конденсации, как карбодиимидный, метод смешанных ангидридов, метод активированных эфиров.

КЛОНИРОВАНИЕ ГЕНА ЛАККАЗЫ ИЗ БАЗИДИОМИЦЕТА CERRENA MAXIMA Черкашин Е.А., Степанова Е.В., Королева О.В., Тишков В.И. МГУ им. М.В. Ломоносова, Химический факультет, Институт биохимии им. А.Н. Баха РАН Лакказы представляют собой семейство медьсодержащих оксидаз, которые были открыты более столетия назад в Японском лаковом дереве Rhus vernicife. На сегодняшний момент ферменты этого семейства обнаружены не только в растениях, но также в грибах, бактериях и насекомых. Лакказа обладает способностью катализировать окисление различных соединений, включая o,п-дифенолы, аминофенолы, полифенолы, полиамины, лигнин, некоторые неорганические ионы, арилдиамины с сопутствующим восстановлением молекулярного кислорода до воды. Кроме того, она способна осуществлять прямой биоэлектрокатализ, то есть прямой перенос электрона с электрода на активный центр. Лакказа из базидиомицета Cerrena maxima (КФ 1.14.18.1 CmaLAC) имеет довольно высокий окислительновосстановительный потенциал, что заметно отличает ее от лакказ полученных из других микроорганизмов. В Институте кристаллографии РАН были получены кристаллы и методом рентгеноструктурного анализа (РСА) пространственная структура фермента с разрешением 2,1. Нами было проведено клонирование гена CmaLAC и определена его последовательность. Клонирование проводилось в несколько этапов. Сначала, исходя из данных по аминокислотной последовательности CmaLAC, полученной из третичной структуры, а также последовательностей других гомологичных лакказ в базе GeneBank, были сконструированы и синтезированы праймеры на сигнальную последовательность, N- и C-концевые участки, а также консервативные участки аминокислотной последовательности, участвующие в связывании ионов меди. С помощью полимеразной цепной реакции были получены перекрывающиеся по последовательности фрагменты ДНК размером от 500 до 1000 п.н. Секвенирование этих фрагментов позволило определить всю нуклеотидную последовательность всего гена, кодирующего CmaLAC, включая интроны. Было показано, что имеются небольшие отличия от аминокислотной последовательности, полученной методом РСА.

ПЕПТИДНЫЕ ПРОИЗВОДНЫЕ МАКРОЛИДНОГО АНТИБИОТИКА 5-О-МИКАМИНОЗИЛТИЛОНОЛИДА Шишкина А.В., Коршунова Г.А. МГУ им. М.В. Ломоносова, Химический факультет Макролидные антибиотики тилозин (1), и 5-О-микаминозилтилонолид (ОМТ) (2) являются антибактериальными лекарственными средствами, действие которых основано на избирательном подавлении биосинтеза бактериального белка. Макролиды связываются с большой субчастицей рибосомы так, что лактонное кольцо антибиотика располагается поперек рибосомного туннеля, препятствуя росту полипептидной цепи. Пептидные производные рассматриваемых антибиотиков служат модельными соединениями для изучения топографии растущей пептидной цепи в рибосомном туннеле [1].

O O H3C 22 11 10 12 13 23 14 15 16 17CH 9 8 21CH H3C O H3C O OH 6 5 4 19 2' R= H3C N 3' HO H3C O R' = O CH CH 4' CH3 OH R" = H (1) H3C18 O R"O O 1' O 5' OR' CH R = R' = R" = H O (2) RO O OH R=H R' = R" = CH (3) Цель настоящей работы состоит в разработке методов синтеза пептидных производных ОМТ по С-23, содержащих пептидные последовательности различной конформации (-спирали или протяженные) для дальнейшего исследования их взаимодействий с рибосомой методом РСА. Осуществлен синтез ОМТ (2) из тилозина (1) в условиях кислого гидролиза (рН 2). Получено диацетильное производное ОМТ по положениям 2’ и 4’ (3). Проведены реакции конденсации с модельными пептидами по 23-гидроксильной группе в присутствии и в отсутствие защитных групп в положениях 2’ и 4’ с использованием различных активаторов. Синтезированные пептидные производные очищены колоночной хроматографией на силикагеле и высокоэффективной жидкостной хроматографией (ВЭЖХ). Индивидуальность полученных веществ доказана методами ТСХ и ВЭЖХ, структура доказана с помощью масс- и ЯМР-спектров. 1. Сумбатян Н.В., Коршунова Г.А., Богданов А.А. // Биохимия. 2003. Т. 68. С. 1436-1438.

ПОДХОДЫ К ИЗУЧЕНИЮ ФУНКЦИИ РИБОСОМНОГО БЕЛКА S7 БАКТЕРИЙ IN VIVO Шубернецкая О.С. МГУ им. М.В. Ломоносова, Химический факультет На биогенез рибосом расходуется половина ресурсов бактериальной клетки. Следовательно, любой агент, способный интерферировать с этим процессом, должен обладать сильным антибактериальным действием. Это определяет необходимость изучения самосборки рибосомы как in vitro, так и in vivo. Сборка малой субчастицы рибосомы начинается с взаимодействия белков S4 и S7 с 16S РНК. Белок S7 обеспечивает организацию основного 3’-концевого домена 16S РНК и связывание других белков при формировании «головы» субчастицы. Существует ряд подходов, позволяющих эффективно изучать самосборку рибосом in vitro, однако исследование этого процесса in vivo затруднительно. Цель нашей работы – найти подход к изучению участия белка S7 в сборке бактериальной рибосомы in vivo. Один из эффективных приемов, т.н. «нок-ин», предполагает экспрессию белка S7 с плазмиды и изучение возможности его встраивания в рибосомы клетки-хозяина. При этом необходим метод оценки как эффективности встраивания плазмидного белка в рибосомы, так и их функциональной активности. В первом подходе в нашей группе был использован полиморфизм длины Сконцевого домена белка S7 E. coli, что позволило отличить гибридные рибосомы от исходных по электрофоретической подвижности белка S (Karginov et al, FEBS Lett. 1998). Второй подход заключался во введении в С-концевой домен S7 участок узнавания протеинкиназой А, что позволяет метить белок радиоактивным фосфором из АТР (Fredrick, Noller, JMB 2000). В третьем подходе нами разработана схема получения химерного белка S7, слитого c зеленым флуоресцентным белком EGFP. Данный подход позволит определить долю гибридных рибосом, оценить их функциональную активность и визуализировать процесс сборки. Работа поддержана грантами РФФИ 06-04-49208, РФФИ-НВО 03-04-89001 (047.015.018), РФФИ-ГФЕН 04-04-39014.

ИНЖЕНЕРИЯ КОФЕРМЕНТНОЙ СПЕЦИФИЧНОСТИ РАСТИТЕЛЬНЫХ ФОРМИАТДЕГИДРОГЕНАЗ Ясный И.Е., Петров А.С., Садыхов Э.Г., Серов А.Е., Тишков В.И. МГУ им. М.В. Ломоносова, Химический факультет NAD+-зависимые формиатдегидрогеназы (ФДГ) из различных источников проявляют очень высокую специфичность к NAD+ по сравнению c NADP+. В нашей лаборатории гены NAD+-зависимых ФДГ из Arabidopsis thaliana (AraФДГ) и сои Glycine max (SoyФДГ) были клонированы в клетках E.coli, ферменты были выделены в гомогенном растворимом виде. Эти ферменты также проявили высокую специфичность к NAD+. В рамках изучения молекулярных основ распознавания коферментов активными центрами ферментов нами была поставлена задача получения растительных ФДГ, специфичных к NADP+. Методами множественного выравнивания может привести аминокислотных к изменению последовательностей специфичности и компьютерного Был проведен моделирования поверхности белков были определены остатки, замена которых фермента. направленный мутагенез генов ферментов и осуществлена экспрессия полученных генетических конструкций в клетках E.coli. Измерения кинетических параметров выделенных мутеинов показали, что они проявляют высокое сродство к NADP+. Таким образом, нам впервые удалось изменить коферментную специфичность ФДГ из растительных источников от NAD+ к NADP+, выделить полученные мутантные NADP+-зависимые белки в гомогенном растворимом виде и охарактеризовать их.

Отделение "Неорганическая химия" Подсекция – молодые ученые Состав жюри: Горбенко О.Ю. Глазунова Т.Ю. ст. науч. сотр., д.х.н. – председатель жюри мл. науч. сотр., к.х.н. – секретарь Ардашникова Е.И. доцент, к.х.н. Васильев Р.Б. Долгих В.А. Кнотько А.В. Миронов А.В. Штанов В.И. к.х.н. вед. науч. сотр., профессор, д.х.н. ст. науч. сотр., к.х.н. науч. сотр. вед. науч. сотр., к.х.н.

ПРОИЗВОДСТВО ФОСФОРНОГО УДОБРЕНИЯ ИЗ НЕОБОГАЩЕННОЙ РУДЫ ЦЕНТРАЛЬНЫХ КЫЗЫЛКУМОВ НЕТРАДИЦИОННЫМ СПОСОБОМ Асамов Д.Д., Мирзакулов Х.Ч., Бардин С.В. Ташкентский химико-технологический институт, Республика Узбекистан Фосфориты Центральных Кызылкумов резко отличаются от существующих перерабатываемых фосфоритов по минералогическому составу и имеют специфические свойства. Для их переработки необходимы новые методы и технологические приемы, которые позволили бы получать на их основе продукты с приемлемыми технико-экономическими и агрохимическими показателями. Разработан способ переработки низкосортных высококарбонизированных фосфоритов Центральных Кызылкумов, содержащих 16-18 % Р2О5, разложением их фосфорной и серной кислотой с получением фосфорных удобрений. Фосфатное сырье разлагается в твердофазном режиме в шнековом реакторесмесителе неупаренной экстракционной фосфорной кислотой с концентрацией 1922 % P2O5 и концентрированной серной кислотой. Экстракционная фосфорная кислота берется в таких количествах, чтобы влажность массы не превышала 20 %. Норма концентрированной серной кислоты подбирается таким образом, чтобы обеспечить образование гранулированного продукта. Суммарная норма кислот составляет 95-100 % из расчета на образование монокальцийфосфата. За счет сильной экзотермичности реакции происходит подсушивание продукта. рН 10 %ного раствора продукта превышает 2,5, что позволяет обходиться без стадия нейтрализации. Ведение процесса в твердофазном режиме позволяет избежать пенообразования при разложении низкосортных фосфоритов, что увеличивает производительность шнекового реактора. После этого полученный полусухой продукт направляется в барабан-сушилку. После сушки продукт поступает на классификацию. Мелкая фракция в качестве ретура направляется в шнековый реактор для поддержания определенной консистенции реакционной массы. Средняя фракция поступает в качестве готового продукта на упаковку и хранение. Крупная фракция направляется на дробление и классификацию. Полученный продукт содержит 18-21 % общего Р2О5, из которых 85-90 % фосфора находятся в усвояемой форме (содержание усвояемого Р2О5 составляет около 15-16 %). Таким образом, разработанная интенсивная нетрадиционная технология позволяет получить на основе необогащенного высококарбонзированного фосфатного сырья Центральных Кызылкумов не только простой суперфосфат, содержащий 10-11 % Р2О5, но и фосфорное удобрение, содержащее 18-21 % Р2О5.

СИНТЕЗ И РЕНТГЕНОСТРУКТУРНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ АЦЕТАТА И ОКСИНАТА ДИМЕТИЛЗОЛОТА(III) Бессонов А.А., Байдина И.А., Морозова Н.Б., Гельфонд Н.В., Игуменов И.К. Институт неорганической химии им. А.В. Николаева СО РАН, Новосибирск, bessonov@che.nsk.su Отсутствие информации о надежных методах синтеза, структурных данных и термических свойствах летучих комплексов золота(III) с органическими лигандами сдерживает их практическое применение для получения пленок золота методом химического осаждения из газовой фазы. В данной работе получены ацетат [(CH3)2AuOCOCH3]2 и 8-хинолинолат (CH3)2AuC9H6NO диметилзолота взаимодействием [(CH3)2AuI]2 с соответствующими органическими лигандами. Соединения очищены методом зонной сублимации (60°С, 6*10-2 торр и 80°С, 10-5 торр, соответственно). Комплексы растворимы во многих органических растворителях и стабильны на воздухе в течение длительного времени. Идентификация проведена с помощью ИК, УФ, спектрометрии. Данные рентгенофазового анализа однофазности полученных продуктов. Впервые проведена расшифровка кристаллической структуры ацетата и 8хинолинолата диметилзолота(III). Кристаллы исследуемых комплексов принадлежат к моноклинной сингонии. Основные кристаллографические данные: [(CH3)2AuOCOCH3]2: a = 12,214(5), b = 14,307(3), c = 7,6635(15), = 103,39(3)°, пр. гр. P2(1)/c, Z = 4, dвыч = 2,917 г/см3, R = 0,0261. (CH3)2AuC9H6NO: a = 8,7133(17), b = 27,875(6), c = 8,6688(17), = 102,76(3)°, пр. гр. P2(1)/c, Z = 8, dвыч = 2,401 г/cм3, R = 0,0909. Установлено, что ацетат диметилзолота имеет димерную структуру с расстоянием Au…Au 2,989. Оксинат диметилзолота является мономером. Каждый атом золота в комплексах имеет плоско-квадратную координацию с атомами окружения. Среднее значение длин связей Au–С равно 2,024. В структурах ацетата и оксината диметилзолота обнаружено слабое взаимодействие Au…Au (3,57 – 3,71 ) между отдельными структурными единицами.

Pages:     || 2 | 3 | 4 |



© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.