WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

   Добро пожаловать!

Pages:     | 1 |   ...   | 5 | 6 || 8 | 9 |   ...   | 15 |

«titul.qxp 19.10.2006 11:03 Page 1 Вступительное слово заместителя министра здравоохранения и социального развития РФ В.И. Стародубова..........................................vi Обращение президента ...»

-- [ Страница 7 ] --

Неконтролируемая диуретическая терапия (сочетается с гипонатри емией).

Гипокалиемический метаболический алкалоз.

Состояния после различных хирургических операций, если они сопро вождаются послеоперационным ацидозом, при котором содержание углекислого газа в плазме увеличивается и хлор переходит в эритро циты.

Диабетический ацидоз, который обычно сопровождается переходом хлора из крови в ткани.

Биохимические исследования Почечный диабет, вследствие большой потери хлора с мочой.

Заболевания надпочечников с нарушением образования минералокор тикоидов.

ГИПЕРХЛОРЕМИЯ Гиперхлоремии разделяют на абсолютные, развивающиеся при наруше нии выделительной функции почек, и относительные, связанные с обезво живанием организма и сгущением крови. При нефрозах, нефритах и осо бенно нефросклерозах наступает задержка солей в организме и развивается гиперхлоремия, из крови хлор переходит в экстрацеллюлярную жидкость, в клетки кожи, кости и другие ткани, вытесняя при этом другие ионы;

в значительных количествах хлор начинает выводиться с потом. Недоста точное поступление воды в организм, диарея, рвота, потеря жидкостей и солей при ожогах могут привести к обезвоживанию организма и разви тию относительной гиперхлоремии. При рвоте очень быстро относитель ная хлоремия переходит в гипохлоремию вследствие потери хлора орга низмом. Эти потери могут доходить до двух третей общего его содержания в организме.

Гиперхлоремия может иметь место при декомпенсации сердечно-сосу дистой системы, при развитии отёков. Поступление с пищей больших ко личеств хлорида натрия также может привести к гиперхлоремии.

Кроме того, гиперхлоремия возможна при алкалозах, сопровождающихся снижением содержания углекислого газа в крови, что приводит к выходу хлора из эритроцитов в плазму, а также при рассасывании отёков, экссу датов и транссудатов.

Хлориды в моче Количество хлора в моче зависит от его содержания в пище. У груд ных детей с мочой выводится очень мало хлора, так как его содержание в грудном молоке низкое. Переход к смешанному питанию ведёт к зна чительному увеличению содержания хлора в моче. Его количество в моче увеличивается в соответствии со всё возрастающим употреблением по варенной соли. Приблизительно 90% хлоридов пищи выводится с мочой и лишь 6% — с потом. Референтные величины выделяемого с мочой хлора приведены в табл. 4-40.

Таблица 4-40. Референтные величины выделяемого с мочой хлора Возраст Количество хлора, мэкв/сут (ммоль/сут) Дети до 1 года 2- Дети 15- Впоследствии 110- Гипохлорурия развивается вследствие выделения повышенного количес тва хлора с потом, рвотными массами и через кишечник. Гипохлорурия, как правило, сопровождает гипохлоремию при диарее и рвоте различной этиологии, при лихорадочных заболеваниях. При пневмониях в результате так называемой «сухой» задержки хлора (вследствие отдачи хлора тканям) его содержание в моче снижается. Сердечно-сосудистая декомпенсация с 288 Глава развитием отёков, воспалительные выпоты, образование отёков при забо леваниях почек сопровождаются «влажной» задержкой хлора в организме (вследствие перехода хлора в экстрацеллюлярную жидкость), при этом так же возникает гипохлорурия.

Нарушение процессов эндокринной регуляции водно-электролитного обмена с повышением функции коры надпочечников и гипофиза может сопровождаться гипохлорурией с явлениями гиперхлоремии в результате обратного всасывания хлора в почечных канальцах.

Гиперхлорурия как физиологическое явление возможна при значитель ном введении в организм хлорида натрия. Как патологическое явление гиперхлорурия возникает реже и сопровождает процессы рассасывания отёков, экссудатов и транссудатов, при этом она возникает одновременно с гиперхлоремией. Период выздоровления при инфекционных заболевани ях, пневмонии сопровождается отдачей хлоридов и гиперхлорурией.

Между содержанием хлора в крови и его выведением с мочой не сущес твует прямой зависимости.

Определение содержания хлора в моче имеет важное диагностическое значение у реанимационных больных в тяжёлом состоянии. Особое значе ние это исследование имеет для установления причин развития метаболи ческого алкалоза и возможности его коррекции введением хлора. Различа ют следующие виды метаболического алкалоза.

Хлорид-чувствительный алкалоз с концентрацией хлоридов в моче ниже 10 ммоль/л — наиболее распространённая форма метаболичес кого алкалоза, обычно он сопровождается снижением объёма внекле точной жидкости. Может возникнуть при потерях хлора через ЖКТ (рвота, аспирация содержимого желудка, ворсинчатая аденома и врож дённая хлоридорея) или при использовании диуретиков (из-за сопутс твующего снижения объёма внеклеточной жидкости и гипокалиемии).

Следует всегда учитывать, что введение большой дозы диуретиков спо собно даже повысить уровень хлора в моче;

об этом надо помнить при оценке метаболического алкалоза и результатов определения хлора в моче. Постгиперкапнические состояния, обусловленные устойчивой почечной задержкой бикарбоната, избыточное введение бикарбоната или неоднократные переливания крови (перегрузка цитратом) также могут вызвать чувствительный к хлору метаболический алкалоз.

Хлорид-резистентный алкалоз с содержанием хлора в моче выше 20 ммоль/л наблюдают гораздо реже. За исключением случаев синд рома Барттера и недостаточности магния в организме, при алкалозе этого типа обычно наблюдается артериальная гипертензия, а объём внеклеточной жидкости не снижен. Другие причины алкалоза данно го типа — первичный альдостеронизм, синдром Кушинга, стеноз по чечной артерии, синдром Лиддла, гиперкальциемия и тяжёлая гипо калиемия.

Медь в сыворотке крови Медь — один из важнейших незаменимых микроэлементов, необходи мых для жизнедеятельности человека. В организме взрослого человека со держится 1,57-3,14 ммоль меди, причём половина этого количества прихо дится на мышцы и кости, 10% — на ткани печени. Суточная потребность Биохимические исследования человека в меди составляет 1-2 мг. Ключевую роль в обмене меди играет печень. Референтные величины концентрации меди в сыворотке крови представлены в табл. 4-41 [Тиц У., 1997].

Таблица 4-41. Референтные величины концентрации меди в сыворотке крови Концентрация меди в сыворотке урови Возраст мг/дл мкмоль/л Дети: 20-70 3,14-10, до 6 мес до 6 лет 90-190 14,3-29, до 12 лет 80-160 12,56-25, Взрослые:

мужчины 70-140 10,99-21, женщины 80-155 12,56-24, в конце беременности 118-302 18,53-47, Большая часть поступающей в организм меди выделяется с калом, вы деление с мочой весьма незначительно. Медь участвует в биохимических процессах как составная часть электронпереносящих белков, осуществля ющих реакции окисления субстратов молекулярным кислородом. Ряд фер ментов содержат до 4 ионов меди и более.

Важнейшую роль в обмене меди играет церулоплазмин — мультифункци ональный белок, обладающий активностью ферроксидазы, аминоксидазы и, частично, супероксиддисмутазы. Медь в сыворотке крови присутствует исключительно в форме, связанной с церулоплазмином (95%) и альбуми ном (5%).

Медь обладает выраженным противовоспалительным свойством, смягча ет проявление аутоиммунных заболеваний, таких, например, как ревмато идный артрит. Дефицит меди отражается и на липидном составе плазмы крови: повышается содержание ХС, ТГ и фосфолипидов за счёт угнете ния липопротеинлипазы. Кроме этого, медь входит в состав апо-B и не обходима для его перевода в растворимую форму, дефицит меди вызывает структурные изменения апо-B и тем самым затрудняет его связывание ре цепторным белком. Недостаточность меди проявляется различными нару шениями метаболизма, которые представлены в табл. 4-42 и 4-43. Избыток меди в организме приводит к дефициту цинка и молибдена.

Недостаточное поступление меди в организм детей лежит в основе 3 кли нических синдромов.

Анемия (у грудных детей при их питании в основном сухим или свежим коровьим молоком), анорексия и низкое содержание меди в крови.

Нейтропения, хроническая или перемежающаяся диарея, сниженные концентрация меди и активность церулоплазмина в крови, нарушение кальцификации костей, анемия (вследствие нарушения использования железа ферритина).

Синдром Менкеса (результат генетически обусловленного дефекта вса сывания меди).

290 Глава Таблица 4-42. Нарушения метаболизма при дефиците меди Патология Метаболический дефект Недостаточность фермента Нарушение синтеза Ахромотрихия Тирозиназа меланина Нарушения Нарушение образования Аминооксидаза формирования «сшивок» коллагеновых соединительной ткани сердечно-сосудистой и эластических волокон (лизилоксидаза) системы, скелета, коллагена и эластина Поражение ЦНС Гипоплазия миелина Цитохром-С-оксидаза Поражение ЦНС Нарушение синтеза Дофамин--гидроксилаза катехоламинов Таблица 4-43. Важнейшие заболевания, синдромы, признаки дефицита и избытка меди Дефицит меди в организме Избыток меди в организме Наследственные формы гипо- и дискупреоза:

Неспецифическая гиперкупре болезнь Менкеса (болезнь «курчавых волос» мия при острых и хронических с тяжёлым поражением ЦНС);

синдром воспалительных заболеваниях, Марфана (аномалии скелета, эластических ревматизме, бронхиальной и коллагеновых волокон, аневризмы аорты, астме, заболеваниях почек, арахнодактилия и др.);

болезнь Уилсона- печени, ИМ и некоторых Коновалова (поражение головного мозга, злокачественных новообразо крупноузловой цирроз печени, гиперкупру- ваниях, заболеваниях крови:

рия);

синдром Элерса-Данло (наследственная лейкозы, лимфогранулематоз, мезенхимальная дисплазия, связанная гемохроматоз, большая и малая с дефицитом лизилоксидазы).

талассемия, мегалобластная и апластическая анемия Первичная (идиопатическая) эмфизема лёгких Профессиональный гипер Медьдефицитные коллагено- и эластопатии купреоз (медная лихорадка, (аортопатии, артериопатии, аневризмы) пневмокониоз) Медьдефицитные заболевания скелета Отравление медьсодержащими и суставов препаратами Медьдефицитные анемии алиментарного Гемодиализный гиперкупреоз происхождения Применение пероральных Медьдефицитные состояния при полном контрацептивов, эстрогенов парантеральном питании (анемия) Медь в моче Референтные величины выделения меди с мочой: мужчины — 2-80 мкг/сут (0,03-1,26 мкмоль/сут);

женщины — 3-35 мкг/сут (0,047-0,55 мкмоль/сут).

Максимальное количество меди (65-90%), поступившей в организм с пищей, выделяется с жёлчью в просвет кишечника, 3-10% выводится поч ками и небольшая часть удаляется с клетками слизистой оболочки ки шечника.

Исследование содержания меди в моче используют главным образом для диагностики и оценки эффективности лечения болезни Уилсона-Конова лова. Экскреция меди с мочой при болезни Уилсона-Коновалова обычно выше 100 мкг/сут (1,57 мкмоль/сут), но может быть ниже у молодых сибсов Биохимические исследования до развития симптомов заболевания. Эффективное лечение сопровождает ся снижением выделения меди с мочой.

Повышенная экскреция меди с мочой может быть выявлена при хрони ческом активном гепатите, биллиарном циррозе, ревматоидном артрите, нефротическом синдроме (потери меди и церулоплазмина, лечении хелат ными препаратами).

Снижение содержания меди в моче выявляют у пациентов с недостаточ ностью белкового питания.

Йод в моче Референтные величины экскреции йода с мочой — 100-500 мкг/л.

Йод — микроэлемент, присутствующий в природе в следовых количес твах. В питьевой воде содержание йода незначительно, поэтому основное количество этого микроэлемента поступает в организм человека с пищей.

Наиболее высока концентрация йода в морепродуктах (приблизительно 800 мкг/кг);

особенно богаты йодом морские водоросли. Очень много йода в рыбьем жире. Обычно источниками йода в организме являются молоко, яйца, мясо и зерновые. Необходимое суточное потребление йода зависит от возраста человека, составляя 40 мкг/сут у грудных детей и 150 мкг/сут для взрослых. Во время беременности потребность в йоде возрастает при мерно до 200 мкг/сут.

Йод, поступивший с пищей в организм в виде йодида, всасывается в ЖКТ. Из крови он легко проникает в различные органы и ткани, частич но депонируясь в липидах. Наиболее значительная часть йода (до 10-20%) избирательно поглощается щитовидной железой. Выделение йода из орга низма осуществляется главным образом почками (до 70-90%).

После поступления в кровь неорганический йод активно захватывается щитовидной железой, где его концентрация в 30-40 раз превышает тако вую в крови. Концентрированный в щитовидной железе йодид окисляется в молекулярный йод, который быстро связывается с остатками тиреогло булина, образуя монойодтирозин и дийодтирозин (фаза органификации йода). В фазу конденсации происходит объединение двух дийодтирозинов с образованием T4 или одного моно- и одного дийодтирозина с образова нием T3. Главный фактор, регулирующий синтез тиреоидных гормонов, — тиреотропный гормон (ТТГ). Он оказывает влияние на все стадии метабо лизма йода: усиливает способность щитовидной железы концентрировать йод из крови, ускоряет йодирование и образование гормонов из молекулы тиреоглобулина, изменяет места йодирования в тиреоглобулине с преиму щественным образованием T3 и активирует цистеиновые протеиназы и ка тепсины, которые расщепляют тиреоглобулин.

При дефиците йода в организме продукция тиреоидных гормонов ста новится недостаточной, что имеет множество последствий, объединяемых термином «йоддефицитные состояния». Такие последствия включают зоб, гипотиреоз, задержку развития, нарушение репродукции и др.

До 90% принятого внутрь йода появляется в моче, поэтому экскреция йода с мочой коррелирует с йодной обеспеченностью. Концентрация йода в моче может служить показателем, адекватно отражающим его потреб ление. Многочисленные исследования показали, что концентрация йода в разовой порции мочи хорошо коррелирует с уровнем йода в суточной 292 Глава моче. Тем не менее уровни йода у отдельных лиц меняются ежедневно и даже в течение дня и поэтому не могут отражать обеспеченность йодом популяции в целом. Метод определения концентрации йода в моче при годен только для эпидемиологических исследований. Минимальное коли чество проб должно быть не менее 60. В связи с очень неравномерным распределением уровня йода в моче обследуемых лучше оценивать медиану экскреции йода с мочой, а не среднее значение. Если медиана превышает 100 мкг/л, то в данной популяции дефицит йода отсутствует. Междуна родный комитет по борьбе с йоддефицитными состояниями и ВОЗ выде ляют три степени тяжести йоддефицита по медиане уровня йода в моче:

99-55 мкг/л — лёгкая;

49-20 мкг/л — умеренная;

менее 20 мкг/л — тяжёлая.

Когда в организм человека с нормальной функцией щитовидной железы поступает избыточное количество йода, синтез тиреоидных гормонов тран зиторно уменьшается (примерно в течение 48 ч). Острое ингибирующее влияние йода на синтез тиреоидных гормонов носит название эффекта Вольфа-Чайкова и связано с возрастанием концентрации йода в самой щитовидной железе. Затем, несмотря на продолжающийся приём больших количеств йода, синтез тиреоидных гормонов восстанавливается, обеспе чивая эутиреоидное состояние (вследствие уменьшения захвата железой йодида). Несмотря на существование такого адаптивного механизма, избы ток йода может вызвать у восприимчивых лиц гипотиреоз с зобом или без него, а также гипертиреоз.

Показатели метаболизма железа Железо в сыворотке крови Общее содержание железа в организме человека составляет приблизи тельно 4,2 г. Примерно 75-80% общего количества железа входит в состав Hb, 20-25% железа являются резервными, 5-10% входят в состав миогло бина, 1% содержится в дыхательных ферментах, катализирующих процессы дыхания в клетках и тканях. Референтные величины концентрации железа в сыворотке крови приведены в табл. 4-44 [Тиц У., 1997]. Железо осущест вляет свою биологическую функцию, главным образом, в составе других биологически активных соединений, преимущественно ферментов. Желе зосодержащие ферменты выполняют четыре основные функции:

транспорт электронов (цитохромы, железосеропротеиды);

транспорт и депонирование кислорода (Hb, миоглобин);

участие в формировании активных центров окислительно-восстанови тельных ферментов (оксидазы, гидроксилазы, СОД и др.);

транспорт и депонирование железа (трансферрин, гемосидерин, фер ритин).

Гомеостаз железа в организме обеспечивается, в первую очередь, регу ляцией его всасывания в связи с ограниченной способностью организма к выделению этого элемента.

Существует выраженная обратная зависимость между обеспеченностью организма человека железом и его всасыванием в пищеварительном тракте.

Всасывание железа зависит от:

возраста, обеспеченности организма железом;

Биохимические исследования состояния ЖКТ;

количества и химических форм поступающего железа;

количества и форм прочих компонентов пищи.

Таблица 4-44. Референтные величины концентрации железа в сыворотке крови Концентрация железа в сыворотке крови Возраст мкг/дл мкмоль/л Новорождённые 100-250 17,90-44, Дети до 2 лет 40-100 7,16-17, Дети 50-120 8,95-21, Взрослые:

мужчины 65-175 11,6-31, женщины 50-170 9,0-30, Для оптимального всасывания железа необходима нормальная секреция желудочного сока. Приём соляной кислоты способствует усвоению желе за при ахлоргидрии. Аскорбиновая кислота, восстанавливающая железо и образующая с ним хелатные комплексы, повышает доступность этого элемента, так же как и другие органические кислоты. Другим компонен том пищи, улучшающим всасывание железа, является «фактор животного белка». Улучшают всасывание железа простые углеводы: лактоза, фруктоза, сорбит, а также такие аминокислоты, как гистидин, лизин, цистеин, обра зующие с железом легко всасываемые хелаты. Всасывание железа снижают такие напитки, как кофе и чай, полифенольные соединения которых про чно связывают этот элемент. Поэтому чай применяют для профилактики повышенного усвоения железа у больных талассемией. Большое влияние на усвоение железа оказывают различные заболевания. Оно усиливается при недостаточности железа, при анемиях (гемолитической, апластичес кой, пернициозной), гиповитаминозе В6 и гемохроматозе, что объясняется усилением эритропоэза, истощением запасов железа и гипоксией.

Современные представления о всасывании железа в кишечнике отводят центральную роль двум видам трансферрина — мукозному и плазменному.

Мукозный апотрансферрин секретируется энтероцитами в просвет кишеч ника, где он соединяется с железом, после чего проникает в энтероцит.

В последнем он освобождается от железа, после чего вступает в новый цикл. Мукозный трансферрин образуется не в энтероцитах, а в печени, из которой этот белок поступает в кишечник с жёлчью. На базальной сторо не энтероцита мукозный трансферрин отдаёт железо своему плазменному аналогу. В цитозоле энтероцита некоторое количество железа включается в ферритин, большая часть его теряется при слущивании клеток слизистой оболочки, происходящем каждые 3-4 дня, и лишь небольшая часть перехо дит в плазму крови. Перед включением в ферритин или трансферрин двух валентное железо превращается в трёхвалентное. Наиболее интенсивное всасывание железа происходит в проксимальных отделах тонкой кишки (в двенадцатиперстной и тощей). Плазменный трансферрин доставляет же лезо к тканям, имеющим специфические рецепторы. Включению железа в клетку предшествует связывание трансферрина специфическими мем бранными рецепторами, при утрате которых, например у зрелых эрит 294 Глава роцитов, клетка теряет способность поглощать этот элемент. Количест во железа, поступающего в клетку, прямо пропорционально количеству мембранных рецепторов. В клетке происходит высвобождение железа из трансферрина. Затем плазменный апотрансферрин возвращается в цирку ляцию. Повышение потребности клеток в железе при их быстром росте или синтезе Hb ведёт к индукции биосинтеза рецепторов трансферрина, и напротив, при повышении запасов железа в клетке количество рецепто ров на её поверхности снижается. Железо, высвободившееся из трансфер рина внутри клетки, связывается с ферритином, который доставляет желе зо в митохондрии, где оно включается в состав гема и других соединений.

В организме человека происходит постоянное перераспределение железа.

В количественном отношении наибольшее значение имеет метаболический цикл: плазма красный костный мозг эритроциты плазма. Кроме того, функционируют циклы: плазма ферритин, гемосидерин плазма и плазма миоглобин, железосодержащие ферменты плазма. Все эти три цикла связаны между собой через железо плазмы (трансферрин), ко торое регулирует распределение этого элемента в организме. Обычно 70% плазменного железа поступает в красный костный мозг. За счёт распада Hb в сутки высвобождается приблизительно 21-24 мг железа, что во много раз превышает поступление железа из пищеварительного тракта (1-2 мг/сут).

Более 95% железа поступает в плазму из системы мононуклеарных фагоци тов, которые поглощают путём фагоцитоза более 1011 старых эритроцитов в сутки. Железо, поступившее в клетки мононуклеарных фагоцитов, либо быстро возвращается в циркуляцию в виде ферритина, либо откладывается про запас. Промежуточный обмен железа, в первую очередь, связан с про цессами синтеза и распада Hb, в которых центральную роль играет система мононуклеарных фагоцитов. У взрослого человека в костном мозге железо трансферрина с помощью специфических рецепторов включается в нормо циты и ретикулоциты, использующие его для синтеза Hb. Hb, поступаю щий в плазму крови при распаде эритроцитов, специфически связывается с гаптоглобином, что предупреждает его фильтрацию через почки. Железо, освободившееся после распада Hb в системе мононуклеарных фагоцитов, снова связывается с трансферрином и вступает в новый цикл синтеза Hb.

В прочие ткани трансферрин доставляет в 4 раза меньшее количество же леза, чем в красный костный мозг. Общее содержание железа в составе Hb составляет 3000 мг, в составе миоглобина — 125 мг железа, в печени — 700 мг (преимущественно в форме ферритина).

Железо выделяется из организма в основном путём слущивания слизис той оболочки кишечника и с жёлчью. Также оно теряется с волосами, ногтями, мочой и потом. Общее количество выделяемого таким образом железа составляет у здорового мужчины 0,6-1 мг/сут, а у женщин реп родуктивного возраста — более 1,5 мг. Такое же количество железа усва ивается из пищи (5-10% его общего содержания в рационе). Железо из животной пищи усваивается в несколько раз лучше, чем из растительной.

Концентрация железа имеет суточный ритм, а у женщин существует связь с менструальным циклом. При беременности содержание железа в орга низме уменьшается, особенно во второй половине.

Биохимические исследования Таким образом, концентрация железа в сыворотке зависит от резорбции в ЖКТ, накопления в кишечнике, селезёнке и красном костном мозге, от синтеза и распада Hb и его потерь организмом.

При некоторых патологических состояниях и заболеваниях содержание железа в сыворотке крови изменяется. В табл. 4-45 представлены основные признаки дефицита и избытка железа в организме человека.

Таблица 4-45. Важнейшие заболевания, синдромы, признаки дефицита и избытка железа в организме человека Заболевания, синдромы и признаки Заболевания, синдромы и признаки дефицита железа избытка железа Гипохромная анемия Наследственный гемохроматоз Миоглобиндефицитная миокардиопатия Миокардиопатия с гиперэластозом эндокарда (сидероз сердца) Атрофический ринит Гепатоз с пигментным циррозом Атрофический глоссит Сидероз и фиброз поджелудочной Дизгевзия и анорексия железы Гингивит и хейлит Бронзовый диабет Наследственная и врождённая Спленомегалия сидеропеническая атрофия слизистой оболочки носа, зловонный насморк Гипогенитализм (озена) Вторичный сидероз при талассемии Железодефицитная эзофагопатия и других заболеваниях (в 5-20% дисфагия) Профессиональный сидероз лёгких Синдром Пламмера-Винсона и сидероз глаза (в 4-16% случаев предрак Ятрогенный трансфузионный сидероз и рак пищевода) Аллергическая пурпура Атрофический гастрит Локальная липомиодистрофия на Миоглобиндефицитная атония месте внутримышечных инъекций скелетных мышц препаратов железа Койлонихия и другие трофические изменения ногтей Железодефицитные состояния (гипосидероз, железодефицитная ане мия) — одно из наиболее распространённых заболеваний человека. Формы их клинических проявлений разнообразны и варьируют от латентных со стояний до тяжёлых прогрессирующих заболеваний, способных привести к типичным органным и тканевым повреждениям и даже к летальному исходу. В настоящее время общепринято, что диагноз железодефицитных состояний надо ставить до развития полной картины заболевания, то есть до возникновения гипохромной анемии. При дефиците железа страдает весь организм, а гипохромная анемия — поздняя стадия болезни.

К современным методам ранней диагностики гипосидероза относят оп ределение концентрации железа в сыворотке, общей железосвязывающей способности сыворотки (ОЖСС), трансферрина и ферритина в сыворотке.

Показатели метаболизма железа при различных видах анемий представле ны в табл. 4-46.

296 Глава Таблица 4-46. Показатели обмена железа при различных видах анемий Железоде- Инфекционная, Нарушение Показатели мета- Референтная фицитная опухолевая синтеза гема болизма железа величина анемия анемия и глобина Железо сыворот ки крови, мкг/дл мужчины 65-175 <50 <50 > женщины 50-170 <40 <40 > ОЖСС, мкг/дл 250-425 >400 180 Коэффициент 15-54 <15 <15 > насыщения,% Ферритин, мкг/л 20-250 <10-12 >150 160- Избыточное содержание железа в организме носит название «сидероз» или «гиперсидероз», «гемосидероз». Он может иметь местный и генерали зованный характер. Различают экзогенный и эндогенный сидероз. Экзо генный сидероз нередко наблюдают у шахтёров, участвующих в разработке красных железных руд, у электросварщиков. Сидероз шахтёров может вы ражаться в массивных отложениях железа в ткани лёгких. Местный сидероз развивается при попадании в ткани железных осколков. В частности, выделен сидероз глазного яблока с отложением гидрата окиси железа в цилиарном теле, эпителии передней камеры, хрусталике, сетчатке и зрительном нерве.

Эндогенный сидероз чаще всего имеет гемоглобиновое происхождение и возникает в результате повышенного разрушения этого пигмента крови в организме.

Гемосидерин представляет собой агрегат гидроксида железа, соединённо го с белками, гликозаминогликанами и липидами. Гемосидерин образуется внутри клеток мезенхимной и эпителиальной природы. Очаговое отло жение гемосидерина, как правило, наблюдается на месте кровоизлияний.

От гемосидероза следует отличать тканевое «ожелезнение», которое возни кает при пропитывании некоторых структур (например, эластических воло кон) и клеток (например, нейронов головного мозга) коллоидным железом (при болезни Пика, некоторых гиперкинезах, бурой индурации лёгких).

Особой формой наследственных отложений гемосидерина, возникающего из ферритина в результате нарушения клеточного метаболизма, является гемохроматоз. При этом заболевании особенно большие отложения железа наблюдают в печени, поджелудочной железе, почках, в клетках системы мононуклеарных фагоцитов, слизистых железах трахеи, в щитовидной же лезе, эпителии языка и мышцах. Наиболее известен первичный, или идио патический, гемохроматоз — наследственное заболевание, для которого характерны нарушение обмена железосодержащих пигментов, повышен ное всасывание в кишечнике железа и накопление его в тканях и органах с развитием в них выраженных изменений.

При избытке железа в организме может развиваться дефицит меди и цинка.

Определение железа сыворотки крови даёт представление об количестве транспортируемого железа в плазме крови, связанного с трансферрином.

Большие вариации содержания железа в сыворотке крови, возможность его увеличения при некротических процессах в тканях и снижения при воспа лительных процессах ограничивают диагностическое значение этого исследо Биохимические исследования вания. Определяя только содержание железа в сыворотке крови, не удаётся получить информации о причинах нарушенного обмена железа. Для этого необходимо определять концентрацию в крови трансферрина и ферритина.

Общая железосвязывающая способность сыворотки крови ОЖСС — показатель концентрации трансферрина. Следует учитывать, что при оценке содержания трансферрина по результатам определения ОЖСС оно оказывается завышенным на 16-20%, поскольку при более чем половинном насыщении трансферрина железо связывается с другими белками. Под ОЖСС понимают не абсолютное количество трансферрина, а количество железа, которое может связаться с трансферрином. Вычитая количество железа сыворотки из ОЖСС, определяют ненасыщенную, или латентную железосвязывающую способность: ненасыщенная железосвязы вающая способность = ОЖСС - железо сыворотки крови. В норме нена сыщенная железосвязывающая способность сыворотки крови составляет в среднем 50,2 ммоль/л (279 мкг/дл). Пределы колебаний референтных значений ОЖСС представлены в табл. 4-47, основные заболевания и со стояния, при которых может изменяться ОЖСС, приведены в табл. 4-48.

Таблица 4-47. Референтные величины ОЖСС Референтные величины ОЖСС Возраст мкг/дл мкмоль/л Дети до 2 лет 100-400 17,90-71, Дети старше 2 лет и взрослые 250-425 44,75-76, На основании определения железа в сыворотке крови и ОЖСС рассчи тывают коэффициент насыщения (отношение железа сыворотки крови к ОЖСС, выраженное в процентах). В норме этот коэффициент колеблется от 16 до 54, составляя в среднем 31,2. Формула расчёта: коэффициент на сыщения = (железо сыворотки/ОЖСС)100.

Таблица 4-48. Основные причины изменения ОЖСС Повышение ОЖСС Понижение ОЖСС Гипохромные анемии Пернициозная анемия Поздние сроки беременности Гемохроматоз Хроническая кровопотеря Гемолитическая анемия Острый гепатит Атрансферринемия Истинная полицитемия Хронические инфекции Дефицит железа в пище Хроническое отравление железом Нарушение всасывания железа Хронические заболевания печени (не всегда) Серповидноклеточная анемия Нефроз Печёночная недостаточность Квашиоркор Злокачественные опухоли Талассемия 298 Глава Трансферрин в сыворотке крови Трансферрин относится к -глобулинам. Главная функция трансфер рина — транспорт всосавшегося железа в его депо (печень, селезёнка), в ретикулоциты и их предшественники в красном костном мозге. Транс феррин способен связывать ионы других металлов (цинк, кобальт и др.).

Из общего количества трансферрина в организме человека только 25-40% содержит железо. В плазме крови человека трансферрин присутствует в четырёх формах: апотрансферрина, лишённого железа;

двух монофер риформ, содержащих железо в одном из обоих участков связывания, и диферритрансферрина. Основное место синтеза трансферрина — печень.

Молочная железа продуцирует белок с подобными трансферрину свойс твами — лактоферрин. В сопоставлении с содержанием железа в сыворот ке крови уровень трансферрина и насыщение его железом являются бо лее стабильными величинами с менее выраженными различиями по полу и возрасту. Коэффициент насыщения трансферрина железом — выражен ное в процентах отношение железа сыворотки к трансферрину. В норме он составляет 20-55%. Формула расчёта: коэффициент насыщения = (желе зо сыворотки/трансферрин)100. Насыщение трансферрина менее 20% — признак пониженной доставки железа к эритроцитарному ростку красного костного мозга.

Определение трансферрина в сыворотке крови — наиболее достоверный тест оценки железодефицитных анемий. Референтные величины концент рации трансферрина представлены в табл. 4-49.

Таблица 4-49. Референтные величины концентрации трансферрина в сыворотке крови Концентрация трансферрина в сыворотке крови Возраст мг/дл г/л Новорождённые 130-275 1,3-2, Взрослые 200-320 2-3, Беременные 305 3, Основными причинами снижения концентрации трансферрина в сыво ротке крови включают торможение синтетических процессов в гепатоцитах при хроническом гепатите, циррозе, хронической нефропатии, голодании, неопластических процессах, а также значительная потеря белка при не фротическом синдроме или заболеваниях тонкой кишки. Концентрация трансферрина может быть повышенной при железодефицитной анемии, у женщин при беременности в последнем триместре и приёме пероральных контрацептивов.

Выделяют 4 типа нарушений содержания трансферрина в сочетании с изменениями концентрации железа и ОЖСС.

Повышение содержания трансферрина с понижением концентрации железа в сыворотке крови. Характерный признак железодефицит ных анемий. Подобные же изменения наблюдают при беременности и в детском возрасте, однако они менее выражены. Увеличение содер жания трансферрина в этих случаях связано с усилением его синтеза.

Биохимические исследования Повышение концентраций трансферрина и железа в сыворотке кро ви. Отмечают при приёме пероральных контрацептивов, что связано с действием содержащихся в них эстрогенов.

Снижение содержания трансферрина и повышение концентрации же леза в сыворотке крови. Такие изменения обнаруживаются при услови ях, ведущих к увеличению количества железа в депо (идиопатический гемохроматоз, гипопластические, гемолитические и мегалобластные анемий), возникают они вследствие угнетения синтеза белка под влия нием высоких концентраций железа.

Снижение концентрации трансферрина и железа в сыворотке крови.

Наблюдают при многих патологических состояниях: белковом голода нии, острых и хронических инфекциях, циррозе печени, хирургических вмешательствах, опухолях и др.

Ферритин в сыворотке крови Ферритин — растворимый в воде комплекс гидроксида железа с белком апоферритином. Он находится в клетках печени, селёзенки, красного кост ного мозга и ретикулоцитах. В небольших количествах ферритин присутс твует в сыворотке крови, где он выполняет функцию транспорта железа от ретикулоэндотелиальных к паренхиматозным клеткам печени. Ферритин — основной белок человека, депонирующий железо. Ферритин и гемосидерин содержат 15-20% общего количества железа в организме. Хотя в сыворотке крови ферритин присутствует в небольших количествах, его концентрация от ражает запасы железа. Референтные величины содержания ферритина в сыво ротке крови представлены в табл. 4-50. Низкие значения ферритина — первый показатель уменьшения запасов железа в организме. Определение ферритина в сыворотке крови используют для диагностики и мониторинга дефицита или избытка железа, дифференциальной диагностики анемий.

Таблица 4-50. Референтные величины концентрации ферритина в сыворотке крови Возраст Концентрация ферритина в сыворотке крови, нг/мл (мкг/л) Новорождённые 25- 1 мес 200- 2-5 мес 50- 6 мес-15 лет 7- Взрослые:

мужчины 20- женщины 10- Результаты анализа на ферритин могут быть ложноположительны ми или ложноотрицательными при воспалениях (ферритин относится к белкам острой фазы), опухолях, патологии печени, когда содержание ферритина может быть увеличено. В ряде случаев у пациентов, находя щихся на гемодиализе, отмечают парадоксально повышенный уровень ферритина при аккумуляции железа в клетках ретикуло-эндотелиальной системы. При этом в костном мозге может быть одновременный дефицит железа. Поэтому при оценке обмена железа следует проводить комплекс ные исследования (табл. 4-51).

300 Глава Таблица 4-51. Критерии диагностики дефицита железа Латентный Железодефицитная Показатели Норма дефицит железа анемия Hb, г/л Мужчины 130-160 >130 < Женщины 120-150 >120 < Сывороточное железо, мкмоль/л Мужчины 11,6-31,3 <7,5 <7, Женщины 9-30,4 <6 < ОЖСС, ммоль/л 44,75-71,60 >71,6 >71, Ферритин, мкг/л:

Мужчины 20-250 <40 < Женщины 10-120 <20 < Отрицательный баланс железа в течение длительного времени приводит к развитию недостаточности железа. Известны три стадии недостаточнос ти, приводящие к наиболее тяжёлой форме — железодефицитной анемии (табл. 4-52). Признаки и симптомы заболевания у пациента также прогрес сируют, находясь в зависимости от наличия и степени анемии.

Таблица 4-52. Стадии развития железодефицитной анемии Сниженные Железо- Железо Показатели Норма запасы дефицитный дефицитная железа эритропоэз анемия Депо железа Транспортное железо Железо эритроцитов Депо красного кост- 2-3 0, следы 0 ного мозга Железо сыворотки, 20±10 Ниже 20 Ниже 11 Ниже мкмоль/л Железосвязывающая 50-65 65 Более 70 Более способность транс феррина, мкмоль/л Насыщение транс- 35±15 Ниже 30 Ниже 15 Ниже феррина,% Ферритин сыворотки, 100±60 Ниже 20 10 Ниже мкг/л Эритроциты Норма Норма Норма Микроци тарные, ги похромные Биохимические исследования Сниженные запасы железа (стадия 1): запасы железа в костном мозге и печени уменьшаются. У пациентов отсутствуют какие-либо симп томы, концентрация Hb находится в пределах нормы. Концентрация ферритина в сыворотке крови и количество железа в красном костном мозге снижены. Основные признаки истощения железа — повышение его всасывания, указывающее на возросшую уязвимость или возмож ность развития недостаточности железа.

Железодефицитный эритропоэз (стадия 2): активность эритропоэза снижается в связи с недостатком железа, необходимого для включения в гемовую часть Hb. Концентрация Hb в крови начинает снижаться, содержание свободного протопорфирина в эритроцитах увеличивается.

Эта стадия также характеризуется отсутствием или снижением количес тва запасов железа, низкой концентрацией железа в сыворотке крови, повышением ОЖСС, низким насыщением трансферрина. Показатели Ht практически не отличаются от нормальных.

Железодефицитная анемия (стадия 3) — развёрнутая стадия заболева ния. Содержание ферритина в сыворотке и насыщение трансферрина находятся на очень низком уровне. К другим лабораторным признакам этой стадии относятся: снижение количества запасов железа, низкая концентрация железа сыворотки, повышение ОЖСС и низкая концен трация Hb.

Повышение содержания ферритина в сыворотке крови может быть вы явлено при следующих заболеваниях: при избыточном содержании железа [например, при гемохроматозе (концентрация ферритина выше 500 мкг/л), некоторых заболеваниях печени), воспалительных процессах (лёгочные инфекции, остеомиелит, артрит, СКВ, ожоги), некоторых острых и хро нических заболеваниях с поражением печёночных клеток (алкогольное по ражение печени, гепатит), раке молочной железы, остром миелобластном и лимфобластном лейкозе, лимфогранулематозе. При оценке результатов повышенной концентрации ферритина следует иметь в виду, что он от носится к белкам острой фазы, следовательно, его повышение может от ражать реакцию организма на воспалительный процесс. В таких случаях при подозрении на наличие гемохроматоза необходимо одновременно оп ределить концентрацию сывороточного железа и ОЖСС. Если отношение сывороточного железа к ОЖСС превышает 50-55%, то, вероятнее всего, у больного гемохроматоз, а не гемосидероз.

Наибольшее значение определение ферритина имеет при диагностике нарушений метаболизма железа. Снижение содержания ферритина выявля ют при железодефицитной и гемолитической анемии с внутрисосудистым гемолизом. У больных с хроническим заболеванием почек недостаточное накопление железа в организме можно констатировать при содержании ферритина в сыворотке крови ниже 100 мкг/л.

Использование определения ферритина в диагностике и мониторинге онкологических заболеваний основано на том, что в отдельных органах и тканях при наличии новообразований (острый миелобластный и лим фобластный лейкоз, лимфогранулематоз, опухоли печени) происходит на рушение депонирования железа, и это приводит к увеличению феррити на в сыворотке крови, а также усиленному выходу его из клеток при их гибели.

Глава Исследование системы гемостаза Система гемостаза — совокупность функционально-морфологических и биохимических механизмов, обеспечивающих сохранение жидкого состо яния крови, предупреждение и остановку кровотечений, а также целост ность кровеносных сосудов.

В целостном организме при отсутствии каких-либо патологических воз действий жидкое состояние крови является следствием равновесия факто ров, обусловливающих процессы свёртывания и препятствующих их раз витию. Нарушение подобного баланса может быть вызвано очень многими факторами, однако вне зависимости от этиологических причин тромбо образование в организме происходит по единым законам с включением в процесс определённых клеточных элементов, энзимов и субстратов.

В свёртывании крови различают два звена: клеточный (сосудисто-тром боцитарный) и плазменный (коагуляционный) гемостаз.

Под клеточным гемостазом понимают адгезию клеток (то есть взаимо действие клеток с чужеродной поверхностью, в том числе и с клетками иного вида), агрегацию (склеивание одноименных клеток крови между собой), а также высвобождение из форменных элементов веществ, ак тивирующих плазменный гемостаз.

Плазменный (коагуляционный) гемостаз представляет собой каскад реакций, в которых участвуют факторы свёртывания крови, завершаю щийся процессом образования фибрина. Образовавшийся фибрин под вергается далее разрушению под влиянием плазмина (фибринолиз).

Важно отметить, что деление гемостатических реакций на клеточные и плазменные условно, однако оно справедливо в системе in vitro и сущес твенно облегчает выбор адекватных методик и интерпретацию результатов лабораторной диагностики патологии гемостаза. В организме эти два звена свёртывающей системы крови тесно связаны и не могут функционировать раздельно.

Очень важную роль в осуществлении реакций гемостаза играет сосудис тая стенка. Эндотелиальные клетки сосудов способны синтезировать и/или экспрессировать на своей поверхности различные биологически активные вещества, модулирующие тромбообразование. К ним относятся фактор фон Виллебранда, эндотелиальный фактор релаксации (оксид азота), про стациклин, тромбомодулин, эндотелин, активатор плазминогена тканевого типа, ингибитор активатора плазминогена тканевого типа, тканевой фактор (тромбопластин), ингибитор пути тканевого фактора и некоторые другие.

Кроме того, мембраны эндотелиоцитов несут на себе рецепторы, которые при определённых условиях опосредуют связывание с молекулярными ли гандами и клетками, свободно циркулирующими в кровотоке.

При отсутствии каких-либо повреждений выстилающие сосуд эндотели альные клетки обладают тромборезистентными свойствами, что способ Исследование системы гемостаза ствует поддержанию жидкого состояния крови. Тромборезистентность эн дотелия обеспечивают:

контактная инертность внутренней (обращённой в просвет сосуда) по верхности этих клеток;

синтез мощного ингибитора агрегации тромбоцитов — простаци клина;

наличие на мембране эндотелиоцитов тромбомодулина, который свя зывает тромбин;

при этом последний утрачивает способность вызывать свёртывание крови, но сохраняет активирующее действие на систему двух важнейших физиологических антикоагулянтов — протеинов С и S;

высокое содержание на внутренней поверхности сосудов мукополиса харидов и фиксация на эндотелии комплекса гепарин-антитромбин III (АТIII);

способность секретировать и синтезировать тканевой активатор плаз миногена, обеспечивающий фибринолиз;

способность стимулировать фибринолиз через систему протеинов С и S.

Нарушение целостности сосудистой стенки и/или изменение функцио нальных свойств эндотелиоцитов могут способствовать развитию протром ботических реакций — антитромботический потенциал эндотелия трас формируется в тромбогенный. Причины, приводящие к травме сосудов, весьма разнообразны и включают в себя как экзогенные (механические повреждения, ионизирующее излучение, гипер- и гипотермия, токсические вещества, в том числе и ЛС, и т.п.), так и эндогенные факторы. К послед ним относятся биологически активные вещества (тромбин, циклические нуклеотиды, ряд цитокинов и т.п.), способные при определённых условиях проявлять мембраноагрессивные свойства. Такой механизм поражения со судистой стенки характерен для многих заболеваний, сопровождающихся склонностью к тромбообразованию.

Все клеточные элементы крови принимают участие в тромбогенезе, но для тромбоцитов (в отличие от эритроцитов и лейкоцитов) прокоагулянт ная функция является основной. Тромбоциты не только выступают в ка честве главных участников процесса тромбообразования, но также оказы вают существенное влияние на другие звенья гемокоагуляции, обеспечивая активированные фосфолипидные поверхности, необходимые для реализа ции процессов плазменного гемостаза, высвобождая в кровь ряд факторов свёртывания, модулируя фибринолиз и нарушая гемодинамические кон станты как путём транзиторной вазоконстрикции, обусловленной генера цией тромбоксана А2, так и путём образования и выделения митогенных факторов, способствующих гиперплазии сосудистой стенки. При инициа ции тромбогенеза происходит активация тромбоцитов (то есть активация тромбоцитарных гликопротеинов и фосфолипаз, обмен фосфолипидов, об разование вторичных посредников, фосфорилирование белков, метаболизм арахидоновой кислоты, взаимодействие актина и миозина, Na+/H+-обмен, экспрессия фибриногеновых рецепторов и перераспределение ионов каль ция) и индукция процессов их адгезии, реакции высвобождения и агрега ции;

при этом адгезия предшествует реакции высвобождения и агрегации тромбоцитов и является первой ступенью гемостатического процесса.

При нарушении эндотелиальной выстилки субэндотелиальные компо ненты сосудистой стенки (фибриллярный и нефибриллярный коллаген, 304 Глава эластин, протеогликаны и др.) вступают в контакт с кровью и образуют поверхность для связывания фактора фон Виллебранда, который не только стабилизирует фактор VIII в плазме, но и играет ключевую роль в процессе адгезии тромбоцитов, связывая субэндотелиальные структуры с рецептора ми клеток (рис. 5-1) [Баркаган З.С., 1998].

Адгезия тромбоцитов к тромбогенной поверхности сопровождается их распластыванием. Этот процесс необходим для осуществления более пол ного взаимодействия тромбоцитарных рецепторов с фиксированными лигандами, что способствует дальнейшему прогрессированию тромбооб разования, так как, с одной стороны, обеспечивает более прочную связь адгезированных клеток с сосудистой стенкой, а с другой стороны, иммоби лизованные фибриноген и фактор фон Виллебранда способны выступать в качестве тромбоцитарных агонистов, способствуя дальнейшей активации этих клеток.

Помимо взаимодействия с чужеродной (в том числе и повреждённой сосудистой) поверхностью, тромбоциты способны прилипать друг к дру гу, то есть агрегировать. Агрегацию тромбоцитов вызывают различные по своей природе вещества, например тромбин, коллаген, АДФ, арахидоно вая кислота, тромбоксан А2, простагландины G2 и H2, серотонин, адрена лин, фактор активации тромбоцитов и другие. Проагрегантами могут быть и экзогенные вещества (отсутствующие в организме), например латекс.

Как адгезия, так и агрегация тромбоцитов могут приводить к развитию реакции высвобождения — специфического Са2+-зависимого секреторно го процесса, при котором тромбоциты выделяют ряд веществ в экстра целлюлярное пространство. Индуцируют реакцию высвобождения АДФ, адреналин, субэндотелиальная соединительная ткань и тромбин. Внача ле высвобождается содержимое плотных гранул: АДФ, серотонин, Са2+;

для высвобождения содержимого -гранул (тромбоцитарный фактор 4, -тромбоглобулин, тромбоцитарный фактор роста, фактор фон Виллебран да, фибриноген и фибронектин) необходима более интенсивная стимуля ция тромбоцитов. Липосомальные гранулы, содержащие кислые гидролазы, высвобождаются только в присутствии коллагена или тромбина. Следует отметить, что высвободившиеся из тромбоцитов факторы способствуют за крытию дефекта сосудистой стенки и развитию гемостатической пробки, однако при достаточно выраженном поражении сосуда дальнейшая акти вация тромбоцитов и их адгезия к травмированному участку сосудистой поверхности формирует основу для развития распространённого тромбо тического процесса с последующей окклюзией сосудов.

В любом случае итогом повреждения эндотелиоцитов становится приоб ретение интимой сосудов прокоагулянтных свойств, что сопровождается синтезом и экспрессией тканевого фактора (тромбопластина) — основного инициатора процесса свёртывания крови. Тромбопластин сам по себе не обладает ферментативной активностью, но может выступать в роли кофак тора активированного фактора VII. Комплекс тромбопластин/фактор VII способен активировать как фактор X, так и фактор XI, вызывая тем самым генерацию тромбина, что в свою очередь индуцирует дальнейшее прогрес сирование реакций как клеточного, так и плазменного гемостаза.

Гемостатические реакции, совокупность которых принято называть плазменным (коагуляционным) гемостазом, в конечном итоге приводят Исследование системы гемостаза Рис. 5-1.Тромбоцитарный гемостаз 306 Глава к образованию фибрина;

эти реакции преимущественно реализуются про теинами, носящими название плазменных факторов. В табл. 5-1 приведён перечень факторов, участвующих в свёртывании крови.

Таблица 5-1. Международная номенклатура факторов свёртывания крови Период Факторы Синонимы полураспада, ч I Фибриноген* 72- II Протромбин* 48- III Тканевой тромбопластин, тканевой фактор IV Ионы кальция V Проакцелерин*, Ас-глобулин 15- VI Акцелерин (исключён из употребления) VII Проконвертин* 4- VIII Антигемофильный глобулин А 7- Кристмас-фактор, плазменный тромбопластиновый 15- IX компонент, антигемофильный фактор В* Х Фактор Стюарта-Прауэр* 30- XI Антигемофильный фактор С 30- XII Фактор Хагемана, фактор контакта* 50- XIII Фибриназа, фибрин-стабилизирующий фактор Дополнительные:

Фактор фон Виллебранда 18- Фактор Флетчера, плазменный прекалликреин Фактор Фитцджеральда, высокомолекулярный кининоген * Синтезируются в печени.

Процесс плазменного гемостаза можно условно разделить на 3 фазы.

I фаза — образование протромбиназы или контактно-калликреин-ки нин-каскадная активация. I фаза представляет собой многоступенчатый процесс, в результате которого в крови происходит накопление комплек са факторов, способных превратить протромбин в тромбин, поэтому этот комплекс называется протромбиназой. Различают внутренний и внешний пути формирования протромбиназы. По внутреннему пути свёртывание крови инициируется без участия тканевого тромбопластина;

в образовании протромбиназы принимают участие факторы плазмы (XII, XI, IX, VIII, X), калликреин-кининовая система и тромбоциты. В результате инициации ре акций внутреннего пути образуется комплекс факторов Ха с V, на фосфоли пидной поверхности (фактор 3 тромбоцитов) в присутствии ионизирован ного кальция. Весь этот комплекс действует как протромбиназа, превращая протромбин в тромбин. Пусковой фактор этого механизма — XII, который активируется либо вследствие контакта крови с чужеродной поверхностью, либо при контакте крови с субэндотелием (коллагеном) и другими ком понентами соединительной ткани при повреждении стенок сосудов;

либо фактор XII активируется путём ферментативного расщепления (калликре Исследование системы гемостаза ином, плазмином, другими протеазами). Во внешнем пути формирования протромбиназы основную роль играет тканевый фактор (фактор III), ко торый экспрессируется на клеточных поверхностях при повреждении тка ней и образует с фактором VIIа и ионами кальция комплекс, способный перевести фактор Х в фактор Ха, который и активирует протромбин. Кро ме того, фактор Ха ретроградно активирует комплекс тканевого фактора и фактора VIIа. Таким образом, внутренний и внешний пути соединяются на факторах свёртывания. Так называемые «мосты» между этими путями реализуются через взаимную активацию факторов XII, VII и IX. Эта фаза продолжается от 4 мин 50 с до 6 мин 50 с (рис. 5-2).

II фаза — образование тромбина. В эту фазу протромбиназа вместе с факторами коагуляции V, VII, X и IV переводит неактивный фактор II (протромбин) в активный фактор IIа — тромбин. Эта фаза продолжается 2-5 с.

III фаза — образование фибрина (рис. 5-3). Тромбин отщепляет от мо лекулы фибриногена по два пептида А и В, переводя его в фибрин-моно мер. Молекулы последнего полимеризуются сначала в димеры, затем в ещё растворимые, особенно в кислой среде, олигомеры, и в конечном итоге в фибрин-полимер. Кроме того, тромбин способствует превращению фак тора XIII в фактор XIIIа. Последний в присутствии Са2+ изменяет фибрин полимер из лабильной, легко растворимой фибринолизином (плазмином) формы в медленно и ограниченно растворимую форму, составляющую ос нову кровяного сгустка. Эта фаза продолжается 2-5 с.

В процессе образования гемостатического тромба распространения тром бообразования от места повреждения стенки сосуда по сосудистому руслу не происходит, так как этому препятствуют быстро возрастающий вслед за свёртыванием антикоагулянтный потенциал крови и активация фибрино литической системы.

Сохранение крови в жидком состоянии и регуляция скоростей взаимо действия факторов во все фазы коагуляции во многом определяются на личием в кровотоке естественных веществ, обладающих антикоагулянтной активностью. Жидкое состояние крови обеспечивает равновесие между факторами, индуцирующими свёртывание крови, и факторами, препят ствующими его развитию, причём последние не выделяются в отдельную функциональную систему, так как реализация их эффектов чаще всего невозможна без участия прокоагуляционных факторов. Поэтому выделе ние антикоагулянтов, препятствующих активации факторов свёртывания крови и нейтрализующих их активные формы, весьма условно. Вещества, обладающие антикоагулянтной активностью, постоянно синтезируются в организме и с определённой скоростью выделяются в кровоток. К ним относятся АТIII, гепарин, протеины С и S, недавно открытый ингибитор тканевого пути свёртывания — TFPI (ингибитор комплекса тканевой фак тор-фактор VIIа-Са2+), 2-макроглобулин, антитрипсин и др. В процессе свёртывания крови, фибринолиза из факторов свёртывания и других белков также образуются вещества, обладающие антикоагулянтной активностью.

Антикоагулянты оказывают выраженное действие на все фазы свёртывания крови, поэтому исследование их активности при нарушениях свёртывания крови очень важно.

308 Глава Рис. 5-2. Плазменный гемостаз. ВМК — высокомолекулярный кининоген;

РФМК — растворимые фибрин-мономерные комплексы;

фп А и В — фибринопептиды А и В;

С3, С5В, С9 — факторы системы комплемента Исследование системы гемостаза Рис. 5-3. III фаза свёртывания крови (образование фибрина) 310 Глава После стабилизации фибрина, вместе с форменными элементами обра зующего первичный красный тромб, начинаются два основных процесса посткоагуляционной фазы — спонтанный фибринолиз и ретракция, приво дящие в итоге к формированию гемостатически полноценного окончатель ного тромба. В норме эти два процесса протекают параллельно. Физиоло гический спонтанный фибринолиз и ретракция способствуют уплотнению тромба и выполнению им гемостатических функций. В этом процессе активное участие принимают плазминовая (фибринолитическая) система и фибриназа (фактор XIIIа). Спонтанный (естественный) фибринолиз отражает сложную реакцию между компонентами плазминовой системы и фибрином. Плазминовая система состоит из четырёх основных компо нентов: плазминогена, плазмина (фибринолизина), активаторов профер ментов фибринолиза и его ингибиторов (рис. 5-4). Нарушение соотно шений компонентов плазминовой системы приводит к патологической активации фибринолиза.

В клинической практике исследование системы гемостаза преследует следующие цели:

диагностика нарушений системы гемостаза;

выяснение допустимости оперативного вмешательства при выявленных нарушениях в системе гемостаза;

проведение контроля за лечением антикоагулянтами прямого и непря мого действия, а также тромболитической терапией.

Сосудисто-тромбоцитарный (первичный) гемостаз Сосудисто-тромбоцитарный, или первичный, гемостаз нарушается при изменениях сосудистой стенки (дистрофические, иммуноаллергические, неопластические и травматические капилляропатии);

тромбоцитопении;

тромбоцитопатии, сочетание капилляропатий и тромбоцитопений.

Сосудистый компонент гемостаза Существуют следующие показатели, характеризующие сосудистый ком понент гемостаза.

Проба щипка. Собирают под ключицей кожу в складку и делают щи пок. У здоровых людей никаких изменений на коже не возникает ни сразу после щипка, ни через 24 ч. Если резистентность капилляров нарушена, на месте щипка появляются петехии или кровоподтёк, осо бенно отчётливо видимые через 24 ч.

Проба жгута. Отступив на 1,5-2 см вниз от ямки локтевой вены, очер чивают круг приблизительно 2,5 см в диаметре. На плечо накладывают манжетку тонометра и создают давление 80 мм рт.ст. Давление поддер живают строго на одном уровне в течение 5 мин. В очерченном круге подсчитывают все появившиеся петехии. У здоровых лиц петехии не образуются или их не более 10 (отрицательная проба жгута). При на рушении резистентности стенки капилляров количество петехий после проведения пробы резко возрастает.

Исследование системы гемостаза Рис. 5-4.

Основные механизмы функционирования фибринолитической (плазминовой) системы 312 Глава Тромбоцитарный компонент гемостаза Показатели, характеризующие тромбоцитарный компонент гемостаза:

Определение длительности кровотечения по Дуке.

Подсчёт количества тромбоцитов в крови.

Определение агрегации тромбоцитов с АДФ.

Определение агрегации тромбоцитов с коллагеном.

Определение агрегации тромбоцитов с адреналином.

Определение агрегации тромбоцитов с ристоцетином (определение ак тивности фактора фон Виллебранда).

Клиническое значение исследования первых двух перечисленных пока зателей в рассмотрено в главе 2 «Гематологические исследования». Ниже подробно рассмотрены клиническая оценка и значение исследования агре гационных функций тромбоцитов.

АГРЕГАЦИЯ ТРОМБОЦИТОВ С АДФ Процессы агрегации изучают с помощью агрегометра, отражающего ход агрегации графически в виде кривой;

в качестве стимулятора агрегации служит АДФ [Меньшиков В.В., 1987].

До добавления проагреганта (АДФ) возможны случайные осцилляции кривой оптической плотности. После добавления агреганта на кривой по являются осцилляции за счёт изменения формы тромбоцитов. Осцилляции уменьшаются по амплитуде, уменьшается оптическая плотность. Тромбо циты соединяются в агрегаты и кривая отклоняется вверх (первичная вол на). Когда подъём переходит в «плато», то происходит реакция высвобож дения, и кривая ещё больше поднимается вверх (вторичная волна).

При воздействии малых доз АДФ на агрегатограмме регистрируют двой ную волну агрегации. Первая фаза (первичная волна) зависит от добав ленного экзогенного АДФ, а вторая фаза (вторичная волна агрегации) — за счёт реакции высвобождения собственных агонистов, содержащихся в гранулах тромбоцитов. Вводимые извне большие дозы АДФ (обычно 110-5 моль) приводят к слиянию первой и второй волн агрегации. Для достижения двухволновой агрегации обычно используется АДФ в концен трации 110-7 моль.

При анализе агрегатограмм обращают внимание на общий характер аг регации (одноволновая, двухволновая;

полная, неполная;

обратимая, не обратимая), разницу между оптической плотностью плазмы до начала агрегации и после достижения максимальной агрегации (характеризует интенсивность агрегации), а также уменьшение оптической плотности плазмы за первую минуту агрегации или угол наклона кривой на этапе бурной агрегации (характеризует скорость агрегации). Важно отметить, что появление двухволновой агрегации при стимуляции АДФ и адреналином в концентрациях, вызывающих в норме обратимую агрегацию (обычно 1-5 мкмоль), указывает на повышение чувствительности тромбоцитов к этим индукторам, а развитие одноволновой неполной (а часто и обратимой) аг регации при стимуляции ими в концентрациях 10 мкмоль и больше — на нарушение реакции высвобождения тромбоцитов. В клинических иссле дованиях общепринятым считают использование АДФ в концентрациях 110-5 моль (для достижения одноволновой агрегации) и 110-7 моль (для достижения двухволновой агрегации).

Исследование системы гемостаза Результаты исследования агрегационной способности тромбоцитов могут выражаться в процентах (табл. 5-2).

Таблица 5-2. Агрегации по Вайсу для АДФ АДФ, мкмоль Агрегации в норме,% 10 77, 5 66, 2 47, 1 30, Определение агрегации тромбоцитов с различными индукторами агрега ции играет важнейшую роль в дифференциальной диагностике тромбоци топатий (табл. 5-3).

Таблица 5-3. Нарушения агрегации тромбоцитов при различных заболеваниях Стимулятор агрегации и нарушения агрегации Вид АДФ тромбоцитопа Коллаген Адреналин Ристоцетин первичная вторичная тии волна волна Тромбастения Патология Патология Патология Патология Норма Эссенциальная Патология Патология Патология Патология Норма атромбия Аспиринопо- Норма Патология Патология Патология Норма добный дефект Синдром Норма Норма (+,-) (+,-) Норма Бернара-Сулье Синдром Вис- Патология Патология Патология Патология Норма кота-Олдрича Болезнь фон Норма Норма Норма Норма Сниженная Виллебранда (патологи ческая) (+,-) — диагностического значения не имеет.

В зависимости от функционально-морфологических характеристик тром боцитов выделяют следующие группы тромбоцитопатий.

Наследственные дизагрегационные тромбоцитопатии без нарушения реакции высвобождения (вторичная волна). В эту группу входят:

тромбастения Глянцманна, для которой характерно нарушение АДФ зависимой агрегации, при нормальной ристоцетин-агрегации;

эссенциальная атромбия — при воздействии малых количеств АДФ агрегация не индуцируется, а при удвоении количества АДФ прибли жается к нормальной;

аномалия Мая-Хегглина — нарушается коллаген-зависимая агрега ция, реакция освобождения при стимуляции АДФ и ристоцетином сохранена.

314 Глава Парциальные дизагрегационные тромбоцитопатии. В эту группу входят заболевания с врождённым дефектом агрегации с тем или иным агреган том, или угнетением реакции высвобождения.

Нарушение реакции высвобождения. Для этой группы заболеваний ха рактерно отсутствие второй волны агрегации при стимуляции малым количеством АДФ и адреналина. В тяжёлых случаях отсутствует АДФ- и адреналин-зависимая агрегация. Коллаген-зависимая агрегация не выявляется.

Болезни и синдромы с недостаточным пулом накопления и хранения медиаторов агрегации. К этой группе относятся заболевания, характе ризующиеся нарушением способности тромбоцитов накапливать и вы делять серотонин, адреналин, АДФ и другие факторы кровяных плас тинок. Лабораторно для этой группы характерно снижение всех видов агрегации и отсутствие второй волны агрегации.

Снижение агрегации в ответ на введение АДФ наблюдают при перни циозной анемии, остром и хроническом лейкозе, миеломной болезни.

У больных с уремией при стимуляции коллагеном, адреналином, АДФ аг регация снижена. Для гипотиреоза характерно снижение агрегации при стимуляции АДФ. Ацетилсалициловая кислота, пенициллин, индометацин, хлорохин, диуретики (в частности, фуросемид при применении в высоких дозах) способствуют снижению агрегации тромбоцитов, что нужно учиты вать при лечении этими препаратами.

При хирургических операциях, осложнённых кровотечениями, нару шения в системе сосудисто-тромбоцитарного гемостаза в большинстве случаев обусловлены не нарушением агрегационных и других функцио нальных свойств тромбоцитов, а наличием тромбоцитопении той или иной степени.

АГРЕГАЦИЯ ТРОМБОЦИТОВ С КОЛЛАГЕНОМ Коллаген-индуцированная агрегация тромбоцитов имеет достаточно вы раженную латентную фазу, во время которой происходит активация фос фолипазы С. В зависимости от используемого реагента продолжительность этой фазы может составлять 5-7 мин. После завершения этого периода в тромбоцитах происходят процессы, приводящие к образованию вторич ных посредников, вследствие чего развивается секреция тромбоцитарных гранул и синтез тромбоксана А2, что сопровождается резким усилением межтромбоцитарного взаимодействия.

В лабораторно-клинической практике коллаген чаще всего используют в конечной концентрации 50 мкг/мл, однако коллагены разных фирм мо гут обладать различной активностью, что необходимо учитывать при их применении. Результаты исследования агрегационной способности тром боцитов могут выражаться в процентах (табл. 5-4).

Диагностическое значение и оценку результатов исследования — см. раз дел «Агрегация тромбоцитов с АДФ». Отдельно это исследование не при меняют, а проводят в комплексе с определением агрегации тромбоцитов с АДФ и адреналином.

Исследование системы гемостаза Таблица 5-4. Референтные значения агрегации тромбоцитов по Вайсу для коллагена Концентрация коллагена, мкг/мл Агрегация в норме,% 10 93, 5 75, 2 69, 1 46, АГРЕГАЦИЯ ТРОМБОЦИТОВ С АДРЕНАЛИНОМ Кривая, регистрируемая при записи адреналин-индуцированной агре гации, имеет две волны. Адреналин при контакте с тромбоцитами взаи модействует с 2-адренорецепторами, что вызывает ингибирование адени латциклазы. Не исключено, что механизм, лежащий в основе реализации эффекта адреналина и развития первой волны агрегации, не зависит от образования тромбоксана А2, реакции высвобождения или синтеза факто ра агрегации тромбоцитов, а связан со способностью этого проагреганта прямо изменять проницаемость клеточной мембраны для ионов Са2+. Вто ричная агрегация при индукции процесса адреналином возникает как ре зультат реакции высвобождения и продукции тромбоксана А2. Результаты исследования агрегационной способности тромбоцитов могут выражаться в процентах (табл. 5-5).

Диагностическое значение и оценка результатов исследования — см. в раз деле «Агрегация тромбоцитов с АДФ».

Отдельно исследование не применяют, а проводят в комплексе с опреде лением агрегации тромбоцитов с АДФ и коллагеном.

Таблица 5-5. Референтные значения агрегации тромбоцитов по Вайсу для адреналина Адреналин, мкмоль Агрегация в норме, % 300 92, 150 46, 60 42, 30 35, АГРЕГАЦИЯ ТРОМБОЦИТОВ С АРАХИДОНОВОЙ КИСЛОТОЙ Арахидоновая кислота — природный агонист агрегации, причём её дейс твие опосредовано эффектами простагландинов G2 и H2 и тромбоксана А и включает активацию как фосфолипазы C с последующим образованием вторичных посредников, мобилизацией внутриклеточного кальция и рас ширением процесса активации клеток, так и фосфолипазы А2, что непос редственно приводит к освобождению эндогенной арахидоновой кислоты.

Активация тромбоцитов под действием арахидоновой кислоты происхо дит достаточно быстро, поэтому кривая, характеризующая этот процесс, чаще носит одноволновый характер.

Для индукции агрегации тромбоцитов арахидоновую кислоту используют в концентрациях 110-3-110-4 моль. При работе с арахидоновой кислотой следует учитывать, что на воздухе это вещество очень быстро окисляется.

316 Глава Пробу на агрегацию с арахидоновой кислотой рекомендуют проводить в случаях использования ЛС, влияющих на реакцию агрегации (например, ацетилсалициловая кислота, пенициллин, индометацин, делагил, диурети ки), что нужно учитывать при оценке результатов исследований.

АГРЕГАЦИЯ ТРОМБОЦИТОВ С РИСТОЦЕТИНОМ Референтные величины активности фактора фон Виллебранда — 58-166%.

Фактор фон Виллебранда синтезируют эндотелиальные клетки и мегака риоциты. Он необходим для нормальной адгезии тромбоцитов и обладает способностью удлинять период полувыведения фактора VIII. Фактор VIII свёртывания плазмы — антигемофильный глобулин А — циркулирует в крови в виде комплекса из трёх субъединиц, обозначаемых VIII-к (коагулиру ющая единица), VIII-Аг (основной антигенный маркёр) и VIII-фВ (фак тор фон Виллебранда, связанный с VIII-Аг). Считают, что фактор фон Виллебранда регулирует синтез коагуляционной части антигемофильного глобулина А (VIII-к) и участвует в сосудисто-тромбоцитарном гемостазе.

Болезнь фон Виллебранда — наследственное заболевание, для которого ха рактерны увеличение длительности кровотечения, уменьшение ристоцетино вой кофакторной активности и снижение (в разной степени) коагулянтной активности фактора VIII. Клинические проявления заболевания сходны с тако выми при тромбоцитопатиях. Вместе с тем у пациентов со значительным сни жением активности фактора VIII могут наблюдаться гематомы и гемартрозы.

На основе лабораторных исследований, позволяющих определить структуру и активность фактора фон Виллебранда, различают следующие формы болезни.

Тип I (70% всех случаев) характеризуется незначительным снижением ристоцетин-кофакторной (фактора фон Виллебранда) и коагулянтной активности (VIII-к) при нормальной макромолекулярной структуре фактора фон Виллебранда.

Тип II: в основе лежит избирательный дефицит высокомолекулярных полимеров фактора Виллебранда вследствие нарушений в структуре этого белка.

Тип IIВ обусловлен усиленным взаимодействием между фактором фон Виллебранда и тромбоцитами, а повышенный клиренс агрегатов тромбоцитов приводит к тромбоцитопении.

Тип III характеризуется тяжёлым количественным дефицитом фактора фон Виллебранда, что приводит к клинически значимому снижению активности фактора VIII (VIII-к).

Содержание фактора фон Виллебранда определяют в тех случаях, когда увеличено время кровотечения, количество тромбоцитов находится в пре делах референтных величин и нет явных причин дисфункции тромбоцитов.

Для оценки фактора фон Виллебранда определяют количественное содер жание фактора фон Виллебранда (исследование ристоцетин-кофакторной активности), исследуют индуцированную ристоцетином агглютинацию тромбоцитов и антигенную структуру фактора Виллебранда, связанного с фактором VIII (VIII-фВ).

Определение агрегации тромбоцитов с ристоцетином в плазме применя ют для количественной оценки фактора фон Виллебранда. Установлена ли нейная зависимость между степенью ристоцетиновой агрегации и количес твом фактора фон Виллебранда. В основе метода лежит способность этого Исследование системы гемостаза Рис. 5-5.

Пути агрегации тромбоцитов и точки приложения антиагрегантов 318 Глава антибиотика (ристоцетина) стимулировать in vitro взаимодействие фактора фон Виллебранда с тромбоцитарным гликопротеином Ib. В большинстве случаев болезни фон Виллебранда отмечается нарушение ристоцетин-аг регации при нормальном ответе на воздействие АДФ, коллагена и адрена лина. Нарушение ристоцетин-агрегации выявляют и при макроцитарной тромбодистрофии Бернара-Сулье (отсутствие на мембране тромбоцитов рецепторов ристоцетиновой агрегации). Для дифференциации применяют тест с добавлением нормальной плазмы: при болезни фон Виллебранда после добавления нормальной плазмы ристоцетин-агрегация нормализует ся, в то время как при синдроме Бернара-Сулье этого не происходит.

Исследование также можно использовать в дифференциальной диагно стике гемофилии А (недостаток фактора VIII) и болезнью фон Виллебранда.

При гемофилии резко снижено содержание VIII-к, а содержание VIII-фВ находится в пределах нормы. Клинически это различие проявляется тем, что при гемофилии возникает гематомный тип повышенной кровоточивос ти, а при болезни фон Виллебранда — петехиально-гематомный [Ogston D., Bennett B., 1977].

Индуцированная ристоцетином агглютинация тромбоцитов снижена при большинстве случаев болезни фон Виллебранда, кроме типа IIВ.

Антигенную структуру фактора Виллебранда, связанного с фактором VIII (VIII-фВ), выявляют различными иммунологическими методами, а рас пределение фактора Виллебранда по размерам молекул определяют путём электрофореза в агарозном геле. Эти тесты применяют для установления типа болезни фон Виллебранда.

Исследование агрегации тромбоцитов с различными индукторами про водят не только для выявления нарушений агрегационных функций тром боцитов. Это исследование позволяет оценить эффективность терапии антиагрегантами, подобрать индивидуальные дозы ЛС и проводить лекарс твенный мониторинг. На рис. 5-5 приведены основные ЛС, обладающие антиагрегантным действием, и точки их приложения.

Плазменный (коагуляционный) гемостаз I фаза плазменного гемостаза (образования протромбиназы) Показатели, характеризующие I фазу плазменного гемостаза включают:

время свёртывания крови по Сухареву;

активированное частичное тромбопластиновое время (АЧТВ).

активность XII фактора;

активность XI фактора;

активность IX фактора;

активность VIII фактора;

активность X фактора.

АКТИВИРОВАННОЕ ЧАСТИЧНОЕ ТРОМБОПЛАСТИНОВОЕ ВРЕМЯ Референтные величины АЧТВ — 25-35 с.

АЧТВ — один из наиболее ценных общих тестов для получения представ ления о системе свёртывания крови. АЧТВ — тест, выявляющий исклю Исследование системы гемостаза чительно плазменные дефекты внутренней системы активации Х фактора в I фазе (образование протромбиназы) свёртывания крови. Удлинение АЧТВ отражает дефицит плазменных факторов (кроме VII и XIII) и на блюдается при их значительном (ниже 25-10%) снижении [Барка ган З.С., 1988]. Удлинение АЧТВ указывает на преобладание гипокоа гуляции.

Причины, приводящие к удлинению АЧТВ Нарушение показателей АЧТВ при нормальном протромбиновом и тромбиновом времени наблюдают только при дефиците или инги бировании факторов VIII, IX, XI, XII, а также прекалликреина и вы сокомолекулярного кининогена. Из этих форм патологии наиболее часто наблюдают дефицит и/или ингибирование факторов VIII и IX, что характерно для гемофилии А и В, а также дефицит фактора фон Виллебранда. Более редко в крови ранее здоровых лиц появляются им мунные ингибиторы фактора VIII.

Замедление свёртывания при определении как АЧТВ, так и протром бинового времени при нормальных тромбиновом времени и концен трации фибриногена наблюдают при дефиците факторов X, V, II, а также при воздействии непрямых антикоагулянтов.

Удлинение протромбинового времени при нормальных показаниях АЧТВ и тромбинового времени характерно только для дефицита фак тора VII.

Удлинение АЧТВ, протромбинового и тромбинового времени наблю дают при глубокой гипофибриногенемии, лечении активаторами фиб ринолиза. Удлинение времени свёртывания только в тромбиновом тес те характерно для дисфибриногенемии и нарушений полимеризации фибрин-мономеров.

Афибриногенемия и гипофибриногенемия, как врождённые, так и свя занные с тяжёлыми поражениями печени, сопровождаются удлинени ем АЧТВ.

При проведении гепаринотерапии удлиняются АЧТВ, протромбиновое и тромбиновое время. Важное значение придают определению АЧТВ.

Известно, что больные могут обладать повышенной и пониженной чувствительностью к гепарину. Окончательно вопрос толерантности к гепарину может быть уточнён путём повторного определения АЧТВ за 1 ч до очередного введения гепарина. Если АЧТВ в это время окажется удлинённым более чем в 2,5 раза по сравнению с нормой, то констатируют повышенную чувствительность к гепарину и снижают его дозу или увеличивают интервал между введениями.

Удлинение АЧТВ может свидетельствовать о наличии у пациента вол чаночного антикоагулянта (ВА), при отсутствии нарушений других по казателей коагулограммы.

В табл. 5-6 приведены данные о том, в каких сочетаниях нарушают ся показания базисных коагуляционных тестов при дефиците различных факторов свёртывания и действии антикоагулянтов. Укорочение АЧТВ свидетельствует о преобладании гиперкоагуляции и отмечается в первой (гиперкоагуляционной) фазе острого ДВС-синдрома.

320 Глава Таблица 5-6. Результаты основных коагуляционных тестов при дефиците разных факторов свёртывания крови Дефицитные факторы Замедление свёртывания и эффекты АЧТВ Протромбиновый тест Тромбиновый тест антикоагулянтов XII + - XI + - Прекалликреин + - ВМ кининоген + - IX + - VIII + - Фактор фон Виллебранда Часто + - VII - + V+ + Х+ + II + + I+ + + ХIII -- Действие гепарина + + + Действие кумаринов + + Обнаружение признаков гиперкоагуляции (укорочение времени свёрты вания крови, протромбинового времени, АЧТВ) считают показанием для назначения препаратов среднемолекулярного (15 000-25 000 Да) или низ комолекулярного (4200-6100) гепарина. Для контроля за адекватностью проводимой терапии 2 раза в сутки необходимо определять время свёр тывания крови или АЧТВ. При исследовании времени свёртывания крови инфузию гепарина (с помощью инфузионных насосов) следует подбирать таким образом, чтобы поддерживать этот показатель в пределах 15-23 мин, а АЧТВ в 2-3 раза выше нормы. Рекомендуемые схемы контроля за ле чением среднемолекулярным гепарином представлены в табл. 5-7. Кроме того, при назначении высоких доз гепарина необходим ежедневный конт роль за содержанием АТIII, так как его уровень резко снижается в резуль тате потребления.

Низкомолекулярные (фракционированные) гепарины вызывают мень шее потребление АТIII, практически не активируют тромбоциты и не вы зывают иммунных реакций. Они не способны связывать одновременно тромбин и АТIII, поэтому не ускоряют инактивацию АТIII, но сохраняют способность катализировать ингибирование фактора Ха АТIII. Ускоре ние инактивации фактора Ха не требует образования тройного комплекса и может достигаться только через связывание гепарина с АТIII (в зависи мости от препарата низкомолекулярного гепарина соотношение анти-Ха/ анти IIа составляет от 2:1 до 4:1).

Для контроля за лечением низкомолекулярным гепарином используют более чувствительный тест, чем АЧТВ — определяют анти-Ха активность плазмы (количественное определение гепарина, где фактор Ха применяют Исследование системы гемостаза в качестве реактива). При определении анти-Ха активности плазмы исполь зуют сульфат декстрана для вытеснения гепарина из комплекса с белками, что обеспечивает точность измерения количества комплексов Ха с АТIII.

В качестве индикаторной используют реакцию с хромогенным субстратом на фактор Ха. Рекомендуемые схемы контроля за лечением низкомолеку лярным гепарином приведены в табл. 5-8.

Таблица 5-7. Схема контроля при лечении среднемолекулярным гепарином Отношение АЧТВ пациента/ Доза гепарина Способ введения АЧТВ контроля и количество определений Менее 20 000 ЕД/сут Подкожно (2-3 введения) Мониторинг не нужен 20 000-30 000 ЕД/сут Подкожно (2-3 введения) 1,2-1,5, определение перед очередным введением и через 4-6 ч Более 30 000 ЕД/сут Внутривенно (прерывистое 1,5-4, определение перед введение 5000-7500 ЕД очередным введением через 4 ч или 7500-10 000 ЕД через 6 ч) 500-1000 ЕД/ч Внутривенно (инфузия) 2,0-2, Таблица 5-8. Схема контроля за лечением низкомолекулярным гепарином Доза гепарина Способ введения Анти-Ха, ЕД/мл 2000-2500 ЕД Подкожно Мониторинг не нужен (1 раз в сут) 4000-5000 ЕД Подкожно Перед очередным введением — (1-2 раза в сут) 0,2-0,4 ЕД/мл 100-120 МЕ/кг Подкожно До инъекции — свыше 0,3 ЕД/мл, (2 раза в сут) через 3-4 ч — менее 1,5 ЕД/мл 30-40 МЕ/кг разово, Непрерывная 0,5-1,0 ЕД/мл, коррекция затем по внутривенная скорости каждые 3-6 ч 10-15 МЕ(кг.ч) инфузия При ИМ об эффективности антикоагулянтной терапии (гепарином) су дят по степени удлинения АЧТВ, что также отражает проходимость коро нарных артерий. На рис. 5-6 показана зависимость между степенью прохо димости коронарных артерий (по данным ангиографии) и длительностью АЧТВ при проведении антикоагулянтной терапии гепарином у больных ИМ [Alexander R.W. et al., 1998].

ФАКТОР XII (ХАГЕМАНА) Референтные величины активности фактора XII в плазме крови — 65-150%.

Фактор XII (Хагемана) — сиалогликопротеид, активизируемый коллаге ном, контактом с чужеродной поверхностью, адреналином и рядом протео литических ферментов (в частности, плазмином). Фактор XII инициирует внутрисосудистую коагуляцию, кроме того, фактор XIIа переводит прекал ликреины плазмы в калликреины. Активный фактор XII служит активато ром фибринолиза.

322 Глава Рис. 5-6. Зависимость между степенью проходимости коронарных артерий (по дан ным ангиографии) и длительностью АЧТВ при лечении гепарином у больных ИМ При дефиците фактора XII увеличено время свёртывания крови и АЧТВ без признаков кровоточивости. В клинической практике определение ак тивности фактора XII используется главным образом для выявления его врождённого дефицита. Дефицит фактора XII следует заподозрить при зна чительном удлинении времени свёртывания крови и АЧТВ. В большинстве случаев дефект Хагемана наследуется по аутосомно-рецессивному типу.

Между степенью нарушения свёртываемости крови и дефицитом факто ра XII существует строгое соответствие: при резко выраженной гипоко агуляции уровень активности этого фактора в плазме не превышает 2% и чаще ниже 1%;

при умеренном нарушении свёртываемости он колеблется от 3 до 9% [Ogston D., Bennett B., 1977]. Если активность фактора XII в плазме составляет 10% и более, то время свёртывания крови, АЧТВ и другие тесты нормальные.

Приобретённая недостаточность фактора XII характеризует коагулопа тию потребления вследствие ДВС.

ФАКТОР XI (АНТИГЕМОФИЛЬНЫЙ ФАКТОР С) Референтные величины активности фактора XI в плазме крови — 65-135%.

Фактор XI — антигемофильный фактор С — гликопротеид. Активная форма этого фактора (XIа) образуется при участии факторов XIIа, Флет чера и Фитцджеральда. Форма XIа активирует фактор IX. При дефиците фактора XI в коагулограмме удлинено время свёртывания крови и АЧТВ.

В клинической практике определение активности фактора XI использу ется, главным образом, для диагностики гемофилии С и для того, чтобы дифференцировать дефициты факторов XI и XII.

Врождённую недостаточность фактора XI называют болезнью Розенталя, или гемофилией С. Это аутосомно-рецессивное наследственное заболева ние. Кровоточивость в основном отмечают после травм и операций.

Исследование системы гемостаза Приобретённая недостаточность фактора XI возникает главным образом при ДВС-синдроме, приёме антикоагулянтов, внутривенном введении де кстрана.

Минимальный гемостатический уровень активности фактора ХI в крови для выполнения операций — 15-25%, при более низкой активности риск развития послеоперационных кровотечений чрезвычайно велик. Мини мальный гемостатический уровень активности фактора ХI в крови для ос тановки кровотечения — 5-15%, при более низкой активности остановка кровотечения без введения больному фактора ХI невозможна [Ogston D., Bennett B., 1977].

ФАКТОР IX (КРИСТМАС-ФАКТОР) Референтные величины активности фактора IX в плазме крови — 60-140%.

Фактор IХ (Кристмас-фактор, антигемофильный глобулин В) относится к -глобулинам, принимает активное участие в I фазе плазменного гемо стаза. Фактор IХ образуется в печени. Поэтому его содержание в крови больных гепатитами, циррозами печени, а также у принимающих произ водные дикумарина и индандиола снижается. Выработка фактора IХ ре гулируется геном, расположенным на хромосоме X, в локусе, отстоящем от гена ключевого фермента синтеза фактора VIII. Этот ген мутирует в 7-10 раз реже, чем ген фермента синтеза фактора VIII. Вследствие этого гемофилию А наблюдают существенно чаще (87-94% всех больных гемо филией), чем гемофилию В (врождённый дефицит фактора IХ — болезнь Кристмаса) (8-15% больных).

В процессе свёртывания крови фактор IХ не потребляется.

Определение фактора IХ играет важнейшую роль в диагностике гемо филии В. С дефицитом фактора IХ связывают большинство кровотечений при острых заболеваниях печени.

В зависимости от уровня фактора IХ разделяют следующие клинические формы гемофилии В: крайне тяжёлая — концентрация фактора IХ до 1%;

тяжёлая форма — 1-2%;

средней тяжести — 2-5%;

лёгкая форма (субге мофилия) — 6-24%. У больных лёгкой формой клинические проявления заболевания возникают после травм и хирургических вмешательств. Опре делённые трудности вызывает определение группы «носителей» гемофилии В. К этой группе могут быть отнесены женщины, у которых при повторных исследованиях выявлено содержание фактора IХ ниже 40%, но выше 24%.

Минимальный гемостатический уровень активности фактора IХ в крови для выполнения операций — 20-25%, при более низкой активности риск развития послеоперационных кровотечений чрезвычайно велик. Мини мальный гемостатический уровень фактора IХ в крови для остановки кро вотечения — 10-15%, при более низком содержании остановка кровотечения без введения больному фактора IХ невозможна [Ogston D., Bennett B., 1977].

Приобретённый дефицит фактора IХ обнаруживают при заболеваниях печени, болезни Гоше, у больных с нефротическим синдром.

ФАКТОР VIII (АНТИГЕМОФИЛЬНЫЙ ГЛОБУЛИН А) Референтные величины активности фактора VIII в плазме крови — 60-145%.

Фактор VIII свёртывания плазмы — антигемофильный глобулин А — циркулирует в крови в виде комплекса из трёх субъединиц, обознача 324 Глава емых VIII-к (коагулирующая единица), VIII-Аг (основной антигенный маркёр) и VIII-фВ (фактор фон Виллебранда, связанный с VIII-Аг).

Считают, что VIII-фВ регулирует синтез коагуляционной части анти гемофильного глобулина (VIII-к) и участвует в сосудисто-тромбоцитар ном гемостазе. Фактор VIII синтезируется в печени, селезёнке, клетках эндотелия, лейкоцитах, почках и принимает участие в I фазе плазмен ного гемостаза.

Определение фактора VIII играет важнейшую роль в диагностике гемофи лии А. Развитие гемофилии А обусловлено врождённым недостатком фак тора VIII. При этом в крови больных фактора VIII нет (гемофилия А-) или он находится в функционально неполноценной форме, которая не может принимать участия в свёртывании крови (гемофилия А+). Гемофилию А- выявляют у 90-92% больных, гемофилия А+ — у 8-10%. При гемофилии резко снижено содержание в плазме крови VIII-к, а концентрация в ней VIII-фВ находится в пределах нормы. Поэтому длительность кровотечения при гемофилии А находится в нормативных пределах, а при болезни фон Виллебранда увеличена.

Гемофилия А — наследственное заболевание, однако у 20-30% больных положительный семейный анамнез не прослеживается. Поэтому определе ние активности фактора VIII имеет большую диагностическую ценность.

В зависимости от уровня активности фактора VIII разделяют следующие кли нические формы гемофилии А: крайне тяжёлая — активность фактора VIII до 1%;

тяжёлая — 1-2%;

средней тяжести — 2-5%;

лёгкая (субгемофи лия) — 6-24%.

Приблизительно у трети «носителей» гемофилии А активность фактора VIII составляет от 25 до 49%. У больных лёгкой формой и «носителей» ге мофилии А клинические проявления заболевания возникают только после травм и хирургических вмешательств.

Минимальный гемостатический уровень активности фактора VIII в кро ви для выполнения операций — 25%, при более низком содержании риск развития послеоперационных кровотечений чрезвычайно велик. Мини мальный гемостатический уровень активности фактора VIII в крови для остановки кровотечения — 15-20%, при более низком содержании оста новка кровотечения без введения больному фактора VIII невозможна. При болезни фон Виллебранда минимальный гемостатический уровень актив ности фактора VIII для остановки кровотечения и для выполнения опера ции — 25% [Ogston D., Bennett B., 1977].

При ДВС-синдроме, начиная со II стадии, отмечают отчётливое сни жение активности фактора VIII вследствие коагулопатии потребления.

Тяжёлые заболевания печени могут привести к снижению содержания фактора VIII в крови. Содержание фактора VIII снижается при болезни фон Виллебранда, а также при наличии специфических АТ к факто ру VIII.

Активность фактора VIII значительно повышается после спленэктомии.

В клинической практике очень важно дифференцировать гемофилию и болезнь фон Виллебранда. В табл. 5-9 представлены показатели коагу лограммы при этих двух заболеваниях.

Исследование системы гемостаза Таблица 5-9. Показатели коагулограммы при гемофилии и болезни фон Виллебранда Болезнь фон Показатель Гемофилия Виллебранда Время свёртывания крови Повышена Норма Длительность кровотечения Норма Повышена Агрегация тромбоцитов с ристоцетином Норма Снижена Протромбиновое время Норма Норма АЧТВ Повышено Норма Тромбиновое время Норма Норма Фибриноген Норма Норма II фаза плазменного гемостаза (образования тромбина) Показатели, характеризующие вторую фазу:

протромбиновое время;

активность V фактора;

активность VII фактора;

активность II фактора.

ПРОТРОМБИНОВОЕ ВРЕМЯ Референтные величины протромбинового времени: взрослые — 11-15 с, но ворождённые — 13-18 с.

Протромбиновое время характеризует I и II фазы плазменного гемостаза и отражает активность протромбинового комплекса (факторов VII, V, X и собственно протромбина — фактора II).

Увеличение протромбинового времени свидетельствует о склонности к гипокоагуляции и может зависеть от различных причин.

Недостаточность одного или нескольких факторов протромбинового комплекса, которая наблюдается при таких наследственных коагуло патиях, как гипопроконвертинемия (дефицит фактора VII) и гипопро тромбинемия (дефицит фактора II).

Наблюдаемое иногда при амилоидозе увеличение протромбинового времени связано с дефицитом фактора Х, который поглощается ами лоидом, а при нефротическом синдроме — с дефицитом факторов VII и V, которые выделяются с мочой.

Синтез факторов протромбинового комплекса происходит в клетках печени, при заболеваниях последней количество их снижается, поэ тому протромбиновое время в определённой степени может служить показателем функционального состояния печени. Увеличение про тромбинового времени отмечают при острых и хронических гепатитах, циррозах печени, при подострой дистрофии печени и других пораже ниях паренхимы печени, что считают плохим прогностическим призна ком. При этом причиной увеличения протромбинового времени может стать и развивающееся в результате уменьшения поступления жёлчи в кишечник нарушение всасывания витамина К, который необходим 326 Глава для синтеза факторов протромбинового комплекса. Такова же причина увеличения протромбинового времени и при механической желтухе.

Энтеропатия и кишечные дисбактериозы, ведущие к недостаточности витамина К, также могут сопровождаться увеличением протромбино вого времени.

При лечении антагонистами витамина К (антикоагулянтами непрямого действия) нарушается конечный этап синтеза факторов протромбино вого комплекса, и протромбиновое время удлиняется.

Потребление факторов протромбинового комплекса при остром ДВС синдроме ведёт к довольно раннему увеличению протромбинового вре мени (в 2 раза и более).

При хроническом панкреатите, раке поджелудочной железы и жёлчно го пузыря увеличение протромбинового времени может быть результа том поражения печени и/или развития ДВС-синдрома.

Афибриногенемия, гипофибриногенемия (снижение содержания в крови фибриногена до 1 г/л и ниже), а также избыточное содержание гепари на в крови ведут к увеличению протромбинового времени.

Удлинение протромбинового времени выявляют при острых и хрони ческих лейкозах, вследствие развития ДВС-синдрома.

Повышение концентрации антитромбина или антитромбопластина в кро ви также ведёт к удлинению протромбинового времени;

Целая группа ЛС способна удлинять протромбиновое время: анаболи ческие стероиды, антибиотики, ацетилсалициловая кислота (в больших дозах), слабительные средства, метотрексат, никотиновая кислота, хи нидин, тиазидные диуретики, толбутамид.

Укорочение протромбинового времени свидетельствует о склонности к гиперкоагуляции и может быть отмечено в начальных стадиях тромбоза глубоких вен нижних конечностей, при полицитемии, в последние месяцы беременности. Укорочение протромбинового времени вызывают следую щие ЛС: ацетилсалициловая кислота (в небольших дозах), меркаптопурин, пероральные контрацептивы.

Определению протромбинового времени отводится ведущая роль в конт роле за антикоагулянтной терапией, однако при таком контроле протром биновое время зависит от чувствительности используемого для этих целей тромбопластина. Поэтому сравнение результатов исследований с исполь зованием различных тромбопластинов — важная задача практической ме дицины. Разные тромбопластины различают по ISI [International Sensitiv ity Index — Международному индексу чувствительности (МИЧ)], который прилагается в описании каждого набора. В 1983 г. ВОЗ совместно с Между народным обществом тромбоза и гемостаза приняли за референтный тром бопластин из мозга человека и установили, что ISI этого тромбопластина равен 1 (Международный референтный препарат Всемирной Организации Здравоохранения). Все другие коммерческие тромбопластины калибруют ся по нему, и для каждого определяется своя чувствительность (МИЧ).

Для сравнения результатов исследования протромбинового времени у больных, получающих антикоагулянтную терапию, необходимо рассчи тать INR [International Normalized Ratio, международное нормализованное отношение (МНО)]. INR (МНО) = (Протромбиновый коэффициент)ISI;

Протромбиновый коэффициент (PTR) = протромбиновое время больно Исследование системы гемостаза го (с) / протромбиновое время контроля (с). МНО — попытка матема тически скорректировать разницу результатов исследования, связанную с различной чувствительностью тромбопластинов, то есть приведение результата к данным, полученным с референтным тромбопластином (табл. 5-10).

Таблица 5-10. Нормализация протромбинового времени при использовании четырёх различных тромбопластинов по расчёту МНО Протромбиновое время, с Рассчитанные величины Тромбопластин ISI Пациент Контроль PTR МНО 1,2 24 11 2,2 2, 3,2 16 12 1,3 2, 2,0 21 13 1,6 2, 1,0 38 14,5 2,6 2, Лабораториям рекомендуют применять тромбопластины с МИЧ менее 1,5.

У кроличьих тромбопластинов МИЧ составляет 2-3. В США все лаборато рии перешли на плацентарный человеческий тромбопластин, МИЧ кото рого составляет 1 [Mammen E.F., 1996].

Основная задача мониторинга приёма пероральных антикоагулянтов — предупреждение кровотечения. До последнего времени рекомендовали поддерживать протромбиновое время при лечении непрямыми антикоагу лянтами в 2-2,5 раза длиннее нормы (кроличий тромбопластин). Однако это время оказалось слишком большим, что часто приводило к кровотече ниям. В настоящее время ВОЗ разработаны рекомендации для контроля терапии антикоагулянтами, выраженные в МНО (табл. 5-11).

Таблица 5-11. Показатели МНО, рекомендуемые при терапии антикоагулянтами Рекомендуемое Клиническое состояние МНО Профилактика тромбоза глубоких вен 2- Лечение тромбоза глубоких вен и лёгочной тромбоэмболии 2- Возвратный тромбоз глубоких вен, лёгочная тромбоэмболия 2- Протезы сердечных клапанов из собственной ткани 2- Механические протезы сердечных клапанов 2,5-3, Рекуррентный тромбоз глубоких вен и лёгочная эмболия 3-4, Сосудистые заболевания, включая ИМ 3-4, Рекуррентная системная эмболия 3-4, Для удобства расчёта МНО приводим шкалу, на которой представлена зависимость МНО от МИЧ и PTR (табл. 5-12). На вертикальной шка ле слева приведены величины PTR (отношение протромбинового вре мени пациента к протромбиновому времени контрольной плазмы), а на горизонтальной шкале вверху приведены значения МИЧ (для различных тромбопластинов). На пересечении линий этих двух параметров находится МНО для данного пациента.

328 Глава Таблица 5-12. Шкала для определения INR (ПВ — протромбиновое время) МИЧ 1,0 1,1 1,2 1,3 1,4 1,5 1,6 1,7 1,8 1,9 2,0 2,1 2,2 2,3 2,4 2,5 2,6 2,7 2,8 2,9 3, PTR МНО 1,0 1,0 1,0 1,0 1,0 1,0 1,0 1,0 1,0 1,0 1,0 1,0 1,0 1,0 1,0 1,0 1,0 1,0 1,0 1,0 1,0 1, 1,1 1,1 1,1 1,1 1,1 1,1 1,2 1,2 1,2 1,2 1,2 1,2 1,2 1,2 1,2 1,3 1,3 1,3 1,3 1,3 1,3 1, 1,2 1,2 1,2 1,2 1,3 1,3 1,3 1,3 1,4 1,4 1,4 1,4 1,5 1,5 1,5 1,5 1,6 1,6 1,6 1,7 1,7 1, 1,3 1,3 1,3 1,4 1,4 1,4 1,5 1,5 1,6 1,6 1,6 1,7 1,7 1,8 1,8 1,9 1,9 2,0 2,0 2,1 2,1 2, 1,4 1,4 1,4 1,5 1,5 1,6 1,7 1,7 1,8 1,8 1,9 2,0 2,0 2,1 2,2 2,2 2,3 2,4 2,5 2,6 2,7 2, 1,5 1,5 1,6 1,6 1,7 1,8 1,8 1,9 2,0 2,1 2,2 2,3 2,3 2,4 2,5 2,6 2,8 2,9 3,0 3,1 3,2 3, 1,6 1,6 1,7 1,8 1,8 1,9 2,0 2,1 2,2 2,3 2,4 2,6 2,7 2,8 2,9 3,1 3,2 3,4 3,6 3,7 3,9 4, 1,7 1,7 1,8 1,9 2,0 2,1 2,2 2,3 2,5 2,6 2,7 2,9 3,0 3,2 3,4 3,6 3,8 4,0 4,2 4,4 4,7 4, 1,8 1,8 1,9 2,0 2,1 2,3 2,4 2,6 2,7 2,9 3,1 3,2 3,4 3,6 3,9 4,1 4,3 4,6 4,9 5,2 5,5 5, 1,9 1,9 2,0 2,2 2,3 2,5 2,6 2,8 3,0 3,2 3,4 3,6 3,8 4,1 4,4 4,7 5,0 5,3 5,7 6, 2,0 2,0 2,1 2,3 2,5 2,6 2,8 3,0 3,2 3,5 3,7 4,0 4,3 4,6 4,9 5,3 5, 2,1 2,1 2,3 2,4 2,6 2,8 3,0 3,3 3,5 3,8 4,1 4,4 4,7 5,1 5,5 5, 2,2 2,2 2,4 2,6 2,8 3,0 3,3 3,5 3,8 4,1 4,5 4,8 5,2 5, 2,3 2,3 2,5 2,7 3,0 3,2 3,5 3,8 4,1 4,5 4,9 5,3 5, 2,4 2,4 2,6 2,9 3,1 3,4 3,7 4,1 4,4 4,8 5,3 5, 2,5 2,5 2,7 3,0 3,3 3,6 4,0 4,3 4,7 5,2 5, 2,6 2,6 2,9 3,1 3,5 3,8 4,2 4,6 5,1 5, 2,7 2,7 3,0 3,3 3,6 4,0 4,4 4,9 5,4 6, 2,8 2,8 3,1 3,4 3,8 4,2 4,7 5,2 5, 2,9 2,9 3,2 3,6 4,0 4,4 4,9 5, 3,0 3,0 3,3 3,7 4,2 4,7 5,2 5, 3,1 3,1 3,5 3,9 4,4 4,9 5, 3,2 3,2 3,6 4,0 4,5 5,1 5, 3,3 3,3 3,7 4,2 4,7 5,3 6, 3,4 3,4 3,8 4,3 4,9 5, 3,5 3,5 4,0 4,5 5,1 5, 3,6 3,6 4,1 4,7 5,3 6, 3,7 3,7 4,2 4,8 5, 3,8 3,8 4,3 5,0 5, 3,9 3,9 4,5 5,1 5, 4,0 4,0 4,6 5, 4,1 4,1 4,7 5, 4,2 4,2 4,8 5, 4,3 4,3 5,0 5, 4,4 4,4 5,1 5, 4,5 4,5 5, 4,6 4,6 5, 4,7 4,7 5, 4,8 4,8 5, 4,9 4,9 5, 5,0 5,9 5, Отношение ПВ пациента к ПВ контроля Исследование системы гемостаза ФАКТОР VII (ПРОКОНВЕРТИН) Референтные величины активности фактора VII в плазме крови — 65-135%.

Фактор VII (проконвертин, или конвертин) относится к 2-глобулинам и синтезируется в печени при участии витамина К. В основном участву ет в образовании тканевой протромбиназы и превращении протромбина в тромбин. Период его полураспада составляет 4-6 ч (самый короткий пе риод полураспада среди факторов свёртывания).

Врождённый недостаток фактора VII обуславливает развитие болезни Александера.

Приобретённые формы гипопроконвертинемии возможны у больных с поражением печени, а также в результате действия непрямых антикоа гулянтов. Снижение активности проконвертина в плазме крови отмечают у больных вирусным гепатитом, циррозом печени, при остром алкогольном гепатите, хроническом персистирующем гепатите. У больных с циррозом печени прослеживается отчётливая связь между снижением уровня про конвертина и тяжестью процесса. Из-за короткого периода полураспада снижение активности проконвертина — лучший маркёр развития печёно чной недостаточности, наступление которой можно отслеживать буквально по часам, исследуя активность проконвертина в крови.

Минимальный гемостатический уровень активности фактора VII в крови для выполнения операций — 10-20%, при более низком содержании риск развития послеоперационных кровотечений чрезвычайно велик. Мини мальный гемостатический уровень активности фактора VII в крови для ос тановки кровотечения — 5-10%, при более низком содержании остановка кровотечения без введения больному фактора VII невозможна [Ogston D., Bennett B., 1977].

При ДВС-синдроме, начиная со II стадии, отмечают отчётливое сниже ние активности фактора VII вследствие коагулопатии потребления.

ФАКТОР V (ПРОАКЦЕЛЕРИН) Референтные величины активности фактора V в плазме крови — 0,5-2 кЕД/л или 60-150%.

Фактор V (проакцелерин) — белок, полностью синтезируемый в печени.

В отличие от других факторов протромбинового комплекса (II, VII и Х), его активность не зависит от витамина К. Он необходим для образования внутренней (кровяной) протромбиназы, активирует фактор Х для превра щения протромбина в тромбин. В случаях дефицита фактора V в различной степени нарушаются внешний и внутренний пути образования протром биназы. В коагулограмме это проявляется увеличением протромбинового времени;

АЧТВ и тромбиновое время остаются в пределах нормы.

Непрямые антикоагулянты не оказывают заметного влияния на содержа ние фактора V в крови.

Определение активности проакцелерина используют для выявления его врождённого и приобретённого дефицита.

Наследственный дефицит фактора V проявляется парагемофилией (болезнь Оврена).

Активность фактора V заметно снижается при тяжёлых формах острого вирусного гепатита и при переходе острого гепатита в хронический. При 330 Глава циррозе печени наблюдают отчётливое снижение содержания в плазме кро ви проакцелерина. При неосложнённой механической желтухе активность фактора V снижается, но незначительно;

при вторичном вовлечении в про цесс печени происходит отчётливое уменьшение активности фактора V.

Минимальный гемостатический уровень активности фактора V в кро ви для выполнения операций — 25%, при более низком содержании риск развития послеоперационных кровотечений чрезвычайно велик. Мини мальный уровень активности фактора V в крови для остановки кровотече ния — 5-15%, при более низком содержании остановка кровотечения без введения больному фактора V невозможна [Ogston D., Bennett B., 1977].

При ДВС-синдроме, начиная со II стадии, отмечают отчётливое снижение активности фактора V за счёт его потребления.

III фаза плазменного гемостаза (образования фибрина) Показатели, характеризующие III фазу:

концентрация фибриногена в плазме крови;

активность XIII фактора в плазме крови;

тромбиновое время.

ФИБРИНОГЕН Фибриноген (фактор I) — белок, синтезируемый в основном в печени.

В крови он находится в растворённом состоянии, но в результате фер ментативного процесса под воздействием тромбина и фактора XIIIа может превращаться в нерастворимый фибрин. Референтные величины концент рации фибриногена в плазме крови приведены в табл. 5-13.

Фибриноген относится к белкам острой фазы, и его концентрация в плазме повышается при инфекции, воспалении, травме и стрессе. Синтез фибриногена стимулируют гормоны (инсулин, прогестерон), жирные кис лоты и ПДФ. Тем не менее основным стимулятором синтеза фибриногена является секреция ИЛ-6 макрофагами и моноцитами в ответ на фагоцитоз ПДФ. Концентрация фибриногена в плазме крови повышена у курильщи ков, больных сахарным диабетом. С повышением концентрации фибри ногена увеличивается риск сердечно-сосудистых заболеваний. У женщин концентрация фибриногена выше, чем у мужчин, и у них более заметно его увеличение с возрастом.

Таблица 5-13. Референтные величины концентрации фибриногена в плазме крови Концентрация фибриногена Возраст Мг/дл г/л Новорождённые 125-300 1,25- Взрослые 200-400 2- Повышение концентрации фибриногена или её снижение отмечено при следующих состояниях и заболеваниях.

Гиперкоагуляция при различных стадиях тромбоза, ИМ, а также в пос ледние месяцы беременности, после родов, после хирургических опе раций.

Исследование системы гемостаза Воспалительные процессы, в частности пневмонии. В связи с этим ис пользуют определение концентрации фибриногена в плазме параллель но с определением СОЭ для контроля за течением воспалительного процесса.

Неопластические процессы, особенно при раке лёгкого.

Лёгкие формы гепатита (концентрация фибриногена может быть по вышена). Тяжёлые поражения печени (острый гепатит, цирроз) сопро вождаются снижением концентрации фибриногена.

Наследственные афибриногенемии и гипофибриногенемии, первич ный фибринолиз (концентрация фибриногена снижена).

ДВС-синдром, при котором изменения концентрации фибриногена за висят от формы и стадии процесса. В случаях хронической формы ДВС синдрома, а также в I стадии острого ДВС-синдрома концентрация фибриногена повышена. Позднее возникает снижение концентрации фибриногена, что свидетельствует о переходе процесса в следующие (II и III) стадии и объясняется повышенным его потреблением.

Во II стадии ДВС-синдрома концентрация фибриногена снижается до 0,9-1,1 г/л, а в III становится менее 0,5 г/л, или он вообще не опреде ляется. Оценивая результаты исследований, необходимо принимать во внимание не только абсолютное, но и относительное снижение концен трации фибриногена по сравнению с первоначальными, повышенны ми показателями. Выраженное прогрессивное снижение концентрации фибриногена во II-III стадиях острого ДВС-синдрома расценивают как неблагоприятный признак, улучшение же состояния сопровождается её повышением.

ФАКТОР XIII (ФИБРИН-СТАБИЛИЗИРУЮЩИЙ ФАКТОР) Референтная величина активности фактора XIII в плазме крови — 100%.

Фактор XIII (фибрин-стабилизирующий фактор, фибриназа) относится к 2-гликопротеидам. Присутствует в сосудистой стенке, тромбоцитах, эритроцитах, почках, лёгких, мышцах, плаценте. В плазме находится в виде профермента, соединённого с фибриногеном.

Фактор XIII под влиянием тромбина превращается в активную форму XIIIа, которая при формировании фибринового сгустка обеспечивает об разование перекрёстно связанных форм фибрина. Тромбы, образованные в присутствии фибриназы, очень медленно подвергаются лизису. При сни жении активности фактора XIII сгустки очень быстро распадаются, даже если фибринолитическая активность крови нормальная. При повреждении стенки кровеносного сосуда фактор XIII участвует в процессе агрегации и адгезии кровяных пластинок. Установлено, что снижение активности фибриназы сопровождается уменьшением адгезивности и агрегации тром боцитов, а при повышении активности фибриназы эти свойства тромбоци тов, наоборот, повышаются.

Фактор XIII характеризует III фазу свёртывания крови: снижение или повышение активности фибриназы рассматривают как фактор геморраги ческого или тромботического риска.

Врождённый дефицит фактора XIII наследуется по аутосомно-рецессив ному типу преимущественно мужчинами. Первым клиническим призна ком дефицита фибриназы у 80% больных бывает длительное (в течение 332 Глава дней, иногда недель) кровотечение из пупочной раны. Характерна крово точивость петехиального типа. Возможны кровоизлияния в мозг. Отмеча ют медленное заживление ран, часто образуются послеоперационные гры жи, плохо срастаются переломы. Все параметры в коагулограмме, кроме снижения концентрации фактора XIII в плазме крови, остаются в преде лах нормы. Приобретённый дефицит фактора XIII выявляется у больных с авитаминозом С, лучевой болезнью, лейкозами, циррозами, гепатитами, раком с метастазами в печень, лимфомой, с ДВС-синдромами, у перенёс ших адреналэктомию, после приёма антикоагулянтов непрямого действия.

Снижение фактора ХIII в крови при этих заболеваниях обусловлено нару шением его синтеза либо расходованием в процессе ДВС-синдрома.

При длительно и плохо заживающих ранах и переломах рекомендуют провести исследование активности фактора ХIII, поскольку в ряде случаев такие явления могут быть связаны с его дефицитом (фактор ХIII стимули рует развитие фибробластов).

Минимальный гемостатический уровень активности фактора ХIII в кро ви для остановки кровотечения — 1-2%, при более низком содержании остановка кровотечения без введения больному фактора ХIII невозможна [Ogston D., Bennett B., 1977].

У больных с тромбоэмболическими осложнениями, атеросклерозом, пос ле оперативных вмешательств, родов, после введения адреналина, ГК, пи туитрина активность фибриназы часто повышена.

ТРОМБИНОВОЕ ВРЕМЯ Референтные величины тромбинового времени — 12-16 с.

Тромбиновое время — время, необходимое для образования сгустка фиб рина в плазме при добавлении к ней тромбина. Оно зависит только от концентрации фибриногена и активности ингибиторов тромбина (АТIII, гепарин, парапротеины) и оценивает как III фазу свёртывания крови — об разование фибрина, так и состояние естественных и патологических анти коагулянтов.

Определение тромбинового времени чаще всего преследует следующие цели:

контроль за гепаринотерапией, особенно при использовании гепарина с высокой молекулярной массой;

контроль за фибринолитической терапией;

диагностика гиперфибринолитических состояний;

диагностика афибриногенемии и дисфибриногенемии.

Тромбиновое время косвенно отражает концентрацию фибриногена, поэтому удлиняется при наследственных и приобретённых афибриноге немиях и гипофибриногенемиях (при тяжёлых поражениях печени, фиб ринолизе, остром ДВС-синдроме). Удлиняется тромбиновое время и при парапротеинемиях.

Определение тромбинового времени — один из распространённых мето дов контроля за лечением гепарином и фибринолитиками. В этих случа ях тромбиновое время должно увеличиваться в 2-3 раза. При проведении тромболитической терапии определение тромбинового времени рекомен дуется проводить каждые 4 ч, при этом следует помнить, что если оно превышает оптимальное значение больше чем в 2-3 раза, то дозу стреп Исследование системы гемостаза токиназы следует повысить для увеличения потребления плазминогена и снижения образования плазмина;

если тромбиновое время уменьшается ниже оптимального значения, дозу стрептокиназы следует уменьшить, что бы часть плазминогена не была блокирована в форме активатора, а полно стью превращалась в плазмин.

Физиологические антикоагулянты Показатели, характеризующие состояние антикоагулянтной системы:

антитромбин III;

протеин C;

протеин S.

Антитромбин III Референтные величины содержания АТIII в плазме крови — 80-120%.

АТIII — гликопротеид, наиболее важный естественный ингибитор свёр тывания крови;

ингибирует тромбин и ряд активированных факторов свёр тывания (Ха, XIIа, IХа). АТIII образует с гепарином быстродействующий комплекс — гепарин-АТIII. Основное место синтеза АТIII — клетки па ренхимы печени. Дефицит АТIII может быть первичным (наследственным) и вторичным, связанным с определённым заболеванием или состоянием.

Приобретённый дефицит АТIII может быть обусловлен сниженным син тезом, повышенным потреблением или потерей белка. Снижение концен трации АТIII — фактор риска тромбозов;

может развиться при следующих состояниях и заболеваниях:

при атеросклерозе, в старческом возрасте;

в середине менструального цикла, в последние месяцы беременности;

в послеоперационный период;

при заболеваниях печени (хронические гепатиты, циррозы печени;

уровень АТIII снижается пропорционально тяжести заболевания);

при остром ДВС-синдроме (ранний и важный лабораторный признак);

при введении гепарина (так как АТIII соединяется с гепарином;

при низком содержании АТIII терапия гепарином неэффективна);

при приёме пероральных контрацептивов и эстрогенов;

шоковые состояния, при которых резко падает продукция АТIII пече нью и активируются его ингибиторы в крови (наиболее частая причина снижения концентрации АТIII).

Повышение концентрации АТIII в крови расценивают как фактор риска кровотечений и отмечают в следующих случаях:

при вирусном гепатите, холестазе, тяжёлом остром панкреатите, раке поджелудочной железы;

при дефиците витамина К;

при приёме антикоагулянтов непрямого действия;

во время менструации.

Протеин С Референтные величины концентрации протеина С в плазме — 70-130%.

Протеин С — витамин К-зависимый гликопротеид плазмы крови. Син тезируется печенью в виде неактивного профермента, который под влия 334 Глава нием комплекса тромбин-тромбомодулин превращается в активную фор му. Активированный протеин С — антикоагулянтный энзим, селективно инактивирующий Vа и VIIIа факторы путём их гидролиза в присутствии ионизированного кальция, фосфолипидов и его кофактора — протеина S, тем самым препятствуя переходу протромбина в тромбин.

Определение протеина С — дополнительный тест для оценки состояния антикоагулянтной системы. Дефицит протеина С связан с высоким риском развития тромбоза, особенно венозного тромбоза и тромбоэмболии лёгоч ной артерии у молодых людей.

Дефицит протеина С — частая причина тромбоэмболических заболева ний у пожилых людей, поэтому определение его показано у больных стар ше 50 лет, страдающих тромбозами (у данной категории пациентов распро странённость дефицита протеина С составляет 25-40%) [Samana M. et al., 1983;

Angelo S.V. et al., 1996]. Недостаточность протеина С может быть двух типов: количественная (тип I) — низкая концентрация самого протеина, и качественная (тип II) — протеин присутствует, но он неактивен или мало активен. При врождённой гетерозиготной недостаточности протеина С его активность составляет 30-60%, при гомозиготной — 25% и ниже. Дальнейшие исследования показали, что резистентность к протеину С (неактивный про теин С) объясняется генетически обусловленным дефектом фактора V (и фак тора VIII в других случаях) — аномалия Лейдена [Angelo S.V. et al., 1996].

Наиболее частая причина приобретённой резистентности к протеину С — нарушения в иммунной системе.

Особенность антикоагулянтного действия протеина С заключается в том, что он не оказывает влияния без присутствия кофактора — протеина S (так же, как гепарин неэффективен без АТIII), поэтому рекомендуют опре деление протеина С проводить совместно с протеином S.

Снижение концентрации протеина С в крови наблюдают при беремен ности, заболеваниях печени, дефиците витамина К, ДВС-синдроме, го моцистеинурии. При нефротическом синдроме протеин С может теряться с мочой. Непрямые антикоагулянты, пероральные контрацептивы снижа ют концентрацию протеина С.

Для лечения и профилактики тромбозов у больных со сниженной кон центрацией протеинов С/S применяют антагонисты витамина К;

однако из-за короткого периода их полужизни в крови, на начальном этапе тера пии пероральными антикоагулянтами наблюдают транзиторное состояние гиперкоагуляции, обусловленное более быстрым падением содержания этих протеинов по сравнению с витамин К-зависимыми факторами свёртыва ния. В связи с этим у больных с исходно сниженной концентрацией проте инов С/S в крови высока вероятность развития некроза кожи, вызванного кумаринами. Во избежание этого эффекта таким больным рекомендуют начинать лечение антагонистами витамина К на фоне гепаринотерапии и отменять гепарин только после достижения требуемого стабильного уровня антикоагуляции [McLaughlin M.A. et al., 1996].

Протеин S Референтные величины концентрации общего протеина S в плазме крови — 60-140%, свободного — 65-144%.

Протеин S — витамин К-зависимый гликопротеид плазмы. Циркулирует в крови в двух формах: свободной (40%) и связанной с С4-компонентом Исследование системы гемостаза комплемента (60%). Они находятся в динамическом равновесии, но ак тивным является только свободный белок. Протеин S — кофактор про теина С в процессе инактивации Vа и VIIIа факторов свёртывания крови [Баркаган З.С., 1988]. Существующие в настоящее время тест-системы на основе ИФА позволяют определять концентрацию свободного протеина S, который имеет ведущее значение для клинической практики.

Содержание протеина S в крови у мужчин выше, чем у женщин. Не прямые антикоагулянты влияют на него слабее, чем на протеин С, это обусловлено тем, что протеин S синтезируется в эндотелиальных клетках печени и мегакариоцитах. При заболеваниях печени его уровень выше, чем протеина С. В связи с тем что основная часть протеина S связана с С4 компонентом комплемента, при увеличении концентрации С4 (острая фаза воспалительных заболеваний или обострение хронических) количест во свободного протеина S снижается. Снижение концентрации протеина S в крови возможно при нефротическом синдроме вследствие его потерь.

Классификация недостаточности протеина S Тип I — недостаточность общего протеина S.

Тип II — недостаточность свободного протеина S при нормальном или пограничном содержании общего протеина S.

Тип III — дисфункция протеина S с ослабленной антикоагулянтной активностью.

Дефицит протеина S приводит к развитию венозного тромбоза, особенно у молодых людей.

В табл. 5-14 приведены данные о влиянии изменений показателей антикоа гулянтной системы на риск развития тромбогеморрагических осложнений.

Таблица 5-14. Показатели антикоагулянтной системы и факторы риска развития тромбогеморрагических осложнений Исследуемые Норма,% Отклонение исследуемых показателей,% показатели АТIII 80-120 <80 — фактор высокого риска тромбоза >120 — фактор высокого риска геморрагий Протеин С 70-130 <70 — фактор высокого риска тромбоза Протеин S 60-140 <60 — фактор высокого риска тромбоза В табл. 5-15 приведены основные эффекты эндогенных и экзогенных антикоагулянтов.

Таблица 5-15. Основные точки приложения действия антикоагулянтов Фазы Ингибируемые факторы Антикоагулянты плазменного свёртывающей системы крови гемостаза АТIII I, II Xa, XIIa, IXa Протеин С I, II Va, VIIIa Протеин S I, II Va, VIIIa Гепарин:

малые концентрации;

I, II IXa, VIII, Xa, IIa 336 Глава Продолжение табл. 5-15.

высокие концентра- I, II,I II На все факторы и агрегацию ции тромбоцитов Непрямые антикоагу- I, II Витамин К-зависимые факторы — лянты II, VII, IX, X Плазминовая (фибринолитическая) система Показатели, характеризующие плазминовую систему:

плазминоген;

2-антиплазмин (2-АП);

продукты ПДФ;

D-димер.

Плазминоген Референтные величины содержания плазминогена в плазме крови — 80-120%.

Плазминоген (профибринолизин ) — неактивный предшественник фер мента плазмина (фибринолизина). Определение плазминогена имеет важ нейшее значение для оценки состояния фибринолитической системы.

Плазминовая система включает четыре основных компонента: плазми ноген, плазмин, активаторы проферментов фибринолиза и его ингибито ры. Плазминоген превращается в плазмин под влиянием физиологичес ких активаторов — веществ, активирующих фибринолиз. Они могут быть плазменного, тканевого и экзогенного (бактериального) происхождения.

Тканевые активаторы образуются в ткани предстательной железы, лёгких, матки, плаценты, печени, сосудистой стенки. Активаторы плазминогена содержатся в секреторных жидкостях (к ним относится, в частности, уро киназа, вырабатывающаяся в почках). Экзогенный активатор плазминоге на бактериального происхождения (стрептокиназа) активирует плазмино ген, образуя с ним активный комплекс.

Плазминовая система в основном предназначена для лизиса фибрина, хотя плазмин легко может разрушать фибриноген, факторы V, VIII и дру гие. Мощная антиплазминовая система (1-антитрипсин, 2-АП, 2-мак роглобулин, АТIII) защищает эти белки от действия плазмина, сосредота чивая его действие на фибрине.

Нарушения в плазминовой системе. Под влиянием различных патологичес ких процессов изменяются состояние плазминовой системы и продукция её отдельных компонентов. В результате активации плазминовой системы нарушается гемостаз и довольно часто развивается геморрагический фиб ринолитический синдром. Клинически он проявляется тяжёлыми крово течениями вследствие множественных дефектов в системе гемостаза. Этот синдром может протекать латентно: кровоточивость отмечается у больных лишь в послеоперационном и послеродовом периодах при повреждении тканей. Чаще всего такие состояния выявляют у больных с поражениями печени в результате уменьшения синтеза ею антиплазминов, при пораже нии органов, богатых активаторами плазминогена, и при оперативных вме шательствах на них (при операциях по поводу рака предстательной железы, Исследование системы гемостаза лёгкого), реже — у пациентов с усиленной выработкой (лекарственной, бактериальной, стрессовой и др.) активаторов плазминогена или повы шенной их концентрацией (табл. 5-16). Такой фибринолиз, обусловленный первичной активацией плазминовой системы как таковой и не отражаю щий реакцию организма на повышение образования фибрина, является первичным фибринолизом. Для его коррекции назначают антифибрино литические препараты типа антипротеаз (апротинин, -аминокапроновая кислота).

В большинстве случаев наблюдают вторичный фибринолиз вследствие активации плазминовой системы на образование фибрина в организме.

При вторичном фибринолизе плазминовая активность вначале повышает ся, а затем постепенно снижается и, наконец, полностью исчезает из-за ис черпания запасов плазминогена. Нередко снижается концентрация и акти ваторов плазминогена на фоне сниженного или повышенного количества антиплазминов (табл. 5-16). На способности ряда препаратов превращать неактивный плазминоген в плазмин основано проведение тромболити ческой терапии у больных с ИМ и тромбоэмболиями — путём введения активаторов плазминогена (чаще всего препаратов стрептокиназы). При проведении тромболитической терапии необходим постоянный контроль за уровнем плазминогена в крови.

Таблица 5-16. Изменения в системе гемостаза при первичном и вторичном фибри нолизе Фибринолиз Показатели первичный вторичный Фибриноген Снижен Снижен Плазминоген Повышен Снижен 2-АП Снижен Повышен ПДФ Повышен Повышен Наиболее ярко сдвиги в плазминовой системе прослеживаются при ДВС синдроме, когда вначале активация фибринолиза является защитной, сано генной реакцией, и поэтому ингибиторы плазмина здесь противопоказаны.

Следует иметь в виду, что плазминоген, так же как и все другие белки ос трой фазы, повышается при инфекциях, травмах, опухолях и в последние месяцы беременности.

2-Антиплазмин Референтные величины содержания 2-АП в плазме крови — 80-120%.

2-АП — основной быстродействующий ингибитор плазмина. Он подав ляет фибринолитическую и эстеразную активность практически мгновен но. Механизм его действия основан на том, что он препятствует адсорбции плазминогена на фибрине, таким образом снижает количество образующе гося плазмина на поверхности сгустка и тем самым резко замедляет фиб ринолиз. Для специфического связывания 2-АП с фибриногеном необхо димо присутствие фактора XIII. 2-АП характеризует состояние системы ингибиторов фибринолиза.

338 Глава Определение 2-АП используют в комплексной оценке состояния плаз миновой системы. При оценке содержания 2-АП нужно учитывать, что оно зависит и от содержания плазминогена, и от количества фибриногена в крови.

Снижение активности 2-АП наблюдают при тяжёлых гепатитах, циррозе печени, хронических тонзиллитах, ДВС-синдроме, тромболитической те рапии стрептокиназой. У больных с хроническим течением ДВС-синдрома плазминоген активируется медленно и содержание 2-АП резко снижается, что связано с быстрым выведением комплекса 2-АП-плазмин. У больных с низким содержанием 2-АП-АП и пониженной активностью фибринста билизирующего фактора послеоперационный период может осложниться кровотечением.

Повышение концентрации 2-АП в крови возможно у больных сахарным диабетом, перенёсших стрептококковую инфекцию, со злокачественны ми новообразованиями, острыми тромбозами, после оперативных вмеша тельств.

Продукты деградации фибриногена/фибрина Референтные величины концентрации ПДФ в плазме крови — менее 10 мг/л.

ПДФ образуются в организме при активации системы фибринолиза (вза имодействия плазмина с фибриногеном и фибрином), которая развивается в ответ на внутрисосудистое образование фибрина. ПДФ обладают анти тромбопластиновым, антитромбиновым и антиполимеразным действием.

Активный плазмин вызывает последовательное асимметричное расщеп ление фибриногена/фибрина. Вначале от их - и -цепей отщепляются низкомолекулярные фрагменты. После их отщепления в плазме крови ос таётся крупномолекулярный фрагмент Х, который еще сохраняет способ ность образовывать фибрин (свёртываться) под влиянием тромбина. Затем под влиянием плазмина фрагмент Х расщепляется на фрагменты Y и D, а фрагмент Y — на фрагменты D и Е. Крупномолекулярные фрагменты фибринолиза (фрагменты Х и Y) получили название «ранние», а фраг менты D и Е — «поздние» или конечные. Эти фрагменты расщепления фибриногена и фибрина и называют ПДФ. У здорового человека концен трация ПДФ чрезвычайно низка. Обнаружение повышенного содержания ПДФ — ранний диагностический признак ДВС-синдрома. Определение ПДФ в плазме крови может быть диагностическим показателем закупорки сосудов, которую трудно определить клинически. Увеличение их количес тва бывает при лёгочной тромбоэмболии, ИМ, тромбозах глубоких вен, в послеоперационный период, при осложнениях беременности (отслойка плаценты, эклампсия), у больных с различными злокачественными ново образованиями, лейкозами, при острой и ХПН, обширных травмах, ожо гах, шоке, инфекционных заболеваниях, сепсисе, коллагенозах, парапро теинемиях и др. Постоянное обнаружение ПДФ имеет большое значение в диагностике хронической формы ДВС-синдрома.

D-димер Референтные величины концентрации D-димера в плазме крови — менее 0,25 мкг/мл (250 мкг/л) или 0,5 мкг эквивалентов фибриногена/мл (500 мкг эквивалентов фибриногена/л).

Исследование системы гемостаза Рис. 5-7. Алгоритм диагностики тромбоэмболии лёгочной артерии 340 Глава При расщеплении волокон фибрина образуются фрагменты — D-диме ры. При определении с помощью специфических антисывороток содер жания D-димеров можно судить, в какой степени в исследуемой крови выражен фибринолиз, но не фиброгенолиз. Повышенное содержания D-димера — один из главных маркёров активации системы гемостаза, поскольку отражает как образование фибрина в исследуемой крови, так и его лизис. Период выведения D-димера из кровотока составляет 6 ч, что значительно выше других маркёров активации коагуляционного каскада (фрагмента 1+2 — продукта протеолиза протромбина, тромбин-антитром бинового комплекса, фибринопептида А). В связи с этим образцы плазмы крови нельзя хранить более 6 ч.

Определение в плазме D-димера используется для исключения тромбо за любой локализации и диагностики ДВС-синдрома. При тромбоэмбо лии лёгочной артерии содержание D-димера в плазме обычно превышает 0,5 мкг/мл (500 мкг/л). Алгоритм диагностики тромбоэмболии лёгочной артерии представлен на рис. 5-7.

Повышенные концентрации D-димера в плазме крови могут быть при ИБС, ИМ, злокачественных опухолях, заболеваниях печени, активном вос палительном процессе, инфекционных заболеваниях, обширных гемато мах, при тромболитической терапии, беременности, у лиц старше 80 лет.

Введение гепарина вызывает резкое и немедленное падение концентра ции D-димера в плазме, которое продолжается более медленно и в даль нейшем при лечении прямыми антикоагулянтами. Назначение непрямых антикоагулянтов также сопровождается снижением содержания D-димера, но оно носит более плавный характер. Обычно на фоне лечения непрямы ми антикоагулянтами концентрация D-димера ниже 500 мкг/л достигается спустя 3 мес.

У пациентов с дефицитом тканевого активатора плазминогена или вы сокой активностью ингибитора активатора плазминогена (что приводит к снижению фибринолитической активности плазмы крови) концентрация D-димера может не повышаться даже при наличии тромбоза глубоких вен или тромбоэмболии лёгочной артерии.

У больных ИМ и облитерирующим атеросклерозом сосудов нижних ко нечностей повышенная концентрация D-димера в плазме крови связана с увеличением вероятности развития осложнений. Повышение уровня D-димера и фибриногена у больных с постоянной формой мерцательной аритмии считают предвестником тромбоэмболических осложнений.

Инфекции, воспалительные процессы, геморрагические осложнения, на личие в крови ревматоидного фактора, образование фибрина при заживле нии послеоперационных ран могут сопровождаться повышением концен трации D-димера.

Диагностическая чувствительность определения D-димера для диагнос тики тромбоэмболии лёгочных артерий составляет 90%, специфичность — менее 50%, для диагностики тромбоза глубоких вен — 60-100% и 29-91% соответственно.

Концентрация D-димера в плазме крови повышается на ранних сроках беременности, достигая к её концу значений в 3-4 раза выше исходных.

Значительно более высокие концентрации D-димера выявляют у женщин с осложнениями беременности (гестозы, преэклампсия), а также у бере менных с сахарным диабетом и заболеваниями почек.

Глава Лекарственный мониторинг Одно из современных направлений в области клинической биохимии — лекарственный мониторинг. Контроль или мониторирование ЛС в течение всего периода лечения представляет собой комплексную аналитическую проблему. Цели лекарственного мониторинга:

определение правильного режима и дозировки ЛС индивидуально для каждого пациента;

определение наиболее эффективной концентрации ЛС для достижения успешного лечения;

предупреждение развития токсических эффектов;

контроль происходящих изменений в каждый период лечения с воз можностью менять дозировку препаратов в зависимости от состояния пациентов;

изучение взаимозависимостей различных факторов при назначенной терапии.

Клинические показания к лекарственному мониторингу Риск передозировки применяемого ЛС.

Отсутствие ожидаемого эффекта от применяемой дозы препарата.

Необходимость определения терапевтической дозы ЛС и нет возмож ности оценить его эффективность более простым способом.

Схожесть симптомов болезни пациента с симптомами токсического действия ЛС.

Риск взаимодействия применяемых при лечении пациента ЛС между собой.

Случаи, когда заболевание (заболевания) пациента может изменять аб сорбцию ЛС, связывающую способность белков крови, выделение ЛС из организма, образование его активных метаболитов.

Развитие противоположного ожидаемому клинического эффекта при применении ЛС.

ДИГОКСИН В СЫВОРОТКЕ КРОВИ Концентрация дигоксина в сыворотке крови при применении в терапевтических дозах составляет 0,8-2 нг/мл (1,2-2,7 нмоль/л). Токсическая концентрация — более 2 нг/мл (более 2,7 нмоль/л).

Период полувыведения дигоксина у взрослых составляет 38 ч при нор мальной функции почек и 105 ч при анурии. Время достижения состояния равновесия препарата в крови — 5-7 дней.

Дигоксин относится к наиболее часто применяемым сердечным гликози дам. Его обычно принимают в течение месяца. Абсорбция в ЖКТ составляет 60-80% принятой дозы. Из крови большая часть препарата выводится поч ками. Назначают дигоксин, в основном, при сердечной недостаточности и как антиаритмическое средство, наряду с другими препаратами (табл. 6-1).

Pages:     | 1 |   ...   | 5 | 6 || 8 | 9 |   ...   | 15 |



© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.