WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

   Добро пожаловать!

Pages:     | 1 || 3 | 4 |   ...   | 7 |

«ВВЕДЕНИЕ ББК 46.91 Г86 УДК 638.15(031 Р е ц е н з е н т ы : В. И. Головнев, кандидат биологиче ских наук; ...»

-- [ Страница 2 ] --

М е р ы б о р ь б ы. Ряд авторов проводили эксперименты по Споры грибов обладают высокой устойчивостью к физиче лечению заболевших пчел с помощью обычных лекарственных ским и химическим факторам. Для них губительны: нагревание до препаратов, но результат был отрицательным. Эффективным 60 °С в течение 30 мин;

раствор сулемы 1:1000;

2—5 %-ные оказалось применение нистатина.

растворы фенола;

5 %-ный раствор формалина.

Поскольку возбудитель аскосфероза длительно сохраняется П а т о г е н н о с т ь. Все породы пчел восприимчивы к ука на объектах пчеловодства, а эффективные лечебные средства занным грибам. Наиболее патогенным для пчел и расплода отсутствуют, то в основе оздоровительных мероприятий должно является гриб аспергиллюс флавус. К аспергиллезу также вос быть строгое выполнение ветеринарно-санитарных мероприятий приимчивы тутовый и дубовый шелкопряды, многие виды диких на неблагополучных пасеках. Из больных семей изымают соты насекомых, теплокровные животные и человек.

с пораженным расплодом и пергой и перетапливают их на воск, Э п и з о о т о л о г и ч е с к и е д а н н ы е. Аспергиллы ши который направляют для обеззараживания на воскозавод. Отка роко распространены в природе, они размножаются в почве, ченный мед нельзя скармливать пчелам. На неблагополучных навозе, живых и погибших растениях, в том числе в тычинках пасеках проводят текущую дезинфекцию пустых ульев, сотов, цветов и нектарниках. В улей аспергиллы заносятся пчелами а также инвентаря и оборудования;

составляют гнезда из проде с нектаром и пыльцой, где при наличии повышенной влаги они зинфицированных ульев и сотов;

перегоняют больные семьи на развиваются на сотах, в перге, на трупах личинок, куколок и новые гнезда, осуществляют заключительную дезинфекцию.

взрослых пчел. Способствуют возникновению заболевания высо Ульи, рамки и другие деревянные предметы от больных кая влажность, сырая, дождливая погода. Наиболее часто встре пчелиных семей тщательно механически очищают и обрабатыва чается болезнь на пасеках, расположенных в затененных местах, ют двукратно через час по 0,25 л/\г одним из следующих с большим травостоем, когда ульи стоят на низких подставках дезередств: раствором, содержащим 10% перекиси водорода или сырой почве.

и 0,5 % муравьиной кислоты (экспозиция с момента первого Болезнь возникает преимущественно весной и протекает нанесения 4 ч);

10 %-ным раствором препарата однохлорнстогс в виде спорадических случаев в отдельных семьях. Процент йода (экспозиция 5 ч);

щелочным раствором формальдегида, гибели пчел в пчелиных семьях колеблется в зависимости от содержащим 15 % формальдегида и 5 % едкого натра (экспози условий и силы семьи. При плохих условиях зимовки, большой ция б ч). После дезинфекции все предметы промывают водой влажности в улье и слабости семьи болезнь приводит к ее гибели.

и просушивают.

Весной и летом при прогрессировании болезни семья пчел может ции и обеспечивают пчел необходимым количеством доброкаче покинуть улей. ственного меда или сахарного сиропа (2:1). Для кормления пчел П а т о г е н е з. Заражение личинок пчел происходит через нельзя использовать мед или пергу, взятые из больных семей.

кишечник при употреблении инфицированных спорами гриба При работе с больными семьями, чтобы споры не попадали нектара, пыльцы. Реже возбудитель проникает в организм через на слизистые оболочки, необходимо защищать глаза специальны поврежденные различными паразитами наружные покровы. За- ми очками, а рот и нос — влажной марлевой повязкой;

пора болевать личинки и пчелы могут в любом возрасте. Аспергиллюс женные соты нужно вынимать из гнезда осторожно в тихую флавус и фумигатус вызывают токсикомикоз, т. е. не только безветренную погоду.

действуют токсинами, но и развиваются в тканях личинок и МЕЛАНОЗ — инфекционная, хронически протекающая бо взрослых пчел. Гибель их наступает через 2—4 дня после зараже- лезнь пчелиных маток, сопровождающаяся прекращением яйце ния. кладки, образованием каловой пробки и почернением яичников.

П р и з н а к и б о л е з н и. Болезнь протекает в скрытой В о з б у д и т е л ь — несовершенный дрожжеподобный гриб и явной форме. При явной форме наиболее часто происходит ауробазидиум — Aurobasidium pullulans (син.: Melanosella mors гибель расплода и реже — взрослых пчел. Погибшие личинки apis).

и куколки сморщиваются, твердеют, сегментация их тела исчеза- Возбудитель меланоза довольно устойчив к физическим ет, окраска тускнеет, приобретая желтоватый оттенок. Свежепо- и химическим факторам. Гриб остается жизнеспособным после раженный расплод, в зависимости от вида аспергилл, покрыва- многократного замораживания и оттаивания, при воздействии ется белым, серым, желтовато-зеленым или черным налетом света в течение 8 мес, в меде — в течение 12 мес (срок наблюде прорастающего гриба. При удалении пчелами плесени с окамене- ния). Он сохранял вирулентность на микрошприце для опло лых мумий они становятся более светлыми. Сухие трупы личинок дотворения пчелиных маток после его обработки 70 и 96 %-ным свободно лежат в ячейках и легко вываливаются. Взрослые пчелы этиловым спиртом. Возбудитель погибал при воздействии при поражении вначале возбуждены, активно двигаются, затем 2 %-ного раствора гипохлорида натрия в течение 20 мин;

слабеют;

брюшко их первоначально становится плотным, а затем 0,1 %-ного раствора йода и в 70 %-ном спирте — 10 мин;

2 %-но твердым, что можно легко определить при сдавливании его между го раствора однохлористого йода — 5 мин.

пальцами. П а т о г е н н о с т ь. Возбудитель патогенен для маток, ра Д и а г н о з на аспергиллез ставят на основании эпизоотиче- бочих пчел и трутней. Интенсивность поражения пчел зависит от ских данных, признаков болезни, результатов микроскопического их возраста;

молодые особи поражаются меньше. Матки разных и микологического исследований. пород (кавказские, среднерусские, итальянские, дальневосточ П р о ф и л а к т и к а. Содержат сильные семьи в хорошо ные) в одинаковой степени заболевают меланозом. При искус утепленных гнездах. Не рекомендуется размещать ульи в сырых, ственном заражении болезнь не всегда возникает при скармлива затемненных местах. Необходимо создать условия для хорошей нии возбудителя. При заражении маток через влагалище болезнь вентиляции в ульях, обеспечить семьи достаточным количеством проявляется через 6—8 дней. Естественное заражение наиболее доброкачественного корма. Нельзя использовать антибиотики без часто возникает при проникновении возбудителя через половые соответствующих показаний к их применению. пути, а также при нарушении перитрофической мембраны ки М е р ы б о р ь б ы. В основе борьбы с этой болезнью лежит шечника.

применение комплекса ветеринарно-санитарных мероприятий. Э п и з о о т о л о г и ч е с к и е д а н н ы е. Болезнь зареги При выраженной степени заболевания, когда поражаются рас- стрирована во многих странах. Возбудитель болезни широко плод и взрослые пчелы, семьи уничтожают. Для этого пчел распространен на растениях, заносится в улей рабочими пчелами.

закуривают сернистым газом или формалином, а рамки с сотами Развитию болезни способствуют ухудшение условий кормления, и погибшими пчелами сжигают. Ульи и инвентарь после тщатель- потребление падевого меда. Большой ущерб болезнь может ной механической очистки обеззараживают огнем паяльной наносить матковыводным пчелохозяйствам, а также обычным лампы или 5 %-ным раствором формальдегида. Место стоянки пасекам в результате снижения продуктивности и гибели маток.

улья перекапывают на глубину 10—15 см и обрабатывают Семьи без маток, как правило, превращаются в трутовочные.

4 %-ным раствором формальдегида (10л/м 2 ). При незначитель- П а т о г е н е з. Возбудитель развивается чаще в эпители ном поражении соты с заболевшим расплодом и утепляющий альных клетках яичника, яйцевода, но поражает и другие органы.

материал с холстиками, покрытые плесенью, удаляют из улья Проникнув в гемолимфу, он разносится по организму и вызывает и сжигают. Соты с пчелами переносят в чистый, сухой и проде- метастазы в различных органах и тканях. У маток наступает зинфицированный улей. Слабые семьи подсиливают. Гнезда некроз яичников. Нередко поражаются большая ядовитая железа тщательно утепляют, создают условия для нормальной вентиля- и ее резервуар, спермиоприемник, мышцы, кишечник. Малая 56 ядовитая железа, содержащая секрет щелочной реакции, не бодно лежащих бластоспор, встречаются клетки, расположенные повреждается. Типичные некрозы тканей в пораженных органах цепочками и гроздями из 6—7 клеток. Группа дрожжеподобных наступают уже через сутки после заражения. грибов рода кандида — аэробы. Хорошо растут на плотных и П р и з н а к и б о л е з н и. Болезнь чаще развивается зо жидких средах (Сабуро, cvc.ie. картофельном и кукурузном вторую половину лета, в большинстве случаев она протекает агаре). Оптимальный пН 6,0--6,5. На плотных средах образуют скрыто. Пчеломатки в начале болезни сокращают, а затем пол- сметакообразные, круглые S- и R-колонии серо-белого цвета, ностью прекращают кладку яиц. В гнезде больной семьи отсут- иногда кремовые, врастающие в субстрат. На жидких средах ствуют яйца и молодые личинки Больные матки становятся грибы образуют густой осадок и пристеночное кольцо. Биохими вялыми, длительное время науолг.ся в неподвижном, оцепе- ческая активность у различных видов неодинаковая. Углеводы невшем состоянии, легко срываются с сота и падают на дно улья. они используют с образованием кислоты и нередко газа;

чаще Движения их скованные, брюшко утолщено и опущено. Анальное сбраживают глюкозу, фруктозу, маннозу, галактозу, мальтозу, отверстие закупоривается каловыми массами. Рабочие пчелы сахарозу, лактозу, раффинозу.

тоже болеют меланозом и гибнут. У больных трутней выводные У с т о й ч и в о с т ь дрожжеподобных грибов зависит от пути половых органов выворачиваются наружу и вскоре наступа вида гриба и субстрата, в котором он находится. В зимних запа ет смерть.

сах перги грибы сохраняются 4—6 мес. Кипячение убивает их Д и а г н о з ставят на основании признаков болезни и ре- через 10—15 мин, сухой жар (90—110°С) — через 20—30 мин.

зультатов микроскопических и микологических исследований. Грибы хорошо выдерживают высушивание, замораживание, рас Л е ч е н и е пчел и дезинфекция ульев, сотов, инвентаря не сеянный свет. В стерильной воде, почве они сохраняются до разработаны. 12 мес, в нестерильной почве — 3—7 мес. Фунгицидным действи П р о ф и л а к т и к а и м е р ы б о р ь б ы. Улучшают ус- ем обладают препараты йода, йодистого калия, раствор Люголя, ловия содержания пчелиных семей. На зиму удаляют из ульев 1 %-ный раствор однохлористого йода, 2 %-ный раствор форма падевый мед и заменяют его цветочным или сахарным сиропом. лина.

Маток, прекративших кладку яиц, заменяют здоровыми. При П а т о г е н н о с т ь дрожжеподобных грибов и их L-форм инструментальном осеменении каждой пчелиной матки микрош- определяют на пчелах и белых мышах. По данным В. А. Триленко приц промывают водой и дезинфицируют 5 мин 2 %-ным раство- (1975), патогенным эффектом обладает масса из растертых ром однохлористого йода, или 10 мин 0,1 %-ным раствором йода грудных мышц и пораженных трахей, профильтрованных через в 70 %-ном спирте. Остатки йода удаляют промыванием инстру- вату. Пчелы в садках погибают на 10—16 день, мышцы при внут ментов в 1 %-ном растворе бисульфата натрия и затем промыва- рибрюшинном заражении чистыми культурами (0,3 мл 3-су нием стерильным физраствором. точной культуры) — через 2 нед.

КАНДИДАМИ КОЗ (син.: эльфунгиоз, кандидоз, монилиаз, Грибы рода кандида широко распространены в природе, их молочница, оидомикоз) — инфекционная болезнь пчел, характе- выделяют из различных растительных субстратов, плодов, ово ризующаяся поражением передних грудных трахей, перерожде- щей, продуктов животного происхождения, из почвы.

нием грудных мышц. Е. И. Скрыпник и др. (1979) выделили эти грибы из виноградного В о з б у д и т е л ь — дрожжеподобные грибы кандида аль- сока осыпавшихся на землю виноградных ягод.

биканс, трописалие, псевдотропикалис, круззей, паракруззей, Э п и з о о т о л о г и ч е с к и е д а н н ы е. Дрожжеподобные стеллатоидеа, чалмерзи и другие (Candida albicans, С. pseudotro- грибы заносят в улей с кормом и водой рабочие пчелы. Пути picalis, С. tropicalis, С. krussei, С. stellatoidea, С. chalmersi и их распространения возбудителя болезни внутри улья и за его преде L-формы — микроорганизмы, утратившие клеточную стенку). лы такие же, как и при других инфекционных болезнях пчел.

В ветеринарной микологии дрожжеподобные грибы видов П а т о г е н е з. Попадая в организм ослабленных пчел, кандида альбиканс, тропикалис известны как возбудитель мо- грибы начинают размножаться и прорастают в слизистые обо лочницы птиц, реже заболевания телят и поросят. Патогенными лочки, вызывая их некроз. В зависимости от локализации возбу для пчел могут быть отдельные виды грибов и их ассоциации. дителя нарушаются функции пищеварительной и дыхательной Дрожжеподобные грибы — одноклеточные микроорганизмы, об- систем, грудных мыши.

ладающие псевдомицелием, мицелием, бластоспорами, псевдоко- П р и з н а к и б о л е з н и. Пчелиные семьи сильно ослабе нидиямн. Некоторые виды их образуют хламидоспоры. В отличие вают в период зимовки, беспокоятся, погибают взрослые пчелы, от истинных дрожжей они не образуют аски. Бластоспоры округ- а весной и расплод. При исследовании под лупой отпрепарозан лой, удлиненной, яйцевидной и редко круглой формы. Молодые ных трахей обнаруживается пятнистое поражение их, напомина клетки обычно круглые или яйцевидные диаметром 2—5 мкм, ющее таковое при акарапидозе. При сильном поражении трахеи а зрелые — округлые или удлиненные — 5—9 мкм. Помимо сво- бывают наполнены коричневатой, как бы маслянистой, пузырча 58 ядовитая железа, содержащая секрет щелочной реакции, не бодно лежащих бластоспор, встречаются клетки, расположенные повреждается. Типичные некрозы тканей в пораженных органах цепочками и гроздями из б—7 клеток. Группа дрожжеподобных наступают уже через сутки после заражения. грибов рода кандида — аэробы. Хорошо растут ка плотных и П р и з н а к и б о л е з н и. Болезнь чаще развивается во жидких средах (Сабуро, сусле, картофельном и кукурузном вторую половину лета, в большинстве случаев она протекает агарг). Оптимальный рН 6.0--6,5. На плотных средах образуют скрыто. Пчеломатки в начале болезни сокращают, а затем пол- сметанообразные, круглые S- и R-колонии серо-белого цвета, ностью прекращают кладку яиц. В гнезде больной семьи отсут- иногда кремовые, врастающие в субстрат. На жидких средах ствуют яйца и молодые личинки Больные матки становятся грибы образуют густой осадок и пристеночное кольцо. Биохими вялыми, длительное время на\«.и;

г.ся з неподвижном, оцепе- ческая активность у различных видов неодинаковая. Углеводы невшем состоянии, легко срываются с сота и падают на дно улья. они используют с образованием кислоты и нередко газа;

чаще Движения их скованные, брюшко утолщено и опущено. Анальное сбраживают глюкозу, фруктозу, маннозу, галактозу, мальтозу, отверстие закупоривается каловыми массами. Рабочие пчелы сахарозу, лактозу, раффинозу.

тоже болеют меланозом и гибнут. У больных трутней выводные У с т о й ч и в о с т ь дрожжеподобных грибов зависит от пути половых органов выворачиваются наружу и вскоре наступа вида гриба и субстрата, в котором он находится. В зимних запа ет смерть.

сах перги грибы сохраняются 4—6 мес. Кипячение убивает их Д и а г н о з ставят на основании признаков болезни и ре- через 10—15 мин, сухой жар (90—110°С) — через 20—30 мин.

зультатов микроскопических и микологических исследований. Грибы хорошо выдерживают высушивание, замораживание, рас Л е ч е н и е пчел и дезинфекция ульев, сотов, инвентаря не сеянный свет. В стерильной воде, почве они сохраняются до разработаны. 12 мес, в нестерильной почве — 3—7 мес. Фунгицидным действи П р о ф и л а к т и к а и м е р ы б о р ь б ы. Улучшают ус- ем обладают препараты йода, йодистого калия, раствор Люголя, ловия содержания пчелиных семей. На зиму удаляют из ульев 1 %-ный раствор однохлористого йода, 2 %-ный раствор форма падевый мед и заменяют его цветочным или сахарным сиропом. лина.

Маток, прекративших кладку яиц, заменяют здоровыми. При П а т о г е н н о с т ь дрожжеподобных грибов и их L-форм инструментальном осеменении каждой пчелиной матки микрош- определяют на пчелах и белых мышах. Поданным В. А. Триленко приц промывают водой и дезинфицируют 5 мин 2 %-ным раство- (1975), патогенным эффектом обладает масса из растертых ром однохлористого йода, или 10 мин 0,1 %-ным раствором йода грудных мышц и пораженных трахей, профильтрованных через в 70 %-ном спирте. Остатки йода удаляют промыванием инстру- вату. Пчелы в садках погибают на 10—16 день, мышцы при внут ментов в 1 %-ном растворе бисульфата натрия и затем промыва- рнбрюшинном заражении чистыми культурами (0,3 мл 3-су нием стерильным физраствором. точной культуры) — через 2 нед.

КАНДИДАМИ КОЗ (син.: эльфунгиоз, кандидоз, монилиаз, Грибы рода кандида широко распространены в природе, их молочница, оидомикоз) — инфекционная болезнь пчел, характе- выделяют из различных растительных субстратов, плодов, ово ризующаяся поражением передних грудных трахей, перерожде- щей, продуктов животного происхождения, из почвы.

нием грудных мышц. Е. И. Скрыпник и др. (1979) выделили эти грибы из виноградного В о з б у д и т е л ь — дрожжеподобные грибы кандида аль- сока осыпавшихся на землю виноградных ягод.

биканс, трописалис, псевдотропикалис, круззей, паракруззей, Э п и з о о т о л о г и ч е с к и е д а н н ы е. Дрожжеподобные стеллатоидеа, чалмерзи и другие (Candida albicans, С. pseudotro- грибы заносят в улей с кормом и водой рабочие пчелы. Пути picalis, С. tropicalis, С. krussei, С. stellatoidea, С. chalmersi и их распространения возбудителя болезни внутри улья и за его преде L-формы— микроорганизмы, утратившие клеточную стенку). лы такие же, как и при других инфекционных болезнях пчел.

В ветеринарной микологии дрожжеподобные грибы видов П а т о г е н е з. Попадая в организм ослабленных пчел, кандида альбиканс, тропикалис известны как возбудитель мо- грибы начинают размножаться и прорастают в слизистые обо лочницы птиц, реже заболевания телят и поросят. Патогенными лочки, вызывая их некроз. В зависимости от локализации возбу для пчел могут быть отдельные виды грибов и их ассоциации. дителя нарушаются функции пищеварительной и дыхательной Дрожжеподобные грибы — одноклеточные микроорганизмы, об- систем, грудных мыши.

ладающие псевдомицелием, мицелием, бластоспорами, псевдоко- П р и з н а к и б о л е з н и. Пчелиные семьи сильно ослабе нидиями. Некоторые виды их образуют хламидоспоры. В отличие вают в период зимовки, беспокоятся, погибают взрослые пчелы, от истинных дрожжей они не образуют аски. Бластоспоры округ- а весной и расплод. При исследовании под лупой отпрепарозан лой, удлиненной, яйцевидной и редко круглой формы. Молодые ны.х трахей обнаруживается пятнистое поражение их, напомина клетки обычно круглые или яйцевидные диаметром 2—5 мкм, ющее таковое при акарапидозе. При сильном поражении трахеи а зрелые — округлые или удлиненные — 5—9 мкм. Помимо сво- бывают наполнены коричневатой, как бы маслянистой, пузырча 58 ния или соскобы каловых масс;

мазки гемолимфы и отпечатки той массой, которая вытекает при надрыве. Одновременно наблю мышц на предметных стеклах;

воскоперговую крошку со дна дается перерождение грудных мышц.

ульев;

насекомых паразитов и вредителей пчел.

Д и а г н о з ставят на основе учета эпизоотологических Для установления причин заболевания пчел в ветеринарную данных, признаков болезни, результатов микроскопических и ми лабораторию посылают:

кологических исследований.

а) при гнильцовых болезнях — образцы сотов (сота) разме П р о ф и л а к т и к а и м е р ы б о р ь б ы не разработаны.

ром не менее 10Х 15 см с больными и погибшими личинками Е. И. Скрыпник и др. (1979) рекомендуют при кандидамикозе и куколками (в случае гибели незапечатанных личинок образец пчел изъять из больных пчелиных семей сотовые рамки с зимними должен содержать неразложившиеся личинки);

при подозрении кормами, пчел подкормить сахарным сиропом с добавлением на мешотчатый расплод образцы сотов с пораженным расплодом нистатина и леворина. Ослабевшие семьи соединить и переселить консервируют 50 %-ным раствором глицерина;

в чистые продезинфицированные ульи на запасные и обеззара б) при подозрении на болезни, проявляющиеся септицемией женные соторамки.

(септицемия, сальмонеллез, гафниоз, колибактериоз) — по МУКОРМИКОЗ ПЧЕЛ (син.: фикомикоз, мукороз) — ин 50 живых пчел от каждой больной пчелиной семьи;

фекционная болезнь пчел, при которой поражаются взрослые в) при подозрении на вирозы и спироплазмоз — по 50 за пчелы, трутни и матки.

консервированных в 50% -ном глицерине пчел, проявлявших В о з б у д и т е л ь — н и з ш и е грибы класса фикомицетес, признаки заболевания;

семейства мукороцес, имеющие хорошо развитый одноклеточный г) при подозрении на варрооз: зимой — трупы пчел и сор со мицелий. Размножение бесполое и половое. Известно около дна ульев в количестве не менее 200 г с пасеки;

весной — пчели 800 видов фикомицетов, большинство которых — водные или ный расплод на соте с нижнего края размером ЗХ 15 см и сор со наземные сапрофиты. Болезнь у пчел слабо изучена, встречается дна улья в указанном выше количестве;

летом и осенью — запе она в ослабленных семьях.

чатанный расплод (пчелиный и трутневый) в указанном количе АКТИНОМИКОЗ МАТОК — инфекционная болезнь, пора стве или 50—100 экземпляров живых внутриульевых пчел от жающая половые пути маток и другие органы.

10 % подозреваемых в заболевании пчелосемей пасеки;

В о з б у д и т е л ь — лучистые грибки стрептомицеты, кото д) при других болезнях — по 50 живых пчел с признаками рые встречаются в природе на растительных и животных субстра или столько же трупов свежего подмора из подозреваемых семей;

тах, большинство их сапрофиты. Болезнь изучена слабо.

при обследовании (паспортизации) пасек берут такое же количе К числу других грибов, заражающих и вызывающих гибель ство пчел от 10 % семей пасеки;

пчел и их расплода, относятся: триходерма лигнорум Т.;

мукор е) при подозрении на отравление — 400—500 трупов пчел, муцедо Л. и дрожжи саккаромицес апикулятус X.

200 г откаченного незапечатанного меда и 50 г перги в соте от АЛЬГОЗЫ пчел — отравление пчелиных семей сине-зелены 10 % пчелиных семей с характерными признаками поражения, ми водорослями. Чаще всего заболевание появляется в пчелиных а также 100—200 г зеленой массы растений с участка, посещае семьях при использовании непроточной воды. У больных пчел мого пчелами;

наблюдаются нарушение координации движения и более темная ж) для обнаружения в меде пади или возбудителей бо окраска наружных покровов. Трупы пчел размягченные, издают неприятный запах. лезней — 100 г, пестицидов — 200 г меда;

воска и вощины — от каждой партии не менее 100 г.

Самопроизвольного распада тела на отдельные части не наблюдается. Патологический материал упаковывают и пересылают:

В дифференциальном отношении следует исключить септице- живых пчел в стеклянной банке, которую обвязывают двумя мию пчел и вирусный паралич. слоями марли или ткани;

образцы сотов с расплодом и сотовые рамки — в фанерном или деревянном ящике без обертывания сотов бумагой, отделяя ЛАБОРАТОРНЫЕ МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ их друг от друга и от стенок ящика деревянными планками;

БАКТЕРИОЗОВ И МИКОЗОВ ПЧЕЛ больных живых пчел на закрепленных сотовых рамках с кормом в количестве, достаточном на время пересылки, в фа ПРАВИЛА ОТБОРА И ПЕРЕСЫЛКИ ПАТМАТЕРИАЛА. нерном или деревянном ящике;

Для бактериологического, микроскопического, серологического, погибших пчел и крошку со дна ульев — в бумажных биологического, химического и других видов исследований берут пакетах;

пробы патматериала: живых пчел и их трупы;

соты с расплодом, мед— в стеклянной посуде, плотно закрытой крышкой;

медом, пергой;

засохшие корочки пчелиных личинок;

испражне- воск и вощину — в целлофановом пакете.

Для микроскопии готовят тонкие мазки из гнильцовой массы При консеовации матеоиала в глицеоине пчел и образцы или «корочек» (2—3 штуки), которые предварительно размачи сотов помещают в чистые стеклянные банки с плотно закры вают теплым (35—40 °С) стерильным физраствором в течение Еающейся крышкой и заливают 50 %-ным глицерином;

банки 20—30 мин. Его наливают в ячейки, тщательно перемешивают обертывают мягкой тканью, помещают в деревянный ящик.

гнильцовую массу вращательными движениями конца пастеров Подмор пчел, зеленую массу для исследования на отравле ской пипетки. При плохом размачивании в прокрашенных ку ние упаковывают в чистые мешочки из целлофана, полиэтилена, сочках тканей споры обнаружить трудно. В тягучей гнилостной бумаги, материи и помещают вместе с сотами в ящик.

массе и корочках обнаруживают споры возбудителя, которые Вредителей и паразитов пчел, имеющих жесткий покров, хорошо окрашиваются 2 %-ным спиртовым раствором карболо отправляют в картонной коробке на вате;

имеющих мягкий по вого фуксина в течение 1,5—2 мин (по Граму споры не окрашива кров — во флаконе с 10 %-ным раствором формалина, 80 %-ном ются). На искусственных питательных средах спорообразование спирте или меде. Картонные коробки или флаконы упаковывают слабое или отсутствует. Споры овальной формы (1,2—1,8X 0,6— в фанерный или деревянный ящик.

0,7 мкм).

Отправляемый патматериал сопровождают письмом ветери При микроскопии мазков (увеличение 900) обнаруживают нарного специалиста, производившего отбор и упаковку проб.

грамположительные палочки Вас. larvae длиной 1,5—6 мкм В нем указывают наименование хозяйства (фамилию, имя, отче и шириной 0,5—0,8 мкм;

они располагаются цепочками в виде ство владельца пасеки), адрес, номер улья, количество проб, характерные признаки заболевания и цель исследования. При стрептобацилл (рис. 12).

подозрении на отравление прилагают акт или копию акта ко- Для выращивания возбудителя американского гнильца пчел миссии, обследовавшей пасеку и отобравшей материал, в сопро- используют следующие среды.

водительном письме конкретно указывают, на какой ядохимикат 1. Среда Томашеца (или мясо-пептонный сывороточный следует провести исследование. Сопроводительное письмо дол- агар): ее готовят добавлением к расплавленному и охлажденно жно иметь штамп ветеринарного учреждения. му до 45—50 °С мясо-пептонному агару (рн 6,8—7,0) 10% Срок доставки проб на исследование в лабораторию не должен превышать суток с момента отбора материала.

Ветеринарная лаборатория регистрирует поступивший мате риал в соответствующем журнале, а результаты исследований сообщает в хозяйство. При установлении возбудителя болезни определяют чувствительность выделенного микроорганизма к ан тибиотикам и рекомендуют применение наиболее активного анти биотика. После исследования патматериал сжигают.

ПОРЯДОК ИССЛЕДОВАНИЯ ПАТМАТЕРИАЛА. Каж дый образец патматериала обрабатывают по следующей схеме:

а) наружный (визуальный) осмотр сотов и подмора пчел;

б) ос мотр и отбор больных личинок и пчел под лупой;

в) вскрытие личинок и взрослых пчел;

г) микроскопия нативных мазков;

д) посевы на питательные среды;

е) изучение культурально биохимических свойств;

ж) в сомнительных случаях изучают серологические и патогенные свойства некоторых изолированных культур.

Результаты исследований регистрируют в специальном жур нале.

АМЕРИКАНСКИЙ ГНИЛЕЦ. Диагноз на американский гнилец ставят на основании характерных признаков поражения расплода и результатов микроскопических, бактериологических и серологических исследований. Предварительно заключение да ют в первый день исследования на основании осмотра сота и обнаружения характерных спор Вас. larvae в мазках из патма териала. Окончательный диагноз ставят на 3—5 день исследова- Рис. 12. Вегетативная форма Bacillus larvae из колоний R-форм. Увели ния после получения чистой культуры Вас. larvae. чение Х 9 0 0 (no A. M. Смирнову).

стерильной лошадиной сыворотки. Агар-агар используют только 24 ч в виде типичных шероховатых (тип R) колоний размером растительный (нельзя брать для этой цели агар с рыбьим гидро- 1—3 мм в диаметре;

они нежные, слегка выпуклые, вначале про лизатом, так как на нем Вас. larvae не растет). зрачные, затем серо-белые. Колонии имеют характерные, отхо 2. Мясо-пептонный сывороточный бульон: к обычному (луч- дящие в стороны, отростки в виде «усиков». При сплошном росте ше приготовленному из отвара конского мяса) мясо-пептонному на поверхности агара (через 48—72 ч с момента посева) появля бульону (рН 6,8—7,2) добавляют 10 % стерильной лошадиной ются серовато-белые наложения, имеющие ограниченные локоно сыворотки. образные края. На мясо-пептонном сывороточном бульоне они 3. Яичный агар и бульон Уайта: свежее яйцо протирают образуют через 24 ч помутнение. Через 48—74 ч на дне пробирки ватным тампоном, смоченным этиловым спиртом, и обжигают на заметен хлопьевидный осадок в виде ваты, легко разбивающийся огне, затем стерильно вскрывают;

отделяют белок, желток выли- при встряхивании в равномерную муть.

вают в колбочку с 70 мл стерильной воды и тщательно смешива- Наряду с типичными R-формами колоний встречаются и дис ют. К 5 мл расплавленного и охлажденного (45—50 °С) МПА, социированные от действия бактериофага и других факторов или МПБ, в пробирке добавляют стерильно по 1 мл эмульсии атипичные RS-формы (переходные) с гладкими краями, с еди желтка и круговыми движениями пробирки между ладонями рук ничными нитевидными отростками или колонии S-формы круг тщательно смешивают агар или бульон с желтком. Перед посевом лые, выпуклые, с ровными краями и гладкой поверхностью (рис.

среды выдерживают двое суток в термостате для определения 13).

стерильности. При просмотре мазков из атипичных колоний палочки Вас.

larvae бывают короткими и толстыми, они утрачивают способ 4. Кровяной агар Цейслера: 3 %-ный мясо-пептонный агар ность располагаться цепочками, иногда встречаются уродливые (рН 7,2—7,4), приготовленный из растительного агар-агара, формы палочек — извитые, вздутые и др.

разливают в колбы по 100 мл и стерилизуют в автоклаве 20 мин Б и о х и м и ч е с к и е с в о й с т в а выделенных штаммов при 120 °С;

по мере необходимости агар в колбе расплавляют Вас. larvae изучают путем выращивания на обычных питатель в водяной бане, а затем охлаждают до 42—45 °С. К агару до ных средах пестрого ряда, к которым добавляют 10 % стерильной бавляют 10 мл 20 %-ного стерильного раствора глюкозы и 15— лошадиной сыворотки. Все типичные штаммы Вас. larvae медлен 20 мл стерильной свежевзятой или дефибринированной крови но (6—10 дней) расщепляют глюкозу и левулезу с образованием овцы (лучше лошади). Смесь осторожно перемешивают (избе кислоты, но без газа, не сбраживают арабинозу, ксилозу, лакто гать образования пены!) и разливают в стерильные чашки. Для зу, рамнозу, мальтозу, сахарозу, галактозу, маннит, дульцит, подсушивания среды чашки выдерживают в термостате 4—6 ч.

сорбит, инозит. Не образуют индола, аммиака, сероводорода Дефибринированную кровь можно заготавливать впрок (на (отдельные штаммы слабо выделяют сероводород и аммиак).

10—15 дней), сохраняя ее в стерильных условиях по 20—25 мл Разжижают желатину, вызывают свертывание и пептонизацию в колбочках.

молока, не гидролизуют крахмал, нитраты восстанавливают, не 5. Кровяная среда Тошкова: к обычному или содержащему обладают гемолитическими свойствами, каталазный тест — отри желточную эмульсию мясо-пептонному агару или бульону до цательный.

бавляют стерильно 5—10 % дефибринированной крови лошади или овцы.

6. Среда Майкла: дрожжевой экстракт — 10 см3, пептон — 10 г, растительный агар-агар — 15 г, тиамин — 0,1 мг, дистилли рованная вода — 1 л, рН — 6,8. Экстракт дрожжей готовят из 100 г измельченных хлебных дрожжей в 1 л водопроводной воды, смесь тщательно перемешивают и кипятят 30 мин, затем отстаи вают, фильтруют в горячем состоянии через 3 слоя марли и остав ляют до просветления. Экстракт в этот же день употребляют для приготовления среды или добавляют к нему 1 % хлороформа, что позволяет сохранять его в холодильнике до месяца.

Получить чистую культуру Вас. larvae на плотной питатель ной среде из отдельных клеток возбудителя трудно. Поэтому на поверхность плотной питательной среды необходимо вносить как можно больше гнильцовой массы.

Видимый рост отдельных колоний Вас. larvae на среде Рис. 13. Колонии Bacillus larvae:

Томашеца появляется и заметен невооруженным глазом через / — R-форма и 2— RS-форма. Увеличение X 56 (по А. М. Смирнову).

64 3 О. Ф. Гробов и др. _ С е р о л о г и ч е с к у ю д и а г н о с т и к у проводят с по- чашки, на дне которых уложен слой ваты, покрытой двумя слоями мощью реакции преципитации, используя ларвейную преципити- стерильной марли, вносят по 10 мл теплого корма: приготовленно рующую сыворотку или реакцию капельной агглютинации. го из перги — 50 г, пекарских дрожжей — 5 г, воды водопро Антиген для реакции преципитации готовят из десяти по- водной — 100 мл. Смесь нагревают в водяной бане 45 мин при гибших от гнильца личинок, которых помещают в ступку, до- температуре 100 °С и после охлаждения добавляют равный объем бавляя десятикратное количество физраствора (15 мл для взрос- непрогретого меда. Затем в здоровой пчелиной семье от сота лых и 7 мл для 3—4-дневных личинок), тщательно растирают, с расплодом срезают острым, слегка подогретым ножом верхнюю суспензию нагревают на кипящей водяной бане 15 мин и фильтру- часть ячеек и осторожно извлекают 3—4-дневных личинок, кото ют через асбестовую вату до получения прозрачного экстракта. рые размещают в бактериологических чашках по 15—20 штук.

Антигеном для реакции преципитации может служить и про- Через сутки выдерживания в термостате при температуре 35 °С зрачный фильтрат выросшей культуры, профильтрованной через отбирают под контролем лупы здоровые (неповрежденные) ли асбестовую вату. Фильтрат разливают по 0,1—0,2 мл в уленгутов- чинки и переносят их в заранее подготовленную теплую чашку.

ские пробирки и подслаивают такое же количество сыворотки Личинок заражают путем скармливания им свежего корма, (сыворотки и фильтраты должны быть прозрачными). Реакция к которому добавлено 2 млрд. исследуемых микроорганизмов.

преципитации протекает при комнатной температуре в течение Ежедневно под лупой отбирают больных личинок и подвергают 15 мин. При положительной реакции через 0,5—2 мин образуется микроскопическому и бактериологическому исследованиям. Кон тонкое, нежное, голубовато-матовое кольцо. тролем служат незараженные личинки, содержащиеся в тех же условиях.

Антигены для реакции а г г л ю т и н а ц и и готовят из 5— 10 свежих трупов личинок или «корочек», которые помещают Для заражения расплода в м и к р о у л е й к а х и в фарфоровую ступку и заливают 5—10 мл карболизированного у л ь я х используют двухмиллиардную взвесь микробов в са 0,5 %-ного физраствора, измельчают пестиком до получения харном сиропе (1 часть воды+ 2 части сахара) ежедневно суспензии и фильтруют через ватный фильтр. Фильтрат центри- в течение 3—5 дней. Для получения инфицированного корма на фугируют 10—15 мин при 1500 об/мин, затем осадок растворяют 5 частей сиропа берут 1 часть культуры. Такой сироп дают 3— в 10—15 мл указанного выше физраствора, нагревают на водяной 5 дней. Суточное количество этой подкормки для пчел в микро бане до 70 °С и в горячем виде фильтруют через бумажный улье — 50 мл, для пчел в стандартном улье — 500 мл. Признаки фильтр. Фильтрат вновь центрифугируют при тех же оборотах, гнильца появляются через 8—10 дней после заражения. С 3— и из осадка готовят антиген в виде густой взвеси микробов и спор 5 дня до окончания биопробы пчелам в микроульях нужно давать (10 млрд/мл). сахарный сироп. Подкормку наливают в банки, обвязывают их Реакцию агглютинации ставят на предметном стекле: на двумя слоями марли и перевертывают вверх дном. В стандартных один его конец пастеровской пипеткой наносят каплю агглютини- ульях банки ставят на рамки, в микроульях — в потолочное рующей сыворотки, разведенной физраствором (0,1 мл сыво- отверстие.

ротки+7,9 мл физраствора), а на другой конец— каплю физра- Для п о с т а н о в к и б и о п р о б ы н а к р о л и к а х вна створа. В обе капли вносят такое же количество антигена и хоро- чале готовят споровую взвесь Вас. larvae из первичного материа шо смешивают. При положительном результате в течение ла. Для получения спор используют пчелиные личинки, погибшие 10—20 мин в капле с ларвейной сывороткой жидкость просветля- от американского гнильца и высохшие до состояния корочек.

ется и наблюдается мелкозернистая агглютинация (появляются Последние извлекают из ячеек сотов стерильным пинцетом, по белые крупинки). В контрольной капле жидкость остается мут- мещают в стерильные фарфоровые ступки, растирают и добавля ной. Агглютинация в капле с ларвейной сывороткой свидетель- ют стерильный физраствор (1 мл на 1 растертую корочку).

ствует об американском гнильце. Содержимое тщательно перемешивают. Полученную массу филь Ф а г о д и а г н о с т и к у осуществляют с применением лар- труют через вату. Если фильтрат вязкий, к нему добавляют вейного бактериофага. На поверхность чашки Петри с мясо- физраствор до исчезновения слизистой консистенции и снова пептонным сывороточным агаром шпателем засевают две капли фильтруют через фильтровальную бумагу. После двукратного суточной бульонной культуры и наносят в центр каплю бактерио- центрифугирования фильтрата получают в осадке чистые споры фага. Чашку наклоняют для стока бактериофага, а затем перево- Вас. larvae, отмытые от тканей личинки. Концентрацию спор рачивают ее кверху дном и ставят в термостат на 24—48 ч. В по- в 1 мл определяют по оптическому стандарту мутности.

ложительном случае на месте протекания капли фага образуется Заражают кроликов внутривенно споровой взвесью в дозе полоса, свободная от роста микробов. 5—6 млн. спор в 1 мл (по оптическому стандарту мутности) на Патогенные свойства устанавливают при заражении пчели- одно животное, морских свинок подкожно дозой 3 млн. спор.

ного расплода или кроликов. В стерильные бактериологические Гибель кроликов наступает на 5—7 день, свинок — на 8—10-е 66 3* сут. Из крови больных и из 1. Среду Бейли: дистиллированная вода— 1 л, глюкоза, внутренних органов павших растворимый крахмал и экстракт дрожжей — по 10 г, калий животных выделяют возбуди- фосфорнокислый однозамещенный (КН 2 РО 4 ) —13,6 г, агар-агар теля американского гнильца растительный — 20 г (рН 6,6). Среду автоклавируют при 116°С пчел. в течение трех дней подряд по 20 мин. Первичный рост возбудите ля на этой среде появляется через 4—7 сут, при последующих ЕВРОПЕЙСКИЙ ГНИ пересевах — через 24—48 ч.

ЛЕЦ. Предварительное за ключение о результатах ис- 2. Среду В. Т. Черепова: в 1 л водопроводной воды вносят следования на европейский 300 г очищенных клубней картофеля (обязательно удалить глаз гнилец может быть дано ки!), варят в течение 15—20 мин (не доводя до полного развари в день поступления патмате- вания клубней), фильтруют через ватно-марлевый фильтр и к 1 л риала на основании осмотра фильтрата добавляют 2 % растительного агар-агара, 3 г пептона.

сота и микроскопии мазков, Смесь стерилизуют в автоклаве при 1 атм 20 мин, затем добав окончательный — после про- ляют 3 % экстракта пекарских дрожжей и 3 % глюкозы, ведения полного бактериоло- рН 6,8.

Рис. 14. Streptococcus pluton (ланце- гического исследования, т. е. Стерилизуют в аппарате Коха 3 дня по 30 мин или в авто товидные кокки). Увеличение X 9 0 0 через 5—7 дней при условии клаве при 0,5 атм 3 дня по 15 мин.

(по А. М. Смирнову). выделения возбудителя бо- 3. Для культивирования Strept. pluton можно использовать лезни. полужидкий 0,15 %-ный картофельный агар, приготовленный аналогично среде Черепова, с той лишь разницей, что вместо 2 % Для лабораторного исследования из ячеек сотов извлекают добавляют 0,15% растительного агар-агара.

стерильным пинцетом не менее 10 свежих трупов личинок, а при их отсутствии — высохшие корочки трупов. Мазки и посевы На плотных средах Strept. pluton образует мелкие, круглые, производят из содержимого кишечника личинки. Корочки трупов выпуклые, зернистые жемчужно-белого цвета непрозрачные ко предварительно помещают на 15—20 мин в стерильный физра- лонии диаметром 1 — 1,6 мм (рис. 15). В печеночном бульоне створ. Мазки окрашивают одновременно и по Граму, для окраски и полужидком агаре стрептококк растет с образованием помутне спор возбудителя используют 2 %-ный спиртовой раствор карбо- ния и нежного пристеночного кольца, на дне пробирки через двое лового фуксина в течение 1,5—2 мин. суток выпадает белый осадок. Strept. pluton расщепляет глюкозу и фруктозу без образования газа, не расщепляет сахарозу, га При бактериологическом исследовании недавно погибших лактозу, лактозу, малтозу, рафинозу, рамнозу, маннит, сорбит, личинок чаще обнаруживают Streptococcus pluton, в мазках, инозит, а-ксилозу, глицерин и крахмал.

приготовленных из загнившей массы личинок и их корочек, как правило, находят споры Вас. alvei, иногда Вас. orpheus, а в маз ках из тела личинок с кислым запахом — Strept. apis.

Streptococcus pluton имеют форму вытянутых (ланцето видных) кокков размером 0,5—1,5 мкм (рис. 14). В мазках они располагаются одиночно, чаще попарно, цепочками и в виде характерных скоплений «розетками»;

в культуре и тканях образу ют капсулу, окружающую несколько кокков, хорошо красящуюся по методу Кленбергера, Томчика и Новелли. Микроб неподвижен, спор не образует. Стрептококки красятся всеми анилиновыми красками и по Граму (неравномерно), иногда с грамположитель ными встречаются и грамотрицательные кокки.

Из патматериала стрептококк плютон выделяют культивиро ванием посевов при 35 °С на средах Бейли или Черепова в анаэ робных условиях, для чего используют анаэростат или обычный эксикатор, который после постановок чашек или пробирок с посе вами наполняют углекислотой (5—10 % СО 2 ). Последующее культивирование выделенных штаммов этого возбудителя можно Рис. 15. Колония Streptococcus plu- Рис. 16. Streptococcus apis. Уве производить и в аэробных условиях. ton. Увеличение X 56 (по А. М. Смир- личение X 900.

Для культивирования Strept. pluton используют: нову).

68 Strept. apis располагается в мазках короткими цепочками, размер отдельных кокков 0,7—0,9 мкм, грамположительная, спор не образует, капсулы не имеет (рис. 16);

факультативный аэроб, хорошо растет при температуре 37 °С на обычных средах, а также на средах Бейли, Черепова, кровяном агаре Цейслера. Через 24 ч на агаре образуются мелкие, прозрачные, бесцветные коло нии или наложения, они легко снимаются петлей и суспензиру ются в физрастворе. Микроб вызывает помутнение бульона, разжижает МПЖ, молоко свертывает и пептонизирует, индол и сероводород не образует, выделяет следы аммиака, углеводы разлагает с образованием кислоты, крахмал не гидролизует, нитриты не восстанавливает, на кровяном агаре не вызывает гемолиза.

Вас. alvei — спорообразующая палочка длиной 3—4,5, ши риной 0,7—0,9 мкм (рис. 17);

по Граму красится положительно, подвижна, перитрих. Споры располагаются центрально, 2,5— 4 мкм в длину и 0,8—1,5 мкм в ширину, иногда образуют ряды в виде частокола (рис. 16). Возбудитель — факультативный аэроб, растет при температуре 37 °С на обычном МПА и МПБ, кровяном агаре Цейслера, через сутки образуя на агаре крупные колонии неправильной формы в виде «оленьих рогов» грязно желтого цвета (рис. 18). На агаре Цейслера он образует гемолиз Рис. 17. Bacillus alvei:

типа р, иногда а. Бульон мутнеет равномерно, на 3—5 день на его / — палочки;

2 — споры (типичное расположение в виде частокола) Увеличе ние Х900 (по А. М. Смирнову).

поверхности образуется бесцветная или сероватая гладкая, не жная не стабильная пленка со слабым пристеночным кольцом.

При встряхивании она опадает хлопьями на дно пробирки. Вас.

alvei медленно разжижают МПЖ, молоко свертывают и пептони зируют, образуют индол;

обнаруживаются следы аммиака и серо водорода;

крахмал не гидролизируют, нитриты не восстанавлива:

ют, расщепляют глюкозу, мальтозу, глицерин, лактозу, сахарозу с образованием кислоты, но без газа. Биохимические свойства не постоянны. Старые культуры имеют неприятный запах, особенно сильный при культивировании микроба на кровяном агаре.

Вас. orpheus — спорообразующая подвижная с закруглен ными концами палочка длиной 2,5—5 мкм и шириной 1 —1,2 мкм.

Микроб окрашивается всеми анилиновыми красками и грамполо жительно. Споры хорошо окрашиваются 2 %-ным спиртовым раствором фуксина в течение 2 мин. В мазках вегетативные и спо ровые формы микроба располагаются поодиночке. Споры оваль ной формы длиной 1,2—2 мкм и шириной 0,7—1,2 мкм, распола гаются сбоку в средней раздутой части бациллы, характерно также наличие с одной стороны споры арфо- или лодкообразного параспорального тела (рис. 19). Бацилла орфеус-аэроб, растет на обычных питательных средах (МПА и МПБ) и особенно хоро шо на печеночном агаре с нейтральной или слабощелочной реакцией при температуре 35—36 °С. Для приготовления пече ночного агар-агара берут свежую печень крупного рогатого скота или свиней, разрезают на куски массой 200—250 г, заливают Рис. 18. Типичная форма колоний Bacillus alvei в виде «оленьих рогов».

равным количеством водопроводной воды и автоклавируют при Увеличение Х 5 6 (no A. M. Смирнову).

10 трупов пораженных личинок, которые отбирают из присланных образцов сотов. Личинок растирают в фарфоровых ступках с 5 мл физраствора, затем переносят в пробирки и нагревают на ки пящей водяной бане в течение 15 мин. Экстракт фильтруют через асбестовую вату (в воронках диаметром 4 см). Прозрачный фильтрат разливают по 0,1—0,2 мл в чистые уленгутовские про бирки и подслаивают такое же количество сыворотки: в первую пробирку — преципитирующую плютоновую, во вторую — пре ципитирующую альвейную и т. д., в последнюю — нормальную сыворотку лошади (для контроля). Сыворотки так же, как и эк стракты, должны быть прозрачными. Мутные сыворотки предва рительно фильтруют через асбестовую вату. РП проходит при комнатной температуре. При положительной реакции на границе сыворотки и антигена в течение 10—20 мин появляется преципи тационное кольцо в виде тонкого серо-белого диска. Положитель ная РП с плютоновой, альвейной или другими специфическими сыворотками свидетельствует о европейском гнильце. В кон трольной пробирке с нормальной сывороткой реакция должна быть отрицательной. Реакцию капельной агглютинации ставят с соответствующими сыворотками, аналогично американскому гнильцу.

Рис. 19. Споры Bacillus orpheus. Сбоку спор видны арфообразные пароспоральные тела. Увеличение Лабораторные животные не восприимчивы к европейскому Х 9 0 0 (по А. М. Смирнову).

гнильцу. Патогенные свойства возбудителей этого вида гнильца могут быть установлены путем заражения 3—4-дневных личинок, 120 °С в течение часа, затем экстракт фильтруют через ватный как и при американском гнильце.

фильтр. Параллельно готовят смесь: 2 г растительного агар- ПАРАГНЙЛЕЦ. В лабораторию направляют кусочки сотов агара, 1 г пептона, 0,5 г натрия хлорида и 500 мл водопроводной с пораженным расплодом и куколками. Микроскопические и бак воды, которую стерилизуют текучим паром 30 мин. Затем к пече- териологические исследования проводят по общепринятым мето ночному экстракту добавляют равное количество указанной дикам, описанным выше.

смеси и после охлаждения до 60 °С устанавливают рН 7,0—7,2. Вас. paraalvei — палочка длиной 2,2—5,7 мкм, шириной После этого печеночный агар-агар разливают по пробиркам или 0,5—0,8 мкм (рис. 20). В погибших личинках и на питательных колбам, стерилизуют автоклавированием при 120 °С в течение средах она образует слегка овальные споры 1,8—2,3 X 0,9— 30 мин. 1,3 мкм. В бульонных культурах подвижна — перитрих, факуль На плотной среде колонии появляются через 24 ч после тативный аэроб, плохо растет на обыкновенных питательных посева, они 2—3 мм в диаметре, с ровными краями, беловато- средах (МПА и МПБ);

хорошо культивируется на кровяном серого цвета с голубоватым оттенком и металлическим блеском, сахарном агаре Цейслера и среде Томашеца (10 %-ный сыворо к 48 часам образуется пышное серовато-белое наложение. МПБ точный мясо-пептонный агар, рН 5,8—7,0 и мясо-пептонный в начале мутнеет, затем на дне образуется осадок и бульон про- сывороточный бульон) при температуре 34—38,5 °С. На повер светляется. Желатину разжижает медленно, молоко коагулирует хности среды образуются шероховатые колонии с синеватым с образованием плотного сгустка. Микроб ферментирует глюкозу, металлическим оттенком, обладающие ползучим ростом (рис.

мальтозу, маннозу, декстрозу, ксилозу, салицин и маннит с обра- 21). Спорообразование на среде Томашеца и агаре Цейслера зованием кислоты, но без газа и не ферментирует сахарозу, плохое. Все штаммы Вас. paraalvei гидролизуют крахмал;

обра рамнозу, лактозу, галактозу, арабинозу, дульцит, сорбит, инозит зуют индол;

восстанавливают нитриты;

разжижают желатину;

не и адонит. Индола и сероводорода не образует, реакция с метилрот ферментируют глюкозу, рафинозу, маннит, салицин, адонит;

ре отрицательная, реакция Фогес — Проскауэр положительная, акция Фогес — Проскауера отрицательная;

тон гемолиза на кро нитраты восстанавливает, на кровяном агаре образует гемолиз вяном агаре не дает, что отличает его от Вас. alvei.

типа а.

Патогенные свойства возбудителя могут быть установлены При проведении серологической диагностики ставят реакцию путем заражения открытого расплода по методике, описанной преципитации (РП). Антигены для этой реакции готовят из 5— при американском гнильце.

72 _ ПОРОШКОВИДНЫЙ РАСПЛОД. Для лабораторного ис следования в ветеринарную лабораторию посылают образцы сотов от каждой семьи размером 10 X 15 см с пораженными личинками.

Возбудитель—грамположительная палочка размером 1 — 1,5 мкм в длину и 0,6—1,2 мкм в ширину, споры эллипсоидной формы (0,8—1,2Х 1,5 мкм), расположены центрально или терми нально;

факультативный анаэроб.

Для выделения возбудителя в 2—3 ячейки сота, содержащих остатки разложившихся личинок, вносят по одной капле стериль ного физраствора. Бактериологической петлей переносят полу ченную взвесь на МПА в чашке Петри и равномерно распределя ют шпателем по его поверхности. Затем посевы инкубируют при 37 С С. Одновременно из взвеси готовят мазки, фиксируют пламе нем или раствором спирт-эфира (1:1), окрашивают по Граму и исследуют под микроскопом. Через 2—3 сут инкубирования посевы просматривают. На МПА возбудитель растет в виде коло ний светло-оранжевого или светло-коричневого цвета, либо в ви де тонкого буроватого налета.

Из каждой чашки по две типичные колонии переносят на Рис. 20. Bacillus paraalvei (по А. М. Смирнову).

скошенный мясо-пептонный агар для получения чистой культуры.

Для изучения морфологии выделенных чистых культур бак терий готовят мазки, фиксируют их, окрашивают по Граму и микроскопируют. Подвижность культур определяют по характе ру роста в 0,3 %-ном полужидком МПА. Биохимические свойства культур исследуют на средах с сахарами, желатине, казеине, крахмало-аммиачном агаре, ставят пробу на каталазу. На средах с глюкозой, маннитом, трегалозой они образуют кислоту, разжи жают желатину, разлагают казеин, не изменяют крахмал. Тест на каталазу отрицательный.

Лучшее спорообразование происходит в течение 5—7 дней инкубации на МПА с добавлением экстракта пыльцы.

Положительный бактерио логический диагноз ставят при выделении культуры Вас. pulvi faciens.

СЕПТИЦЕМИЯ. В лабора торию посылают не менее штук больных пчел. При невоз можности доставить в лаборато рию живых пчел делают мазки отпечатки из грудных мышц.

Возбудитель — Pseudomo nas apisepticum — полиморфная, грамотрицательная, подвижная, не образующая спор, палочка длиной 0,8—2 мкм, шириной 0,7—0,8 мкм (рис. 22);

фа- Рис. 22. Pseudomonas apisepti Рис. 21. Колония Bacillus paraalvei. Увеличение культативный аэроб, хорошо cum. Увеличение Х 9 0 0.

X 5 6 (по А. М. Смирнову).

растет на обычных питательных средах (рН 7,2—7,4);

оптимум нуклеазу, мочевину, крахмал;

не выделяет индол;

не разжижает роста 20—37 °С. желатину;

не изменяет молоко.

При микроскопическом исследовании поверхность хитиново- Для получения культуры от каждой пробы берут по 10 пчел, го покрова груди пчел дезинфицируют обжиганием, прокалывают помещают их на 30 с в 96 %-ный спирт, затем обсушивают на перепонку между сегментами тонкой пастеровской пипеткой и на- стерильной фильтровальной бумаге и вскрывают. Для этого бирают гемолимфу, из которой затем готовят мазки и производят пчелу пинцетом фиксируют за грудку, стерильной препароваль посевы на питательные среды (МПА, МПБ). Мазки фиксируют ной иглой удаляют спинное полукольцо со стороны заднего на пламени горелки и красят по Граму. В положительном случае грудного тергита и из грудных мышц делают посев на среду Эндо.

в мазках обнаруживают однородные грамотрицательные па- Одновременно из мышц готовят два мазка на предметных стек лочки. лах, окрашивают один метиленовой синькой, второй по Граму и просматривают с помощью иммерсионной системы микроскопа.

Pseud, apisepticum на агаре образует крупные, с ровными Посевы выращивают при комнатной температуре (20 °С). На краями мутно-опаловые в центре и светлые к периферии масляни МПА бактерии гафнии растут в виде полупрозрачных, круглых, стые, легко смывающиеся колонии. При сплошном росте на агаре с ровными краями колоний, легко снимающихся петлей. Из коло культура приобретает мутно-зеленоватый оттенок и гнилостный ний готовят мазки, красят по Граму, микроскопируют и сравнива запах;

на пластинчатой желатине образуются колонии с глубо ют с микрофлорой мазков из грудных мышц. Грамотрицательные ким центром разжижения, при посеве уколом желатина воронко бактерии исследуют на подвижность. Подвижные грамотрица образно разжижается по ходу укола и выделяются пузырьки тельные бактерии пересевают на МПА, а затем делают посевы на газа;

на агаре Эндо формируются красные колонии, цвет среды не цветной ряд Гисса с глюкозой, лактозой, маннитом, сахарозой изменяется.

и сорбитом;

на среду с цитратом аммония;

в две пробирки со После получения чистой культуры изучают ее биохимические средой Кларка;

в МПБ с индикаторными бумажками на индол свойства на наборе питательных сред (среды с углеводами, жела и сероводород и на желатину. Посевы бактерий на среде с цитра тина, молоко, МПБ с индикаторными бумажками для исследова том аммония и в одной пробирке со средой Кларка выращивают ния на индол и сероводород, ломтик картофеля). Учет проводят при комнатной температуре, остальные — при 35 °С. С культура через 1—2 сут. На картофеле вырастают хорошо заметные, вы ми, выращенными на среде Кларка при 35 °С, ставят реакцию пуклые, маслянистые колонии, постепенно темнеющие от бурого с метилротом, а при 20 °С — реакцию Фогес — Проскауэр на до почти черного цвета;

буреет и сам картофель.

ацетилметилкарбинол. Желатину охлаждают.

Pseud, apisepticum свертывает и пептонизирует молоко;

образует кислоту, затем щелочь;

выделяет сероводород;

разлага- Срок бактериологического исследования на гафниоз пчел ет без образования газа, но с накоплением щелочи фруктозу, 4 дня.

галактозу, маннозу, сорбит, глицерин, салицин;

образует неболь- С е р о л о г и ч е с к а я д и а г н о с т и к а гафниоза пчел шое количество кислоты в средах с рафинозой, арабинозой, основана на постановке реакции агглютинации возбудителя со крахмалом, лактозой, изодульцитом;

декстрин не разлагает, ни- специфической сывороткой.

траты восстанавливает до нитритов;

индола не образует. Для постановки реакции агглютинации необходимы:

ГАФНИОЗ. В лабораторию посылают живых больных или а) стандартная культура Hafnia alvei (стандартный анти мертвых пчел. В лаборатории выделяют чистую культуру возбу- ген);

дителя болезни или ставят реакцию агглютинации. б) гипериммунная сыворотка;

ее получают от кроликов, для В о з б у д и т е л ь — Hafnia alvei. Это бактерия, имеющая этого животному вводят внутривенно выращенную на МПА вид палочки с закругленными концами, длина ее 1—2 мкм, шири- суточную культуру возбудителя в концентрации 3—5 млрд. мик на 0,3—0,5 мкм;

подвижная (перитрих), грамотрицательная, робных тел в 1 мл 4 раза через 5 дней в следующих количествах:

хорошо красится всеми анилиновыми красителями. Факульта- при первой инъекции — 0,5 мл, второй — 1 мл, третьей — 1 мл, тивный аэроб. Спор не образует. При 20 °С она хорошо растет на четвертой — 1,5 мл. Через 7—10 дней после четвертой инъекции обычных и элективных питательных средах, ферментирует с обра- у кролика берут кровь и получают сыворотку;

ее можно использо зованием кислоты и газа глюкозу, с образованием кислоты — вать в течение 10 мес при условии хранения в холодильнике при арабинозу, ксилозу, мальтозу, маннит, рамнозу;

не дает реакции температуре 4 °С;

с метилротом;

образует ацетилметилкарбинол, сероводород;

ути- в) нормальная сыворотка кролика;

лизирует цитрат аммония;

декарбоксилирует лизин и орнитин;

не г) физраствор, содержащий 0,85 % химически чистого на гидролизирует аргинин;

не ферментирует адонит, дульцит, ино- трия хлорида и 0,5 % карболовой кислоты;

зит, инулин, лактозу, рафинозу, салицин, сахарозу, сорбит и эрит- д) исследуемый антиген — смыв бактериальной культуры, рит;

не дезаминирует фенилаланин;

не разлагает дезоксирибо- содержащий 3—5 млрд. микробных тел в 1 мл. Для этого берут 76 20 пчел с признаками заболевания и помешают на 2—3 мин в ста- сти изменчивость, которая выражается тем, что на плотных кан с углекислым газом. Затем берут гемолимфу тонким капилля- средах формируются колонии, несвойственные для этих видов ром, который вводят сбоку между 3 и 4 тергитами брюшка бактерий (шероховатые с пальцеобразными выростами и др.).

и высевают на МПА. Посевы выращивают в течение суток при Изменяются и биохимические свойства. Они теряют способность ферментировать маннит, мальтозу или оба углевода одновре 35 °С.

менно. В то же время бактерии могут приобрести новое свой Из гипериммунной сыворотки в физрастворе готовят после ство — расщеплять сахарозу. Эта способность особенно выраже довательные разведения 1:50, 1:100, 1:200, 1:400. Затем в каждую на у Sal. cholere suis. Изменчивость также касается и антигенно пробирку с указанными разведениями добавляют по две капли го строения микроорганизмов, что проявляется либо снижением исследуемого антигена.

агглютинационного титра, либо полной потерей способности всту Контролями реакции служат: нормальная сыворотка кроли пать во взаимодействие с гомологичной для исходной культуры ка в разведениях 1:50, 1:100, 1:200, 1:400 со стандартным антиге антисывороткой.

ном, физраствор со стандартным антигеном;

физраствор с иссле дуемым антигеном;

гипериммунная кроличья сыворотка в разве- Патогенные свойства возбудителей сальмонеллеза пчел изу дении 1:100 со стандартным антигеном. чают на пчелах, которых помещают в специальный энтомологиче После разлива компонентов пробирки тщательно встряхива- ский садок, в потолочное отверстие которого вставляют пробирку ют, помещают в термостат при 35 °С на 2 ч и проводят предвари- вверх дном с бактериальной культурой, смешанной с густым тельный учет реакции. После этого пробирки оставляют при сахарным сиропом (1:3), предварительно обвязанную двумя комнатной температуре на 18—20 ч и определяют окончательные слоями марли. На 10 мл сиропа добавляют 0,1 мл 18—24-часовой результаты реакций. культуры, содержащей 1 млрд. микробных тел. В контрольном опыте пчел кормят сахарным сиропом без микробной культуры.

Реакцию учитывают в крестах:

В положительном случае через 1—3 дня начинается массовая + + + + полная агглютинация, при которой осадок на дне гибель пчел, в то время как в контроле погибают только единич пробирки располагается кучкой или в форме от ные насекомые.

крытого перевернутого зонтика;

надосадочная жидкость совершенно прозрачная;

КОЛ И БАКТЕРИОЗ. В лабораторию посылают живых боль + + + почти полная агглютинация;

осадок такой же, как ных пчел. При бактериологическом диагнозе обязательно выделя и в предыдущем случае;

жидкость почти прозрач- ют чистую культуру возбудителя, изучают его культурально ная;

морфологические и биохимические свойства, определяют 0-анти + + слабая агглютинация;

небольшой осадок, жид- ген, а при необходимости ставят биологическую пробу на пчелах.

кость не прозрачная;

От каждой пробы берут по 10 пчел и стерилизуют их по + отмечаются следы агглютинации, осадок едва за- верхность ватным тампоном, смоченным спиртом. Затем с по метен, жидкость не прозрачная;

мощью тонкооттянутой пастеровской пипетки берут гемолимфу, — отрицательная реакция агглютинации. Бактерии переносят ее на поверхность подсушенного агара Эндо и растира могут оседать на дно в виде точки, при встряхи- ют шпателем, затем проводят посев в МПБ. Посевы выдержива вании разбиваются в равномерную муть. ют сутки в термостате при температуре 32 °С. Одновременно от Положительной реакцией считают наличие микроскопиче- тех же пчел готовят на предметных стеклах мазки, которые фик ской агглютинации с оценкой не менее чем в три креста в разведе- сируют раствором спирт-эфира (1:1) и окрашивают один мазок ниях гипериммунной сыворотки 1:100 и выше и отсутствие фуксином или метиленовой синью, а другой — по Граму. Мазки агглютинации в контролях. просматривают с использованием иммерсионной системы микро скопа через 18—24 ч инкубирования. В тех случаях, когда на САЛЬМОНЕЛЛ ЕЗ. Для лабораторного исследования посы среде Эндо роста нет, а в МПБ отмечается помутнение среды, лают живых больных пчел, а также соскобы фекалий с ульев или культуру микроскопируют и пересевают в чашку со средой Эндо;

сотов. При микроскопическом и бактериологическом исследова через сутки проверяют наличие роста колоний. Э. коли на среде нии трупы пчел опускают в спирт, быстро обжигают для удаления Эндо образует округлые выпуклые колонии с ровным краем розо микрофлоры с поверхностных покровов, складывают в стериль вого, красного или малинового цвета с металлическим блеском.

ную ступку, добавляют физраствор, растирают и делают посевы Для дальнейшего исследования переносят на скошенный МПА по на МПА и МПБ. Для получения чистой культуры посевы произво две произвольно взятых колонии или по две колонии каждой дят из гемолимфы и грудных мышц. Гемолимфу получают путем разновидности в случае получения неоднородного роста (каждую отделения одной из ножек или при помощи тонкой пастеровской в 2 пробирки). Одну пробирку используют для изготовления пипетки, которую вводят в боковую сторону брюшка.

мазков, посева на дифференциально-диагностические среды и Возбудители сальмонеллеза в организме пчел могут приобре 78 приготовления убитого кипячением антигена, вторую — для по лучения автоклавированного антигена.

Проводят титрование выделенных бактерий по О-антигену с целью установления энзоотических серотипов при помощи набора типоспецифических агглютинирующих сывороток. Если культура Е. coli серологически не типируется набором О-сыворо ток, используют другие диагностические сыворотки.

В том случае, когда из гемолимфы выделены бактерии Э. коли, которые не типируются серологически набором типоспе цифических колисывороток, необходимо определить патогенные свойства кишечной палочки путем постановки биологической пробы на пчелах. С этой целью используют 2 садка с пчелами (по 100 штук в каждом). Пчел первого садка (контрольный) кормят сахарным сиропом (1:1), пчел второго садка (опытный) —са харным сиропом с культурой Э. коли (1 млрд. клеток в 1 мл).

Пчел в садках содержат 10 дней при температуре 30 °С, ежеднев но подсчитывая погибших насекомых. Культуру признают пато- Рис. 23. Споровая циста гриба Ascosphaera apis с заключенными в ней споровыми шарами. Увеличение генной, если наблюдаются признаки болезни у опытных пчел X1000 (по А. Г. Григорян).

(вздутие брюшка, пятна экскрементов на стенке садка) и про должительность жизни у них сокращается более чем в 2 раза по сравнению с продолжительностью жизни контрольных пчел. пола. Чистую культуру гриба получают путем пересева с перифе рии колоний, характерных для данного гриба.

Положительный диагноз на колибактериоз устанавливают Мицелий гриба состоит из многоклеточных гиф толщиной при выделении из гемолимфы пчел культуры Е. coli и если она 4,2—12 мкм с многоядерными клетками, обладает половым ди серологически типируется набором типоспецифических колисыво морфизмом. Женский мицелий — белый, мужской — желтовато роток или не типируется, но вызывает гибель пчел.

зеленоватый, в результате сложного полового процесса образу Определяют чувствительность выделенных патогенных ки ются многочисленные одноклеточные споры диаметром 1,9— шечных палочек к антибиотикам и химиотерапевтическим препа 3,2 мкм, склеенные в шары (рис. 23). Плодовые тела диаметром ратам, руководствуясь методикой, описанной ниже, для всех 27—77 мкм покрыты толстой оболочкой (рис. 24).

возбудителей.

АСПЕРГИЛЛЕЗ. В лабораторию посылают трупы пчел (не АСКОСФЕРОЗ. Для микроскопического исследования ис менее 50) и соты с погибшими личинками (ЗХ 15 см). Материал пользуют соскоб с поверхности тела пораженных личинок. Не посылают в стерильных банках с притертыми пробками.

большое количество полученного материала помещают на пред При микроскопическом исследовании пчел и личинок по метное стекло в каплю 50 %-ного водного раствора глицерина мещают в чашки Петри и просматривают под малым увеличением или лактофенола (20 г кристаллического фенола, 16 мл молочной для обнаружения на поверхности их тела характерного спороно кислоты и 31 мл глицерина) и рассматривают при малом увеличе шения гриба (конидиальные головки). Затем готовят препараты нии микроскопа с целью обнаружения мицелия и плодовых тел для изучения гриба при большом увеличении. Делают соскобы гриба.

с поверхности погибших пчел и личинок, а также сотов и помеща Для подтверждения результатов микроскопического иссле ют их на предметное стекло в каплю из смеси спирта, воды дования из патматериала выделяют чистую культуру гриба. Для и глицерина (равные части), покрывают покровным стеклом этого трупы личинок извлекают из ячеек, помещают в стерильную и исследуют на наличие гриба.

пробирку с 2 мл физраствора, вносят туда же 1000 ЕД пеницилли Для выделения культуры возбудителя кусочки трупов, а так на и 1000 ЕД стрептомицина, тщательно растирают и материал же кишечника помещают в чашку Петри на агар Чапека. Для высевают на скошенный сусло-агар или среду Сабуро в пробир предупреждения бактериального роста к среде добавляют ках. Посевы культивируют в течение 10 сут при температуре антибиотики (пенициллин — 50 ЕД/мл, стрептомицин — 28—32 °С. На 3—5 сут на поверхности среды появляются белые 100 ЕД/мл). Культивируют при температуре 25—30 °С. Через пушистые колонии, дающие к 8—10 сут зеленовато-серый налет 3—4 дня появляются желто-зеленые колонии гриба Asper. flavus, на дне и по краям колонии, который образуется при формирова они мелкозернистые с воздушным мицелием по краям. Мицелий нии плодовых тел гриба. Колонии могут остаться белыми в том белый или желтый с отходящими от него многочисленными кони случае, если в пробирке будет развиваться мицелий лишь одного 12,4 X 14,2 мкм, а в поздние сроки заболевания — черную зерни стую массу. У больных маток в яичниках обнаруживают большое количество трубочек желтого, коричневого или черного цвета в виде темных пятен (меланин), что является характерным при знаком болезни. Яичники здоровой матки белого цвета. При меланозе также могут поражаться прямая кишка, ядовитые железы, мышцы.

Выделение культуры гриба проводят путем высева суспензии патматериала на сусло-агар, сливовый или картофельно-морков ный агар;

оптимальная температура роста 28—32 °С. Рост гриба появляется на третьи сутки. Колонии возбудителя меланоза сначала белые, гладкие, с возрастом темнеют и становятся черны ми, морщинистыми или бугристыми. В препаратах из культуры гриба выявляются желто-коричневые гифы, овальные оидии и темно-коричневые круглые или овальные хламидоспоры разме ром 2,8—4,8Х 2,6—2,8 мкм, которые, прорастая, образуют псев домицелий и цепочки дрожжеподобных клеток.

В старых культурах часто образуются толстостенные темно окрашенные хламидоспоры. При их прорастании в зависимости от питательной среды могут либо образовываться проростки, дающие начало новым гифам, либо дрожжеподобные клетки.

Вначале они светлые, затем темнеют;

их размеры 1,5—5,2 X 3,1 — 14,7 мкм. Хламидоспоры более крупные— 10X13 мкм, как Рис. 24. Культура Ascosphaera apis на пятые сутки роста, мицелий и правило, одноклеточные, реже с одной или двумя перегородками.

Р ВаНИе СПОровой цисты ГТгригорТн) ° - Увеличение х 1000 ( п !

Грифы в поперечнике составляют от 1,5 до 6 мкм.

КАНДИДАМИКОЗ. В лабораторию направляют больных диеносцами размером 400-1000X 5 - 1 5 мкм, на конце которых и свежие трупы пчел, образцы сотов с медом и пергой с белой имеются округлые вздутия 10-40 мкм в диаметре. На вздутиях блестящей поверхностью в ячейках. Мазки готовят из содержи образуются отходящие радиально одноярусные или двухъярус мого зобика, средней кишки и мальпигиевых сосудов. Препараты ные стеригмы с расположенными в виде цепочек конидиями раз исследуют в темном поле зрения микроскопа на наличие дрожже мером 3—6 мкм в диаметре.

подобных грибков — бластоспор и псевдомицелия.

В посевах из патматериала могут выделяться также Asper Делают посев материала на бактериологические среды и го tumigatus с темно-зелеными колониями, Asper. niger с черно товят суспензию из 10—20 свежих трупов или больных пчел от коричневыми колониями и другие грибы.

одной семьи. В суспензию вносят биомицин, тетрациклин или МЕЛАНОЗ В ветеринарную лабораторию направляют тру- окситетрациклин (или антибиотик, который применяли на небла пы маток в 50%-ном растворе глицерина. Присланных пчел гополучной пасеке) и высевают на сусло-агар, кукурузный или обрабатывают йодированным спиртом. Затем с соблюдением картофельный агар с глюкозой, агар Сабуро и в бульон с глюко стерильности проводят вскрытие (обнаруживают почернение зой. Посевы инкубируют при температуре 25—30 СС в течение яичников и других внутренних органов) и готовят из пораженных 10 дней. По культурально-морфологическим и биохимическим органов суспензию на стерильном физрастворе и препараты для свойствам соответственно определяют виды грибов рода Candida.

микроскопии. С этой целью на предметное стекло наносят каплю Candida albicans имеет вид гроздевидно расположенных лактофенола (20 г кристаллического фенола, 16 мл молочной округлых клеток (бластоспор), псевдомицелия и шаровидных кислоты, 31 мл чистого глицерина), в нее вносят небольшой кусо- клеток с двухконтурной светящейся оболочкой — хламидоспоры.

чек пораженного органа и расщепляют его двумя препаровальны- Они видны нередко в препаратах нативного материала и в препа ми иглами на отдельные фрагменты. Препарат слегка подогрева- ратах из колонии на кукурузном и рисовом агаре на 2—7 сут.

ют на слабом огне, покрывают стеклом и рассматривают под Другие виды Candida хламидоспор не образуют.

микроскопом при увеличении X 100, 200 и 400. В пораженных Для С. albicans, С. tropicalis и С. krussei, выделенных от органах в начале заболевания обнаруживают спороцисты — теплокровных животных, птиц и пчел, характерна их способность округлые клетки гриба с коричневой цитоплазмой размером прорастать в глубь среды, что хорошо видно под изолированной обеззараживаемых объектов кишечной палочки лактозопозитив колонией на косом агаре на 5—7 сут (после пересева изучаемой культуры). ной группы (Е. coli, E. citrovarum, E. aerogenes) и стрептококка пчелиного (Strep, apis).

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ ВОЗБУДИТЕ По наличию кишечной палочки определяют качество профи ЛЕЙ БОЛЕЗНЕЙ ПЧЕЛ К АНТИБИОТИКАМ. Чувствитель лактической и вынужденной дезинфекции при сальмонеллезе, ность выделенных микроорганизмов к антибиотикам определяют гафниозе, септицемии, вирусном параличе и мешотчатом распло методом бумажных дисков (метод диффузии в агар). Для этого де, нозематозе и маланозе пчел и маток.

в стерильные чашки Петри наливают плотную питательную среду Пробы с поверхностей обеззараживаемых объектов для (картофельный или мясо-пептонный агар, среды Бейли, Черепова бактериологического исследования берут через 3 ч после проведе или Томашеца) и на ее поверхность наносят 1 мл густой буль ния профилактической дезинфекции, а при вынужденной (на онной культуры или смывы с агара. Покачивая чашку, равно неблагополучной пасеке) по истечении времени экспозиции, реко мерно распределяют жидкость на поверхности среды. На засе мендуемой при использовании соответствующих дезинфицирую янный агар накладывают пинцетом по одному бумажному диску щих средств. Пробы берут при помощи ватно-марлевых тампо с антибиотиками — пенициллином, стрептомицином, биомицином нов, пропитанных нейтрализующим раствором. При использова и др. На одной чашке можно испытать чувствительность микро нии для дезинфекции растворов едкого натра, каспоса, демпа, бов к четырем антибиотикам. Чашки помещают в термостат на кальцинированной соды и других щелочных препаратов в каче 18—24 ч, затем измеряют диаметр зон задержки роста микробов стве нейтрализующего раствора берут раствор уксусной кисло вокруг дисков миллиметровой линейкой, которую накладывают ты;

при дезинфекции формалином и пароформом — раствор на дно чашки. Зона размером 15 мм — слабая чувствительность нашатырного спирта;

при дезинфекции щелочным раствором микробов, зона более 24 мм — высокая чувствительность микро формальдегида — смесь, состоящую из растворов уксусной кис бов, зона меньше 15 мм — отсутствие чувствительности.

лоты и нашатырного спирта;

при дезинфекции раствором глута ОПРЕДЕЛЕНИЕ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ ВОЗБУДИТЕ рового альдегида — раствор бисульфита натрия;

при дезинфек ЛЕЙ БОЛЕЗНЕЙ ПЧЕЛ К СУЛЬФАНИЛАМИДНЫМ ПРЕПА ции перекисью водорода и хлорамином — раствор гипосульфита РАТАМ. Используют метод диффузии, который заключается натрия;

при применении препарата дезинфектол — раствор ам в следующем. В стерильные чашки Петри наливают по 20 мл миака. Нейтрализующие растворы используют в концентрации расплавленной питательной среды (картофельного или мясо в 10 раз меньшей, чем концентрация примененного дезинфектан пептонного сывороточного агара). Из застывшей питательной та. При отсутствии нейтрализующего раствора используют обыч среды вырезают стерильным скальпелем полоску (по диаметру ную воду (стерильную).

чашки Петри) шириной в 1 см. В образовавшуюся канавку зали Для бактериологического исследования качества дезинфек вают ту же среду с 0,4 %-ным раствором норсульфазол натрия, ции ульев пробы берут со дна со всех стенок улья, всего с пяти или с 0,4 %-ным раствором сульфантрола. Заранее готовят сте различных мест (от 3 % обеззараженных ульев на пасеке).

рильный мясо-пептонный агар с сульфаниламидными препарата С каждого вида пчеловодного инвентаря (дымарь, роевня, медо ми. Чашки помещают в термостат на 3—4 ч для диффузии гонка, воскопресс) берут по одной пробе. Чтобы взять пробу, сульфаниламидов в среду. Затем бульонную культуру 24-часово намечают на ульях и оборудовании квадраты величиной го роста испытуемых патогенных микробов вносят на поверхность 10 X Ю см и протирают их в течение 1—2 мин стерильным ватно приготовленных питательных сред. Посев культуры проводят марлевым тампоном, пропитанным в колбе нейтрализующим в одну или две линии перпендикулярно к канавке. Результаты раствором и затем хорошо отжатым. Тампоны, каждый в отдель роста культуры и бактерицидное действие сульфаниламидных ности, помещают в колбы со стерильным нейтрализующим препаратов учитывают через 24, 48 и 72 ч после выдерживания раствором или стерильной водой (20 мл) и в таком виде доставля в термостате при температуре 37 °С. Устойчивые штаммы бакте ют в лабораторию.

рий растут до самой канавки и даже по ее поверхности. Чувстви тельные штаммы прекращают рост на некотором расстоянии от В каждой соторамке (в количестве 1 % от числа подвергну нее или не растут на поверхности сульфаниламидной среды. тых дезинфекции) с двух сторон отмечают бумажными флажками два участка по 25 ячеек в каждом. Затем в каждую намеченную МЕТОДИКА БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКОГО КОНТРОЛЯ ячейку сота вносят пипеткой по 5—6 капель соответствующего КАЧЕСТВА ДЕЗИНФЕКЦИИ ОБЪЕКТОВ ПЧЕЛОВОДСТВА.

нейтрализующего раствора, после чего вращательными движени С целью обеспечения эффективности дезинфекции объектов на ями конца пастеровской пипетки отмывают микробные тела со пасеке после каждой их обработки обеззараживающими раство стенок и дна ячеек и вместе с нейтрализующим раствором отсасы рами или газом ОКЭБМ необходимо проверить качество прове вают и переносят в стерильные центрифужные пробирки, которые денной работы. Контроль качества дезинфекции осуществляют закрывают резиновыми пробками. Пробы должны быть доставле бактериологическим методом путем выделения с поверхностей 84 ны в лабораторию не позднее чем через 2 ч после взятия. К про ИНВАЗИОННЫЕ БОЛЕЗНИ бам прикладывают сопроводительную, в которой указывают:

адрес хозяйства или владельца пасеки, дату, время дезинфекции и взятия проб, должность лица, взявшего пробы для исследова ния.

В лаборатории пробы исследуют в день доставки. Для этого тампон тщательно отжимают от нейтрализатора в той же колбе, где он находился, и удаляют;

жидкость помещают в стерильные центрифужные пробирки и центрифугируют в течение 30 мин при 3—3,5 тыс. об/мин. Смывы с соторамок также центрифугируют.

Затем надосадочную жидкость осторожно сливают, к осадку Инвазионные (паразитарные) болезни медоносной пчелы в пробирку наливают такое же количество стерильной воды, вызываются возбудителями различной природы: простейшими, содержимое смешивают и после 20-минутного центрифугирова- гельминтами, клещами и насекомыми, в связи с этим их разделя ния снова удаляют надосадочную жидкость, а центрифугат ют на четыре большие группы: протозоозы, гельминтозы, арахно используют для бактериологических исследований. Осадок в объ- зы и энтомозы.

еме 0,5 мл высевают в пробирки со скошенным агаром и в мясо пептонный бульон (5 мл). Посевы выдерживают в термостате при ПРОТОЗООЗЫ температуре 37 °С в течение 24 ч. Выросшие на питательных средах микробные культуры кишечной палочки и стрептококка Из группы простейших рассматривается 7 болезней, из пчелиного исследуют по общепринятой методике. числа которых более часто регистрируются болезни, вызываемые Качество дезинфекции признают удовлетворительным, если микроспоридиями. Долгое время бытовало мнение, что болезнь в посевах из исследуемых проб нет роста указанных культур у медоносных пчел вызывает один вид микроспоридии — Nosema микроорганизмов. apis Zander, 1909. Однако изучение цикла развития паразита, сохраняемости спор во внешней среде, круга восприимчивых хозяев, тканевой специфичности и мест локализации в хозяине, отношения к лечебным препаратам и других вопросов дало проти воречивые данные. Было высказано предположение, что болезнь вызывают 2 вида микроспоридий.

По характеру поражений микроспоридиями медоносных пчел различают: микроспоридиозы взрослых пчел, вызываемые Nose ma apis и Microsporidium sp., характеризующиеся поражением кишечника;

диссеминированный нозематоз взрослых пчел, обус ловленный N. bombi;

нозематоз доимагинальных форм развития пчелы (N. sp. Buys, 1972).

НОЗЕМАТОЗ (Nosematosis) — болезнь взрослых пчел.

В о з б у д и т е л ь — Nosema apis Zander, 1909. Свежие зрелые споры паразита овальной, яйцевидной формы размером 4,5—7,5 X 2—3,5 мкм. Оболочка спор гладкая или слегка вол нистая, трехслойная толщиной 0,2—0,3 мкм. У одного края споры тоньше и имеют микропиле 0,080 мкм диаметром и поляр ные гранулы. Внутри споры различают: зонтикоподобный пластинчатый поляропласт;

полярную трубку, свернутую в 33— 34 витка, уложенные в два слоя (рис. 25);

спороплазму с двумя сферическими или продолговатыми ядрами (иногда одно из них больше другого, размер их 0,218—0,245 мкм, расположены про дольно или несколько смещены к заднему концу споры);

заднюю вакуоль.

Заражение пчел возможно при температурах от 10 до 37 °С.

Оптимум развития микроспоридий — 31 °С.

хлоруксусной кислоты (1 мл/м ) при 18 °С — 2 ч;

10 %-ной хлорной извести — 10—12 ч. Ультрафиолетовые лучи в зависимо сти от интенсивности инактивируют сухие споры через 5—32 ч, споры в воде — 37—51 ч.

Э п и з о о т о л о г и ч е с к и е д а н н ы е. Болезнь может возникать во всех зонах разведения пчел (медоносных и средне индийских) обычно весной и реже осенью. При содержании пчел в теплицах первый пик нозематоза регистрируют в конце мар та — начале апреля, а второй — после их выставки — в мае.

Вспышки массового поражения пчел на пасеке повторяются с интервалом 3—5 лет или более.

Возникновению нозематоза способствуют: повышение и рез кие колебания температуры, беспокойство пчел в зимовнике, позднее наступление весны, длительная дождливая или ветреная Рис. 25. Споры ноземы: холодная погода, высокая влажность в ульях, слабое развитие А —общий вид;

Б — продольный срез споры ноземы (стрелкой указана по семей, плохая обеспеченность их белковым кормом в период, лярная трубка).

предшествующий зимовке, несвоевременное и в большом количе стве скармливание сахара осенью перед формированием семьи на Заглоченные споры через 30 мин попадают в среднюю кишку, зимовку, недоброкачественные кормовые запасы (наличие пади где под действием пищеварительных соков выбрасывают по- в кормах и пестицидов в субтоксических дозах), снижение рези лярную трубку длиной 250—280 мкм (по данным некоторых стентности организма пчел (отравление, наличие других бо авторов, до 400 мкм), из нее выходит двуядерная спороплазма, лезней) и т. д.

амебула которой проникает в протоплазму или ядро клетки эпите- Породы пчел обладают различной устойчивостью к нозема лия средней кишки пчел, где проходит сложный цикл развития тозу. Более устойчивы местные северные породы. Осенняя попу (рис. 26). Полный цикл развития паразита заканчивается через ляция пчел, идущая в зимовку, наиболее устойчива к заражению, 48—72 ч.

чем весенняя. Пчелы одной породы, линии, происходящие от Культивирование возбудителя возможно только в культурах маток-сестер, обладают различной устойчивостью к паразиту;

клеток или тканей. отношение восприимчивых и устойчивых к заражению маток Данные о длительности сохранения спор во внешней среде равно 3:1. Фактор устойчивости наследуется трутнями. Возмож противоречивы. В трупах пчел в лабораторных условиях они на селекция пчел, обладающих резистентностью к ноземе. Гибри сохраняются от 4 мес до 6 лет, на почве перед ульем — от 44 дней ды первого поколения, полученные от скрещивания устойчивых до 25 мес, на сотах — от 3 мес до 2 лет;

в запечатанном меде — и восприимчивых к заражению пчел, более резистентны к зараже 462 дня;

в центрифужном меде при комнатной температуре — от нию. Устойчивость снижается во 2—4 поколениях пчел этих 30 дней до 10 лет, в водопровод- помесных семей.

ной воде при 20 °С — 90—113 Заражение насекомых происходит при заглатывании спор дней. При минусовых темпера- ноземы. N. apis поражает взрослых рабочих пчел, трутней и ма турах споры сохраняются от ток. Величина инвазирующей дозы зависит от сезона года, 24 дней до 7 лет. породы пчел и возраста насекомых. Сравнительно большей устой Споры погибают при нагре- чивостью обладают трутни, а затем матки.

вании до 57—65 °С в течение Источником возбудителя болезни являются больные пчелы.

10—15 мин;

в водяных парах — Из организма пчел ноземы выделяются с фекалиями. Внутри при 55 °С через 40 мин, в текучем семьи споры распространяются в основном рабочими пчелами, паре (100 ° С — 1— 5 мин;

в которые собирают фекалии у анального отверстия матки, рабочих 4 %-ном формалине при 25 °С — пчел и трутней, очищают соты, кормят матку, трутней и обменива в течение часа;

в 2 %-ном раст- ются между собой кормом. В сильно инвазированной семье на воре едкого натра при 37 °С — язычке рабочей пчелы находят 1—4 споры, антеннах— 1—5, 15 мин;

80 %-ной уксусной кис- первой паре ног — 8—32, второй и третьей парах — 266—400, на лоте (200 мл на улей) при крыльях — 231—244 споры ноземы (Свобода, 1961). Спорами Рис. 26. Цикл развития ноземы. 16 °С — 5—7 дней;

в парах ноземы контаминированы также все внутренние стенки улья;

на 88 секреторные, затем регенерационного эпителия. Они увеличива ются в объеме, у них возрастает секреторная деятельность, исчезают цитоплазматические гранулы фосфата кальция, снижа ется или подавляется синтез РНК, уменьшаются количество мукополисахаридов и активность ферментов, ответственных за энергетический и углеводный обмены.

В зависимости от состояния организма патологический про цесс из отдельных участков средней кишки постепенно распро страняется на весь отдел, перитрофическая мембрана становится фрагментарной и исчезает, увеличивается десквамация эпителия на отдельных участках вплоть до базальной мембраны. Послед няя утолщается, приобретает складчатость (Гробов и др., 1967;

Кавачев, Шабанов, 1972). Заполненные спорами оболочки клеток выступают в просвет кишечника и разрываются, происходит инфицирование здоровых участков эпителия, часть спор выбра сывается с фекалиями. Поражаются также клетки пилорической части тонкой кишки и мальпигиевых сосудов в местах их впаде ния в кишечник. В результате изменений в средней кишке нару шаются процессы переваривания и всасывания питательных веществ.

В течении болезни различают два периода. Первый характе ризуется увеличением активности каталазы в средней кишке и тканях тела, количества общего белка и фракции А в гемолимфе пчел. С усилением нозематозного процесса снижается активность Рис. 27. Гистологический срез участка средней кишки пчелы, поражен каталазы, протеиназы, амилазы, диастазы и фермента, створажи НОИ НОЗСМОЙ.

вающего казеин молока в средней кишке, уменьшается содержа соте их находят до 2,6 млн., в 1 г меда до 10 млн. (Штехе 1961 ние общего белка за счет фракций А и Б гемолимфы, повышается 1977);

они содержатся и в перге (Вовк, 1972). Споры ноземы уровень остаточного азота и свободных аминокислот. В последу обнаружены в воде, почве и на растительности (Борхерт, 1928, ющем отмечается падение уровня свободных аминокислот в гемо лимфе и средней кишке, снижение уровня липидов в гемолимфе.

Распространению возбудителя болезни на пасеке способ- Уменьшается общее количество жира в теле и стеролов в средней ствуют перелеты рабочих пчел, трутней, подсадка больных маток кишке, увеличивается содержание бора и марганца в мышцах перестановка сотов из одного улья в другой, объединение слабых пораженных пчел, возрастает содержание воды в организме при семей, размещение на пасеке семей неизвестного происхождения снижении ее потребления на 33 % и кислорода на 22 % (Моф различные членистоногие, проникающие в ульи. Большое значе- фетт, Лаусон, 1975). Количество гемоцитов в начале процесса не ние в передаче возбудителя имеет плотность размещения семей изменяется, но затем резко падает, возрастает число более зре пчел на местности. лых форм гемоцитов. Гипофаренгиальные железы, ответственные за выработку личиночного корма и инвертирование сахара, у по Экономический ущерб от нозематоза пчел большой Напри раженных насекомых быстро атрофируются, межклеточные ка мер, в Северной Америке, по сообщению К. М. Дулла (1972) нальцы спадаются;

резко снижается активность инвертазы и ами убытки от заболевания достигали до 24 кг меда с семьи, в Южной лазы, уровень био- и неоптеринов (ростовых факторов, выделяе Австралии в отдельные годы погибали от этой болезни до 20— мых с маточным молочком).

25 /0 пчел. Согласно данным В. И. Полтева (1948), продукция меда при нозематозе снижается на 35—50 %, прирост семей — на Отмечаются изменения в ректальных железах (Бэрманн, 58—75 %;

смертность возрастает в 2—3 раза. При поражении 1963), резко уменьшается размер жирового тела и содержание около 60 /0 пчел семья не дает никакой продукции (Захаров, азота в нем. Общая масса пораженных пчел вначале возрастает, затем падает, масса средней кишки увеличивается пропорцио П а т о г е н е з. Обычно вначале поражаются клетки задней нально числу скапливающихся в ней спор ноземы. Атрофируются части средней кишки, где отслаивается перитрофическая мембра- мышцы. Сухая масса инфицированных пчел снижается.

на (рис. 27) (Жданов, 1967). Прежде всего повреждаются клетки У пораженных маток яичник подвергается различной степе 90 ни дегенерации в зависимости от степени поражения средней и не зависит от степени поражения их кишечника;

молодые зара кишки. Больные матки, вероятно, снижают выделение маточного женные матки живут в среднем 25,3 дня (Ласкотова и др., 1980).

феромона (Фургала, 1962). Поражение трутней, очевидно, также Продолжительность жизни больных рабочих пчел почти сопровождается нарушением спермиогенеза и наступлением им- вдвое меньше, чем здоровых. Пчелы чаще погибают внутри улья потенции. Кроме изменения метаболизма, у пчел отмечается в период зимовки, однако прямая зависимость величины подмора токсикоз, наступающий в результате усиления бродильных про- от степени его поражения бывает не всегда. Весной и в первой цессов и всасывания продуктов распада микрофлоры. Выделяет половине лета насекомые погибают в поле. Интенсивное ослабле ли нозема при своем развитии какие-либо токсины, неясно. Токси- ние семей пчел весной часто приводит к понижению температуры ческих субстанций в спорах паразита пока не установлено. в гнезде, снижению резистентности у личинок. При нозематозе У больных рабочих пчел увеличивается количество бактериаль- возможна гибель всех пчел отдельных семей и пасек, иногда ных клеток в средней кишке в 12—250 раз, возрастает разнообра- болезнь приобретает характер эпизоотии с гибелью семей ряда зие видов микроорганизмов. других пасек на местности.

Разрушение перитрофической мембраны и десквамация эпи- Различают две формы проявления нозематоза: типичную телия в средней кишке приводит к проникновению микрофлоры и скрытую (латентную). Первая наблюдается относительно ред в гемолимфу пчелы, развитию септицемии (Бухарев и др., 1971). ко, обычно в зонах с умеренным и холодным климатом, летом У отдельных пораженных нозематозом пчел бывают опухоле- переходит в скрытую форму. Вторая регистрируется довольно подобные образования и разрастание отдельных кольцевых часто, отмечается во всех зонах земногв шара, но особенно в зо мышц.

нах субтропиков и тропиков.

П р и з н а к и б о л е з н и. В первый период заболевания Нозематоз очень часто протекает совместно с другими пораженные насекомые в большом количестве поедают пергу. болезнями, он способствует развитию вируса хронического пара Возрастает потребление сахарного сиропа, однако пчелы лучше лича у пчел. Нитевидный вирус, у-вирус и вирус черных маточни берут мед, содержащий пыльцу. Во второй период болезни расход ков установлены только у пчел, пораженных ноземой. Вирус корма снижается до нормы. Установлено, что повышенное со- мешотчатого расплода и х-вирус не проявляют такой зависимо держание белка в рационе в период развития болезни вызывает сти. Нозематоз ускоряет заражение и гибель пчел при скармлива переполнение кишечника и непроизвольную дефекацию у пчел нии им возбудителей бактериальной природы (Hafnia alvei, Вас.

в улье, сокращает продолжительность жизни насекомых. alvei, Вас. mesentericus viscosis, Pseudomonas apisepticum).

Больные пчелы начинают раньше выполнять работы, несвой- Часто отмечается смешанное течение нозематоза с европейским ственные их возрасту. В активный период они находятся на или американским гнильцами. Поражение микроспоридией периферии гнезда, скапливаются у летка и в верхней части улья. взрослых пчел снижает их устойчивость к некоторым грибам В свите матки и на расплоде преобладают здоровые особи. Зимой (Aspergillus niger, A. fumigatus, Torulopsis dattila, T. stelata).

и весной пораженные пчелы сосредотачиваются в месте наи- Большой отход пчел вызывает совместное течение нозематоза высшей температуры клуба (над расплодом, если он имеется). и амебиаза. Зарегистрированы случаи смешанного течения нозе При зимовке пчелы беспокоятся, издают непрерывный шум, матоза с критидиозом и грегаринозом. Часто отмечается пораже вылетают из улья и погибают. Первый весенний облет недруж- ние пчел ноземой и клещом Acarapis woodi.

ный, пчелы нередко ползают около улья. Передняя стенка улья, П р о г н о з болезни зависит от многих факторов: жизнеспо предлетковая доска, а также соты покрыты многочисленными собности зимующих пчел (качества подготовленности пчел, иду пятнами фекалий. Пчелы становятся вялыми, мало реагируют на щих в зимовку);

количества зараженных пчел, степени их внешние раздражения. Летняя деятельность пораженных семей поражения и загрязнения внутренней среды улья спорами нозе снижается на 22—35% (Риндерер, Катслин, 1977), медосбор мы;

длительности зимовки и неблагоприятной погоды для лёта и опылительная активность насекомых сокращаются на 36—50 % насекомых весной;

активности яйцекладки у матки;

обеспеченно (Франклин, 1953;

Михайленко, 1975;

Пехакер, 1980). сти семьи пчел полноценными кормами. При слабом поражении Пчелы плохо развиваются, площадь расплода сокращается или своевременном лечении семьи пчел могут восстановить к се в 4—8 раз, из яиц, отложенных маткой, погибает 10—20 % (про- редине или концу лета свою силу и дать продукцию, однако тив 1 % в норме) до образования зрелых личинок. У больных жизнеспособность пчел осенней генерации, идущих в зимовку, личинок сокращается число гемоцитов в гемолимфе, изменяется будет значительно ниже, чем у здоровых пчел.

количество микроэлементов в теле. Выращенные в семьях матки Д и а г н о з. Поскольку признаки поражения нозематозом не неполноценны. Они медленно передвигаются по сотам, часто специфичны, важное значение приобретают лабораторные иссле падают на дно улья;

их плохо принимают в новых семьях. Отмеча- дования. В лабораторию посылают не менее 30 трупов или живых ется смена маток в семьях. Замена их происходит через 2—6 нед пчел. Трупы собирают из среднего слоя подмора, образовавшего 92 окрашивают акридином оранжевым 1:20 000— 1:25 000 в течение ся на дне улья. Живых пчел в период зимовки или ранней весной 30—60 мин, и мазки исследуют под люминесцентным микроско берут с верхней планки рамок, а в летний — у летка или с крайних пом. У живых спор оболочка светится желто-зеленым цветом рамок гнезда. Поступивший в лабораторию материал исследуют (Бубнов, Смирнов, 1970, 1971).

групповым методом или каждую пчелу отдельно. У пчелы берут Для определения жизнеспособности спор можно применить брюшко, помещают в 1 мл воды и тщательно готовят суспензию.

биопробу.

Каплю суспензии микроскопируют (Х400—600) в слегка зате Установить видовую принадлежность спор удается с по ненном поле. Исследуют не менее 20 полей зрения микроскопа.

мощью специфичных сывороток в реакциях иммунофлуоресцен При положительных результатах находят овальные споры нозе ции.

мы. Степень поражения оценивают по 3 или 4-балльной системе:

П р о ф и л а к т и к а. В некоторых странах при возникнове -f- единичные споры ноземы (менее 10), нии нозематоза накладывают карантин, в других, в том числе + + —Ю—100 (в каждом поле видны не соприкасаю и в СССР, при этой болезни вводят ограничения.

щиеся споры), щиеся спорь С целью предупреждения заноса возбудителя нельзя разме +-+,+ —100—1000 (очень много соприкасающихся спор),,, - свыше 1000. щать на пасеках нозематозные семьи;

использовать маток и рас Н плод семей, не проверенных на наличие возбудителей, а также Для опр Для определения количества спор используют также метод соты, ульи и другой инвентарь без предварительной их дезинфек подсчета их в г е м о ц и т о м е т р е (камера Горяева).

подсчета их ции;

размещать рои неизвестного происхождения;

ставить ульи При индивидуальном исследовании пчел для получения на перелете пчел с других пасек;

перемещать пораженные семьи.

суспензии используют многокамерные гомогенизаторы и мно В случае приобретения пакетов пчел из них помещают в чистые гоштыревые пружинные капельницы. Оценку поражения прово ульи на продезинфицированные соты. Свободные от расплода дят так же, как указано выше. Определение количества спор соты в пакетах выбраковывают или дезинфицируют. Ульи с вновь в каждой пробе позволяет более точно судить о состоянии пора сформированными семьями тщательно утепляют и ставят в 25— жения пчел в семье и прогнозировать исход болезни.

30 м от основной пасеки. При подсадке маток тщательно их При слабом поражении пчел полученные гомогенаты центри осматривают, сопровождающих пчел уничтожают.

фугируют при 1500 об/мин в течение 15 мин и исследуют средний Пчел содержат в теплых ульях, которые устанавливают на (белого цвета) слой осадка. Для выявления носительства спор подставки, в местах, хорошо освещенных солнцем и защищенных ноземы следует выдержать 7—10 дней группу пчел в садках, от ветра. Слабые семьи помещают в один улей, разделенный а затем исследовать их кишечник.

глухой перегородкой, или объединяют. Нельзя часто беспокоить Прижизненную диагностику нозематоза у маток и рабочих пчел в позднеосенний, зимний и ранневесенний периоды. В зи пчел осуществляют методом к о п р о л о г и ч е с к и х и с с л е мовнике поддерживают температуру ±2 °С и относительную д о в а н и й. Матку осторожно помещают под стеклянный кол влажность 75—85 %. При зимовке на воле и при выставке ранней пак, дном для которого служит стеклянная пластина. После весной ульи обвязывают толем.

дефекации матки пятна кала осторожно снимают, добавляют Важной профилактической мерой при нозематозе является каплю воды и исследуют. При невозможности сразу же провести ранний облет пчел, поэтому ульи как можно раньше выставляют исследование материал берут на целлофан и сушат. Для сбора из зимовника. После облета при благоприятной погоде семьи пчел каловых масс рабочих пчел весной перед массовым облетом пересаживают в чистые продезинфицированные ульи. Гнездо укрепляют на передней стенке улья листы бумаги. Можно со сокращают и утепляют, иногда применяют дополнительный обог скоблить фекалии со стенок улья и рамок.

рев улья. Старые непросвечивающиеся соты (более 3 лет эксплуа Для выявления спор ноземы в меде к 2,1 г (1,5 мл) этого тации) выбраковывают, удаляют также соты с забродившим или продукта добавляют 5 мл воды и 10 мл этилового спирта, тща закристаллизовавшимся медом, заплесневевшей пергой, пустые тельно размешивают и центрифугируют 5—10 мин при 2500— соты с пятнами испражнений пчел. С деревянных частей рамок, 3000 об/мин. Микроскопируют осадок.

остающихся в улье, удаляют пятна. Годные для употребления Пергу или пыльцевую обножку (250 мг) исследуют на соты после механической очистки рамок дезинфицируют.

предметном стекле, добавив к ним 3—5 капель раствора Люголя.

Весной пчелам скармливают полноценную пергу или дают В тканях тела пчелы споры ноземы и их стадии развития белковые подкормки (4 части дрожжей+ 6 частей сахарной удается обнаружить при просмотре под световым микроскопом пудры+ 6 частей меда, смешанные до однородной массы;

са окрашенных гистологических препаратов или при электронной харный сироп 1:1 и 10—20 % свежего цельного коровьего молока микроскопии ультратонких срезов.

в количестве 500—750 г (Мельник, Попов и др., 1982). Очень Наличие спор не всегда свидетельствует о развитии болезни, важно, чтобы семьи пчел в течение всего сезона развития были важно установить их жизнеспособность. С этой целью споры 94 обеспечены белковым кормом. Для стимуляции откладки яиц 2000 г/м, экспозиция 72 ч при 10—28 °С и относительной влаж маткой высокий эффект дает периодическое скармливание не- ности 36—89 %). Обеззаразить соты можно температурой, раз большими дозами (200—250 г) чистого меда из старых запасов. местив их в специальном помещении при 48,4 °С на 24 ч, или при Мед из пораженных нозематозом семей скармливать пчелам 42—45 °С и относительной влажности 40—60 % на 4—8 сут.

нельзя. При формировании семей на зимовку их обеспечивают Одежду, лицевые сетки, холстики с ульев, мелкий инвентарь углеводным кормом в количестве 18—30 кг в зависимости от зоны кипятят 20—30 мин. Ульи можно дезинфицировать газами страны (в зимних запасах сахар не должен превышать 5—7 кг), (см. выше) или прожигать огнем паяльной лампы.

количество белкового корма (перги) должно составлять не менее Л е ч е н и е. Для лечения пчел применяют фумагиллин ДЦГ 3200 см2. Замену меда на сахар нужно производить своевремен или фумидил Б. Один флакон препарата (20 г) рассчитан на но;

сахарный сироп должен быть переработан, уложен и запеча применение 5 семьям пчел. Содержимое флакона растворяют тан в ячейках сот до образования клуба пчел. При наличии пади в 25 л чистого сахарного сиропа (1:1) и дают ежедневно в течение и различных пестицидов в меде его необходимо полностью заме 21 сут по 250 мл. При сильном поражении дозу удваивают, на нить на сахарный сироп.

крупных пасеках дают по 1—2 л через 5—7 дней. Препарат мало Семьи пчел ставят в зимовник с наступлением устойчивой токсичен для пчел и теплокровных. Он подавляет синтез ДНК холодной погоды. На пасеках целесообразно содержать пчел и изменяет липидный обмен в паразите. Изменение устойчивости одной породы, обладающих выраженной естественной устойчиво- возбудителя к препарату при многократном его применении не стью (краинская, карпатская, среднерусская или их помеси). установлено. Фумагиллин действует на паразитов в период их Старых маток (более 3 лет) заменяют на молодых. Слабые семьи нахождения в кишечнике пчелы. Он не всасывается, не кумулиру выбраковывают. Прирост на пасеке получают за счет здоровых ется, нормализует жизнедеятельность организма пораженных семей, проводят комплекс профилактических мероприятий, на- пчел;

при недостатке белка, вероятно, стимулирует яйцекладку правленный на недопущение появления других болезней. маток, обладает высокой эффективностью. Рекомендовано ис М е р ы б о р ь б ы. Чтобы предупредить распространение пользовать фумагиллин: пчелам краинской породы — 5 мг/л, нозематоза внутри пасеки, при выставке и перевозке ее на ме- среднерусской—10, серой горной кавказской—13, итальян досбор ульи устанавливают в том же порядке, как они стояли ской — 20 мг/л.

раньше. Ульи окрашивают в хорошо различаемые пчелами цвета Фумагиллин применяют для лечения и профилактики нозе (белый, голубой или желтый) и размещают друг от друга на матоза в семьях пчел весной и осенью, его используют в корм при расстоянии 3—4 м. На пасеке проводят борьбу с воровством пчел, транспортировке пакетов и маток. Препарат нельзя давать в пе содержат сильные семьи, не допускают перестановку сотов с рас- риод медосбора. Фумагиллин сохраняется в зимних запасах плодом или кормом из слабых семей в сильные. Следят за чисто- семьи (при стабильной внешней температуре) до 6 мес, в сахар той предлетковых площадок и весь мусор сжигают. Осмотр на ном сиропе при 4,4 °С — в течение 44 мес, в весенне-летних пасеках начинают с сильных семей. Ульи оборудуют индивиду- запасах — не более 16 дней.

альными поилками или устанавливают на хорошо освещенном Фумагиллин дают в виде канди совместно с белковыми месте групповую поилку с проточной водой, обязательно ста подкормками (1 —12 г препарата на 1 кг корма);

пергой, соевой вят и поилку с подсоленной водой. В борьбе с болезнью большое мукой, молоком, дрожжами. Корм дают по 1 —1,5 кг на семью значение имеет своевременное выделение больных семей пчел.

3 раза через 10—15 дней весной. Однако в сахарном сиропе этот В ветеринарную лабораторию высылают пробы от подозри- антибиотик действует более длительно. Совместное применение тельных в заболевании семей, при отсутствии таковых — от 10 % террамицина с фумагиллином снижало количество расплода семей пчел, содержащихся на пасеке. в семьях, сочетание последнего с окситетрациклнном Основным способом профилактики нозематоза является (200 мг/семья) способствовало вспышке мешотчатого расплода.

систематическая ежегодная дезинфекция сотов. Соты дезинфици- В ЧССР предложен новый препарат — нитекабин, состоя руют в парах уксусной кислоты (200 г 80 %-ной ледяной уксусной щий из гуанидин карбоната, формальдегида и воды. Препарат кислоты на 12-рамочный улей в течение 3 сут при 16—18 °С, или выпускается во флаконах по 100 мл, содержимое рассчитано на 5 сут при более низкой температуре). Можно хранить пустые соты применение 5 семьям. Лечебный сироп дают ежедневно по 0,15 л, и с кормом в парах 33 %-ной уксусной кислоты (эссенция) в тече- или 3 раза через 7—10 дней по 1 л. В период скармливания ните ние всей зимы (против ноземы, амебы). После обработки соты кабина семьи пчел должны быть обеспечены пыльцой (пергой).

проветривают (до исчезновения запаха) в течение 20—48 ч. Спо- По эффективности нитекабин не уступает фумагиллину (Перо ры теряют жизнеспособность и при обработке газами: окисью утка, 1981;

Нейманн, 1982). Оба препарата дают наибольший этилена (1000 мг/л, экспозиция 48 ч при 43 °С) или смесью окиси эффект в комплексе мероприятий (сокращение и утепление гнезд, этилена и бромистого метила в соотношении 1:25 (1500— максимальное удаление из семей возбудителя болезни).

96 4 О ф Гробии и др. виды шмелей в большей или меньшей степени. Поражение насе Определенным действием на паразита обладают сульфади комых в некоторые годы приводит в определенных местах к значи мезин, мономицин. Однако данные по практическому применению тельной гибели шмелей, в результате резко снижается урожай этих препаратов противоречивы, вместе с тем их можно использо ность семян клевера. Поражение пчел микроспоридией так же, вать при нозематозе для подавления развивающейся микрофло как у шмелей, носит диссеминированный характер. Эреши-Пал ры (Гробов, 1974). Как симптоматическое лечение могут быть (1938) и Борхерт (1974) наблюдали маток, которые имели еди использованы аскорбиновая кислота (200 мг на 1 кг канди), ничных паразитов в эпителии средней кишки, однако последние экстракты, настойки и отвары некоторых растений (календула, в значительном количестве встречались в просвете спинного мята, полынь и пр.), стимулирующих усиленное развитие семей сосуда, в перикардиальных клетках, в яичнике, протоплазме пчел.

и ядрах питательных и фолликулярных клеток, в яйцах. Их также МИКРОСПОРИДИОЗ вызывает Microsporidium sp. Clark, находили в стенке тонкой кишки, ректального пузыря и летатель 1980, который паразитирует в клетках эпителия средней кишки ных мышцах.

медоносной пчелы.

Д и а г н о з при поражении медоносных пчел N. bombi не В о з б у д и т е л ь. Плазмодии округлые и лентовидные с разработан. Индикация спор возможна с помощью серологиче 2, 4 и 8 ядрами, некоторые лентовидные клетки содержат 12 ядер, ских методов при наличии специфической сыворотки к N. bombi.

округлые — 22;

редко встречаются одноядерные клетки. Размер ядер 0,6—0,8 мкм. Одно- и многоядерные формы имеют выпячи- Л е ч е н и е не разработано.

вания протоплазмы, подобные филоподиям, которые захватыва- П р о ф и л а к т и к а болезни такая же, как при N. apis.

ют протоплазму клетки хозяина. Споры размером 3,5—5Х 0,6— НОЗЕМАТОЗ ЛИЧИНОК И КУКОЛОК. К заражению наи 1 мкм (в среднем 4,2±0,39X 0,8±0,12 мкм), цилиндрические, более восприимчивы 5-дневные личинки (96,7% заражения), слегка конические, некоторые изогнуты. Спора содержит одно меньше 4-дневные и 3-дневные (2,3 %) и практически не воспри ядро и имеет полярную трубку, уложенную в 7—9 витков. имчивы 1-2-дневные (0,3%).

В о з б у д и т е л ь Nosema sp. Buys, 1972, поражает клетки Д и а г н о з ставят по характерной форме и размерам спор жирового тела 4—5-дневных личинок, куколок и молодых взрос микроспоридий, при этом необходима специальная окраска (ре лых пчел. Выходящие из спор спороплазмы обнаруживаются акция Фёльгена) с целью выявления количества ядер в споре.

в клетках жирового тела на 5—6 день после заражения. Они М е р ы б о р ь б ы и л е ч е н и е не разработаны.

превращаются в овоидные, а затем лентовидные шизонты с одним ДИССИМИНИРОВАННЫЙ НОЗЕМАТОЗ вызывает No или несколькими округлыми ядрами, протоплазма часто со sema bombi Fantham et Porter, 1914.

держит вакуоли. Из четырехъядерных шизонтов формируются В о з б у д и т е л ь. Паразитов обнаруживают в клетках эпи два споронта, переходящие в споробласты. Свежие двухъядерные телия мальпигиевых сосудов, слизистой оболочке и мышцах споры имеют размер 4,9X2,8 мкм. Для заражения необходимо кишечника, жировом теле и трахее шмелей, медоносных и карли не менее 100 спор на одну личинку. При искусственном скармли ковых пчел.

вании спор гибель куколок не превышает 7 %. При превращении Двуядерная спороплазма размером 2,2 мкм проникает в куколок в молодых пчел возбудитель болезни сохраняется в их клетки эпителия уже через 48 ч после заражения. В цитоплазме организме. В одном трупе куколки образуется в среднем 139 спор.

клетки она образует два тела с тонко гранулированной цитоплаз Скармливание спор ноземы взрослым насекомым к заражению их мой и гомогенными одинарными ядрами. Последние многократно не приводит.

делятся, образуя многоядерные шизонты, которые распадаются на одноядерные клетки. После деления их ядер формируются П р и з н а к и б о л е з н и. Болезнь зарегистрирована на споры. Они продолговатой или слегка почковидной формы разме- одной пасеке в Претории (ЮАР). Паразит, вероятно, распро ром 4,4—4,8х 2 мкм с двумя сферическими ядрами. В организме странен более широко и встречается совместно с N. apis. Семьи не молодых шмелей бывают более крупные споры, достигающие гибли, но сильно ослабели, имели пестрый расплод. Около ульев размеров 5,2--7X3,7 мкм. с больными пчелами находили большое количество погибших куколок. При поражении клеток жирового тела споробласта Заболеванию подвержены самки, самцы и рабочие особи ми вокруг паразита образуется гало, клетки быстро разру шмелей и пчел всех видов. У больных шмелей уменьшаются раз шаются.

меры жирового тела и яичников, увеличивается объем гемо Д и а г н о з ставят по обнаружению спор микроспоридий лимфы. Пораженные клетки разрушаются.

в погибших куколках.

Больные самки не строят гнезд. Насекомые часто теряют Л е ч е н и е не разработано. Больные семьи выздоравлива способность к полету, с трудом ползают по поверхности почвы, ли самостоятельно. Необходимо проводить дезинфекцию сотов, обычно очень раздражительны и жалят беспричинно. В различ ульев и пасечного инвентаря.

ные годы и в зависимости от территории инвазируются различные 98 4• АМЕБИАЗ — Amoebiasis apium (син.: амебиоз, амеба- Источником возбудителя болезни служат больные пчелы, тоз) — инвазионная болезнь взрослых пчел, характеризующаяся выделяющие с калом цисты амеб. Заражение насекомых происхо поражением мальпигиевых сосудов. дит при очистке сотов, а также при потреблении контаминиро В о з б у д и т е л ь — Malpighamoeba mellificae Prell, 1927. ванных возбудителем кормов и воды. В некоторые годы пора Вне организма пчелы сохраняется в виде овальных или шарооб- женность семей бывает значительной. Наибольшее число боль разных цист размером 5—8 мкм. Цисты покрыты гладкой, плот- ных пчел в семье регистрируется весной, пик заболевания обычно ной, трудно воспринимающей краски оболочкой, толщина которой отмечается вслед за пиком нозематоза. Обычно в зимние месяцы зависит от степени зрелости цисты (у зрелых она достигает 1 мкм). количество пораженных насекомых в семье не превышает 1 — Протоплазма цисты разделена на экто- и эндоплазму с различ- 1,5%, в апреле достигает 14—20, в мае — 33—40% и выше, ным коэффициентом преломления света;

в световом микроскопе в июне резко снижается, и в июле — августе в семьях трудно бы цисты выявляются в виде двуконтурных образований. Они имеют вает найти пораженных насекомых. В Приморье из-за климати одно или несколько ядер размером 1 мкм. Ядра окрашиваются не ческих особенностей местности пик амебиаза иногда смещается всегда, лучшими красителями являются тнонин, толуидин-голу- на июнь — начало июля. Амебиаз протекает как самостоятельная бой и окраска по Граму. болезнь с поражением иногда до 70—100 % пчел в семье или При заглатывании пчелой цист последние скапливаются совместно с другими болезнями (микроспоридиозы, акарапидоз, в задней части средней кишки или ректальном пузыре, превраща- хронический вирусный паралич, фитотоксикозы).

ются в вегетативные формы, которые внедряются в мальпигиевы П а т о г е н е з. Амебы, расположившись на стенках мальпи сосуды, где продолжают свое развитие. В результате множе- гиевых сосудов, проникают своими псевдоподиями в межкле ственных делений цисты распадаются в течение 14 дней на ряд точное пространство и путем осмоса резорбируют питательные мелких образований. Последние увеличиваются в размерах и об- вещества. Это приводит к атрофии клеток, они становятся разуют подвижные формы со жгутиками. В дальнейшем движе- плоскими и теряют способность накапливать и выводить ураты.

ние этих форм замедляется, жгутики исчезают, клетки образуют Концентрация продуктов обмена в организме пчел приводит псевдоподии с заостренными, слегка согнутыми, тонкими концами к отравлению его, снижению резистентности. Скопление амеб или закругленными, редко наблюдают клетки с одной лобоподией иногда вызывает механическую закупорку мальпигиевых сосу (пальцеподобный выступ). В этой стадии происходит повторное дов, в результате чего отмечают их разрывы. Выделяют ли амебы бинарное деление паразита, после чего вновь возникают под- токсины и насколько опасны продукты их жизнедеятельности для вижные формы со жгутиками. организма пчел, не выяснено.

Вегетативные формы хорошо окрашиваются генцнанвиоле- П р и з н а к и б о л е з н и. Основным признаком болезни том, метиленблау и фуксином. При подсыхании среды или является постепенное уменьшение пчел в семье.

понижении температуры ниже 20 °С паразит образует цисты. Во время зимовки накопление продуктов обмена у пора Количество цист и вегетативных форм амеб в каждом женных насекомых происходит медленно и это мало сказывается мальпигиевом сосуде значительно варьирует. Иногда весь про- на состоянии пчел, но весной при вылете из улья у них резко свет сосуда полностью заполнен паразитами. В других случаях возрастает обмен веществ, и повышенная концентрация про отмечают незначительное число амеб. Пораженность отдельных дуктов распада приводит к внезапной гибели пчел во время мальпигиевых сосудов также неодинаковая. В естественных усло- полета. В отличие от других заболеваний пчелы обычно не поги виях при 23—32 °С цикл развития паразита завершается в тече- бают в непосредственной близости от улья. Их смерть наступает ние 21 —28 дней. Созревшие цисты продвигаются током жидкости в результате прекращения функционирования мальпигиевых со к месту впадения мальпигиевого сосуда в кишечник и выделяются судов или же вследствие более низкой температуры за пределами с экскрементами пчелы. В сухих пятнах фекалий на сотах цисты улья, которую здоровые пчелы обычно хорошо переносят.

сохраняют жизнеспособность не менее 5—б мес.

Иногда на пасеке обнаруживают ползающих, неспособных Э п и з о о т о л о г и ч е с к и е д а н н ы е. Болезнь распро- к полету пчел. При вскрытии улья отмечают неприятный запах.

странена во многих странах. В ульях заметны пятна фекалий, у пчел увеличено брюшко. Бо К амебиазу восприимчивы взрослые особи пчел. Матки лезнь развивается постепенно, часто протекает скрыто. Семьи и трутни в естественных условиях обычно не заболевают, однако пчел резко ослабевают и погибают весной. Количество погибших при содержании маток в садках или нуклеусах они заражаются семей резко возрастает при смешанных заболеваниях. В выжив так же легко, как и рабочие особи. Искусственное заражение ших семьях болезнь вновь возникает в следующую весну.

возможно при скармливании материала, содержащего цисты При вскрытии больных пчел мальпигиевые сосуды стекло паразита. Заболевают чаще старые пчелы, однако известны видные, увеличены, иногда разорваны. Через стенку сосуда случаи обнаружения цист амеб у пчел в возрасте до 6 дней. видны округлые цисты, эпителиальные клетки дегенерированы.

100 Д и а г н о з амебиаза лучше проводить на живых или Рис. 28. Грегарины:

недавно (не более 1—2 дней) погибших пчелах. Микроскопируют / — споронт;

2 — цефалент с ок руглым эпимеритом;

3 — цефалент, содержимое мальпигиевых сосудов, которые тщательно отделяют прикрепленный к клетке хозяина;

от кишечника, стараясь не повредить последний. При микроско- 4 — маленький цефалент с большим пии нативных мазков в слегка затемненном поле микроскопа плотным эпимеритом;

5 — цефалент (объектив X 40) цисты амеб заметны в виде округлых двухкон- (слева внизу) и споронт;

6—спо ронт и споры ноземы (слева внизу) турных образований величиной 5—8 мкм (приблизительно '/в (Хитчок, 1948).

диаметра мальпигиева сосуда).

Для выявления вегетативных форм паразита исследуют окрашенные препараты. В качестве красителей используют цированной (остаточное те 2 %-ный раствор эозина на физрастворе или раствор Люголя ло). Цисты нередко имеют об (йод кристаллический 5 г, йодистый калий 10 г, дистиллирован- разование для выхода спор — ная вода 100 мл). Красители добавляют в соотношении 1:1 к сус- спородукт.

пензии мальпигиевых сосудов на предметном стекле;

исследуют Для определения вида через 5 мин. Эозин и йод окрашивают ядра погибших паразитов. грегарин имеет значение фор Для выявления вегетативных форм цист амеб можно использо- ма и размеры эпи-, прото- и вать окраску по Граму и другие красители. Для выявления дейтомерита, споронта, га паразитов на гистопрепаратах их окрашивают по Майеру и эози- мет, способ выхождения спор ном по Гейденгайну. из цисты (наличие или отсут ствие спородукта) и т. д.

Л е ч е н и е. Специфических средств для лечения пчел нет.

Хороший эффект дают мероприятия, направленные на усиленное В настоящее время из развитие семей: сокращение и утепление гнезда, дача побуди- вестно 4 вида грегарин, выде тельных подкормок для стимулирования откладки яиц маткой. ленных от пчел.

Э п и з о о т о л о г и ч е с к и е д а н н ы е. Ареал установ П р о ф и л а к т и к а амебиаза такая же, что и при микрос ленных видов грегарин у пчел не выяснен. Наиболее широко поридиозах (нозематозе) пчел. Важной составной частью профи распространены представители рода Leydiana. Помимо указанно лактических мер является дезинфекция сотов в парах уксусной го вида грегарин, в кишечнике пчел могут, вероятно, встречаться кислоты, пересадка семей пчел весной в чистый улей.

другие виды этих простейших, инвазирующие различных насеко ГРЕГАРИНОЗ — Gregarinosis — инвазионная болезнь мых, случайно внедряющихся в улей.

взрослых пчел, вызываемая простейшими из подотряда Cephali Заражение пчел происходит при заглатывании спор парази na Delage et Herouard, 1896. Болезнь сильно ослабляет семьи.

та во время приема воды из источников, загрязненных фекалиями Насекомые малоподвижны, часто теряют способность или трупами, погибших от грегариноза пчел. После некоторого к полету, погибают около улья или далеко за пределами пасеки.

нахождения в воде цисты освобождают массу спор.

В о з б у д и т е л ь. Грегарины являются самыми крупными Споры грегарин погибают при замораживании. Грегариноз простейшими, выделенными от пчел, длина их взрослых форм регистрируется в основном в зонах субтропиков и тропиков в до (споронтов) достигает 120—160 мкм. Форма тела чаще вытяну ждливый период. На территории с умеренным и холодным тая, тело разделено поперечной перегородкой на передний от климатом отмечают незначительное количество паразитов в ки дел— протомерит и задний—дейтомерит, который содержит шечнике отдельных пчел, что позволяет некоторым исследовате ядро. У молодых грегарин на переднем конце протомерита распо лям считать этих паразитов комменсалами.

лагается третий членик — эпимерит. Грегарин в этой стадии развития называют трофозоитами, или цефалонтами (рис. 28). П а т о г е н е з. Заглоченные споры прорастают в средней Грегарины — паразиты многих беспозвоночных и в организме кишке медоносных пчел, образовавшиеся цефалонты с помощью хозяина проходят сложный цикл развития. Споронты постепенно эпимерита прикрепляются к клеткам эпителия средней кишки.

превращаются в половозрелые клетки — гамонты. Последние, Количество паразитов зависит от числа заглоченных спор и ко соединяясь друг с другом, образуют сизигии. Внутри этого обра- леблется от единичных экземпляров до 1000—3000. Грегарины зования, покрытого плотной оболочкой (циста), развиваются питаются через мембрану клеток за счет осмоса, поглощая угле гаметы одинаковой (изогамия) или разной формы и величины воды из клеток эпителия хозяина и просвета кишечника. Иногда (анизогамия). Затем гаметы сливаются и образуют зиготу, кото- они проникают в гемоцель и прикрепляются с наружной стороны рая покрывается плотной оболочкой и превращается в спору. мальпигиевых сосудов. Цикл развития паразитов в пчелах про Иногда внутри цисты часть протоплазмы остается недифферен- должается около месяца.

П р и з н а к и б о л е з н и. Здоровые пчелы не пускают или субцентрально с тенденцией перемещения к задней части пораженных насекомых в улей или удаляют их из него. Длитель- тела. Кинетопласт располагается впереди или сбоку ядра.

ность жизни больных пчел резко сокращается, они гибнут в поле, Э п и з о о т о л о г и ч е с к и е д а н н ы е. Поражаются ра обычно около водных источников, где трупы быстро разруша- бочие пчелы в возрасте 8 дней.

ются. Часть пчел погибает до образования цист паразита. Жгутиконосцев находят у рабочих пчел, трутней и маток — Пораженные семьи резко ослабевают, иногда гибнут. Болезнь чаще всего в весенне-летнее время. Болезнь зарегистрирована протекает самостоятельно или совместное N. apis и Malpighamo- в ряде стран. Заражение происходит при очистке пчелами сотов eba mellificae. (Лэнгридж, 1972).

При вскрытии пораженных насекомых отмечают некоторую П р и з н а к и б о л е з н и. Паразит обнаружен в области бледность средней кишки, подобно поражению ее ноземой. Эпите- складок ректального пузыря пчел, при сильном заражении реги лиальные клетки средней кишки сильно разрушены, изменены стрируется также в задней части тонкой кишки. Места поражения и ядра. критидиями заметны в виде округлых лиловатых или охряно Д и а г н о з. Для обнаружения грегарин исследуют суспен- желтых наложений. Возможно слущивание эпителия. В местах зию, приготовленную из средней кишки пчел. Нативные мазки прикрепления паразита скапливается микрофлора, которая глу просматривают под малым или средним увеличением микроскопа боко проникает в ткани хозяина. Вероятно, критидий могут в слегка затененном поле зрения. Мазки можно окрасить. Для способствовать проникновению микрофлоры кишечника в гемо этого их фиксируют жидкостью Шаудина (насыщенный раствор цель и последующему развитию септицимии. По данным ряда сулемы 50 мл, абсолютный спирт 25 мл;

на 100 мл жидкости до- авторов (Химер, 1962;

Борхерт, 1966, 1974), флагелляты явля бавляют несколько капель уксусной кислоты) и выдерживают ются комменсами. Но Б. Собещанска (1974) относит критидий при 60—70 °С в течение 10—15 мин, затем окрашивают гема- к опасным возбудителям болезни пчел. Лэнгридж (1966) отмечал токсилином по Бёмеру (1 г гематоксилина растворяют в 10 см3 гибель пчел, у которых никаких возбудителей, кроме критидий, не 96 %-ного этилового спирта +200 см3 10 %-ного раствора калий- обнаружено.

ных квасцов, краску оставляют для созревания 10—14 дней). Д и а г н о з. Для выявления паразитов в ветеринарную Л е ч е н и е. Рекомендуется применять 0,04 %-ный раствор лабораторию высылают 20—30 живых, подозрительных в заболе фумагиллина с сахарным сиропом по схеме его использования вании, пчел. Предварительно проводят микроскопию нативной при борьбе с нозематозом. суспензии в затененном поле зрения или с помощью фазово П р о ф и л а к т и к а. Используют фумагиллин в 0,02 %-ной контрастного устройства микроскопа. В капле суспензии, приго концентрации и проводят общие санитарные мероприятия со- товленной из растертого в ступке с физраствором тонкого и тол держания пчел. стого отделов кишечника пораженных пчел, видны (увеличение 400 раз) очень подвижные веретеновидные формы. В последую КРИТИДИОЗ — Crithidiosis — (син. лептомоноз) — инва щем проводят исследование окрашенных препаратов. Из выде зионная болезнь, вызываемая простейшими рода Crithidia. Пара ленных участков тонкой и передней части прямой кишки готовят зиты локализуются в кишечнике пчел, где их можно найти в сво тонкий мазок, который сушат при комнатной температуре в тече бодном состоянии или прикрепленными к стенке тонкой или ние суток, фиксируют метиловым спиртом (3—5 мин) или спирт толстой кишки.

эфиром (15—20 мин), красят по Романовскому краской Гимза В о з б у д и т е л ь. В настоящее время наиболее изучено два 45—60 мин. Лэнгридж (1972) рекомендует держать мазки в кра вида: Crithidia (Leptomonas) apis (Lotmar, 1946), Lorn, 1962 и сителе в течение ночи или проводить окраску несколько часов при Cr. mellificae Langridge, Me Ghee, 1967.

35—50 °С в термостате. Краску сливают, мазки промывают водой Подвижные стадии (нектомонады) Сг. apis веретеновидной и сушат. Под иммерсионной системой микроскопа видны харак формы, задний конец лентовидный и чаще вытянут. Размер пара терные формы паразитов со специфическим набором органелл.

зита 3 (2—4) X 9,5 (7 — 11) мкм. Ядро (0,7—1,4 мкм) сфериче ское с большой кариосомой, локализуется центрально. Имеется В качестве среды для выращивания критидий можно исполь относительно толстый жгутик, длиной около 16—20 мкм. Кине- зовать следующий состав: пептон и глюкоза — по 0,5 г, лимонная топласт расположен на расстоянии 4 мкм от переднего конца кислота — 6,2 г, сульфат магния — 0,02 г, бифосфат калия — тел а. 0,05 г, дистиллированная вода — 100 мл. Добавление в среду 3 % Cr. mellificae обычно яйцевидной формы, передний конец (по массе) пыльцы улучшает культивирование жгутиконосцев.

усечен, задний остроконечный. Задняя часть тела паразита в ок- Cr mellificae культивировали на среде, состоящей из агара рашенных препаратах не видна, но хорошо заметна при наблюде- (1,4 %) с добавлением гепаризированной крови цыпленка (25— нии в фазовоконтрастном микроскопе. Средняя длина критидий 29 %) и надосадочной жидкости среды Коуперсуайта (рН 5,2).

7,1 (3,4—10,9) X 5,5 (2,9—9,0) мкм. Ядро расположено центрально Перед высевом материала его подвергают очистке: суспензию 104 кишечника, приготовленную на физрастворе с добавлением анти биотиков для подавления микрофлоры, помещают в U-образные трубки и отстаивают. Из надосадочной жидкости делают посевы.

Д и а г н о з ставят при наличии признаков поражения в семьях пчел и только при исключении других возбудителей.

Л е ч е н и е неспецифическое. Хороший эффект получен при скармливании 1 л сахарного сиропа (1:1) с растворенным в нем 0,5 г сульгина (сульфагуанидина) в течение двух дней на семью пчел. Курс лечения повторяют через 5—7 дней 3 раза (Собещан ска, 1974).

П р о ф и л а к т и к а не разработана.

ГАПЛОСПОРИДИОЗ — Haplosporidiosis — малоизучен ная инвазионная болезнь взрослых пчел, вызываемая паразити- рованием Nephridiophaga apis Jvanic, 1937, в клетках эпителия мальпигиевых сосудов. Рис. 29. Mermis nigrescens:

В кишечном тракте пчелы из споры гаплоспоридии выходит 1—4 — откладка яиц на растениях;

5 — копуляция (Штейнер, Христе, 1923).

мельчайшее округлое образование, которое внедряется в эпите хозяевами личинок являются в основном прямокрылые из се лиальную клетку мальпигиевого сосуда. Здесь паразит растет, мейств настоящих кузнечиковых и саранчовых. Зрелые самки превращается в амебовидную стадию, ядро его активно делится выходят из почвы на поверхность травянистых растений, преиму и возникают стадии одно- и двухъядерных шизонтов и, наконец, щественно злаковых. Обвиваясь вокруг стеблей, самка отклады образуется взрослый плазмодий, распадающийся на одноядер вает на поверхность листьев растения яйца (рис. 29). Плодови ные дочерние клетки. Образование последних может происходить тость самок средних размеров ( « 8 5 мм) достигает 14 000 яиц.

Pages:     | 1 || 3 | 4 |   ...   | 7 |



© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.