WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

   Добро пожаловать!

Pages:     | 1 | 2 || 4 | 5 |   ...   | 9 |

«под редакцией М.М.ДЕЙЛА, ДЖ.К.ФОРМЕНА Руководство по иммунофармакологии ПЕРЕВОД С АНГЛИЙСКОГО КАНД. МЕД. НАУК О.Г. ЯНОВСКОГО ПОД РЕДАКЦИЕЙ Д-РА МЕД. НАУК Б.СУТЕШЕВА МОСКВА "МЕДИЦИНА" 1998 УДК ...»

-- [ Страница 3 ] --

И хотя точные механизмы, лежащие в основе нуклеарные фагоциты способны к эндоцитозу жидкости (пиноцитозу), осуществляемому спе- презентации, остаются неясными, известно, что цифическими и неспецифическими механизма- в физиологических условиях им-муноген связан ми. Установлено, что макрофаги перитонеаль- с мононуклеарными фагоцитами и что между клеткой, несущей иммуно-ген, и лимфоцитом ной полости мышей интернализируют площадь возникает прямой физический контакт.

плазматических мембран (эквивалента их общей площади) каждые 35 мин;

скорость значительно На рис. 32 показана последовательность возрастает при стимуляции моно-нуклеарных представления антигена мононуклеарными фа фагоцитов воспалительными стимулами. гоцитами лимфоцитам, а также последующие У мононуклеарных фагоцитов определены события в иммунной системе. Представление разнообразные эндоцитарные функции, неза- антигена возможно при сингенности мононук висимые от продуктов активированных лим- леарных фагоцитов и лимфоцитов. Кроме того, фоцитов. В легких альвеолярные макрофаги для представления необходима прямая или посредством фагоцитоза удаляют ряд токси- непрямая связь между иммуногеном и анти ческих и инертных частиц. Длительный контакт генами 1а. Показано, что антитела к антигенам с некоторыми веществами, такими как кремний 1а подавляют распознавание Т-лимфоцитами или асбест, может привести к хроническим иммуногена, связанного с мононуклеарными легочным воспалительным заболеваниям, фагоцитами.

частично опосредуемым веществами, Не все мононуклеарные фагоциты имеют на выделяемыми макрофагами. Мононуклеарные своей поверхности la-антигены;

их количество фагоциты могут также участвовать в развитии зависит не только от ткани, в которой они атеросклероза. Накопление измененных липо- находятся, но и от локального микроокружения протеинов низкой плотности в мононуклеарных в данный момент времени. Вполне вероятно, фагоцитах происходит с участием специ- что лимфоциты, отвечающие на фических рецепторов и приводит к образованию представленный им антиген, могут в свою пенистых клеток, нагруженных эфиром очередь увеличивать количество мононуклеар холестерина. Наличие таких клеток является ных фагоцитов, несущих la-антиген. Мононук характерным признаком атеросклеротических леарные фагоциты осуществляют также гене бляшек. тический контроль за развитием иммунного Непереваренные вещества остаются во вто- ответа. Этот контроль зависит от возможности мононуклеарных фагоцитов экспресси-ровать ричных лизосомах мононуклеарных фагоцитов соответствующие la-антигены, что спо- в месте их первоначального взаимодействия Мононуклеарные фагоциты Рис. 32. Представление мононуклеарными фагоцитами иммуногенов лимфоцитам.

Иммуногены (темный кружок со стрелкой), к которым относятся вирусы, паразиты, бактерии, аллергены или токсины, захватываются и процессируются мононуклеарными фагоцитами. Процессинг включает в себя соединение специфичного домена молекулы иммуногена с la-детерминантами (представляют собой фенотипическую экспрессию некоторых генов главного комплекса гистосовместимости) на поверхности мононуклеарного фагоцита с последующим физическим представлением Т-лимфоцитам. Т-лимфоциты пролиферируют и образуют лимфокины, которые обладают рядом биологических эффектов, в том числе стимуляцией функции мононуклеарных фагоцитов, относящихся к удалению иммуногена и экспрессии гиперсенситивности замедленного типа. Т-лимфоциты также рекруитируют В лимфоциты и, обладая хелперной функцией, стимулируют их к продукции антител с последующим образованием иммунных комплексов. Эти иммунные комплексы фагоцитируются мононуклеарными фагоцитами, таким образом завершая эффекторную часть защитного процесса организма. (По Rosenthal, 1980.) собствует клональной экспансии Т- и В-лим- функций, которые необходимы мононуклеар фоцитов для обеспечения синтеза лимфокинов ным фагоцитам на данной стадии воспали и антител. тельного процесса. Совершенно очевидно, что продукты секреции имеют важное значение для облегчения удаления патогенных организмов и Секреторная активность других стимулов воспаления, а также для мононуклеарных фагоцитов усиления процессов репарации и устранения Многогранное участие мононуклеарных фаго- возникших повреждений. Возможно, что не цитов в защите организма и в хроническом которые аспекты хронических воспалительных воспалении требует от них величайшей функ- процессов должны учитываться в связи с абер циональной подвижности при взаимодействии рантной секрецией различных продуктов мо с другими типами клеток, компонентами со- нонуклеарных фагоцитов. Некоторые продукты единительной ткани и воспалительными сти- секретируются мононуклеарными фагоцитами мулами во внеклеточной среде. В связи с этим постоянно, в том числе ферменты лизо-цим и мононуклеарные фагоциты синтезируют и сек- липопротеинлипаза, тогда как другие ретируют большое количество биологически выделяются лишь при воздействии на моно активных медиаторов (табл. 4). Выделение та- нуклеарные фагоциты воспалительными сти ких медиаторов происходит не одновременно: мулами или продуктами иммунных реакций они секретируются по мере выполнения тех (рис. 33).

74 Глава Таблица 4. Секреторные продукты мононуклеарных фа- Интерлейкин- гоцитов Первоначально интерлейкин-1 был охаракте Гидролитические ферменты Лизоцим ризован как секреторный продукт мононук Нейтральные протеазы леарных фагоцитов с молекулярной массой Лизосомные гидролазы 000 дальтон, который опосредует ряд важных Липопротеиновая липаза биологических эффектов этих клеток (см. главу 15). Как показывают исследования in vitro, эти Ингибиторы протеолитических ферментов эффекты включают следующее: стимуляцию а2-Макроглобулин a1-Протеазный пролиферации тимоцитов;

образование ингибитор интерлейкина-2 лимфоцитами;

пролиферацию Факторы, изменяющие клеточную пролиферацию фибробластов;

синтез хондроцитами и Колониестимулирующий фактор Фактор созревания синовиоцитами нейтральной протеиназы, а тимуса Ангиогенный фактор Стимулятор пролиферации фибробластов Интерлейкин- также простагландинов и протеиназы;

синтез Фактор-антагонист глюкокортикоидов Фибронектин гепатоцитами белка острой фазы;

хемотаксис Ростовой фактор, происходящий из тромбоцитов лейкоцитов;

резорбцию костей. In vivo интер Эритропоэтин лейкин-1 вызывает лихорадку, изменение уровней ионов металлов и повышение уровня белка острой фазы. Недавно были получены в чистом виде по крайней мере две формы Факторы, нарушающие жизнеспособность инфекционных человеческого интерлейкина-1 и идентифици агентов и эукариотических клеток Перекись водорода рованы два гена человека, которые кодируют Гидроксильные радикалы молекулы, обладающие активностью интер Интерферон лейкина-1.

Листерицидный фактор Белок, связывающий витамин В Фактор некроза опухоли Гидролитические ферменты Факторы, имеющие отношение к гуморальным медиаторам Гидролитические ферменты, секретируемые воспаления мононуклеарными фагоцитами в ответ на вос Все компоненты альтернативного пути и ранние ком поненты классического пути комплемента палительные стимулы (иммунные комплексы, Прокоагулянтный фактор Свертывающий фактор лимфокины), возможно, играют важную роль в развитии повреждений при хроническом вос- Рис. 33. Моноиуклеарные фагоциты в ответ на действие инфекционных агентов, воспалительных стимулов и продуктов стимулированных лимфоцитов вырабатывают широкий спектр секреторных продуктов (детальное описание дано Davies, и соавт., 1981).

Мононуклеарные фагоциты палении. Эти ферменты, включающие акти- Продукты окисления арахидоновои кислоты ватор плазминогена, эластазу и коллагеназу, В фосфолипидах мононуклеарных фагоцитов вероятно, обусловливают деградацию и по содержится необычно большое количество вреждение тканей, а также ускорение обмена арахидоновои кислоты, и, как выяснилось в соединительной ткани, что сопровождается последние годы, эти клетки обладают значи удалением продуктов распада и заживлением тельным потенциалом синтеза простагланди-нов зон воспаления.

и лейкотриенов. Их синтез усиливается при Факторы клеточной пролиферации экспозиции макрофагов с воспалительными и дифференциации стимулами, включая иммунные комплексы. На Характерной чертой многих хронических вос- основании этого открытия и уже известных палений является местная пролиферация тка- эффектов экзогенных простагландинов (осо бенно серии Е), подавляющих различные эф ней, связанная с очагами активированных фекторные функции лимфоцитов, было выдви лимфоидных клеток. Ярким примером такого нуто предположение относительно способности процесса может служить пролиферирующий синовиальный паннус сустава при ревматоид- простагландинов мононуклеарных фагоцитов ном артрите. В подобных условиях раство- действовать в качестве ингибиторных мо римые факторы, включая интерлейкин-1 и рос- дуляторов функции лимфоцитов in vivo. Это товой фактор тромбоцитов, которые секрети- предположение подтвердили клинические ис следования, где было показано повышение руются мононуклеарными фагоцитами, могут иммунного ответа при использовании инги стимулировать пролиферацию как лимфоцитов (с последующим синтезом антител и лим- биторов синтеза простагландинов (индомета цин). Предполагается, что мононуклеарные фокинов), так и фибробластов, впоследствии фагоциты вносят свой вклад в опосредование синтезирующих коллагеназу и компоненты повышенной чувствительности немедленного соединительной ткани. Этому предположению соответствует наблюдение отмены гиперсенси- типа, поскольку они синтезируют лейкотриены тивности замедленного типа веществами, из- В4 и С4. Известно, что лейкотриены входят в состав медленно реагирующей субстанции бирательно токсичными для мононуклеарных анафилаксии (см. главу 10).

фагоцитов, а также нарушения заживления ран у экспериментальных животных после введения антимакрофагальной сыворотки.

Метаболиты кислорода Прокоагулянты Во время метаболического взрыва, сопровож дающего взаимодействие макрофагов с фаго При реакциях повышенной чувствительности цитируемыми и другими стимулами, образуется замедленного типа и отторжении аллогенной ткани, а также при экспериментальном аллер- ряд потенциально токсичных метаболитов гическом энцефаломиелите и реакции Шварц- кислорода. Обладая исключительно короткой жизнью, они могут опосредовать некоторые мана часто наблюдается отложение фибрина. В недавних исследованиях показано, что об- важные функции, в том числе клеточно-зави симую цитотоксичность по отношению к опу разование фибрина в зонах поражения может холевым клеткам и инфекционным агентам, инициироваться прокоагулянтной активностью, инактивацию некоторых белков (ингибитор а-1 исходящей из мононуклеарных фагоцитов.

протеиназы) и образование хемотаксических Выделение такого прокоагулянтного фактора, по-видимому, зависит от сигнала Т-лимфоцй- стимулов при перекисном окислении ненасы щенных жирных кислот, в частности арахи тов. Мононуклеарные фагоциты могут также доновои кислоты.

инициировать удаление фибрина, секретируя активатор плазминогена. Важное значение имеет тот факт, что прокоагулянтная актив Комплемент ность является продуктом моноцитов, вновь прибывших к месту воспаления, тогда как ак Белки системы комплемента содержат более тиватор плазминогена синтезируется более молекул (см. главу 12), которые активируются дифференцированными макрофагами, которые по принципу каскада после взаимодействия с вызревают под действием лимфокинов или иммунными комплексами или же непосред других стимулов, присутствующих в очаге ственно воспалительными стимулами. Про воспаления.

дукты активации комплемента усиливают 76 Глава функцию фагоцитов, стимулируя хемотаксис и Список литературы фагоцитоз, а также выделение из них ме диаторов. Большое функциональное значение Dames Р., Воппеу R.J., Humes J.L. & KuehlF.A. (1981) Secretory functions of macrophages participating in inflammatory имеет секреция многих компонентов компле responses. In: Dingle J. T. & Gordon J. L. (eds) Proceedings of мента моноцитами периферической крови че Symposium on Cellular Interactions in Inflammation, pp. 33-42.

ловека.

Elsevier/North Holland Biomedical Press, Amsterdam.

Davies P., Воппеу R.J., Humes J.L. & KuehlF.A. (1985) The synthesis of arachidonic acid oxygenation products by macrophages. In: Reichard S. M. & Filkins J. P. (eds) The Заключение Reticuloendothelial System, A Comprehensive Treatise, vol 7B, pp. 47-66. Plenum Press, New York.

Функции мононуклеарных фагоцитов в системе Gallin J. I. (1980) The cell biology of leukocyte chemotaxis. In:

Weissmann G. (ed.) The Cell Biology of Inflammation, защиты организма отражают широкий спектр Handbook of Inflammation 2, pp. 299-335. Elsevier/North реакций-от реакций, характеризующихся Holland Biomedical Press, New York.

примитивными жизненными системами, до Fogelman A. M., Haberland M. E. & Edwards P. A. (1984) Low высокоспецифичных, генетически ограниченных density lipoprotein receptors and scavenger receptors on monocytes and macrophages: modulation by lymphokines.

реакций, вовлекающих клетки лимфоидной Lymphokines 9, 363-372.

системы. Сохраняющиеся реакции, связанные с Johnson R. B. Jr. & Kitagawa S. (1985) Molecular basis for the примитивными жизненными системами, enhanced respiratory burst of activated macrophages. Fedn включают пиноцитоз и фагоцитоз. Другие от- Proc. 44, 2927-2932.

Metcalf D. (1985) The granulocyte-macrophage colony stimulating веты связаны с участием продуктов лимфоид factors. Cell 43, 5-6.

ных клеток, в частности лимфокинов и иммун Rosenthal A. S. (1980) Regulation of the immune response-Role of ных комплексов. Наконец, высокоспецифичные, the macrophage. New Eng. J. Med. 303, 1153-1156.

генетически рестриктированные взаимо- Unanue E. R. (1980) Cooperation between mononuclear phagocytes and lymphocytes in immunity. New Eng. J. Med. 303, 977-985.

действия с лимфоцитами в афферентном звене Van Furth R., Diesselhoff-Den Dulk M. C, Raeburn J. A., Van иммунного ответа указывают на необходимую ZwetT.L., Crofton R. & Blusse van oud Albas (1980) роль мононуклеарных фагоцитов в специфи Characteristics, origin and kinetics of human and murine ческом усилении механизмов защиты организма mononuclear phagocytes. In: Van Furth R. (ed.) Mononuclear Phagocytes Functional Aspects, pp. 279- 298. Mar-tinus Nijhoff, активированными лимфоцитами. Благодаря The Hague.

различным механизмам мононуклеарные клетки Week J., Gray P. W., Rinderknecht E. & Sevastopoupos C.G. (1985) играют важную роль в защите организма, Interferon gamma: a lymphokine for all seasons. Lymphokines 11, 1-46.

оказывая решающее влияние на окружающие клетки и ткани как в норме, так и при патологии.

7 Лимфоциты Дж. Л. Турк (J. L. Turk) Введение ки) даже у млекопитающих, несмотря на от сутствие доказательств существования у них Лимфоциты играют центральную роль в спе- органа, эквивалентного сумке Фабрициуса.

цифическом адаптивном иммунном ответе. Их Кроме участия в клеточно-опосредованном мембрана (и секрет) включает в себя участки и иммунитете, субпопуляции Т-клеток играют свободные молекулы. Стволовая клетка, от важную роль в регуляции иммунного ответа, которой происходят лимфоциты, находится в функционируя как клетки-помощники (Тп) и костном мозге и фетальной гемопоэтической клетки-супрессоры (Тс). Данные субпопуляции ткани, например в печени плода. Лимфоциты распознаются по специфическим мембранным образуют скопления, называемые лимфоидной антигенам, выявляемым моноклональными тканью. Они мигрируют в крови, лимфе и антителами (у человека CD4-Тn, CD8- Тс). Как экстрацеллюлярной жидкости. Лимфоидные показано in vitro, лимфоциты обладают цито ткани могут быть первичными, например тимус токсичностью при контакте с клетками-мише и сумка Фабрициуса у цыплят. Они служат нями. Вероятно, in vivo цитотоксическое дей местом дифференциации лимфоцитов и в норме ствие бывает более сложным и осуществляется не участвуют в пролиферации лимфоцитов при при участии ряда химических медиаторов и иммунном ответе. Ко вторичным лим-фоидным неспецифических эффекторных клеток, напри структурам относят лимфатические узлы, мер макрофагов. Выделяют три типа цито селезенку и лимфоидную ткань, связанную с токсических лимфоцитов: а) цитотоксические Т кишечником. В этих тканях происходит клетки;

б) К-клетки, принимающие участие в необходимая для иммунного ответа пролифе- антителозависимой клеточной цитотоксич-ности рация лимфоцитов. Иммунный ответ-это экс- (АЗКЦ);

в) натуральные клетки-киллеры (НК).

пансия специфического антигенреактивного Реакция между цитотоксическими Т-клет-ками и клона лимфоцитов. клетками-мишенями, а также АЗКЦ Лимфоциты участвуют в хронических вос- антигенспецифичны. НК действуют неспеци палительных реакциях и в резистентности ор- фично на клетки-мишени определенных линий.

ганизма к облигатным и факультативным Субпопуляции лимфоцитов имеют опреде внутриклеточным микроорганизмам. Они так- ленные характеристики и обнаруживаются в же вовлекаются в резистентность к раку и в различных областях лимфоидной ткани. Тимус отторжение органных и тканевых трансплан- состоит почти исключительно из Т-клеток. Т татов. Эти функции выполняются главным лимфоциты представлены главным образом образом лимфоцитами с антигенными рецеп- долгоживущими, высокомобильными клетками, торами, составляющими интегральную часть выявляемыми в паракортикальных (тимусза клеточной мембраны. Клеточно-опосредован- висимых) областях лимфатических узлов вокруг ный иммунитет (как именуется эта функция) венул с высоким эндотелием (ВВЭ), через подавляется у крыс и мышей неонатальной который они мигрируют (рис. 34), а также в тимэктомией и, следовательно, зависит от ти- «тимусзависимых областях» селезенки вокруг муса. Лимфоциты, развитие которых в поздний центральных артериол. В-лимфоциты-ко фетальный и ранний постнатальный периоды роткоживущие, оседлые клетки, которые вы происходит под контролем тимуса, оп- являются в терминальных центрах и их краевых ределяются как Т-лимфоциты (Т-клетки). Лим- зонах в лимфатических узлах, в кортико фоциты, участвующие в образовании антител и медуллярных соединениях и мозговых шнурах, являющиеся предшественниками плазмати- а также на периферии белой пульпы и в красной ческих клеток, находятся под контролем сумки пульпе селезенки. Сходные Т- и В-кле-точные (бурсы) Фабрициуса (у птиц). Они соответст- зоны обнаруживаются в лимфоидной ткани, венно определяются как В-лимфоциты (В-клет- связанной с кишечником. В-клетки и 78 Глава Рис. 34. Схематическое изображение иммунологически активного лимфатического узла.

Т-лимфоциты расположены в паракортикальной области, В-лимфоциты - в компактных «муфтах» небольших лимфоцитов, в терминальных центрах, лимфоидных фолликулах, корково мозговых соединениях и мозговых шнурах.

Т-супрессоры являются быстро обновляющи- появление и активацию клеток в очагах во мися и короткоживущими популяциями лим- спаления, а также пролиферацию клеток, фоцитов. участвующих в иммунном ответе. Среди них Т клеточное происхождение могут иметь ИЛ-2, ИЛ-3, ИЛ-4, ИЛ-5, ИЛ-6, у-интерферон и Реакция гиперсенситивности лимфотоксин (ЛТ-ФНОр). Т-клеточное про замедленного типа-аллергия к исхождение установлено также для фактора иммунитету некроза опухолей (ФНОа) и колониестимули рующего фактора гранулоцитов и макрофагов (КСФГМ). В-клетки и НК могут продуцировать Устойчивость организма к факультативным и облигатным внутриклеточным микроорга- ФНОа. В настоящее время большинство из этих низмам может быть связана с реакциями по- цитокинов могут быть получены с помощью рекомбинантнои ДНК и определены вышенной чувствительности замедленного типа, моноклональными антителами в ELISA. Однако которые направлены на антигены этих микроорганизмов. Гиперсенситивность замед- первоначально их определяли биологическими ленного типа (ГСЗТ) проявляется эритематоз- методами, оценивая их влияние на клетки ной индуративной реакцией (на коже) с макси- мишени in vitro.

Описан ряд факторов, активность которых мальной выраженностью через 24-48 ч после свидетельствует в пользу их участия в воспа инъекции антигена, например туберкулина. Как лительных процессах in vivo, особенно в реак элиминация инфекционного агента, так и ГСЗТ циях повышенной чувствительности замедлен являются результатом взаимодействия специфически сенсибилизированных лимфоци- ного типа и устойчивости организма к инфек циям. Факторы, проявляющие такую актив тов и специфического антигена. Это приводит к ность, названы «макрофагальный хемотаксиче секреции растворимых медиаторов (известных ский фактор», «фактор, активирующий макро как лимфокины), которые непосредственно фаги», «фактор, подавляющий миграцию».

активируют макрофаги с целью элиминации Однако в настоящее время выяснилось, что внутриклеточных микроорганизмов, либо для большинство функций фактора, активирующего инициации выделения медиаторов воспаления, макрофаги, принадлежит у-интерфе-рону.

таких как простагландины.

Лимфокины принадлежат к группе медиа- Аналогично этому, реакция ГСЗТ лежит в торов (известных как цитоксины), которые об- основе развития контактной чувствительно- разуют совокупность веществ, регулирующих Лимфоциты сти к простым химическим гаптенам, таким как торая развивается в течение 96 ч или дольше и 2,3-Динитрохлорбензол (ДНХБ), ковалент-но характеризуется высокой степенью индура-ции связанным с белками кожи. Определение кожи (рис. 35). Такой тип реактивности может кожной реакции ГСЗТ к антигену инфекцион- сохраняться многие годы после иммунизации.

ного организма не означает непременного Второй тип ГСЗТ, известный как участия ГСЗТ в механизме защиты и вовсе не «сенситивность типа Джонса-Мота, характе обязательно свидетельствует о высокой степени ризуется высокой степенью неустойчивости;

резистентности организма. Устойчивость к реакция наблюдается 7-14 дней после сенсиби инфекции и ГСЗТ могут быть направлены лизации. Реакции этого типа достигают своего против разных антигенов, особенно у таких максимума к 24-му часу и исчезают к 48-му сложных микроорганизмов, как бактерии и часу, при этом толщина кожи увеличивается паразиты. В случае менее сложных микроор- незначительно или не изменяется. Реакции ганизмов (например, вирусов) резистентность и Джонса- Мота регулируются супрессорными ГСЗТ могут быть вызваны одним антигеном. клетками в большей степени, чем реакции ту Роль Т-клеток в устойчивости организма и беркулинового типа. Подавление активности ГСЗТ подтверждается экспериментами с ис- супрессорных клеток может превратить реак пользованием методов пассивного переноса. цию Джонса-Мота в реакцию туберкулинового Показано, что резистентность организма к типа. Реакции контактной чувствительности микроорганизмам (таким как туберкулезные регулируются супрессорными клетками таким бациллы) реакция ГСЗТ на туберкулин и кон- же образом, как реакции Джонса-Мота.

тактная чувствительность к гаптенам (напри- Гистологически реакции ГСЗТ на 24-48-й мер, к ДНХБ) могут быть перенесены суспен- час представлены главным образом инфиль зией периферических Т-клеток (за исключением тратами мононуклеарных клеток, состоящих из тимоцитов) от сенсибилизированных доноров;

с равного количества лимфоцитов и макрофагов.

помощью В-клеток или антител они не пере- Эти клетки расположены в основном носятся. Макрофаги сами по себе неактивны;

периваскулярно. При реакциях Джонса-Мота и перенос невозможен и при использовании бес- контактной чувствительности может опре клеточных экстрактов Т-клеток. Имеющиеся деляться значительное количество базофиль сообщения о пассивном переносе ГСЗТ с по- ных лейкоцитов с характерным расположением мощью сыворотки вызывают сомнения: дей- под эпидермисом, ввиду чего эти реакции ствительно ли индуцировалась истинная ГСЗТ получили название «кожная базофильная ги или же имела место реакция типа феномена персенситивность». Предполагается, что базо Артюса. фильный инфильтрат зависит от регуляции Как у человека, так и у экспериментальных реакции на периферии супрессорными клетка животных описаны два типа реакции ГСЗТ. Это ми.

«истинная туберкулиновая реакция», ко- Рис. 35. Сравнительные данные о времени развития задержанных реакций гиперсенситивности туберкулинового типа (светлые кружки) и типа Джонса-Мота (темные кружки).

80 Глава клон таким образом, чтобы в циркуляцию Рецепторы Т-клеток для антигена поступило достаточное количество клеток для Рецепторы для антигена В-клеток являются реакции с антигеном на периферии и для запуска иммуноглобулиновыми молекулами, связан- биологических ответов. Индуцированная ными с клеточной поверхностью. В течение антигеном пролиферация Т-клеток наиболее длительного времени считали, что антигенные выражена в паракортикальных областях лим рецепторы Т-клеток несут идиотипические де- фатических узлов, дренирующих область пе терминанты, аналогичные наблюдаемым на ресадки кожного аллотрансплантата или место антигенреактивном участке иммуноглобули- аппликации химического сенсибилизирующего новых (Ig) молекул. В таком случае приготов- агента. Увеличение количества больших лим ленные антиидиотипические антитела к специ- фоцитов в S-фазе клеточного цикла, которые фическому Ig могут «включать» или «выклю- легко распознаются по их высокопиронино чать» Т-клетки, стимулируя Т-клеточные им- фильной или базофильной цитоплазме, достигает мунные ответы или вызывая специфическую пика к 4-му дню после антигенной стимуляции толерантность. Таким бразом, допускается, (рис. 36). В любое время до 20% лимфоцитов что антигенные рецепторы на Т-клетках имеют, могут быть в S-фазе;

определяется также по-существу, такие же участки распознавания, большое количество митозов. Число что и антитела. Однако до последнего времени делящихся клеток в любой отрезок времени структуры, подобные вариабельным доменам Ig, значительно превышает их расчетное коли не были обнаружены. Использование метода чество при условии деления клеток одного клонирования ДНК позволило приготовить цепи клона. Предполагают, что большинство клеток рецепторов Т-клеток и затем определить их отвечает на неспецифический стимул. Такими аминокислотную последовательность. стимулами могут быть лимфокин ин Обнаружено, что данная молекула состоит из терлейкин-2 или фактор роста Т-клеток, которые двух доменов, соединенных двумя секретируются другими активированными дисульфидными мостиками, причем размеры и лимфоцитами. T-лимфоциты несут рецепторы общая структура доменов были такими же, как у для ИЛ-2, который обладает антигенно-стью и у Ig. Более того, N-концевой домен был человека распознается моноклональ-ным вариабельным, а С-концевой-константным, т.е. антителом (анти-Тас).

как у Ig. Структурно рецептор Т-клеток является мономером, в котором две цепи образуют одно место связывания, а каждое место независимо от Пролиферация Т-лимфоцитов in vitro других встроено в клеточную мембрану. Две гипервариабельные области обеих цепей тесно T- и В-клетки пролиферируют in vitro в при примыкают друг к другу, образуя сутствии антигена, если донор клеток сенсиби антигенреактивный центр. Данная структура лизирован. Пролиферацию клеток определяют соответствует модели единичного рецептора по образованию бластных клеток или по вклю ГКГС-рестриктированного Т-кле-точного чению Н-тимидина. Лимфоциты также про распознавания. Согласно этой модели, антиген лиферируют (неспецифически) в ответ на поли распознается совместно с молекулами клеточной клональные лиганды или митогены. Фитогем поверхности главного комплекса агглютинин и конканавалин А (Кон-А) дей гистосовместимости. ствуют так поликлональные активаторы Т-кле ток. Липополисахарид грамнегативных бактерий и митоген чечевицы обладают некоторой Пролиферация 'I-лимфоцитов in vivo специфичностью по отношению к В-клеткам.

Кон-А в определенных дозах специфичен для T Главным событием иммунного ответа in vivo супрессорных клеток.

является экспансия специфического клона T- Хотя митогенез, вызываемый растительными или В-клеток после поступления антигена. По лектинами, является искусственным феноменом теории, основывающейся на полученных in vitro в отношении нормальных событий, на данных, антиген представляется рецепторам Т- блюдающихся в иммунной системе in vivo, его клеток макрофагами или дендритными клет- использование для изучения пролиферации ками, такими как клетки Лангерганса в коже. В лимфоцитов дает больше возможностей, чем результате этого запускается пролиферация Т- исследования in vivo. Важно отметить, что клеток, которая функционально расширяет дефект ответа лимфоцитов на митогены тесно Лимфоциты Рис. 36. Электронная микрофотография Т лимфоцита в S-фазе клеточного цикла, пролиферирующего в лимфатическом узле после антигенной стимуляции.

связан с их неспособностью к пролиферации цию «вспомогательных» клеток можно восста при ряде заболеваний, что придает этому ис- новить добавлением макрофагов или дендрит следованию клиническую значимость. ных клеток из различных источников. Макро Трансформация и митогенез лимфоцитов фаги, обработанные туберкулином, вызывают могут индуцироваться и в смешанной культуре антигенспецифическую пролиферацию Т-кле лимфоцитов, различающихся по I области ток при условии исключения прямого контакта главного комплекса гистосовместимости. антигена с лимфоцитами. Вероятно, антиген локализуется на мембране макрофагов и в таком виде представляется лимфоцитам, причем в Макрофаги как вспомогательные клетки более доступной форме, чем свободный при индуцированной митогенами или антиген.

антигенами пролиферации лимфоцитов Не исключено, что часть иммуностимули рующего действия макрофагов связана с пред Удаление макрофагов из популяции лимфо ставлением антигена с той части поверхности идных клеток уменьшает способность Т- и В макрофагов, которая также экспрессирует la лимфоцитов к пролиферации в ответ на ряд антигены, кодируемые I областью генов глав антигенов или митогенных стимулов. Функ- ного комплекса гистосовместимости. Кроме того, макрофаги секретируют неспецифические 82 Глава растворимые регуляторные продукты-моно- не менее митогенная трансформация и секреция кины. Наиболее важный из них - интерлей-кин-1 лимфокинов, будучи двумя независимыми - является фактором, активирующим событиями, могут быть разделены. Макси лимфоциты (см. главу 15). ИЛ-1 способен за- мальные проявления воспалительной реакции, мещать макрофаги в реакциях тимических вызванной ЛК, наблюдаются через 12-24 ч лимфоцитов на митогены, а также в смешанной после внутрикожного введения;

развитие реак культуре лимфоцитов. ИЛ-1 образуется ции сопровождается повышением проницаемо макрофагами при их стимуляции ЛПС или сти сосудов и смешанной гранулоцитарно-мо комплексом антиген-антитело. нонуклеарной клеточной инфильтрацией. Обу словливающая это событие фармакологическая активность супернатанта культуры известна как Вторичные передатчики «реактивный фактор кожи» (РФК);

при активации лимфоцитов сравнительно недавно были идентифицированы его отдельные компоненты.

Митогены, вероятно, вызывают изменения Помимо того, что ЛК способны вызывать внутриклеточного метаболизма, не проходя воспалительные реакции, сходные с ГСЗТ, они через плазматическую мембрану. Взаимодей могут образовываться при развитии ГСЗТ. При ствие митогенов со своими рецепторами при кожных реакциях могут определяться водит к образованию внутриклеточных вто макрофагальная хемотаксическая активность и ричных передатчиков. К наиболее изученным РФК. Фактор, подавляющий миграцию, и вторичным передатчикам относятся ионы Са2+ и активность РФК могут быть получены из пе циклический АМФ. Показано, что скорость ритонеальной полости сенсибилизированных поступления Са2+ в клетку резко возрастает при морских свинок при реакции исчезновения экспозиции лимфоцитов с мито-генами. Более макрофагов. Это еще одна модель ГСЗТ in vivo, того, трансформация лимфоцитов может быть в которой через несколько часов после введения подавлена добавлением хела-торов ионов специфического антигена в брюшную полость металлов, например ЭДТА. И наконец, ионофор макрофаги исчезают из нее, прикрепляясь к бивалентного катиона (А23187), переносящий серозной поверхности. Третьим указанием на Са2+ через биологические мембраны, также значимость продуктов активации лимфоцитов вызывает митогенную трансформацию для индукции воспаления служит подавление лимфоцитов.

ГСЗТ и реакции исчезновения макрофагов под Роль цАМФ как вторичного передатчика при действием антилимфоцитарной сыворотки.

митогенезе лимфоцитов гораздо более проти ГСЗТ не индуцируется у неона-тально воречива;

имеются аналогичные данные и в тимэктомированных животных, а также после отношении циклического ГМФ. В некоторых введения (животным) антилимфоцитарной исследованиях показано увеличение цикличе сыворотки.

ского ГМФ в течение нескольких минут после добавления Кон-А или ФГА к лимфоцитам.

Образование гранулемы Другие исследователи не смогли подтвердить эти результаты.

Гранулема является местом хронического во спаления, которое представляет собой скоп ление макрофагов или других клеток серии Участие лимфоцитов в хронических мононуклеарных фагоцитов, обнаруживаемых вместе с клетками других типов (или без них).

воспалительных процессах Хотя гранулематозные воспалительные ин фильтраты могут встречаться и в отсутствие Связь секреции лимфокинов in vivo с ГСЗТ иммунологической реакции, многие формы Активность лимфоцитов при хроническом во- гранулем связаны с функцией лимфоцитов.

Такие гранулемы возникают при хронических спалении in vivo, например при ГСЗТ, связана с местной секрецией широкого спектра лимфо- инфекциях (туберкулез, туберкулезоподобная проказа и шистосомоз). Гранулемы, сопро кинов, подробное описание которых дано в вождающие повышенную чувствительность к главе 14. Внутрикожное введение супернатанта бериллию и цирконию, а также наблюдаемые культур антиген- или митогенстимулирован-ных при саркоидозе, имеют лимфоцитарное про лимфоцитов вызывает воспалительную исхождение и могут быть связаны с ГСЗТ.

реакцию, весьма напоминающую ГСЗТ. Тем Лимфоциты Узловые гранулемы развиваюся в месте про- миелинизация и другие признаки делают эту ведения теста кожной чувствительности при экспериментальную модель близкой к рассеян сенсибилизации к металлам или при сарко- ному склерозу у человека. Поражения головного идозе в ответ на введение экстракта селезенки и спинного мозга по некоторым признакам (тест Квайма). Такие повреждения развиваются напоминают ГСЗТ в коже, что говорит о через 1 - 3 нед после кожного теста в отличие от сходстве с взаимодействием лимфоцитов и ГСЗТ, появляющейся через 24-48 ч. макрофагов при участии лимфокинов in vivo.

При гистологическом исследовании грану лем, сопровождаемых повышенной активно стью лимфоцитов, клетки системы мононукле- Состояния, связанные с дефицитом арных фагоцитов имеют признаки эпителиоид лимфоцитов ных клеток. Эпителиоидные клетки отличаются от фагоцитирующих макрофагов тем, что они Значимость лимфоцитов, в частности Т-клеток, не фагоцитируют и нередко обнаруживают для ряда биологических состояний подтвержда наличие шероховатого эндоплазматического ется неспособностью неонатально тимэктоми ретикулума, что свидетельствует об опреде рованных мышей, крыс и цыплят воспроизво ленной секреторной функции. Эти клетки несут дить подобные состояния. Многие из таких специфический макрофагальный антиген ак реакций могут отменяться и антилимфоцитар тивации точно так же, как активированные ной сывороткой, в том числе ГСЗТ, контактная фагоцитирующие макрофаги. Эпителиоидно чувствительность, отторжение аллотрансплан клеточные гранулемы обычно сопровождаются тата, трансформация лимфоцитов in vitro значительной активацией фибробластов и митогенами и антигенами, устойчивость орга увеличением синтеза коллагена, что в неко низма к целому ряду облигатных и факульта торых случаях может привести к быстрому тивных внутриклеточных организмов, грибков и разрешению повреждений.

простейших. У людей нарушение развития Роль лимфоцитов, особенно Т-клеток, изу третьей и четвертой жаберных дуг может обу чалась в экспериментальных моделях образо словить врожденную недостаточность вилоч вания гранулем в легких после внутривенного ковой железы. Дефицит лимфоцитарных ство введения мышам яиц шистосом. У животных, ловых клеток может привести к нарушению предварительно сенсибилизированных антиге развития Т- и В-клеток. Иммунные дефекты нами шистосом, определяется увеличение ко могут быть частичными или полными, необра личества гранулем. Гранулемы не развиваются тимыми или восстановимыми со временем.

у тимэктомированных животных или после Ретровирусная инфекция, особенно вирус введения (мышам) антилимфоцитарной сыво иммунодефицита человека, который обладает ротки.

аффинитетом к антигену CD4, может привести к развитию синдрома приобретенного иммунного дефицита. При этом отмечается уменьшение Экспериментальный аллергический нормального отношения Тп:Тс-CD4:CD8, что энцефаломиелит как аутоиммунное состояние связано с сокращением числа Т-клеток Экспериментальный аллергический энцефало помощников. В результате нарушаются все миелит (ЭАЭ) вызывается сенсибилизацией указанные выше функции Т-клеток, включая экспериментальных животных тканью гомоло снижение устойчивости к оппортунистическим гичного или гетерологичного головного или инфекциям. Аномальные грибковые инфекции и спинного мозга в полном адъюванте Фрейнда кандида постоянно обнаруживаются при (см. главу 28). Болезнь проявляется параличом тяжелых, быстро прогрессирующих одной из задних конечностей и сопровождается заболеваниях, вызванных Micobacteria и смешанной периваскулярной инфильтрацией Pneumocystis carinii. У больных развиваются лимфоцитов и макрофагов в головном и спин редкие злокачественные новообразования, осо ном мозге. ЭАЭ переносится лимфоцитами у бенно саркома Капоши. У больных, получаю инбредных морских свинок и не развивается у щих антилимфоцитарный глобулин или аза неонатально тимэктомированных крыс. Хро тиоприн, а также при некоторых врожденных ническая, затихающая и вновь обостряющаяся иммунодефицитных состояниях отмечается форма заболевания может быть вызвана у тенденция к развитию ретикулоклеточных сар морских свинок (инбредная линия XIII), им ком или лимфосарком.

мунизированных вскоре после рождения. Де- 84 Глава Цитокины как регуляторы функции зующих клеток к эритроцитам барана у мышей nude с дефицитом Т-клеток;

лимфоцитов г) индуцирует аллоантигенспецифичные ти моциты и цитолитическую активность Т-клеток Интерлейкины мышей-nude (см. главу 30). ИЛ-2 является гликопротеином, который элюирует с гель фильтрационных колонок с молекулами, име Интерлейкины являются наиболее важными ющими массу от 25000 до 40000 дальтон. В регуляторными молекулами, образуемыми других исследованиях указывается молеку лимфоцитами и моноцитами. Роль этих молекул лярная масса около 20000. Предполагается, что была установлена главным образом в экс образование ИЛ-2 стимулируется и регу периментах in vitro с использованием проли лируется ИЛ-1. Однако некоторые исследова ферации лимфоцитов. Интерлейкин-1 первона тели полагают, что ИЛ-1 не является необхо чально был описан как фактор, активирующий димым для образования ИЛ-2, а нужен только лимфоциты и присутствующий в культуре для регуляции его продукции. Эти авторы рас макрофагов. ИЛ-1 способен замещать макро сматривают ИЛ-2 как необходимый внеклеточ фаги в пролиферативной реакции лимфоцитов ный митогенный сигнал для Т-клеток, стиму на аллоантиген (см. главу 15). Такой вывод был лированных поликлональными активаторами и сделан при проведении экспериментов, в антигенами. Митогенная активность ИЛ- которых культуральная среда человеческих и приводит к клональной экспансии незрелых мышиных макрофагов, стимулированных ли тимоцитов и лимфоцитов, которые затем диф пополисахаридом, усиливала ответ мышиных ференцируются в зрелые цитотоксические, су тимусных клеток и периферических Т-клеток на прессорные или хелпервые клетки.

митоген (липополисахарид). Сейчас известно, Мощным влиянием на регуляцию иммун что ИЛ-1 представляет собой пептидную ного ответа обладают, помимо интерлейкинов, молекулу с массой 17 500. Данная молекула лимфокины, активирующие макрофаги. Лим обладает различными формами активности, из фокины первоначально были описаны как которых наиболее интересна активность уже растворимые факторы активированных in vitro известного эндогенного пирогена. Кроме того, лимфоцитов, которые подавляют миграцию ИЛ-1 обладает следующими способностями:

макрофагов из капиллярных трубочек. Сейчас а) вызывает выделение ИЛ-2 Т-клетками;

известно, что они вызывают глубокие изме б) усиливает ответы антител in vitro, действуя нения метаболизма макрофагов. Метаболиче на Т- и В-клетки;

в) усиливает цитотоксичность ские эффекты включают повышение уровней лимфоцитов;

г) индуцирует маркеры Lyt (суб глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы, окислитель популяция лимфоцитов);

д) увеличивает обра ной активности НАДФН, активности сукци зование стабильных Е-розеток;

е) индуцирует натдегидрогеназы и р-глюкуронидазы. В других синтез коллагеназы и простагландинов в сино исследованиях отмечается повышение уровня виальных клетках;

ж) вызывает пролиферацию внутриклеточного цГМФ и не обнаруживается фибробластов;

з) индуцирует образование ами увеличения цАМФ.

лоида сыворотки. ИЛ-1 может также участво Интерлейкин-3 - гемопоэтический ростовой вать в Т-клеточной супрессии.

фактор, который поддерживает рост полипо Открытие ИЛ-2 (Т-клеточный ростовой тентной стволовой клетки, частично приводя к фактор) явилось результатом следующего на дифференциации в сторону миелоидного ряда.

блюдения: супернатант стимулированных ми ИЛ-3 также индуцирует экспрессию Thy- тогеном (Кон-А) лейкоцитов периферической антигена Т-лимфоцитов. Он присутствует в крови человека содержит фактор, вызывающий супернатантах культур Т-клеток-помощников.

пролиферацию клеток in vitro. Получение ИЛ- ИЛ-4 вызывает активацию, пролиферацию и стало возможным при использовании дифференциацию В-клеток, является фактором долгоживущих культур клонированных Т-кле роста Т-клеток и ряда других клеток. ИЛ- точных популяций. Показано, что очищенный является активирующим, ростовым и диффе ИЛ-2 способен осуществлять следующие функ ренцирующим фактором В-клеток;

он также ции:

вызывает дифференциацию эозинофилов. ИЛ- а) он запускает пролиферативную экспан продуцируется активированными Т-клетками сию активированных клонов Т-клеток;

или Т-клеточными линиями и способен б) усиливает митогенез тимоцитов;

стимулировать В-клетки человека.

в) усиливает формирование бляшкообра- Лимфоциты Интерферон и лимфотоксин к их пролиферации. ПГЕ! также вызывает быструю экспрессию Thy-1 антигена в культуре Интерферон является еще одной макромоле эмбриональных мышиных тимусов. Боль кулой, которая может играть важную роль в шинство исследований иммунорегуляторных регуляции иммунного ответа (см. главу 29).

эффектов ПГ в отношении функции Т-клеток ИФН может иметь лимфоцитарное происхож проведено на моделях митогенного или анти дение. Показано, что ИФН обладает рядом генного бластогенеза. Во многих публикациях иммуномодулирующих эффектов. К ним отно сообщается о подавлении митогениндуциро сятся подавление и стимуляция ответа антител, ванного бластогенеза nrEj и ПГЕ2, а также об подавление гиперсенситивности замедленного отмене супрессии индометацином. ПГЕ зна типа и отторжения трансплантата, супрессия чительно подавляет продукцию Т-клетками митогенеза лимфоцитов, активация макрофагов, лимфокина-фактора, угнетающего миграцию.

увеличение экспрессии поверхностных ан ПГ могут также угнетать способность сенси тигенов лимфоцитов и выделение гистамина билизированных Т-клеток к специфическому базофилами. Кроме того, интерферон повышает лизису опухолевых клеток-мишеней. Однако цитотоксичность Т-клеток, антителоза-висимую для этого требуются высокие концентрации ПГ.

клеточную цитотоксичность, активность Предположительно ПГ оказывают подав естественных киллеров. Указанные формы ляющее влияние на пролиферацию лимфоцитов активности присущи прежде всего ИФН-а, через активацию аденилатциклазы и повышение который образуется Т- и В-клетками, а также уровня цАМФ. ПГ, повышая внутриклеточный макрофагами. Многими из перечисленных форм уровень цАМФ, усиливают бластоге-нез активности обладает и ИФН-/3, образуемый тимоцитов, но подавляют бластогенез цир активированными Т-лимфоцитами.

кулирующих Т-клеток, не разделенных на суб Лимфотоксин - это вещество, относящееся к популяции. Из этого наблюдения был сделан фактору некроза опухолей (ФНОа;

иногда его вывод об основном действии, связанном с су называют ФНОр, так как оба вещества прессорными клетками периферической крови.

обладают сходными биологическими и струк Ингибиторы синтеза простагландинов, такие как турными свойствами). ФНОа образуется индометацин, подавляют функции Т-кле-ток макрофагами, а ФНОр-активированными Т супрессоров в культуре лимфоцитов, сти клетками. Лимфотоксин цитотоксичен для мулированных Кон-А. На функции В-клеток ПГ определенных опухолевых клеточных линий и оказывают модулирующее действие. Ин вызывает геморрагические некрозы некоторых дометацин усиливает формирование антитело опухолей. Предполагается, что ФНОа и ФНОР продуцирующих клеток на эритроциты барана.

ответственны за ряд воспалительных эффектов, Вероятно, что на Т-клетки-помощники ПГ наблюдаемых при реакциях гиперсенси влияют так же, как на В-клетки.

тивности замедленного типа и ранее относимых к кожным реактивным факторам.

Гормоны вилочковой железы Простагландины С тех пор как была открыта роль вилочковой железы в регуляции иммунного ответа, был Простагландины-это широко распространенное семейство соединений, производных по- разработан целый ряд препаратов тимусного линенасыщенной жирной кислоты (арахидоно- происхождения. Многие из них химически оха вой), которые образуются при участии цикло- рактеризованы. К главным препаратам относят следующие: тимозин, тимопоэтин, тими-ческий оксигеназной активности. Показано, что ПГЕ2, гуморальный фактор и сывороточный фактор nrF2, nrF2a (простациклин) и ТА2 (тромбоксан) вилочковой железы.

синтезируются макрофагами некоторых видов.

Макрофаги обладают активной циклооксигеназной системой. Лимфоциты не Тимозин обнаруживают способности к синтезу ПГ, поэтому вполне логичным представляется про- Этот препарат является неочищенным экстрак том сыворотки теленка, а изученный активный ведение исследования влияния ПГ на Т-клетки, препарат обычно называют 5-й фракцией ти nrEj и ПГЕ2 в отличие от nrFla или ПГЕ2(1 могут мозина. Эта фракция состоит из ряда пепти- вызвать быстрое 2-4-кратное увеличение цАМФ в тимоцитах, что через 2-4 ч приводит 7 86 Глава дов;

некоторые из них происходят от тими- лимфоцитов неонатально тимэктомированных ческого эпителия, а остальные-от тимоцитов. мышей.

Определена аминокислотная последователь- Гуморальный фактор вилочковой железы ность пептидов, обладающих биологической используется при лечении иммунодепрессив- J активностью;

так, тимозин-сц состоит из 28 ных состояний у людей.

аминокислотных остатков. Пятая фракция ти мозина и некоторые ее биологически активные Сывороточный химический фактор пептиды используются в экспериментальных моделях, а также при иммунодепрессии у боль- Сывороточный тимический фактор (СТФ) яв ных раком и при тяжелых вирусных инфекциях.

ляется единственным гормоном вилочковой Показано, что большинство функций Т-клеток железы, который приготавливается не из эк индуцируется или усиливается этими стракта железы теленка. Он представляет со-] препаратами. Важно отметить, что помимо бой нонапептид (молекулярная масса 900), вы усиления эффекторных функций Т-клеток 5-я деленный из сыворотки, но еще не синтезиро фракция тимозина и особенно тимозин 7 ин- ванный. СТФ способен индуцировать маркеры дуцируют образование супрессорных клеток у Т-клеток (Thy-1 мембранный антиген) у пред мышей. Аналогичный эффект наблюдается у шественников Т-клеток и отсутствует в сыво людей. Учитывая данное наблюдение, необ- ротке тимэктомированных животных. В ряде ходимо рационально использовать препараты тестовых систем действие СТФ аналогично (но этого типа, пока не будет произведена очистка не идентично) действию тимопоэтина.

отдельных пептидов, а также точное определе- Одно из направлений в изучении тимиче ние их клеток-мишеней.

ских факторов - исследование их влияния на процессы старения. Уровни тимопоэтина и СТФ в сыворотке с возрастом снижаются.

Тимопоэтин Иммунитет старых мышей восстанавливается Тимопоэтин был первоначально получен в ходе после введения ТП5. Как и тимозин, СТФ в исследований на экспериментальной модели высоких концентрациях обладает стимули миастении гравис и охарактеризован в соот- рующим действием на Т-супрессорные клетки, ветствии с его влиянием на нейромышечную поэтому он может подавлять сенсибилизацию к передачу. Было показано также влияние тимо- динитрофторбензолу и отторжение кожного поэтина на раннюю дифференциацию Т-клеток. трансплантата. У человека СТФ в определен Тимопоэтин химически охарактеризован, он ных условиях угнетает образование Т-клеток представляет собой полипептидную цепь, супрессоров in vitro.

содержащую 49 аминокислот. В последующем Гольдштейн и его коллеги выделили пентапеп Список литературы тид с аналогичной биологической активностью, который был назван ТП5. ТП5 исследован в Hamblin A.S. (1988) Lymphokines. IRL Press. Oxford. Howard J.

ряде экспериментальных мышиных моделей. В (1984) The T-cell antigen receptor-paradigm regained. Immunol.

частности, пентапептид эффективен при Today 5, 188-189.

экспериментальном аутоиммунном заболевании Hume D.A. & Weidemann M.J. (1980) Mitogenic Lymphocyte животных. Transformation. Elsevier/North Holland, Amsterdam.

Moiler G, (ed.) (1984) T-cell receptors and genes. Immunological Reviews vol. 81, Munksgaard, Copenhagen.

Pernis B. & Vogel H.J. (eds) (1980) Regulatory T-lymphocytes.

Гуморальный фактор вилочковой железы Academic Press, New York.

Simonsen M. (1984) May T3 protect us. Immunol. Today 5, 314-315.

Данный фактор представляет собой пептид Turk J. L. (1980) Delayed Hypersensitivity, 3rd ed., Elsevier/ North (молекулярная масса 3000), выделяемый из Holland, Amsterdam.

диализата неочищенного экстракта вилочковой Yoshida T. (1983) Lymphokines mediate and regulate in vivo delayed hypersensitivity reactions. In: Hadden J. W., Che-did L., Dukor P., железы. На модели «трансплантат против Spreafico F. & Willoughby D. (eds) Advances in хозяина» in vitro гуморальный фактор вилоч Immunopharmacology 2. pp. 609-614. Perga-mon Press, Oxford.

ковой железы и подобные ему препараты спо собны восстанавливать иммунную активность Эндотелиальные клетки сосудов М.М. Дейл, Т-П.Д. Фан (М.М. Dale, T-P.D. Fan) Сосудистый эндотелий представляет собой не- Эндотелиальные клетки in vitro имеют повы прерывный монослой клеток, выстилающих шенную скорость обмена и часто весьма напо люминальную поверхность кровеносных сосу- минают «травмированные» клетки in vivo. Более дов всего организма и отделяющих кровь от того, эндотелиальные клетки в отличие от субэндотелиальных тканей. Этот монослой не фибробластов и гладкомышечных клеток об является пассивным барьером между кровью и лигатно растут монослоем как in vivo, так и in тканями. Это метаболически активная ткань, vitro, проявляя характерное контактное тор обладающая многочисленными функциями. можение и осуществляя межклеточные контак Подробные сведения об этих функциях были ты. Не следует также забывать о разносторон получены лишь в последнее десятилетие бла- ности эндотелиальных клеток в отношении годаря развитию эффективных методов куль- некоторых функций in situ. Так, люминальная тивирования эндотелиальных клеток in vitro. поверхность клетки обладает механизмами Эндотелиальные клетки различных органов предупреждения адгезии тромбоцитов (см. ни и тканей не идентичны и различаются по своей же), тогда как ее противоположная поверхность структуре или функции. Например, некоторые способствует тромбогенезу. Ангиотен эндотелиальные слои обладают преимущест- зинконвертирующий фермент локализуется на венно плотными соединениями между клетка- люминальной поверхности, а коллагеназа-на ми, что характерно для гематоэнцефалическо- противоположной. Такая «ориентация по го барьера;

в костном мозге подобные соеди- сторонам» у клеток в культуре не очевидна.

нения отсутствуют. В легких клетки эндотелия Подавляющее большинство сосудистых эн в отличие от других сосудистых областей спо- дотелиальных клеток организма находится в собны метаболизировать циркулирующие пеп- микрососудах, главным образом в капиллярах тиды. Эндотелиальные клетки посткапилляр- (рис. 37). Стенки сосудов микроциркуляторно-го ных венул активно отвечают на циркулирую- русла состоят из концентрических, послойно щие в крови вещества повышением проницае- расположенных тканей, причем слои варьируют мости сосудов. Подобной способностью не в зависимости от типа сосудов (рис. 38).

обладают клетки эндотелия капилляров и ар- Эндотелий примыкает к базальной мембране териол. поверхностью, противоположной люминальной.

В функциональном плане эндотелий наде- Стенка капилляров и посткапиллярных венул лен широким спектром форм активности, но в состоит в основном из этих двух элементов. В этой главе основное внимание будет уделено этой части сосудистого русла с эндоте тем функциям, которые имеют отношение к лиальными клетками связаны перициты воспалительным и гиперсенситивным реакци- длинные, узкие клетки (длина 150-200 мкм, ям. Приведенные здесь данные были получены ширина 10-25 мкм) (см. рис. 38). Они распола частично в исследованиях in vivo, частично-in гаются на базальной мембране, образуя пре vitro на культурах клеток. Следует подчерк- рывистый слой, распространяющийся от ар нуть, что в большинстве исследований in vitro териол до мышечных венул. На этом отрезке использовались эндотелиальные клетки доста- имеются и переходные формы между перици точно крупных кровеносных сосудов, посколь- тами и гладкомышечными клетками. Перициты ку разработка методов длительного культиви- выполняют сократительную функцию и рования больших количеств эндотелиальных обеспечивают механическую поддержку эндо клеток микрососудов находится лишь на своем телиальных клеток. Имеются свидетельства в начальном этапе. Следует также отметить, что пользу фагоцитарной активности перицитов.

эндотелиальные клетки in vivo являются по Кроме того, перициты могут служить источ существу покоящимися и в нормальных усло- ником недифференцированных мезенхималь- виях уровень обмена в них достаточно низок.

8 мкм капилляры Рис. 37. Площадь поверхности эндотелия, приходящегося на единицу объема крови, выражена как функция диаметра сосудов на различных участках циркуляции.

Для вычисления использовалось отношение площади цилиндрической поверхности сосудов диаметром от 8 мкм (капилляры) до 20 мм (крупные артерии и вены) к 1 см3 объема [Busch и соавт.-Lab. Invest., 1982, 47, 498].

ных клеток при воспалительных и препаратив- диаторов и клеток, участвующих в воспалении, ных процессах. в зону поражения. Однако исследования в Эндотелий небольших артериол и постка- культуре клеток пока не выявили различий пиллярных венул имеет непосредственное от- между эндотелиальными клетками из разли ношение к воспалительной реакции. Артериолы чных областей микроциркуляции.

контролируют переход клеток и плазмы из крови в область воспаления. Венулы принимают участие в контроле направленного из сосудов Морфология эндотелия потока жидкости и медиаторов, комплемента, антител, а также в контроле прохождения Сосудистые эндотелиальные клетки представ клеток непосредственно в зону внедрения ляют собой уплощенные полигональные клетки патогена или другого вредоносного агента (см. длиной 25-50 мкм и шириной 10-15 мкм, главу 18). Эндотелиальные клетки данной части которые образуют одноклеточный слой на вну микроциркуляции сравнивают со стражниками, тренней стороне кровеносных сосудов, причем которые отвечают на различные химические длинная ось клеток ориентирована в направле сигналы инициацией соответствующих реакций, нии кровотока. Толщина концов клеток очень регулирующих доставку ме- невелика (1 мкм в артериях и менее 0,1 мкм Рис. 38. Основные структуры микроциркуляции и их взаимосвязь с остальными частями сосудистого ложа."

Детальное строение стенки посткапиллярной венулы представлено в нижней части рисунка [Rodin J. A. G.- In:

Handbook of Physiology: The Cardiovascular System II, Chap. I/Eds. D. F. Bohr, Somlyo, Spaks].

9 Гистамин - медиатор аллергических и воспалительных реакций М.М. Дейл, Дж. К. Формен (М. М. Dale, J. С. Foreman) Эта часть книги, куда входит данная глава, оказывать пресинаптическое действие, регули называется «Медиаторы», поскольку она по- руя собственный выброс.

священа химическому взаимодействию клеток, Аналогичные условия существуют и для которые первично активируются при воспали- медиаторов воспалительных и иммунных ре тельных или аллергических реакциях, со всеми акций. Эти вещества ответственны не только за другими клетками, участвующими в этих реак- позитивную передачу информации, но вместе с циях. Мы хотели провести аналогию между другими веществами могут также препят нейропередатчиками и медиаторами иммуни- ствовать ее распространению. Для определен тета и воспаления и показать их общие свойства, ных возбуждающих медиаторов конкретного отметив, в частности, то, что они являются эффекта, таких как гистамин, имеются соот- химическими веществами, переносящими ветствующие тормозящие медиаторы - некото- информацию. На роль нейропередатчиков и рые простагландины, например. Более того, медиаторов воспалительных или иммунных гистамин может облегчать или подавлять дей реакций было предложено множество веществ. ствие других медиаторов и даже угнетать соб Принадлежность того или иного вещества к ственное выделение.

нейропередатчикам определяется тем, насколь ко оно соответствует четким критериям, пер Основные характеристики воначально предложенным Dale в 1933 г. Лишь воспалительных и аллергических в очень немногих работах аналогичные критерии адекватно используются для оценки реакций медиаторов иммунных и воспалительных ре акций, что весьма затрудняет наше понимание Прежде чем начать рассмотрение самих ме этих реакций. Обсуждение различных предпо- диаторов и тех критериев, которым они дол лагаемых медиаторов осложняется подобной жны удовлетворять, чтобы соответствовать «вариабельностью» критериев, поскольку экс- своему наименованию, неплохо было бы от периментальная работа просто отсутствует. Тем ветить на вопрос: медиаторами чего они явля не менее мы полагаем, что разъяснение таких ются? Хотя в главе 1 дано краткое описание критериев может быть полезным подходом к природы воспалительных и иммунных реакций разрешению некоторых вопросов, касающихся на внедрение в организм чужеродного мате медиаторов в рассматриваемых реакциях. Мы риала в виде микроорганизма или химического попытаемся проиллюстрировать этот подход на вещества, не лишним будет вспомнить основ примере гистамина, который является ные признаки воспалительных реакций, о ко классическим медиатором повышенной торых Цельс сказал так: воспалительная реак чувствительности немедленного типа и острого ция проявляется «краснотой, опухолью, жаром воспаления и о котором существует больше и болью».

информации, чем о других предполагаемых Краснота (или покраснение) обусловлена медиаторах. расширением сосудов и увеличением кровотока В ранних исследованиях проводилось опре- в очаге воспалительной реакции.

деление химических передатчиков нервной си- Опухоль (или отек) вызвана как повы стемы, которые обладают позитивным (воз- шенной проницаемостью сосудов с перемеще буждающим) постсинаптическим эффектом. нием жидкости во внесосудистые тканевые Однако наряду с постсинаптической активацией пространства, так и инфильтрацией различны должны существовать нейротрансмите-ры, ми клетками. При хронических состояниях вы обладающие тормозящим действием. В является преобладание клеточной инфильтра настоящее время установлено, что в дополнение ции, что сопровождается организацией фибри к этим эффектам передатчики могут на, коллагена и других матриц.

Гистамин Жар (или повышение температуры) обус- медиатор. Десенсибилизация органа-мишени к ловлен увеличением кровотока в результате медиатору также может прекращать его дейст расширения сосудов. вие. Такая десенсибилизация осуществляется Боль вызывается стимуляцией афферентных другим, вторичным, медиатором, действующим нервов повышенным давлением, возникшим в либо как модулятор, либо по принципу down результате отека, а также химическими регуляции соответствующих рецепторов.

медиаторами, выделяемыми в очаге воспале- 5. Фармакологическое вмешательство в ния. синтез, хранение, выделение, метаболизм или Пятая характеристика воспаления, которая в действие агента должно вызывать предска не упомянута Цельсом, заключается в измене- зуемые изменения воспалительной реакции как нии функции ткани. Примером может служить in vitro, так и in vivo.

спазм гладких мышц бронхиол при астме или 6. Экспериментальные или клинические со ограничение подвижности воспаленного сус- стояния, связанные с дефицитом медиатора или тава. метаболизирующих его ферментов, должны сопровождаться соответствующим умень Как уже отмечалось во введении и в первой шением или увеличением аллергических или части книги, в результате действия медиаторов клетки, накапливающиеся в области пораже- воспалительных явлений.

7. Рецепторы или другие механизмы акти ния, проявляют (часто одновременно) самую разнообразную активность и функции, поэто- вации медиатора должны обнаруживаться на му события, которые опосредуются медиато- соответствующих клетках фармакологическими методами и(или) методом связывания.

рами при аллергии и воспалении, гораздо сложнее, чем при передаче нервных импульсов.

Гистамин как медиатор Критерии оценки Гистамин, или В-имидазолилэтиламин, был медиаторов независимо, но почти одновременно выделен из биологического источника и синтезирован По Dale (1933), для отнесения того или иного химическими методами. Kitscher идентифици вещества к группе медиаторов оно должно ровал его в качестве активного начала спо удовлетворять определенным критериям, при рыньи, a Windaus и Vogt получили его путем веденным ниже в некоторой модификации.

синтеза. Dole и его коллеги начали и продол 1. Нанесение агента должно вызывать эф жили интенсивное исследование биологическо фект, наблюдаемый при острой воспалитель го действия гистамина.

ной или аллергической реакции не только in Dale и Schultz независимо друг от друга vitro, но и in vivo. В ситуации, когда множество показали, что реакция гиперсенситивности не медиаторов участвуют в сложном эффекте, медленного типа (анафилактическая реакция) выявление соответствия этому критерию, осо является прямым следствием взаимодействия бенно in vivo, может быть сложной экспери антигена и ткани, сенсибилизированной анти ментальной задачей.

телами. Dale показал, что нанесение гистамина 2. При воспалительной или аллергической на гладкую мышцу in vitro или (в определенной реакции в тканях in vivo и in vitro должно мере) внутривенная инъекция гистамина выделяться или образовываться достаточное животным воссоздает многие признаки ана количество предполагаемого медиатора.

филактической реакции. В то же время Abel и 3. Ферменты, необходимые для образова его сотрудникам удалось экстрагировать ги ния предполагаемого медиатора, должны об стамин из тканей;

впоследствии он был обна наруживаться в местах его продукции, а их ружен практически во всех тканях млекопи активность должна возрастать под действием тающих. Особенно много гистамина в коже, воспалительного стимула, вызывающего уско- легких, кишечнике, но больше всего-в сли рение обмена медиатора.

зистой оболочке желудка.

4. Должен существовать механизм останов Таким образом, уже в самых ранних иссле ки действия медиатора, чтобы его эффект не дованиях было установлено присутствие ги продолжался неопределенно долго. Прекраще стамина в тех тканях, где наблюдаются ана ние действия медиатора в норме требует нали филактические и аллергические реакции. Кроме чия или катаболического фермента в месте того, нанесение экзогенного гистамина на воспалительной реакции, или процесса захвата в изолированные ткани и введение его живот- некоторых клетках, которые могут удалять 106 Глава ным воспроизводит ряд признаков таких реак- расширились благодаря классическим исследо ций. ваниям Riley и West, идентифицировавших тка Некоторое время спустя Bartosch, Feldberg и невые тучные клетки как главный источник Nagel подтвердили еще один критерий. Они гистамина. Гистамин присутствует также в ба показали, что антигенная стимуляция сенси- зофильных лейкоцитах крови и (у некоторых билизированной ткани легких (модель гипер- видов) в тромбоцитах. Кроме того, гистамин сенситивности немедленного типа) вызывает содержится в нейронах головного мозга я в выделение гистамина из тканей. Последующие слизистой оболочке желудка, однако эти его исследования показали выделение гистамина источники, по-видимому, не играют роли в кожей при воспалении, обусловленном высокой воспалении.

температурой. Идентификация тучных клеток как ткане После работы Dale, где было продемон- вых депо гистамина побудила к проведению стрировано сокращение мышц в ответ на ги- исследований, показавших, что иммунный сти стамин, и более позднего исследования, пока- мул способен инициировать выделение гиста завшего (более специфически) сокращение мина (см. главу 2).

гладких мышц бронхиол, Lewis показал, что Кроме того, многие воспалительные сти внутрикожная инъекция гистамина почти всегда мулы, такие как СЗа, С5а, физическая травма и воспроизводит утроенный ответ кожи на разнообразные химические вещества, вызы повреждение. Утроенная кожная реакция на вают выделение гистамина из тучных клеток.

повреждение заключается в локальном по- Тучные клетки и базофильные лейкоциты, краснении непосредственно в точке поврежде- помимо выделения гистамина, способны син ния, которое быстро распространяется (по тезировать его с помощью фермента гистидин окружности) на несколько сантиметров. По мере декарбоксилазы. Kahlson показал, что практи уменьшения красноты начинает развиваться чески все ткани способны к образованию гиста локальный отек (вокруг места травмы). Все эти мина. В ряде работ продемонстрировано уско признаки возникают после введения гистамина, рение синтеза гистамина вследствие воспали но отсутствуют при введении изотонического тельных реакций на физические, химические и раствора хлорида натрия. Покраснение при бактериальные стимулы. Таким образом, утроенном ответе кожи является результатом синтез гистамина и его выделение из префор расширения артериол гистами-ном, тогда как мированных хранилищ вносят вклад в пул отек (или волдырь) обусловлен протеканием медиатора при воспалительной реакции.

жидкости из посткапиллярных венул, Ферменты, осуществляющие катаболизм проницаемость которых увеличивается под гистамина,-диаминоксидаза и метилтрансфе действием гистамина. Эти прямые наблюдения раза неспецифичны для гистамина и широко действия гистамина на сосуды кожи распространены в тканях. Поэтому критерий соответствуют таковым Dale, отметившего со- существования специфической системы терми судорасширяющие эффекты гистамина in vivo. нации действия гистамина неприменим для Гистаминовый шок, развивающийся после оценки его медиаторной функции, однако не внутривенного введения гистамина животным, обходимые ферменты определенно доступны.

характеризуется выраженной гипотонией и Для выяснения роли гистамина был исполь спазмом бронхов и весьма напоминает ана- зован интересный, но не дающий окончатель филактический шок. ного решения подход с применением конку Таким образом, гистамин соответствует рентных антагонистов. Первые мощные анта критериям, согласно которым медиатор должен гонисты гистамина (называемые теперь H1-ан вызывать определенные эффекты после его тагонистами) эффективны in vitro в препаратах введения как in vitro, так и in vivo. Гистамин изолированных гладких мышц. Антагонисты вызывает расширение сосудов, повышение их частично подавляют эффекты экзогенного ги проницаемости и сокращение гладких мышц, а стамина у животных. Bain показал, что анти также зуд и боль в месте инъекции (в некоторых гистаминные препараты уменьшают кожные областях). Гистамин не дает лишь одного реакции на введенный гистамин у человека.

признака острого воспаления-накопления клеток Однако те же препараты в основном неэффек в месте воспаления. тивны в экспериментальных моделях воспале ния, а также при воспалительных и аллерги Знания о существовании гистамина в тканях ческих заболеваниях человека.

и его выделении под действием воспалительных Одним из безусловных заключений, сделан и иммунных стимулов значительно Гистамин ных на основании этих наблюдений, является чение из этого правила составляют некоторые отрицание гистамина как медиатора острой воспалительные заболевания кожи. При раз воспалительной или аллергической реакции. личных формах крапивницы и атопическом Но такое заключение трудно было поддержать с дерматите уровень гистамина в крови, отте учетом остальных данных, приведенных выше и кающей из области поражения, повышается. Эти имеющих явно противоположную на- заболевания чувствительны к H1-антаго-нистам правленность. Поэтому были приведены другие и в большей степени-к комбинации H1- и Н2 объяснения и выдвинуто предположение, что антагонистов.

гистамин, выделяясь локально (в месте В недавних исследованиях была показана воспаления), достигает концентрации, которая возможность существования третьего класса может снимать эффекты клинически достижи- гистаминовых рецепторов, названных Н3-ре мых концентраций антигистаминных препара- цепторами, и описаны специфические антаго тов. Другим возможным объяснением является нисты для этих рецепторов. Однако участие существование нескольких типов рецепторов этого предполагаемого Н3-рецептора в гипер гистамина, которые обладают разной чувстви- сенситивности и воспалительных реакциях пока тельностью к блокаде антагонистами. Это не определено.

представляется вполне вероятным, поскольку Таким образом, значительная часть пред индуцированная гистамином секреция кислоты в ставленных данных соответствует критериям, желудке полностью нечувствительна к анти- позволяющим признать гистамин медиатором гистаминным препаратам. Возможно также, воспалительных реакций и повышенной чув что гистамин, опосредуя некоторые проявления ствительности немедленного типа. Но, как это острого воспаления, не является чистым следует из изложенного выше (и будет еще медиатором. Как мы увидим далее, элемент более очевидным в следующих главах этой истины есть в каждом из этих предположений. части), гистамин является не единственным Исходя из наблюдений Schild в отношении медиатором данных реакций. Постулат Dale о резистентности к антигистаминным препаратам, выделении одним нервом только одного вызванной гистамином секреции желудочной передатчика в настоящее время пересматри кислоты, Black разработал группу Н2- вается, а возможность существования несколь антагонистов гистамина, которые подавляют эту ких передатчиков в одном нейроне делает секрецию. Таким образом, был открыт путь к трудной эволюцию предполагаемых передат исследованию значения H1- и Н2-рецеп-торов в чиков. В случае медиации аллергии и острого воспалительных и иммунных реакциях. воспаления ситуация еще сложнее.

Экспериментальная работа, выполненная в последнее десятилетие, скорее осложнила наше понимание этого вопроса, нежели внесла в него Гистамин как регулятор какую-то ясность. Не вызывает особых сомне ний то, что классические воспалительные эф- Оценка роли гистамина еще больше усложни фекты гистамина опосредуются Hj-рецептора- лась недавними исследованиями, показавшими, ми. Однако вазодилатация, вызванная гиста- что гистамин, помимо его действия как мином. сильнее подавляется Нх-антагонистами в медиатора, осуществляет функцию регулятора.

присутствии Н2-антагонистов, что пред- Как свидетельствуют многочисленные иссле положительно способствует действию Н2 ре- дования in vitro, гистамин изменяет реакции цепторов. Не исключается также небольшой различных клеток на другие медиаторы, а также Н2-эффект в дополнение к выраженному - на воспалительные и иммунные стимулы. В эффекту при вызванном гистамином по- некоторых из этих работ отмечается регуля вышении венозной проницаемости;

Н2-рецеп- торная провоспалительная активность гиста торы, по-видимому, участвуют и в возникно- мина, однако данные большинства исследо вении зуда, вызванного гистамином. Однако ваний указывают на наличие антивоспалитель комбинация Н1 и Н2-антагонистов не обес- ных,и(или) иммуносупрессивных эффектов. В печивает существенно большей эффективности целом установлено, что первый эффект связан с лечения при гиперсенситивности немедленного действием на H1-рецепторы, а второй-на типа и воспалительных заболеваниях в сравне- рецепторы Н2. Во многих публикациях такие нии с применением только Н1 -антагониста, выводы основываются на экспериментах, в ко эффективность которого, как уже отмечалось, торых эффект гистамина (нередко только в од лишь несколько выше маргинальной. Исклю- ной концентрации) подавляется Н1- или Н2-ан- 108 Глава Рис. 43. Подавление аналогами гистамина стимуляции лимфоцитов конканавалином-А (25 мкг/мл-1) у морских свинок.

Кривая с темными кружками-гистамин, с квадратами -4 метилгистамин, с треугольниками - 2-метилгистамин, со светлыми кружками - 3-метилгистамин. Каждая точка представляет среднее значение и стандартную ошибку двойных образцов в трех экспериментах. Результаты выражены в процентах подавления включения [3Н] тимидина в лимфоциты, стимулированные одним митогеном. N. В. Оценка Н2-антагонистов в данном тесте невозможна, поскольку они сами обладают прямыми эффектами [Beets, Dale-Br. J. Pharmacol., 1979, 66, 365].

тагонистами (также взятыми в одной, доста димые для определения константы диссоциа точно высокой концентрации, обычно 10-4 10- ции конкурентного антагониста регуляторного М). Подобные результаты могут служить лишь действия гистамина, часто включают измерение грубым указанием на участие рецепторов;

с подавления ингибирования и достаточно фармакологической же точки зрения здесь трудны в выполнении, они тем не менее воз требуются дополнительные количественные можны и дают полезные результаты (рис. 44).

исследования. Прежде всего необходимо Расчет на более точные исследования ре установить четкую зависимость доза - эффект цепторов- вовсе не проявление педантичности.

для специфических агонистов с определением Поскольку полученная в них информация будет порядка величин, например импромидин > ги иметь важное значение не только для стамин > димаприт или 4-метилгистамин > > 2 понимания биологической роли гистамина, но и метилгистамин для Н2-эффектов и гистамин > 2 для разработки новых лекарств на основе тиазолилэтиламин > 2-метилгистамин > 2 возможных регуляторов эффектов.

пиридилэтиламин-для H1-эффектов (рис. 43).

Следующим важным моментом интерпре Но для более точного определения типа тации значимости полученных результатов яв рецепторов (H1 или Н2, или ни тот, ни другой) ляется соответствие между изменениями ответа необходимо выявить селективный эффект эффекторных клеток при различных кон специфического конкурентного антагони-ста, центрациях гистамина и условиями, достижи включая параллельность кривых доза-эффект мыми in vivo. Интересно, что концентрация для гистамина или соответствующего агониста, гистамина в одной грануле крысиных тучных что позволяет вычислить значение KD, клеток достигает почти молярных значений, а основанное (если возможно) на построении локальная концентрация гистамина в ткани графика Шилда1. Хотя эксперименты, необхо- после секреции тучных клеток может составлять 10 - 10_3 М, хотя вряд ли столь высокие концентрации распространяются на большие График Шилда-график log (A/a)-l против log I, где А/а - расстояния и сохрняются длительное время. Тем отношение концентраций агониста, которые вызывают не менее небольшой процент изменений 50% максимального эффекта с агонистом (А) и без него (а), а I - концентрация антагониста. Наклон линии должен быть эффекта при очень высоких концентрациях одинаковым при простом конкурентном антагонизме).

гистамина свидетельствует не в пользу серьез ной значимости гистамина in vivo.

Гистамин Все это следует учитывать при оценке ис- у мышей на Н2-рецепторы и умеренное подав следований in vitro возможной регуляторной ление Т-клеточной цитотоксичности, направ роли гистамина. ленной против аллогенных клеток. По крайней мере в 10 исследованиях показано подавление гистамином пролиферации Т-лимфоцитов у Противовоспалительное регуляторное действие морских свинок, мышей и человека. В боль В некоторых опубликованных работах сооб- шинстве из них выявлен умеренный 3эффект при щается о стимулирующем или противовоспа- высоких концентрациях (10~~4- 10~ М), хотя в лительном действии гистамина на эозинофи- условиях специального определения заметные эффекты наблюдаются при низких кон лы: усиление хемотаксиса при концентрации 1(Г6 М, увеличение экспрессии СЗЬ- и С4-ре- центрациях (Ю~10-10~7 М). Приведены данные как в пользу, так и против участия Н2-ре цепторов и увеличение гибели шистосомул.

цепторов в этих реакциях. По некоторым дан Предполагается участие Hi-рецепторов, однако ным, наблюдаемые эффекты связаны с актива окончательная идентификация не проведена.

цией супрессорных клеток.

В некоторых экспериментальных исследо Противовоспалительное и иммуносупрессивное ваниях влияния гистамина на легкие возник регуляторное действие вопрос, насколько индуцированный гистамином бронхоспазм, опосредуемый Н,-рецепторами, Многие исследования свидетельствуют об ин модулируется индуцированной гистамином гибиторном эффекте гистамина. Гистамин при релаксацией, опосредуемой Н2-рецептора-ми. В концентрации 107- Ю-5 М, как сообщается, легких морских свинок сокращение гладких уменьшает выделение гистамина из человече мышц, вызываемое селективным Hj-aro-нистом ских базофилов, действуя на Н2-рецепторы, и 2-пиридилэтиламином, отменяется Н2 приведенные доказательства достаточно убе агонистом димапритом (рис. 45). Эффект дительны, как это видно на рис. 44 (хотя более димаприта может быть заблокирован некото высокое дозовое отношение было бы еще бо рыми конкурентными Н2-антагонистами, зна лее убедительным). Гистамин также уменьша чение рА2 для которых свидетельствует об ет хемотаксис базофилов человека. Существу опосредовании Н2-рецепторами релаксации, ют противоречивые данные о прямом значи вызванной димапритом. Так как указанные тельном влиянии гистамина на активность ней эксперименты выполнялись на паренхиматоз трофилов и малоубедительные результаты его ных полосках, то вполне возможно, что часть действия на макрофаги. В отношении лимфо Н2-агонистических эффектов обусловлена из цитов отмечается четко определенное действие вестным Н2-вазодилататорным действием на Рис. 44. А- кривые доза- эффект для подавления гистамином антигениндуцированного выделения гистамина (одного и в присутствии указанных концентраций буримамида). Кривая с темными кружками - гистамин, со светлыми треугольниками - гистамин и 2,1 х 10_б М буримамида, со светлыми кружками гистамин и 4,3 х Ю-6 М буримамида, с темными треугольниками-гистамин и 1,1 х 10~5 буримамида. Б-график Шилда, основанный на данных графика А и других сходных экспериментов. Темные кружки буримамид Кд = 5х10-6М, светлые кружки - буримамид Кд=3,9х 10 М. Полученные значения Кд обычно близки к таковым в других системах с Н2-рецепторами, например в предсердии морских свинок [Lichtenstein, Gillespie — J.Pharmacol. Exp. Ther., 1975, 192, 441].

Глава легочные кровеносные сосуды. Наличие Н2-ре- Исследования связывания меченого гиста цепторов в легких морских свинок было под- мина с различными типами клеток не слишком тверждено в исследовании связывания (см. ни- способствовали пониманию рецепторов, таи же). Показано также потенцирование Н2-анта- как в них определялись главным образом за гонистами бронхоспазма, вызванного гистами- хват клеткой и(или) его катаболизм. Изучение ном в изолированных бронхах человека. Однако связывания высокоспецифичных меченых Н1 и Н2-антагонисты не влияют на бронхоспазм, Н2-антагонистов и возможных Н3-антаго вызванный антигеном. В ряде исследований не нистов с высокой активностью может дать удалось показать бронхорасширяющий эффект больше информации о типах гистаминовых) гистамина, но эти эксперименты могут быть рецепторов на различных клетках воспаления, подвергнуты критике за недостаточно широкий хотя даже присутствие рецептора к лиганду не диапазон доз препарата. Вообще, как нам обязательно означает наличие физиологиче кажется, опосредованный Н2-рецепторами ского ответа клетки на лиганд. В дыхательных бронхорасширяющий эффект гистамина, кото- путая морских свинок связывание 3Н-мепира рый наблюдается у морских свинок, у человека мина использовалось для идентификации слишком мал и не имеет существенного значе- Н,-рецептора, опосредующего бронхоспазм, а ния при астме. связывание 3Н-тиотидина-для идентификации Возможно, необходимо принять во внима- Н,-рецептора. Насыщаемое специфическое свя ние, что ингибиторный эффект гистамина может зывание 3Н-тиотидина легкими морских свинок быть обусловлен предполагаемыми Н3-ре- (рис. 46) замещалось рядом Н2-антагони-стов.

цепторами. Заявлено существование таких ре- Значения KD, полученные методами свя цепторов на гистаминергических нервах, окан- зывания, четко соответствуют величинам KD, чивающихся в ткани головного мозга. Они полученным при использовании антагонистов:

контролируют синтез и выделение гистамина. а) для блокирования бронхорасширяющего Получены доказательства, что стимуляция Н3- действия гистамина (см. выше);

б) для блоки рецепторов уменьшает синтез и выделение рования стимуляции гистамином аденилатци гистамина в легких, селезенке и коже крыс. клазы легких у морских свинок. Таким образом, Предполагается также присутствие Нз-рецеп- в легких морских свинок фармакологические и торов на тучных клетках, где они модулируют биохимические показатели совпадают с выделение гистамина. данными, полученными методами связывания с Получение убедительных доказательств су- Н2-рецепторами. Однако вопрос о локализации ществования Н3-рецепторов позволит объяснить описанных выше Н2-рецепторов-на гладких некоторые противоречия относительно мышцах дыхательных путей, на гладких регуляторной роли гистамина в иммунном от- мышцах сосудов, на тучных или каких-либо вете, поскольку импромидин, мощный агонист других клетках - остается открытым.

Н2-рецепторов, является не менее мощным Гистамин, как было показано выше, широко антагонистом Н3-рецепторов. распространен в организме и, вероятно, Рис. 45. Кумулятивная кривая доза - ответ при релаксации полоски легкого морских свинок (сокращенной 100 мкМ 2 пиридилэтиламина, 2-ПЭА) под действием димаприта.

Вертикальные линии и концентрации указывают на каждое добавление димаприта [Foreman, Rising, Webber- Br. J.

Pharmacol., 1985, 86, 465-473].

Гистамин Рис. 46. Специфическое связывание Н2-антагониста [3Н]-тиотидина с гомогенатом легкого морских свинок и график Скэтчарда для специфического связывания. К, = 8 нМ;

Вмакс = 28 фмоль/мг белка [Foreman, Norris, Rising, Webber.-Br. J. Pharmacol., 1985, 86, 475-482].

присутствует в любой ткани, для которой по- Такие реакции с высоким уровнем базофилов стулируется наличие его регуляторной актив- особенно характерны для морских свинок, но они могут наблюдаться и у человека. У морских ности, а также ферментов, необходимых для свинок было показано местное увеличение его образования и распада. Кроме того, при содержания гистамина в коже при замедленной некоторых клеточно-опосредованных ответах наблюдается базофильная инфильтрация, при- гиперсенситивности туберкулинового типа.

Пока не ясно, какую роль при этом играет чем базофилы, составляя 0,5-1% лейкоцитов гистамин-медиатора или модулятора (или, крови, достигают 20-60% инфильтрирующих клеток. Большое количество базофилов и со- возможно, обе роли).

Трудно определить, обладает ли гистамин in ответственно высокие концентрации гистамина определяются в особые фазы реакции на кож- vivo регуляторной функцией при аллергии и воспалении. Частично это связано с тем, что его ные аллотрансплантаты, на укусы клещами, на медиаторная роль может осложнять ре- вирус коровьей оспы и контактные аллергены.

112 Глава зультаты;

и, кроме того, некоторые специфи- предоставить доказательства, удовлетворяющие ческие гистаминовые антагонисты (например, критериям фармакологического вмешательства Н2-антагонисты) могут подавлять катаболизм действия агента, модифицирующего гистамина и действовать, как Н2-агонисты им- наблюдаемые феномены. Возможно, это свя промидин и димаприт. Тем не менее введение зано с тем, что гистамин является лишь одним гистамина или других специфических Н2-аго- из многих регуляторов, или же с другим фак нистов может ослаблять реакции повышенной тором, а именно: его регуляторная активность чувствительности замедленного типа у морских опосредуется рецепторами, для которых еще не свинок, если оно осуществляется в индук- найдено адекватных антагонистов. Поэтому с тивную фазу реакции. В разных исследованиях большим интересом ожидаются результаты эти эффекты относят либо только к Н2-рецеп- исследований новых Н3-агонистов и антаго торным механизмам, либо к Н,- и ^-механизмам. нистов.

При адъювантном артрите крыс, в котором участвуют реакции клеточного и гуморального Заключение иммунитета, ежедневное подкожное введение гистамина дважды в день в диапазоне доз 0,3- Совершенно очевидно, что гистамин является мг/кг вызывает дозозависи-мое уменьшение лишь одним из многих медиаторов реакций, первичных и вторичных поражений. Тем не рассмотренных в данной главе, а его роль как менее в данном исследовании нельзя исключить регулятора наблюдаемых процессов пока не активации гипофизарно-адреналовой системы.

исследована адекватно и не оценена полностью.

Возможно, более важным является отсутствие явных свидетельств критического влияния Нг и Н2-антагонистов на клеточно-опосредованный Список литературы иммунитет, что следует из практики интенсивного клинического применения этих Owen D. А. А. & Woodward D.F. (1980) Histamine and histamine H, препаратов. В некоторых публикациях and H2 receptor antagonists in acute inflammation. Biochem. Soc.

сообщалось об иммуностимулирующем эффекте Trans. 8, 150.

циметидина, хотя не вполне ясно, является ли Plaul M. & Lichtenstein L.M. (1982) Histamine and immune responses. In: Ganellin C. R. & Parsons M. E. (eds) Pharmacology это действие прямым или нет.

of Histamine Receptors, p. 392, Wright PSG, Bristol.

Таким образом, хотя результаты экспери Hill S.J. (1987) Histamine receptors branch out. Nature 327, 104.

ментов in vitro и in vivo свидетельствуют о ре гуляторной роли гистамина, пока невозможно 10 Эйкозаноиды Дж. А. Салмон, Г. А. Хигс (J. A. Salmon, G. A. Higgs) Простагландины и подобные им вещества, об- зей в боковых цепях, которое обозначается разующиеся из арахидоновой кислоты (см. ни- соответствующим индексом (например, в ПГЕ же), являются этиологическими факторами в две двойные связи) (рис. 48). Арахидо-новая патогенезе многих заболеваний, включая во- кислота (С20:4, w-6) превращается в бис спаление и астму. Выделяют несколько групп еноевые простагландины (т. е. содержащие две эйкозаноидов, поэтому первая часть данной двойные связи);

дигомо-у-линоленовая (С20:3, главы посвящена номенклатуре и структуре w-6) и эйкозапентаеноевая (С20:5, Зсо-3) этих соединений. Их биосинтез рассматривает- кислоты образуют соответственно мо ся с учетом биологической активности, указы- ноеноевые и триеноевые серии простагланди вающей на их возможную медиаторную роль в нов.

ряде патофизиологических событий. Простациклин (ПГ12) обладает структурой, сходной с простагландинами, но содержит вторую кольцевую систему (см. рис. 47).

Номенклатура эйкозаноидов Тромбоксаны (ТОА и ТОВ) первоначально были идентифицированы как продукты Активные вещества, стимулирующие гладкие метаболизма арахидоновой кислоты в тром мышцы, были обнаружены в семейной жид- боцитах крови. Вместо циклопентанового кости человека 50 лет назад. Тогда исследова- кольца, характерного для структуры проста тели полагали, что предстательная железа яв- гландинов, тромбоксаны содержат оксановое ляется главным источником данной активно- кольцо (см. рис. 48).

сти, поэтому был введен термин «простаглан- Простаноидами называют производные дины». Термин сохраняется и в настоящее гипотетической простаноевой кислоты (т. е.

время, хотя известно, что простагландины об- простагландины, простациклин), и хотя, строго разуются большинством клеток организма, а говоря, это не вполне корректно, тромбоксаны предстательная железа не является их основ- тоже включаются в данную группу.

ным источником. Лейкотриены (ЛТ) получили свое название в Простагландины - это группа окисленных связи с их первоначальным определением в жирных кислот, содержащих 20 углеродных лейкоцитах и наличием конъюгированной атомов и циклопентановое кольцо между С8 и триеновой системы в их структуре. Лейкотрие С12. Их считают производными гипотети- ны не содержат ни циклопентанового, ни ок ческого соединения простаноевой кислоты санового колец и разделяются на подгруппы (А (рис. 47). Простагландины разделяют на классы - F) в соответствии с основными структурными (A-J) в зависимости от групп заместителей в различиями. Они также могут подразделяться циклопентановом кольце. Первой была опре- по количеству двойных связей в боковых цепях;

делена структура простагландинов Е и F. Такие например, арахидоновая и эко-запентаеноевая обозначения были им даны исследователями из кислоты могут превращаться в тетраеноевые и Karolinska Institutet в Стокгольме ввиду пентаеноевые лейкотриены (например, ЛТВ4 и возможности их разделения в диэтило-вом ЛТВ5) соответственно. Структура лейкотриенов, эфире и буфере. Простагландины F экстра- образованных из арахидоновой кислоты, будет гировались эфиром, а соединения F оставались в показана ниже, на рис. 53.

фосфатном (по-шведски-fosfat) буфере. Об- Эйкозаноиды. Этот термин используется для работка простагландинов Е кислотой или ос- обозначения всех 20 углеродных жирных нованием превращает их в простагландины А кислот, т. е. простагландинов, тромбоксанов и или В соответственно. лейкотриенов, а также их предшественников.

Дальнейшая классификация простагланди нов основывается на количестве двойных свя- 114 Глава Биосинтез и метаболизм эйкозаноидов (в частности, арахидоновои) в клетках достато чно низкое, но сравнительно большое их коли Доступность предшественников чество находится в этерифицированной форме.

жирных кислот Главным источником арахидоновои кислоты служат фосфолипиды, представляющие собой Арахидоновая и другие кислоты, которые слу- важный структурный компонент клеточных жат субстратом для превращения в проста- мембран. Депо жиров (например, адипозная гландины, поступают непосредственно с пищей ткань, богатая триглицеридами) относятся к или образуются при удлинении цепей и менее важным иточникам арахидоновои ки ненасыщении других жирных кислот. Напри- слоты для превращения в простагландины, мер, арахидоновая и эйкозапентаеноевая ки- тромбоксаны и лейкотриены.

слоты могут образовываться из линолевой (С Арахидоновая кислота первично этерифи 18:2 со-6) и линоленовой (С 18:3, со-3) кислот цируется в 2'-ацильной позиции фосфолипидов соответственно. Однако эти превращения не (рис. 49). Так как для последующих фермент имеют важного значения у человека;

следова- ных реакций образования эйкозаноидов необ тельно, арахидоновая и эйкозапентаеноевая ходима свободная арахидоновая кислота, на кислоты обычно поступают в организм не- чальной реакцией бывает высвобождение жир посредственно с пищей. Мясо животных явля- ной кислоты из мембранных фосфолипидов.

ется богатым источником арахидоновои ки- Эта реакция является этапом, лимитирующим слоты, а морская рыба содержит относительно скорость биосинтеза эйкозаноидов. Фосфоли большие количества эйкозапентаеноевой ки- пазу А2 (ФЛА2) относят к главным ферментам, слоты. участвующим в выделении свободных кислот, Содержание свободных жирных кислот однако необходимо учитывать и дру- Рис. 47. Химическая структура простагландинов, простациклина и тромбоксанов.

Простагландины могут рассматриваться как производные гипотетической простаноевой кислоты с модификациями циклопентанового кольца и боковых цепей, что показано на рисунке.

Простаноиды также разделяются на группы в зависимости от количества двойных связей в боковых цепях (см. рис. 48).

Эйкозаноиды Рис. 48. Образование моно-, ди- и триеновых простагландинов из полиненасыщенных жирных кислот. Превращение жирных кислот в соответствующие простагландины осуществляется в ходе нескольких ферментативных реакций (см. рис. 51 и 52).

гие механизмы, например комбинированное фосфолипид (например, лизофосфатидилхо действие ФЛС и диглицириллипазы. лин), образующийся после отщепления ара В нормальных (базальных) условиях ФЛА2 хидоновой кислоты, обычно быстро реаци неактивна, поскольку она связана с ингиби- лируется КоА-зависимой ацилтрансфера-зой.

торным белком, например с липокортином (см. Фосфолипаза А2 также имеет важное зна главу 24), и активируется под действием чение для образования фактора активации различных стимулов-гуморальных, нервных, тромбоцитов, который является важным ме иммунных и механических (рис. 50), которые диатором при некоторых патологических со вызывают диссоциацию этого комплекса. Фос- стояниях (см. главу 16).

фолипаза А2 непосредственно выделяет ара- Последующие пути превращения выделен хидоновую кислоту из фосфолипидов (см. рис. ной арахидоновой кислоты были показаны, в 50). Вся активность фермента ФЛА2, за частности, у тромбоцитов. Фосфатидилино исключением лизосомной фракции, кальций- зитол гидролизуется специфической фосфоли зависима, а оптимальная скорость реакции пазой С, а образующийся диглицерол служит отмечается при нейтральных значениях рН. субстратом для липазы, расщепляющей арахи Большинство ферментов ФЛА2 связано с мем- доновую кислоту (см. рис. 50). Фосфоинози браной, поэтому мембранные фосфолипиды толы, первоначально образующиеся под дей представляют как окружение, так и субстрат ствием фосфолипазы С, могут быть передат для фермента. Структурная композиция фос- чиками, контролирующими мобилизацию вну фолипидов и ФЛА2 в мембране оказывает триклеточного кальция. Накапливаются данные, существенное влияние на ферментативную ре- указывающие на возможность важной роли акцию, и любое событие, разрушающее мем- фосфоинозитолов во внутриклеточной передаче бранный фосфолипидный бислой, повышает сигналов. Диглицерол после быстрого фосфолипазную активность. фосфорилирования превращается в фосфа Хотя ФЛА2 действует на разные фосфо- тидиловую кислоту, а затем-в фосфатидил липиды (т.е. содержащие разные основания), инозитол. Этот повторный цикл называется главным источником выделяющейся арахидо- обменным циклом фосфатидилинозитола. Су новой кислоты являются фосфатидилхолин и ществуют данные об образовании арахидоновой фосфатидилэтаноламин. Убедительные дока- кислоты из фосфатидиловой кислоты под зательства существования специфических ара- действием специфической ФЛА2.

хидоновых фосфолипаз отсутствуют. Лизо- 116 Глава Рис. 49. Ферментативное выделение ненасыщенных жирных кислот из фосфолипидов.

R, и R2-жирные кислоты, связанные с глицеролом;

R1 безвариантно является насыщенной жирной кислотой (например, стеариновой, пальмитиновой), а предшественник простагландинов (например, арахидоновая кислота) обозначен R2. Ф-фосфатная группа;

Х-основание (например, холин, этаноламин, серии). Фосфолипаза С специфически действует на фосфатидилинозитол (т. е. X является инозитолом).

Синтез простагландинов зироваться циклооксигеназой жирных кислот (простагландинсинтетазой) в простагландино Простагландины и другие метаболиты арахи- вые эндоперекиси (ПГG2 и ПГН2). Первым доновой кислоты в тканях не депонируются, этапом реакции является стереоспецифическое поэтому их биосинтез должен непосредственно удаление водорода при С13 с последующим предшествовать их выделению. Как уже от- выделением кислорода и образованием 11-пе мечалось в предыдущих разделах главы, выде- рокси-5,8,12,14-эйкозатетраеноевой кислоты.

ление кислоты-предшественника из фосфоли- Дальнейшее окисление при С15, изомеризация пидного депо является исходным этапом, ли- А13-двойной связи и циклизация путем обра митирующим скорость образования продукта. зования новой С—С-связи между С8 и С Свободная арахидоновая кислота в результате приводит к образованию ПГG2. Восстановление согласованных реакций может метаболи- группы 15-перокси в данной эндоперекиси Эйкозаноиды с помощью пероксидазы, сопряженной с цик- гландины могут образовываться нефермента лооксигеназой, дает ПГН2 (рис. 51). тивно, но существуют специфические изоме Циклооксигеназа обнаруживается в боль- разы, которые катализируют превращение ПГН шинстве клеток млекопитающих;

только в ПГЕ2 и ПГD2.

эритроциты лишены этого фермента. Субкле- Простациклины и ТОА2 нестабильны при точная локализация циклооксигеназы связана с физиологических значениях рН и температуры микросомной фракцией эндоплазматической (период полураспада - примерно 5 мин и 30 с сети;

она представляет собой гемзависимый соответственно);

они гидролизируются в менее гликопротеин. Ферментативная реакция стиму- активные 6-кето-ПГЕ1а и ТОВ2 соответственно лируется небольшими количествами перекисей (см. рис. 52).

(«перекись-затравка»), а избыток перекиси инактивирует фермент. Так как во время обра Метаболизм простагландинов и зования ПГН2 генерируются перекисные ради тромбоксанов калы, фермент сам себя разрушает (или совер шает «самоубийство»). Для циклооксигеназы Метаболизм простагландинов в организме предпочтительным субстратом является ара- происходит быстро. Время их биологической хидоновая кислота, однако дигомо-у-линоле- полужизни составляет менее 1 мин, и в нор новая и (в меньшей степени) эйкозапентаеное- мальной плазме концентрация родительских вая кислоты могут превращаться в простаглан- простагландинов не превышает 100 пкг/мл.

дины (см. рис. 48). Первоначальная метаболическая реакция за Эндоперекиси (ПГG2, ПГН2), лабильные при ключается в окислении группы 15-окси с после физиологических значениях рН и температуры, дующим восстановлением 13,14-диена. Оба являются центральными молекулами в процесса катализируются специфическими биосинтезе ряда других арахидоновых ме- ферментами- простагландин-15-оксидегидро таболитов;

они ферментативно или нефермен- геназой и простагландин-А13-редуктазой соот тативно превращаются в простациклин (ПП2), ветственно. Большинство клеток содержит эти ТОА2, «первичные» простагландины (ПГЕ2, растворимые ферменты, но особенно богаты ПГF2а, ПГD2), 17-окси-гептадекатриеноевую ими почки и (еще больше) легкие. Например, кислоту и малондиальдегнд (рис. 52). Образо- 90% инфузируемых ПГЕ1, Е2 или F2a метабо вание метаболитов зависит от типа клеток: лизируются после единственного прохождения например, эндоперекиси в тромбоцитах пре- через перфузируемые легкие. В то же время вращаются почти исключительно в ТОА2, а в метаболизм зависит и от активного захвата. Ряд сосудистом эндотелии-в простациклин. Про- простаноидов, в частности простациклин, стациклин и ТОА2 образуются из ПГН2 только является плохим субстратом для механизма ферментативно (контролируются соответ- захвата и вследствие этого «выживает» при ствующими синтетазами). Первичные проста- прохождении через легкие. Несмотря на это, СТИМУЛЫ (гормональные, нервные, иммунологические, механические) Фосфолипиды Рнс. 50. Схематическое изображение клеточной процессов, ведущих к выделению свободных жирных кислот (например, арахидоновой мембраны кислоты) из мембранных фосфолипидов клетки.

Стимул взаимодействует с рецептором, что приводит к активации фосфолипазы, которая катализирует выделение жирных кислот в результате процесса, показанного на рис. 49.

Свободные жирные кислоты 118 Глава Рис. 51. Метаболизм арахидоновой кислоты.

простациклин in vivo является короткоживу- изомеров ГПЭТЕ. В отличие от циклооксиге щим. назы, которая сравнительно специфически дей Концентрация первых метаболитов проста- ствует на арахидоновую кислоту, липоксигена гландинов (производные 15-кето и 13,14-ди- зы могут эффективно катализировать окисле гидро-15-кето) в плазме обычно выше, чем ние других жирных кислот, включая эйкоза концентрация родительских простагландинов, триеновые и эйкозапентаеноевые кислоты.

но биологическая активность метаболитов за- Впервые липоксигенация арахидоновой ки метно ниже. Дальнейшее их окисление проис- слоты в тканях млекопитающих была описана ходит на «верхней» и «нижней» боковых цепях в тромбоцитах;

в результате этого процесса (B- и w-окисление соответственно) преимущест- образуется 12-ГОЭТЕ (см. рис. 51). Однако венно в печени. Окончательно ди-нор и тетра- более интересным является образование 5 нор (т. е. удаление двух и четырех углеродов из ГОЭТЕ, поскольку она является промежу «верхней» боковой цепочки) метаболиты 20- точным продуктом при генерировании лейко окси и 20-карбокси легко выделяются с мочой. триенов.

В то время как циклооксигеназа широко распространена в клетках млекопитающих, 5 Образование гидропероксикислот и липоксигеназа ограничена главным образом лейкотриенов нейтрофилами, эозинофилами, моноцитами, Вторым (позже обнаруженным) путем арахи- макрофагами и тучными клетками. Эти клетки донового метаболизма является окисление, образуются в костном мозге, возможно, из контролируемое липоксигеназными фермента- общей стволовой клетки. Все эти клетки участ ми. Свободные жирные кислоты превращаются вуют в воспалительных реакциях, и наличие в гидроперокси-производные (гидроперок- общего фермента (5-липоксигеназа) может сиэйкозатетраеноевые кислоты, ГПЭТЕ), ко- иметь функциональное значение. Кроме того, торые легко восстанавливаются пероксидазой 5-липоксигеназа обнаружена в кератиноцитах, глутатиона в соответствующие гидроксикисло- кровеносных сосудах и в головном мозге.

ты (ГОЭТЕ). В животном и растительном мире Другое различие между циклооксигеназой и существует несколько липоксигеназ, которые 5-липоксигеназой заключается в избирательной катализируют окисление молекулярным активации последнего фермента кальцием кислородом cis,сis-1,4-пентадиеновые системы. (например, кальциевый ионофор А23187 силь Так, арахидоновая кислота может метаболи- но и избирательно стимулирует биосинтез 5 зироваться этими ферментами до нескольких липоксигеназных продуктов). Напротив, цик лооксигеназа всегда находится в активном со- Эйкозаноиды Рис. 52. Превращение простагландиновой эндоперекиси (ПГН2) в простагландины, простациклин и тромбоксаны.

120 Глава стоянии и для реакции необходимы лишь суб- нию разными растворимыми ферментами до страт и небольшое количество перекиси. 20-карбокси-ЛТВ4. Эта реакция легко проте Начальной реакцией в превращении 5- кает в полиморфно-ядерных лейкоцитах ГПЭТЕ в леикотриены является потеря воды, (ПМЯЛ) человека, а ПМЯЛ других видов и которая катализируется дегидразой, с фор- другие лейкоциты человека неспособны к ме мированием нестабильного 5,6-эпоксида (ЛТА4) таболизму ЛТВ4. Метаболиты ЛТВ4 биологи (рис. 53). Как и в случае с эндопереки-сями в чески менее активны, чем исходное соединение.

синтезе простаноидов, ЛТА4 является центральным соединением в образовании дру Образование других эйкозаиоидов гих лейкотриенов. ЛТА4 гидролизуется до 5(S), 12(R)-дигидрокси-6,14-cis-8, 10-trans-эйкозате Описанные выше эйкозаноиды (т. е. проста траеноевой кислоты (ЛТВ4) под действием гландины, простациклин, тромбоксаны, моно растворимой гидролазы. ЛТА4 также нефер гидроперокси- и гидроксикислоты, лейкотрие ментно гидролизуется до других 5,12- и 5,6-ди ны) в настоящее время считаются наиболее гидроксикислот (см. рис. 53).

важными в биологическом отношении. Однако Глутатион может взаимодействовать с ЛТА4.

стоит отметить, что арахидоновая кислота Реакция катализируется специфической может превращаться в другие метаболиты, глутатион-Б-трансферазой, при этом образуется патофизиологическая роль которых пока не 5(8)гидрокси-6(К)-8-глутатионил-7,9-trans известна. К ним относятся липоксины, содер 11,14-сis-эйкозатетраеноевая кислота (ЛТС4).

жащие в своей структуре конъюгированный Данный лейкотриен может метаболизировать-ся тетраен, тригидроксиэйкозатетраеноевые и у-глутамилтранспептидазой и цистеингли эпокси-гидрокси-эйкозатетраеноевые кислоты.

циназой до ЛТD)4 и ЛТЕ4 соответственно. Эти пептидно-липидные леикотриены (ЛТС4, ЛТD4 и ЛТЕ4) являются компонентами «брон Биологическая активность эйкозаиоидов хоконстрикторной активности», генерируемой при анафилаксии;

она была описана 50 лет Выделение и очистка эйкозаиоидов из биоло назад, и фармакологи называли ее «медленно гических тканей позволили идентифицировать действующим веществом анафилаксии» (МДВ- их структуру, что в свою очередь дало воз А). Другой лейкотриен, ЛТF4, был можность синтезировать чистые соединения.

идентифицирован как 5(8)-гидрокси-6(R)-цисте- Доступность «чистых стандартов» в значитель инилглутамиловый аналог ЛТС4.

ной степени способствовала исследованиям ро Разные леикотриены, как и простагланди-ны, ли различных эйкозаиоидов в физиологических образуются специфическими типами клеток;

и патофизиологических процессах. Эйкозанои например, эозинофилы человека синтезируют в ды обладают сильными и разнообразными основном ЛТС4, а нейтрофилы-ЛТВ4.

биологическими эффектами;

многие из извест ных сейчас эйкозаиоидов были первоначально обнаружены при проведении биологического Метаболизм лейкотриенов тестирования.

Метаболизм лейкотриенов не изучен так тща Простагландины, например, были впервые тельно, как метаболизм простагландинов. Как идентифицированы по вызываемому ими со описано выше, ЛТС4 может легко превращаться кращению миометрия, а позднее обнаружилось, в ЛТD4, а затем в ЛТЕ4 в той же клетке, где что они стимулируют гладкие мышцы сосудов, происходил его биосинтез, причем все три кишечника и бронхов. Изучение анафилаксии в соединения биологически активны. Эти пеп дыхательных путях позволило выделить тидно-липидные леикотриены инактивируются вещество, вызывающее медленное и длительное превращением в 6-trans-ЛTB4, что наблюдается сокращение гладких мышц. Это вещество при образовании хлорноватистой кислоты в известно теперь как МДВ-А;

впоследствии оно результате дыхательного взрыва в стиму было идентифицировано в виде смеси лированных лейкоцитах.

лейкотриенов (см. выше). На основании Лейкотриен В4 также инактивируется в той гладкомышечной активности предполагается, же клетке, где он образуется. Уникальный, что эйкозаноиды выполняют важные функции в связанный с мембраной фермент цитохром Р сердечно-сосудистой системе, дыхательных превращает ЛТВ4 в 20-гидрокси-ЛТВ4, который путях и репродуктивных органах.

подвергается дальнейшему превраще- Биологические возможности эйкозаиоидов Рис. 53. Биосинтез лейкотриенов из 5-ОПЭТЕ.

Эйкозаноиды 122 Глава не ограничены гладкими мышцами. Эйкоза- рования воспалительного процесса. Тем не ме ноиды также являются мощными активаторами нее ткани, пораженные хроническим воспале клеток крови, в частности тромбоцитов и нием, продолжают генерировать эйкозаноиды.

лейкоцитов. Тромбоксан А2 индуцирует В тканях гранулемы через несколько дней по агрегацию тромбоцитов, а простациклин пре- сле начала воспаления определяется высокое дупреждает их агрегацию, вызванную различ- содержание эйкозаноидов, а синовиальные тка ными стимулами. Лейкотриен В4 и некоторые ни через несколько дней после индукции им гидроксикислотные продукты арахидоновой мунного артрита обнаруживают повышенную кислоты обладают высокой хемотаксической способность метаболизировать арахидоновую активностью в отношении лейкоцитов. Как уже кислоту. Более того, образование эйкозаноидов отмечалось, различные ткани синтезируют хронически воспаленными тканями прояв характерные профили эйкозаноидов;

например, ляется высоким уровнем ПГЕ2 и ЛТВ4, опре тромбоциты синтезируют в основном ТОА2, а деляемым в синовиальной жидкости, аспири сосудистый эндотелий- простациклин. руемой из суставов больных ревматоидным Поскольку ряд эйкозаноидов обладает проти- артритом (см. главу 33) или подагрой.

воположными формами биологической актив- В воспалительной реакции участвуют не ности, профиль метаболизма арахидоновой сколько типов клеток, в том числе клетки кислоты в различных тканях имеет важное окружающих тканей и кровеносных сосудов, а функциональное значение. также мигрирующие клетки крови. Клетки Кроме того, эйкозаноиды участвуют в таких различных типов вносят разные эйкозаноиды.

системах, как передача внутриклеточных Хотя высокие концентрации ТОВ2 определя сигналов, цитопротекция, иммунная система, ются на ранних стадиях экспериментального формирование факторов боли и лихорадки, воспаления, тромбоциты (основной источник ввиду чего выдвигаются различные предполо- тромбоксанов), вероятно, не являются источ жения относительно возможных ролей эйко- ником эйкозаноидов в воспаленных тканях. У заноидов в нормальных и пораженных тканях. животных при сниженном содержании тром боцитов концентрации ТОВ2, ПГЕ2 и 6-кето ПГFla в воспалительных экссудатах не отли Роль эйкозаноидов в воспалении чаются от таковых у контрольных животных, У животных с невысоким уровнем ПМЯЛ концентрации ТОВ2 и ЛТВ4 снижены, причем Синтез эйкозаноидов при воспалении их уменьшение идет параллельно сокращению числа ПМЯЛ, накапливающихся в экссудате.

Воспаление- это физиологическая реакция ткани Однако образование ПГЕ2 и простациклина на травму или раздражение. При воздействии на остается практически неизменным при отсут ткани механических, химических или ствии ПМЯЛ. Эти наблюдения свидетельству иммунологических стимулов происходят синтез ют о том, что при остром воспалении ПМЯЛ и высвобождение эйкозаноидов, поэтому служат главным источником ТОВ2 и ЛТВ4, а воспалительная реакция всегда сопровождается ПГЕ2 и простациклин образуются в окру выделением простагландинов. В воспаленных жающих тканях и кровеносных сосудах.

тканях обнаруживается множество различных эйкозаноидов, но доминирующим продуктом является ПГЕ2. Наблюдается также присутствие Воспалительные свойства эйкозаноидов тромбоксанов, простациклина и лейкотриенов.

Синтез эйкозаноидов сопровождает ряд Некоторые эйкозаноиды, особенно ПГЕ2, вносят воспалительных заболеваний-от острого свой вклад в симптомы воспаления. Про солнечного ожога до хронического стагландин Е2 и простациклин расслабляют ревматоидного артрита. Кроме того, в этот гладкие мышцы сосудов и сильно расширяют список входят ожоговые поражения, контактная прекапиллярные артериолы, в результате чего экзема, псориаз, язвенный колит, увеит, наблюдается характерная краснота (или эри остеоартриты и подагра. тема), сопровождающая острое воспаление.

При экспериментальном воспалении мак- Кроме того, возрастает приток крови к воспа симальный синтез эйкозаноидов наблюдается в ленным тканям, что в свою очередь увеличивает острую фазу. Образование ТОА2 и ЛТВ4 быстро потерю плазмы, которая обусловлена действием прекращается, а синтез ПГЕ2 (хотя он и веществ, повышающих проницаемость сосудов сохраняется) ослабевает по мере прогресси- (гистамин, брадикинин). Совместные.

Эйкозаноиды эффекты увеличенного кровотока и повышен- ПГЕ2, простациклин, ЛТВ4 и 12-ГОЭТЕ) про ной проницаемости сосудов приводят к опу- дуцируются при воспалении и обладают высо холи или отеку (см. главу 7). Тромбоксан А2 кой воспалительной активностью. Влияние является мощным вазоконстриктором, и его противовоспалительных препаратов на мета образование при остром воспалении, вероятно, болизм арахидоновой кислоты подтверждает необходимо для предупреждения кровотече- роль эйкозаноидов как медиаторов воспаления.

ний. Продукты липоксигеназы в основном Ингибиторы синтеза простагландинов, такие как слабо влияют на сосудистый тонус, но ЛТВ4, препараты, подобные ацетилсалициловой ЛТС4 и ЛTD4 вызывают образование волдырей кислоте, обладают противовоспалительным, и расслабление сосудов кожи человека аналгезирующим и жаропонижающим посредством неизвестных механизмов. действием. Аналогично этому препараты, сни Лейкотриен В4 - один из наиболее мощных жающие липоксигеназную или циклооксиге среди известных сегодня факторов хемотаксиса назную активность, подавляют активацию лейкоцитов. Его активность обнаруживается во лейкоцитов (см. главы 23 и 24).

многих системах in vitro. Показано также, что ЛТВ4 обусловливает маргинацию лейкоцитов в Эйкозаноиды при анафилаксии микроциркуляции и их накопление во внесосудистых тканях. На этих наблюдениях дыхательных путей основывается теория о локальном образовании ЛТВ4 как о важном механизме местного Выделение МДВ-А при реакциях гиперсенси контроля рекруитирования воспалительных тивности немедленного типа изучалось в тече лейкоцитов в поврежденные ткани. Наряду с ние многих лет, поскольку предполагалось, что другими факторами хемотаксиса (например, именно это вещество опосредует бронхоспазм С5а комплемента) ЛТВ4 вызывает высвобож- при бронхиальной астме у человека. Как уже дение лизосомных ферментов, что вносит де- отмечалось выше, в настоящее время установ генеративный компонент во многие воспали- лено, что смесь ЛТС4, ЛТD4 и ЛТЕ4 обладает тельные заболевания. В клеточной реакции биологической активностью МДВ-А. Эти пеп участвует и другой продукт липоксигеназы-12- тидно-липидные лейкотриены в качестве брон ГОТЕ. Хемотаксическая активность 12-ГОТЕ хоконстрикторов и веществ, вызывающих со слабее, чем у ЛТВ4, однако высокие кращение гладких мышц дыхательных путей, на концентрации 12-ГОЭТЕ могут определяться в 2-3 порядка сильнее гистамина. Лейкотриен Е коже больных псориазом, что, вероятно, слабее ЛТС4 или ЛТD4, но он действует более связано с большим количеством ПМЯЛ, ин- длительное время. Помимо бронхоспа фильтрирующих дерму при этом воспалитель- стического эффекта, лейкотриены, видимо, об ном заболевании.

ладают стимулирующим влиянием на секрецию Эйкозаноиды вносят определенный вклад в слизи и, следовательно, усугубляют нарушения такие симптомы воспаления, как боль и ли- проходимости дыхательных путей.

хорадка. Простагландин Е2 и простациклин Лейкотриены сокращают in vitro трахеаль усиливают боль, вызванную брадикинином и ные и бронхиальные гладкие мышцы, однако гистамином, сенсибилизируя афферентные С- эксперименты in vivo свидетельствуют об из волокна (т. е. индуцируют состояние гипер- бирательности их действия в отношении ниж алгезии). Такая повышенная чувствительность них дыхательных путей. ЛТС4 и ЛТD4 вызывают обусловливает восприятие нормальных (не бо- преимущественно уменьшение податливости левых) стимулов как болезненных;

например, дыхательных путей и относительно менее кожа при солнечном ожоге легко травмируется эффективны в снижении их специфической (натирается) даже одеждой. Простагландин Е проводимости. При введении ЛТС4 и ЛТD представляет собой сильный пирогенный фак- добровольцам отмечаются кашель, свистящее тор;

его высокие концентрации определяются дыхание, стеснение в груди и уменьшение ско в спинномозговой жидкости больных с бакте- рости потока воздуха при максимальном вы риальной или вирусной инфекцией, вирусным дохе. Обнаружение лейкотриенов в мокроте энцефалитом или пирогенным менингитом.

больных астмой и в носовых смывах аллергиков Пирогенная активность интерлейкина-1 (эндо- после введения им антигена дает дополни генный пироген) опосредуется образованием тельные аргументы в пользу представления о ПГЕ2 (см. главы 15 и 19).

лейкотриенах как о важных медиаторах ана Таким образом, эйкозаноиды (например, филактических респираторных заболеваний.

124 Глава Селективные антагонисты лейкотриенов стью. Эйкозаноиды действуют как местные] уменьшают бронхоспазм in vivo, однако такого гормоны, участвующие в физиологических и рода препаратов, пригодных для проведения патофизиологических процессах. Эйкозаноиды тестирования у людей, пока нет. Конечно, часто действуют синергично с другими медиа кортикостероиды, которые ослабляют оба пути торами, усиливая и расширяя реакцию. Тера метаболизма арахидоновой кислоты (см. главу певтические и токсические эффекты многих) 24), очень эффективны при лечении астмы. Но противовоспалительных препаратов могут чаш это вряд ли обусловлено их влиянием на синтез тично или полностью объясняться их вмеша простагландинов или тромбоксанов, поскольку тельством в синтез эйкозаноидов.

селективные ингибиторы циклоок-сигеназы не оказывают благоприятного действия и могут даже (в некоторых случаях) обострить бронхиальную анафилаксию. И действительно, по имеющимся сегодня данным, продукты обмена циклооксигеназы модулируют бронхоспазм, подавляя синтез лейкотриенов.

Резюме Окислительные ферменты, катализирующие превращение арахидоновой кислоты в проста гландины, тромбоксаны и лейкотриены, широко распространены в тканях млекопитающих. Эти ферменты активируются при стимуляции клеточных мембран или при их повреждении.

Образующиеся при этом эйкозаноиды обладают высокой биологической активно- 11 Факторы хемотаксиса нейтрофилов и эозинофилов при аллергии и астме А. Б. Кей (А. В. Кау) Эозинофилы и нейтрофилы-это подвижные В 1977 г. Atkins и соавт. описали высоко клетки, которые «распластываются» по стеклу молекулярную термостабильную НХА, выде и отвечают хемотаксисом (миграция по гра- ляющуюся в циркуляцию у больных бронхи диенту) и(или) хемокинезом (увеличение ско- альной астмой после ингаляции специфического рости случайного движения). Обнаружено антигена. Те же исследователи показали, что большое количество факторов хемотаксиса предварительное введение двунатриевого хро эозинофилов и нейтрофилов, однако биологи- могликата (ДНХГ, хромолин) подавляет вы ческое значение многих из них остается неяс- деление НХА, что свидетельствует о связи ным. Широко распространено мнение, что про- данного феномена с тучными клетками. На дукты тучных клеток играют важную роль в блюдение изменений концентраций НХА при привлечении нейтрофилов и эозинофилов к высвобождении гистамина из иммунологиче месту возникновения аллергических реакций в ски стимулируемых сенсибилизированных тканях. Результаты последних исследований фрагментов легких подтверждает эту точку показали необходимость изменения этих взгля- зрения.

дов, поскольку другие клетки, например эози- Например, O'Driscoll и соавт., используя нофилы, макрофаги и тромбоциты, также несут легочные фрагменты, стимулированные кро функциональные IgE(Fc)-рецепторы. личьим анти-IgE, показали, что у человека Теоретически существует несколько меха- высокомолекулярная НХА имеет легочное низмов, объясняющих накопление клеток в ме- происхождение. НХА легких человека пред стах воспаления тканей. Они включают по- ставляется гетерогенной, хотя один из пиков вышенный хемокинез, контактную задержку активности имеет практически идентичные ха клеток в очаге воспаления и уменьшенный рактеристики (при гель-фильтрации, ионооб выход клеток из очага. В этом плане наиболее менной хроматографии, изоэлектрофокусиро привлекательным механизмом является мигра- вании) с НХА, выделенной из крови больных ция клеток из сосудов под действием хемотак- астмой.

сических медиаторов. Этот процесс включает Таким образом, существуют доказательства в себя первоначальное прикрепление клеток к выделения аналогичных высокомолекулярных сосудистому эндотелию (большинство ме- соединений при иммунологической стимуляции диаторов хемотаксиса облегчает адгезию гра- легочных фрагментов in vitro и ингаляционной нулоцитов) с последующим диапедезом и на- провокации при бронхиальной астме in vivo.

правленной миграцией по хемотаксическому Интересными представляются наблюдения градиенту. Воспалительные медиаторы, при- Schenkel и соавт., которые описали нимающие участие в данном процессе при высокомолекулярную НХА из легочных аллергии и астме, точно не установлены. фрагментов активно сенсибилизированных морских свинок после введения им разрешаю щей дозы специфического антигена. НХА, по Факторы хемотаксиса нейтрофилов при видимому, представляет основную часть хе аллергии и астме мотаксической активности нейтрофилов (в от личие от эозинофилов) в этих легочных супер Идентификация натантах. Доказательства тучноклеточного происхождения НХА (как единственного) ос Индуцированная аллергеном нейтрофильная таются неокончательными, хотя есть основания хемотаксическая активность (НХА) идентифи предположить, что вещество, выделяющееся цируется in vitro (т. е. по специфически сенси совместно с гистамином и блокирующееся билизированным эффекторным клеткам) или ДНХГ, имеет какое-то отношение к тучным in vivo (в жидких средах организма у аллерги клеткам.

ков после аллергенной провокации).

126 Глава ской гипервентиляцией (ИКГВ)1. Например, Неспецифическое выделение НХА ИКГВ холодным воздухом не сопровождается Особый интерес представляют наблюдения, фазой бронходилатации (наблюдаемой при касающиеся возникновения НХА при неимму физических упражнениях у больных симптома нологической стимуляции. Wasserman и соавт.

тической астмой), латентной фазой, рефрак описали ВМ-НХФ, выделяющийся в венозную терным периодом и базофилией крови. Более кровь (вместе с гистамином) после холодовой того, антихолинергические препараты, подан иммерсии больных с холодовой крапивницей.

ляющие астму, индуцированную физической Аналогичные НХА идентифицированы при хо нагрузкой, у определенной части больных не линергической, солнечной и тепловой крапив влияют на сопротивление воздушного потока, ницах после предъявления соответствующих которое возникает при ИКГВ охлажденным стимулов. Lee и соавт. показали, что НХА, воздухом. Эти наблюдения показывают, что определяемая в сыворотке при астме, вызванной хотя потеря тепла и(или) воды в дыхательных физической нагрузкой (НХА-фн), по своим путях может быть инициирующим фактором физико-химическим характеристикам идентична (стимулом), возникновению АВФН способ НХА у больных астмой, получивших раз ствуют и другие факторы. Вряд ли базофилы решающую дозу антигена через бронхи (НХА служат источником НХА при стимуляции, по аг). Так, НХА-фн и НХА-аг имеют мо скольку базофилия вследствие физической на лекулярную массу 600 000 дальтон, элюируют грузки наблюдается и у нормальных лиц, од ся единичным пиком активности между 0,15 и нако в этом случае она не сопровождается 0,30 М NaCl при обменной анионной хро увеличением НХА в сыворотке. Кроме того, | у матографии на DEAE Sephacell, а их изоэлект астматиков без АВФН, которые испытывали рические точки, определяемые при электрофо такую же физическую нагрузку, как и больные с кусировании, находятся в промежутке между ИКГВ, наблюдалась сравнимая базофилия, но с и 6,5. Интенсивность НХА-фн и НХА-аг после небольшим повышением циркулирующей НХА.

инкубации с трипсином и химотрипси-ном Наконец, неспособность ДНХГ подавлять существенно снижается (как в дозовой, так и во выброс медиаторов из базофилов in vitro временной зависимости). Эти характеристики свидетельствует против предположения об практически аналогичны наблюдаемым при этих клетках как об источнике НХА.

НХФ холодовой крапивницы (макромолекула с нейтральной изоэлектрической точкой).

Участие НХА в реакциях поздней фазы Полученные данные четко указывают на близкое родство или полную аналогию между Нами установлено, что НХА выделяется при НХФ, образуемыми при астме и крапивнице поздних астматических реакциях после инга после соответствующей стимуляции, и НХФ, ляции антигена. Позднее повышение НХА выделяемыми фрагментами легких морских предшествует позднему падению ОФВ пример свинок и человека. Однако до установления но на 3 ч и бывает более устойчивым, чем при химической структуры этот вопрос не может немедленной астматической реакции (через 10 быть решен окончательно. До настоящего мо 15 мин после антигенной нагрузки). Физико мента любое определение интенсивности НХА химические характеристики НХА поздней фазы обязательно включает биологическое тестиро аналогичны таковым ранней фазы (одинаковая вание (метод Boyden, при котором нормальные молекулярная масса, идентичные хро нейротрофы служат индикаторными клетками).

матографические параметры на DEAE-Sepha cell и изоэлектрические точки). Эти наблюде ния свидетельствуют в пользу предположения Стимулы, вызывающие возникновение НХА при об участии тучных клеток как в поздней, так и в астме, индуцированной физической нагрузкой ранней фазах реакции. Точный механизм Данные о том, что НХА возникает при астме, активации тучных клеток при поздних реакциях вызванной физической нагрузкой (АВФН), и неясен. Возможно, он связан со вторым отсутствует при бронхоспазме, обусловленном спонтанным выбросом медиаторов из уже ак гипервентиляцией, свидетельствуют о сущест- тивированных тучных клеток, что показано на вовании различий междй АВФН и изокапниче- Гипервентиляция с нормальным уровнем С02 в альвеолах и артериальной крови.

Факторы хемотаксиса нейтрофилов и эозинофилов крысиных перитонеальных тучных клетках. следующем: а) высокомолекулярная нейтро Альтернативно предполагается, что инфильт- фильная хемотаксическая активность, связанная рирующие воспалительные клетки (возможно, с астмой (ВММ-НХА), определяется в сы нейтрофилы) вызывают второе выделение НХА воротке при острой форме заболевания;

б) за счет высвобождения содержимого ли-зосом, активность значительно снижается при лечении;

что было показано ранее в экспериментах in в) ВММ-НХА при астматическом статусе (и в vitro. Вряд ли второй выброс НХА некоторых контрольных группах) является иммунологически специфичен (т. е. обусловлен гетерогенной;

г) пик хемотаксической медленной абсорбцией антигена), поскольку активности связан с молекулярной массой поздние астматические реакции при физиче- kD и изоэлектрической точкой pi между 6,0 и ской нагрузке также сопровождаются поздним 7,0. Следовательно, по этим параметрам подъемом НХА. Величина и динамика умень- активность вполне сравнима с наблюдаемой при шения ОФВ1 и возрастания НХА в ранние и аллергических и вызванных физической поздние фазы астмы, вызванной физической нагрузкой ранних и поздних астматических нагрузкой, аналогичны ранее описанным при реакциях.

антигенной ингаляторной нагрузке.

Роль НХА НХА при астматическом статусе Патофизиологическая роль НХА при тканевых Содержание НХА в сыворотке больных при аллергических реакциях в отличие от ее значе астматическом статусе (status asthmaticus) ния как маркера активации тучных клеток в [Buchanan et al., 1987] увеличивается по срав- настоящее время только исследуется. Ввиду нению с контрольной группой (слабая астма, значительных трудностей в получении доста стабильная, необратимая обструкция воздуш- точных количеств НХА для детальных биоло ного потока, неинфекционные легочные забо- гических исследований сравнение НХА с дру левания, бессимптомные состояния). Серийные гими известными медиаторами гиперсенситив изменения НХА также были проведены у 12 ности по специфической активности не пред больных с острой астмой при их поступлении в ставляется возможным. Тем не менее нами клинику, через 3 дня после начала лечения и показано, что НХА, как и другие хемоаттрак при выписке (примерно на 7-й день). Выявлено танты, обладает разнообразными эффектами в весьма достоверное (р < 0,001) снижение отношении функции нейтрофильных лейко НХА в сыворотке на 7-й день по сравнению с цитов, включая увеличение случайного и на нулевым днем, что коррелирует с улучшением правленного движения, увеличение количества функции легких (PEFR). При гель-фильтрации СЗЬ-рецепторов на нейтрофильных лейкоцитах, методом быстрой белковой жидкостной стимуляцию выделения лизоцима и (в меньшей хроматографии (ББЖК) с использованием Su- степени) миелопероксидазы, а также ускорение perose 6 prep, grade обнаружено, что НХА при опосредованной нейтрофилами ком астматическом статусе достаточно гетерогенна и плементзависимой гибели личинок гельминтов.

имеет по крайней мере четыре пика активности, Таким образом, НХА имеет характеристики, которые обусловлены белковыми молекулами с аналогичные таковым других хемоат массой 800, 600, 150 и < 20 kD. Менее трактантов, с потенциальной значимостью ос выраженные (800 и 150 kD) пики отмечены и в новного участника воспалительной реакции.

Pages:     | 1 | 2 || 4 | 5 |   ...   | 9 |



© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.